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1、1第三篇 微生物学各论 三性两法三性两法生物学性状微生物学检查法致病性免疫性防治法2第十四章 化脓性细菌3v化脓性细菌：一类能够感染人体并引起化脓性炎症的细菌。常引起创伤感染和医院内感染。v根据革兰染色性的不同可分成lG+菌：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等lG-菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、铜绿假单胞菌等。4第一节第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属(Staphylococcus)对人类致病的主要是金黄色葡金黄色葡萄球菌萄球菌（S.aureus）。5p分布广泛，是最常见的化脓性球菌p医院内交叉感染的重要传染源p所致疾病l化脓性炎症l食物中毒l烫伤样皮肤综合征l毒性休克综合征p耐药率高61、形态与染色、
2、形态与染色p球形或椭圆形，平均直径1m，典型排列呈葡萄串状；p无鞭毛，无芽胞，体外培养时一般不形成荚膜；p革兰染色阳性。p衰老、死亡或被中性粒细胞 吞噬后易G。一、生物学性状7脓标本革兰染色镜检82、培养特性、培养特性p营养要求不高，耐盐，最适生长温度为37，最适pH为7.4。p在普通琼脂平板上孵育2448h后，形成S型（光滑）菌落。p可产生脂溶性色素，菌落呈现金黄色、白色、柠檬色不同的颜色。p血琼脂平板上，致病性葡萄球菌形成明显的全透明溶血环（溶血）。9三种葡萄球菌培养三种葡萄球菌培养琼琼脂脂培培养养基基金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌金黄色色素金
3、黄色色素白色色素白色色素柠檬或白色色素柠檬或白色色素致病力强致病力强条件致病菌条件致病菌一般不致病一般不致病 10金黄色葡萄球菌金黄色菌落11金黄色葡萄球菌血平板123、生化反应、生化反应p触酶阳性；可与链球菌区别p多数菌株能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖；p致病株能分解甘露醇。13capsulepolysaccharide(teichoicacid)SPA4、抗抗 原原 结结 构构14p葡萄球菌A蛋白(staphylococcusAprotein，SPA)是葡萄球菌细胞壁的一种表面蛋白，可与人类免疫球蛋白IgG的的Fc段段非特异性结合，而IgG分子的Fab段仍能同相应抗原分子特异性结合，介导完成协
4、同凝集试验。15意义：意义：I.含SPA的葡萄球菌可作为载体，结合特异性抗体后，开展简易、快速的协协同同凝凝集集试验，检测多种微生物抗原。16II.SPA与IgG结合后的复合物具有抗吞噬抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物学活性。SPASPAIgGIgGFc receptorFc receptorPHAGOCYTEPHAGOCYTEBACTERIUMBACTERIUM 17p荚膜荚膜：体内的大多数金黄色葡萄球菌有荚膜，有粘附作用，与细菌侵袭力有关。p多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁。185、抵抗力、抵抗力p葡萄球菌在无芽胞菌中抵抗力最强葡萄球菌在无芽胞菌中抵抗力最强。60
5、1h或8030分钟才被杀死。p对碱性染料敏感，龙胆紫可抑制其生长。p对许多抗生素敏感，但易产生耐药性。近年来出现的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSAMRSA）已成为医院感染最常见的致病菌。19根据色素与生化反应根据噬菌体：分为5个噬菌体群和26个噬菌体型。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌6、分类、分类20二、致病性与免疫性致病物质所致疾病21（一）致病物质（一）致病物质p毒素细胞毒素（、杀白细胞素）、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1、肠毒素等。p酶凝固酶、纤维蛋白溶酶、耐热核酸酶、透明质酸酶、脂酶等。p其他粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖等。22凝固酶凝
6、固酶（coagulase）p能使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。p作用：l抗吞噬作用（纤维蛋白沉积细菌表面）l保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏l使感染易于局限化和形成血栓p意义：鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。23v葡萄球菌溶素（膜损伤毒素）：葡萄球菌溶素（膜损伤毒素）：p损伤细胞膜的毒素，主要是溶素。p溶素对多种哺乳动物RBC有溶血作用。对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有损伤作用。p溶素是一种外毒素，可制成类毒素。v杀白细胞素：杀白细胞素：攻击中性粒细胞和巨噬细胞，能抗吞噬和增强病菌的侵袭力。24肠毒素（enterotoxin）p约1/3临床
7、分离的金黄色葡萄球菌可产生肠毒素。p耐热的外毒素p引起急性胃肠炎即食物中毒。p作用机制：到达中枢神经系统后刺激呕吐中枢而导致以呕吐为主要症状的食物中毒。25表皮剥脱毒素（exfoliatin）p蛋白质外毒素，使表皮和真皮脱离。p可引起烫伤样皮肤综合征（staphylococcalscaldedskinsyndrome,SSSS），又称剥脱性皮炎，多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人。26毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）pTSST-1可引起机体发热，增加对毒素的敏感性；p可引起机体多个器官系统的功能紊乱或毒性休克综合征（TSS）。27其他v耐热核酸酶耐热核酸酶（heat-stablenu
8、clease）v致病性葡萄球菌能产生该酶。耐热，经10015min或602h不被破坏；能较强的降解DNA和RNA。v耐热核酸酶可作为测定葡萄球菌有无致病性的重要指标之一。28（二）所致疾病（二）所致疾病1、化脓性感染: 化脓性炎症大多由致病性较强的金葡菌引起。（1）局部感染：疖、痈、毛囊炎、甲沟炎、蜂窝组织炎、脓胸、伤口化脓（2）全身感染：败血症、脓毒血症 特点：脓液稠厚，不易扩散29化脓性感染化脓性感染疖疖痈痈:30化脓性感染化脓性感染312、毒素性疾病、毒素性疾病l食物中毒食物中毒由葡萄球菌肠毒素引起。为毒素性食物中毒，16h出现症状，以呕吐为主要症状，大多于12d内恢复。32l假膜性肠炎
9、假膜性肠炎是一种菌群失调性肠炎。主要表现为腹泻。病理特点是肠粘膜被一层炎性假膜覆盖。现认为主要由艰难梭菌所致，金黄色葡萄球菌仅为伴随菌。33l烫伤样皮肤综合征烫伤样皮肤综合征 由表皮剥脱毒素引起，导致表皮上层脱落。34l毒性休克综合征毒性休克综合征 由毒性休克综合征毒素-1引起，主要表现为急性高热、低血压、腥红热样皮疹伴脱屑。严重时出现休克。35（三）免疫性p人类对葡萄球菌有一定的天然免疫力。p患病后，能获得一定的免疫力，但不强。36幼猫试验三、微生物学检查法标本标本 脓汁、血液、脑脊液、剩余食物、呕吐物等分离培养分离培养与鉴定与鉴定触酶血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶直接涂片镜检直接涂片镜检革
10、兰阳性葡萄球菌生长现象色素、溶血等生化反应毒素检查37致病性葡萄球菌的主要鉴别依据l金黄色色素金黄色色素l 溶血溶血l凝固酶阳性凝固酶阳性l耐热核酸酶阳性耐热核酸酶阳性l分解甘露醇分解甘露醇38四、防治原则防防 注意消毒隔离 注意个人卫生 防止医源性感染 防止耐药性产生治 抗菌素药敏试验自身菌苗疗法39第二节 链球菌属（Streptococcus） 对人类致病的主要是A A群链球菌群链球菌和肺炎链球菌。肺炎链球菌。401、形态与染色、形态与染色p球形或椭圆形，呈链状排列。p无芽胞，无鞭毛。培养早期（24h）形成透明质酸的荚膜。p细胞壁外有菌毛样结构，含有型特异性M蛋白。p革兰染色阳性。一、生物
11、学性状41422、培养特性、培养特性p营养要求较高，需补充血液、血清、葡萄糖等。p在血清肉汤中易形成长链，管底呈絮状沉淀。p在血琼脂平板上形成灰白色半透明、表面光滑、边缘整齐的菌落，不同菌株溶血不一。433、生化反应、生化反应p分解葡萄糖，产酸不产气。p触酶阴性。p链球菌一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，这两特性可用来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌。444、抗原结构、抗原结构p蛋白质抗原：或称表面抗原。具有型特异性。A群链球菌有M、T、R和S不同性质的蛋白质抗原，与致病性有关的是M抗原。p多糖抗原：或称C抗原。是群特异性抗原，是细胞壁的多糖组分。p核蛋白抗原：或称P抗原。无特异性。455、分类、
12、分类l根据溶血现象分类l根据抗原结构的分类46根据溶血现象分类l甲型溶血性链球菌甲型溶血性链球菌：草绿色溶血环，称甲型溶血或溶血，溶血环中的红细胞并未完全溶解。多为条件致病菌。l乙型溶血性链球菌乙型溶血性链球菌：完全透明溶血环，称乙型溶血或溶血，溶血环中的红细胞完全溶解，致病力强。l丙型链球菌丙型链球菌：无溶血环，又称不溶血性链球菌。一般不致病。4748根据抗原结构的分类p按多糖抗原，可分成20群。对人致病的链球菌菌株，90%左右属A群群。pA群根据其M抗原不同，可分为100个型。496、抵抗力、抵抗力p抵抗力比较弱。p对常用消毒剂敏感。p对青霉素、红霉素，四环素和磺胺药都很敏感。青霉素是治疗
13、首选药物，极少发现有耐药菌株。50二、致病性与免疫性51（一）致病物质l链球菌溶素（streptolysin）l致热外毒素（pyrogenicexotoxin）l透明质酸酶l脂磷壁酸lM蛋白l链激酶（streptokinase;SK）l链道酶（streptodornase;SD）521 1、毒素、毒素p 致热外毒素（红疹毒素猩红热毒素）致热外毒素（红疹毒素猩红热毒素）l是人类猩红热的主要毒性物质。l由A群链球菌溶原菌菌株产生。53根据对氧的稳定性可分为：根据对氧的稳定性可分为：lSLO (链球菌溶素O)：v对O2敏感，氧化后即失去溶血活性。v抗原性强，可刺激机体产生SLO抗体（即抗“O”），
14、v常用于风湿热活动性及肾小球肾炎的辅助诊断。（1:400）lSLS (链球菌溶素S)：v对O2稳定v破坏红细胞v无免疫原性，不产生抗体。p链球菌溶素:542 2、侵袭性酶、侵袭性酶p透明质酸酶l又名扩散因子l能分解细胞间质的透明质酸，使病菌易在组织中扩散。55p链激酶（streptokinase;SK）能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，可溶解血块或阻止血浆凝固，有利于病菌在组织中扩散。p链道酶（streptodornase;SD）亦称链球菌DNA酶。能降解脓液中具有高度粘稠性的DNA，使脓液稀薄，促进病菌扩散。563 3、细胞壁成分、细胞壁成分p脂磷壁酸（脂磷壁酸（LTA）l围绕在M蛋白外
15、层，与M蛋白共同组成链球菌的菌毛样结构。l与人类多种细胞膜上的受体结合，使细菌能定植在皮肤和粘膜表面。pM蛋白蛋白l有抗吞噬和抵抗吞噬细胞内的杀菌作用l与某些超敏反应疾病有关5758（二）所致疾病A群链球菌为主，占90%p化化脓脓性性（淋巴管炎、淋巴结炎、扁桃体炎、咽炎、中耳炎等）p中毒性中毒性l猩红热p超敏反应性超敏反应性l风湿热l急性肾小球肾炎59猩红热皮疹猩红热皮疹小儿猩红热6061（三）免疫性p可获得对同型链球菌的特异性免疫力。p但因其型别多，各型间无交叉免疫力，故常可反复感染。p患猩红热后能建立牢固的同型抗毒素免疫。62三、微生物学检查法p标本：脓液、咽拭子p直接涂片镜检p分离培养与
16、鉴定接种在血琼脂平板l如有溶血菌落，应与葡萄球菌区别l溶血菌落，要和肺炎链球菌鉴别63血清学诊断p抗链球菌溶血素抗链球菌溶血素O试验试验（antistreptolysinOtest,ASOtest） SLO+RBC溶血SLO+患者血清+RBC不溶血 结果：效价大于400单位意义：风湿热及其活动性的辅助诊断风湿热及其活动性的辅助诊断64四、防治原则p减少传染源p注意消毒p治疗患者以青霉素G为首选药物，须治疗彻底，防止超敏反应性疾病的发生。65第三节 肺炎链球菌（S.pneumoniae）66G+双球菌，呈矛尖状培养：营养要求高。在血平板上的菌落细小、圆形略扁、灰白色半透明，菌落周围出现草绿色溶血
17、环，培养时间 48小时，菌落呈脐状生化反应：与甲型链球菌的鉴别菊糖发酵试菊糖发酵试验、胆汁溶菌试验验、胆汁溶菌试验 一、生物学性状67肺炎球菌肺炎球菌68肺炎链球菌菌落-扁平状69肺炎链球菌落-脐状70二、致病性p致病物质l荚膜荚膜l肺炎链球菌溶素Ol脂磷壁酸l神经氨酸酶p所致疾病l大叶性肺炎大叶性肺炎l化脓性中耳炎、胸膜炎、脓胸、脑膜炎或败血症71三、微生物学检查法p标本：取痰液、脓汁、血液或脑脊液等p直接涂片镜检p分离培养与鉴定：（与甲型溶血性链球菌鉴别）v胆汁溶菌试验vOptochin试验v荚膜肿胀试验p动物试验：少量具有毒力的肺炎链球菌注入小鼠腹腔内，一般24h内死亡。72右侧：肺炎链
18、球菌（澄清、透明）左侧：甲型溶血性链球菌（浑浊）胆汁溶菌试验73四、防治原则p荚膜多糖多价疫苗p治疗前作常规药物敏感试验74第四节 奈瑟菌属（Neisseria）75概述p革兰阴性双球菌。无鞭毛。无芽胞。有荚膜和菌毛。p种类l脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis）l淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）l干燥奈瑟菌（N. sicca）、浅黄奈瑟菌（N.subflava）、金黄奈瑟菌（N.flavescens）、粘膜奈瑟菌（N.mucosa）等76一、脑膜炎奈瑟菌（meningococcus）77（一）生物学性状p形态与染色：肾形或豆形革兰阴性双球菌，新分离菌株大多有荚膜和菌毛。p培养特
19、性：营养要求较高，常用巧克力（色）培养基。专性需氧，5%CO2条件下生长更佳。菌落为圆形光滑似露滴状。血平板上不溶血。p抵抗力：很弱。对干燥、热力、消毒剂等均敏感。78脑脑膜膜炎炎双双球球菌菌79A BA BA.A.A.A.脑膜炎奈瑟菌在血琼脂平板上的菌落特征脑膜炎奈瑟菌在血琼脂平板上的菌落特征脑膜炎奈瑟菌在血琼脂平板上的菌落特征脑膜炎奈瑟菌在血琼脂平板上的菌落特征(18-(18-(18-(18-24h)24h)24h)24h)B.B.B.B.脑膜炎奈瑟菌在巧克力琼脂平板上的菌脑膜炎奈瑟菌在巧克力琼脂平板上的菌脑膜炎奈瑟菌在巧克力琼脂平板上的菌脑膜炎奈瑟菌在巧克力琼脂平板上的菌 落特征落特征落
20、特征落特征(18-24h)(18-24h)(18-24h)(18-24h)80（二）致病性p致病物质致病物质侵袭力：荚膜和菌毛毒素：内毒素，是脑膜炎奈瑟菌的主要致病物质。内毒素，是脑膜炎奈瑟菌的主要致病物质。p所致疾病所致疾病p流行性脑脊髓膜炎（简称流脑）流行性脑脊髓膜炎（简称流脑）p 主要经飞沫传播：鼻咽部炎症-败血症-脑膜炎81标本分离培养与鉴定脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭子保暖、保湿、立即送检，培养基预温。最好床边接种。直接涂片镜检中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，可作出初步诊断。可作出初步诊断。巧克力（色）培养基，5% CO2气体。生化反应和玻片
21、凝集试验鉴定。快速诊断对流免疫电泳，SPA协同凝集试验（三）微生物学检查法82（四）防治原则p流脑荚膜多糖疫苗（A+C）进行特异性预防。p注意隔离治疗流脑患者，控制传染源。p流行期间儿童可口服磺胺药物等预防。83二、淋病奈瑟菌（gonococcus）84（一）生物学性状p形态与染色：革兰阴性双球菌，似一对咖啡豆。无芽胞。无鞭毛。有荚膜和菌毛。p培养特性：专性需氧，初次分离培养时需供给5% CO2。营养要求高，巧克力（色）血琼脂平板是适宜培养基。p抵抗力：热、冷、干燥和消毒剂极敏感，1%石炭酸 3 min或1:4000硝酸银2 min即死亡。85Neisseria gonorrhoeae Gra
22、m stain of pure cultureNeisseria gonorrhoeae Gram stain of a pustular exudateNeisseria gonorrhoeae 淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌86致病物质致病物质v菌毛：粘附作用；抵抗吞噬。v外膜蛋白：有助于粘附。vIgA蛋白酶：能破坏黏膜表面sIgA。v内毒素：损害人体黏膜的重要因素。87人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主。主要通过性接触引起泌尿道和生殖系统炎症。淋病淋病 新生儿新生儿淋菌性结膜炎淋菌性结膜炎新生儿由产道感染所致疾病所致疾病88（三）微生物学检查法标本标本用无菌棉拭沾取直接涂片镜检直接涂片镜检在中性粒细胞内发
23、现有革兰阴性双球菌时，有诊断价值在中性粒细胞内发现有革兰阴性双球菌时，有诊断价值分离培养与鉴定分离培养与鉴定标本采集后应注意保暖保湿，立即送检接种泌尿生殖道脓性分泌物子宫颈口表面分泌物巧克力色平板，510% CO2气体89（四）（四）防治原则防治原则防防防防开展防治性病的知识教育开展防治性病的知识教育开展防治性病的知识教育开展防治性病的知识教育防止不正当的两性关系防止不正当的两性关系防止不正当的两性关系防止不正当的两性关系治治治治新生儿新生儿新生儿新生儿1%1%硝酸银滴眼。硝酸银滴眼。硝酸银滴眼。硝酸银滴眼。抗生素抗生素抗生素抗生素。参考体外药敏试验参考体外药敏试验参考体外药敏试验参考体外药敏
24、试验。对对对对青青青青霉霉霉霉素素素素、头头头头孢孢孢孢胺胺胺胺噻噻噻噻肟肟肟肟钠钠钠钠、环环环环丙丙丙丙沙沙沙沙星星星星、壮壮壮壮观观观观霉霉霉霉素素素素等等等等多多多多种种种种抗抗抗抗生生生生素素素素敏敏敏敏感感感感，近年报告耐药菌株增多。近年报告耐药菌株增多。近年报告耐药菌株增多。近年报告耐药菌株增多。90Neisseria gonorrhoeaePurulent conjunctivitisOphthalmia neonatorum Infection in newborns during vaginal delivery91第五节 假单胞菌属Pseudomonas92p一类G-杆菌，
25、种类繁多，其中铜绿假单胞菌是一是一种种常见的条件致病菌，也是院内感染常见菌。p因在生长过程中产生绿色水溶性色素，感染后的脓汁或敷料上出现绿色，故俗称绿脓杆菌。93p直或微弯G杆菌，有荚膜，单端有13根鞭毛，运动活泼。 革兰染色革兰染色革兰染色革兰染色荧光染色荧光染色荧光染色荧光染色电镜图电镜图电镜图电镜图形态特征 94p需氧，4不生长，42生长。可产生带荧光的 绿色水溶性色素，有溶血环。血平板上细菌生长血平板上细菌生长血平板上细菌生长血平板上细菌生长普通培养基上细菌生长普通培养基上细菌生长普通培养基上细菌生长普通培养基上细菌生长培养特性95临床表现p多见于皮肤粘膜受损部位（烧伤和创伤等）与机体免疫力下降病人，表现为局部化脓性炎症和全身感染。引起中耳炎、角膜炎、尿道炎、胃肠炎、心内膜炎、脓胸，也可引起菌血症、败血症及引起婴儿严重的流行性腹泻。p医源性感染。96本章主要内容小结v葡萄球菌和链球菌的生物学性状、致病性、微生物学检查方法。v致病性葡萄球菌的鉴别要点、抗O试验。v其它球菌主要的生物学特点、致病性。
