《黄酮类天然产物》PPT课件

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1、太原理工大学化学化工学院太原理工大学化学化工学院常宏宏常宏宏20111.21第五章第五章2二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应 一、黄酮类化合物的概述一、黄酮类化合物的概述三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第五章第五章 黄酮类化合物黄酮类化合物3 黄酮类化合物多具有颜色，在植物体内大部分与糖黄酮类化合物多具有颜色，在植物体内大部分与糖黄酮类化合物多具有颜色，在植物体内大部分与糖黄酮类化合物多具有颜色，在植物体内大部分与糖结合成甙，一部分以游离形式存在。结合成甙，一部分以游离形式存在。结合成甙，一部分以

2、游离形式存在。结合成甙，一部分以游离形式存在。1. 基本结构和分类基本结构和分类 以以以以前前前前，黄黄黄黄酮酮酮酮类类类类化化化化合合合合物物物物主主主主要要要要是是是是指指指指基基基基本本本本母母母母核核核核2-2-苯苯苯苯基基基基色色色色原原原原酮酮酮酮类类类类化化化化合合合合物物物物，现现现现在在在在则则则则是是是是泛泛泛泛指指指指两两两两个个个个苯苯苯苯环环环环（A-A-与与与与B-B-环环环环）通通通通过过过过中央三碳链相互联结而成的一系列化合物中央三碳链相互联结而成的一系列化合物中央三碳链相互联结而成的一系列化合物中央三碳链相互联结而成的一系列化合物。一、一、 概述概述4 一、一

3、、 概述概述5 重要的天然黄酮类化合物分类如下所示：重要的天然黄酮类化合物分类如下所示： 黄酮类黄酮类 黄酮醇 一、一、 概述概述6 二氢黄酮类二氢黄酮类二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类 花色素类花色素类 一、一、 概述概述7 黄烷黄烷-3,4-3,4-二醇类二醇类 双苯吡酮类双苯吡酮类( ( 酮类酮类) ) 黄烷黄烷-3-3-醇类醇类一、一、 概述概述8 异黄酮类异黄酮类 二氢异黄酮类二氢异黄酮类 查耳酮类查耳酮类 一、一、 概述概述9 二氢查耳酮类二氢查耳酮类 橙酮类橙酮类 高异黄酮类高异黄酮类 一、一、 概述概述10 黄黄黄黄酮酮酮酮类类类类化化化化合合合合物物物物广广广广泛泛泛泛分分分分布布布

4、布于于于于植植植植物物物物界界界界中中中中，而而而而且且且且生生生生理理理理活活活活性性性性多多多多种种种种多多多多样样样样，引引引引起起起起了了了了国国国国内内内内外外外外的的的的广广广广泛泛泛泛重重重重视视视视，研研研研究究究究进进进进展展展展很很很很快快快快。仅仅仅仅截截截截止止止止到到到到19741974年年年年为为为为止止止止，国国国国内内内内外外外外已已已已发发发发表表表表的的的的黄黄黄黄酮酮酮酮类类类类化化化化合合合合物物物物共共共共16741674个个个个（主主主主要要要要是是是是天天天天然然然然黄黄黄黄酮酮酮酮类类类类，也也也也有有有有少少少少部部部部分分分分为为为为合合合合

5、成成成成品品品品，其其其其中中中中甙甙甙甙元元元元902902个个个个，甙甙甙甙722722个个个个），并并并并以以以以黄黄黄黄酮酮酮酮醇醇醇醇类类类类最最最最为为为为常常常常见见见见，约约约约占占占占总总总总数数数数的的的的三三三三分分分分之之之之一一一一，其其其其次次次次为为为为黄黄黄黄酮酮酮酮类类类类，占占占占总总总总数数数数的的的的四四四四分分分分之之之之一一一一以以以以上上上上，其其其其余余余余则则则则较较较较少少少少见见见见。至至至至于于于于双双双双黄黄黄黄酮酮酮酮类类类类多多多多局局局局限限限限分分分分布布布布于于于于裸裸裸裸子子子子植植植植物物物物，尤尤尤尤其其其其松松松松柏柏

6、柏柏纲纲纲纲，银银银银杏杏杏杏纲纲纲纲和和和和凤凤凤凤尾尾尾尾纲纲纲纲等等等等植植植植物物物物中中中中。至至至至19801980年年年年，黄黄黄黄酮酮酮酮类类类类化化化化合合合合物物物物总总总总数数数数已已已已达达达达到到到到27212721个个个个。至至至至19931993年年年年，黄黄黄黄酮酮酮酮类化合物总数已达到类化合物总数已达到类化合物总数已达到类化合物总数已达到40004000多个。目前，已超多个。目前，已超多个。目前，已超多个。目前，已超80008000个。个。个。个。一、一、 概述概述11 一、一、 概述概述12 少少数数黄黄酮酮类类化化合合物物结结构构较较为为复复杂杂，如如水水

7、飞飞蓟蓟素素( (silybinsilybin) )为黄酮木脂体类化合物。为黄酮木脂体类化合物。一、一、 概述概述13 榕碱及异榕碱则为生物碱型黄酮。榕碱及异榕碱则为生物碱型黄酮。一、一、 概述概述14 天天然然黄黄酮酮甙甙类类化化合合物物，由由于于糖糖的的种种类类、数数量量、联联接接位位置置及及联联接接方方式式不不同同，可可以以组组成成各各种种各各样样的的黄黄酮酮甙甙类：类：单糖类：单糖类：D-葡葡萄萄糖糖、D-半半乳乳糖糖、D-木木糖糖、L-鼠鼠李李糖糖、L-阿阿拉拉伯伯糖及糖及D-葡萄糖醛酸等。葡萄糖醛酸等。双糖类：双糖类：槐糖、龙胆二糖、芸香糖、新橙皮糖、刺槐二糖等。槐糖、龙胆二糖、芸

8、香糖、新橙皮糖、刺槐二糖等。一、一、 概述概述15叁糖类：叁糖类：龙胆三糖、槐三糖。龙胆三糖、槐三糖。酰化糖类：酰化糖类：2-2酰葡萄糖、咖啡酰基葡萄糖等。酰葡萄糖、咖啡酰基葡萄糖等。 黄黄酮酮甙甙中中糖糖的的联联接接位位置置与与甙甙元元的的结结构构类类型型有有关关。如如黄黄酮酮醇醇类类常常形形成成3-，7-， 3-， 4，-单单糖糖甙甙，或或3，7-， 3，4-及及7，4-双糖链甙等。双糖链甙等。一、一、 概述概述16 天天天天然然然然黄黄黄黄酮酮酮酮类类类类C-C-糖糖糖糖甙甙甙甙如如如如葛葛葛葛根根根根黄黄黄黄素素素素、葛葛葛葛根根根根黄黄黄黄素素素素木木木木糖糖糖糖甙甙甙甙等，为中药葛

9、根中的扩冠有效成分等，为中药葛根中的扩冠有效成分等，为中药葛根中的扩冠有效成分等，为中药葛根中的扩冠有效成分。一、一、 概述概述17 葛根素：葛根素： R1R2R4R5H，R3Glc3-OH-葛根素：葛根素：R1R2R5H，R3Glc, R4=OH大豆苷大豆苷 ： R1R3R4R5H，R2Glc大豆苷元大豆苷元 ： R1R3R4R5R2H芒果苷：芒果苷： R1R2R3R4H，R5Me一、一、 概述概述181.性状 黄黄酮酮类类化化合合物物多多为为晶晶状状固固体体，少少数数（如如黄黄酮酮甙甙类类）为无定形粉末。为无定形粉末。2. 旋光性 甙甙元元中中，二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮醇醇、黄黄

10、烷烷及及黄黄烷烷醇醇具具有有手手性性碳碳，具具旋旋光光性性，其其余余黄黄酮酮类类无无旋旋光光性性。甙甙类类结结构中含糖的部分结构，故均有旋光性，且多为左旋。构中含糖的部分结构，故均有旋光性，且多为左旋。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应19二氢黄酮类二氢黄酮类二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类 黄烷黄烷-3,4-3,4-二醇类二醇类二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应20 黄烷-3-醇类二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应213.颜色颜色 黄黄酮酮的的色色原原酮酮部部分分无无色色，在在2-2-位位上上引引入入苯苯环环后

11、后，即即形形成成交交叉叉共共轭轭体体系系，使使共共轭轭链链延延长长，因因而而呈呈现现出出颜颜色色。黄黄酮酮、黄黄酮酮醇醇及及其其甙甙类类多多显显灰灰黄黄黄黄色色，查查耳耳酮酮为为黄黄橙橙黄黄色色，异异黄黄酮酮类类显显微微黄黄色，色，二氢黄酮、二氢黄酮醇不显色。二氢黄酮、二氢黄酮醇不显色。 在在上上述述黄黄酮酮、黄黄酮酮醇醇分分子子中中，尤尤其其在在7-7-倍倍及及4-4-位位引引入入OHOH及及OCH3OCH3等等供供电电基基后后，化化合合物物的的颜颜色色加加深深，但但在在其其它它位位置置引引入入OHOH、OCH3OCH3等供电基影响较小。等供电基影响较小。 花花色色甙甙及及其其甙甙元元的的颜

12、颜色色随随pH不不同同而而改改变变，一一般般显显红红色色( pH 7 )、紫色紫色( pH8.5 )、蓝色蓝色( pH 8.5 )等颜色。等颜色。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应22 二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应23 4.溶解度 一一一一般般般般来来来来说说说说，游游离离甙甙元元难难溶溶或或不不溶溶于于水水，易易溶溶于于甲甲醇醇、乙乙醇醇、醋醋酸酸乙乙酯酯、乙乙醚醚等等有有机机溶溶剂剂及及稀稀碱碱液液中中。花花色色甙甙元元（花花青青素素）类类以以离离子子形形式式存存在在，水水溶溶度度较较大大。黄黄酮类甙元分子中羟基数越多，水中

13、的溶解度越大。酮类甙元分子中羟基数越多，水中的溶解度越大。 黄黄酮酮甙甙类类，水水溶溶性性比比相相应应甙甙元元为为大大；糖糖链链越越长长，则则水水溶溶度度越越大大，一一般般易易溶溶于于水水、甲甲醇醇、乙乙醇醇等等强强极极性性溶溶剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应24 5.酸碱性酸碱性酸性酸性 黄黄酮酮类类化化合合物物因因分分子子中中多多含含有有游游离离酚酚羟羟基基，故故显显酸酸性性，可可溶溶于于碱碱性性溶溶液液中中。酸酸性性强强弱弱顺顺序序依依次次为为：7 7，4-4-二二OH O

14、H 7-7-或或4-OH4-OH 一一般般酚酚OH OH 5-OH 5-OH 。此此性性质质可用于提取、分离及鉴定工作可用于提取、分离及鉴定工作。 碱性碱性 黄黄酮酮类类化化合合物物分分子子中中 - -吡吡喃喃酮酮环环上上的的1-1-位位氧氧原原子子，因因有有未未共共用用的的电电子子对对，故故表表现现微微弱弱的的碱碱性性，可可与与强强无无机机酸酸，如如浓浓硫硫酸酸、盐盐酸酸等等生生成成（金金羊羊）盐盐，但但生生成成的的（金羊）（金羊） 盐不稳定，加水可分解。盐不稳定，加水可分解。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应256.显色反应显色反应1）盐酸盐酸-镁粉（或锌粉）

15、反应镁粉（或锌粉）反应 多多数数黄黄酮酮、黄黄酮酮醇醇、二二氢氢黄黄酮酮及及二二氢氢黄黄酮酮醇醇类类化化合合物物显显橙橙红红紫紫红红色色，少少数数显显紫紫蓝蓝色色。查查耳耳酮酮、橙橙酮酮、儿儿茶茶素素类类不不显显色色。异异黄酮类一般不显色。黄酮类一般不显色。2） 四氢硼钠（钾）反应四氢硼钠（钾）反应 NaBH4是是对对二二氢氢黄黄酮酮类类化化合合物物专专属属性性较较高高的的一一种种还还原原剂剂。与与二氢黄酮类化合物产生红二氢黄酮类化合物产生红紫色。紫色。其它黄酮类化合物均不显色。其它黄酮类化合物均不显色。 3）铝盐铝盐 生生成成的的络络合合物物多多为为黄黄色色（ max=415nm），并并有有

16、荧荧光光，可可用用于于定性及定量分析。常用试剂为定性及定量分析。常用试剂为1%1%三氯化铝或硝酸铝溶液。三氯化铝或硝酸铝溶液。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应26 4） 铅盐铅盐 常常用用1%醋醋酸酸铅铅及及碱碱式式醋醋酸酸铅铅水水溶溶液液，碱碱式式醋醋酸酸铅铅反应能力更强，可生成黄反应能力更强，可生成黄红色沉淀。红色沉淀。5） 锆盐锆盐 多多用用2%二二氯氯氧氧化化锆锆（ZrOCl2）甲甲醇醇溶溶液液。黄黄酮酮类类化化合合物物分分子子中中有有游游离离的的3-或或5-OH存存在在时时，均均可可反反应应生生成黄色的锆络合物。成黄色的锆络合物。3-OH，4-酮酮基基

17、络络合合物物的的稳稳定定性性 5-OH，4-酮酮基基络络合合物物（仅仅二二氢氢黄黄酮酮醇醇除除外外）。当当反反应应液液中中接接着着加加入入枸枸橼橼酸酸后后，5-羟羟基基黄黄酮酮的的黄黄色色溶溶液液显显著著褪褪色色，而而3-羟羟基基黄酮溶液仍呈鲜黄色（锆黄酮溶液仍呈鲜黄色（锆枸橼酸反应）枸橼酸反应）。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应27 6）镁盐镁盐 二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮醇醇类类与与醋醋酸酸镁镁的的甲甲醇醇溶溶液液，加加热热可可显显天天蓝蓝色色荧荧光光，若若具具有有C5-OHC5-OH，色色泽泽更更为为明明显显。而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显黄而黄酮

18、、黄酮醇及异黄酮类等则显黄而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显黄而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显黄 橙黄橙黄橙黄橙黄 褐色。褐色。褐色。褐色。7）氯化锶（氯化锶（SrCl2） 在在氨氨性性甲甲醇醇溶溶液液中中，可可与与分分子子中中具具有有邻邻二二酚酚羟羟基基结构的黄酮类化合物生成绿色结构的黄酮类化合物生成绿色 棕色乃至黑色沉淀。棕色乃至黑色沉淀。8）三氯化铁反应三氯化铁反应 多多数数黄黄酮酮类类化化合合物物因因分分子子中中含含有有游游离离酚酚羟羟基基，与与三三氯氯化化铁铁水水溶溶液液或或醇醇溶溶液液可可产产生生正正反反应应，呈呈现现颜颜色色；当含有氢键缔合的酚羟基时，颜色更明显。当含有氢键缔合的酚羟基

19、时，颜色更明显。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应28 9）硼酸显色反应硼酸显色反应 在在无无机机酸酸或或有有机机酸酸存存在在条条件件下下，5-羟羟基基黄黄酮酮及及2-羟羟基查耳酮可与硼酸反应，呈亮黄色。基查耳酮可与硼酸反应，呈亮黄色。10）碱性试剂显色反应碱性试剂显色反应 在在日日光光及及紫紫外外光光下下，通通过过纸纸斑斑反反应应，观观察察样样品品用用氨氨蒸蒸气气和和其其他他碱碱性性试试剂剂处处理理后后的的色色变变深深的的情情况况。当当分分子子中中有有邻邻二二酚酚羟羟基基取取代代或或3,4-二二羟羟基基取取代代时时，在在碱碱液液中中很快氧化，最后生成绿棕色沉淀。

20、很快氧化，最后生成绿棕色沉淀。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应29 1. 提取提取 黄黄酮酮甙甙类类以以及及极极性性稍稍大大的的甙甙元元（如如羟羟基基黄黄酮酮等等），一一般般可可用用丙丙酮酮、醋醋酸酸乙乙酯酯、乙乙醇醇提提取取。一一些些多多糖糖甙甙类类可可用用沸沸水水提提取取。在在提提取取花花青青素素类类化化合合物物时时，可可加加入入少少量酸（量酸（0.1%盐酸，应当慎用，避免发生水解）。盐酸，应当慎用，避免发生水解）。 大大多多数数黄黄酮酮甙甙元元宜宜用用用用氯氯仿仿、乙乙醚醚、醋醋酸酸乙乙酯酯等等中中极极性性溶溶剂剂提提取取，而而对对多多甲甲氧氧基基黄黄酮酮

21、类类游游离离甙甙元元，甚甚至可用苯等低极性溶剂进行提取。至可用苯等低极性溶剂进行提取。 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离30 对得到的粗提物可进行下列精制处理，常用方法有：对得到的粗提物可进行下列精制处理，常用方法有：（1） 溶剂萃取法溶剂萃取法 利利用用黄黄酮酮类类化化合合物物与与混混入入的的杂杂质质极极性性不不同同，选选用用不不同同溶溶剂剂进进行行地地萃萃取取可可达达到到精精制制纯纯化化目目的的。例例如如植植物物叶叶子子的的醇醇浸浸液液，可可用用石石油油醚醚处处理理，以以便便除除去去叶叶绿绿素素、胡胡萝萝卜卜素素等等脂脂溶溶性性色色素素。而而某某些些药药料料水水溶溶

22、液液则则可可加加入入多多倍倍量量浓浓醇醇，以以沉沉淀淀除除去去蛋蛋白白质质、多多糖糖类类等等水水溶溶性杂质。性杂质。 有有时时溶溶剂剂萃萃取取过过程程也也可可以以用用逆逆流流分分配配法法连连续续进进行行。常常用用的的溶溶剂系统有：水剂系统有：水- -醋酸乙酯，正丁醇醋酸乙酯，正丁醇- -石油醚等。石油醚等。 溶溶剂剂萃萃取取过过程程在在除除去去杂杂质质的的同同时时，往往往往还还可可以以收收到到分分离离甙甙和和甙甙元或极性甙元与非极性甙元的效果元或极性甙元与非极性甙元的效果。 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离31（2）碱提取酸沉淀法）碱提取酸沉淀法 黄黄酮酮甙甙类类虽虽有

23、有一一定定极极性性，可可溶溶于于水水，但但却却难难溶溶于于酸酸性性水水，易易溶溶于于碱碱性性水水，故故可可用用碱碱性性水水提提取取，再再于于碱碱水水提提取取液液中中加加入入酸酸，黄黄酮酮甙甙类类即即可可沉沉淀淀析析出出。此此法法简简便便易易行行，如如芦芦丁丁、橙橙皮皮甙甙、黄黄芩甙的提取都应用了这个方法。芩甙的提取都应用了这个方法。 在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓度不宜在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加热进破坏黄酮母核。在加酸酸过高，以免在强碱性下，尤其加热进破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成（金羊）盐，致使析出的黄化

24、时，酸性也不宜过强，以免生成（金羊）盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。 当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如花、果类当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如花、果类药材，宜用药材，宜用石灰乳或石灰水石灰乳或石灰水代替其它碱性水溶液进行提取，以代替其它碱性水溶液进行提取，以使上述含羟基的杂质生成钙盐沉淀，不致溶出。这也有利于黄使上述含羟基的杂质生成钙盐沉淀，不致溶出。这也有利于黄酮类化合物的纯化处理。酮类化合物的纯化处理。 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离32 以以从槐米中提取芦丁从槐米中提取芦丁为例说明该

25、法的操作过程。为例说明该法的操作过程。 槐槐米米（槐槐树树花花蕾蕾）加加约约6倍倍量量水水，煮煮沸沸，在在搅搅拌拌下下缓缓缓缓加加入入石石灰灰乳乳至至pH89，在在此此pH条条件件下下微微沸沸2030分分钟钟，趁趁热热油油滤滤，残残渣渣同同上上再再加加4倍倍水水煎煎1次次，乘乘热热抽抽滤滤。合合并并滤滤液液在在6070下下，用用浓浓盐盐酸酸调调至至pH为为5，搅搅匀匀，静静置置24小小时时，抽抽滤滤。沉沉淀淀物物水水洗洗至至中中性性，60干干燥燥得得芦芦丁丁粗粗品品，于水中重结晶，于水中重结晶，7080干燥得干燥得芦丁纯品芦丁纯品。 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离33

26、 （3）碳粉吸附法）碳粉吸附法 主主要要适适于于甙甙类类的的精精制制工工作作。通通常常，在在植植物物的的甲甲醇醇粗粗提提取取物物中中，分分次次加加入入活活性性炭炭，搅搅拌拌，静静置置，直直至至定定性性检检查查上上清清液液无无黄黄酮酮反反应应时时为为止止。过过滤滤，收收集集吸吸甙甙炭炭末末，依依次次用用沸沸甲甲醇醇、沸沸水水、7%酚酚/水水、15%酚酚/醇醇溶溶液液进进行行洗洗脱脱，各各部部分分洗洗脱液进行定性检查（或用脱液进行定性检查（或用PPC鉴定）。鉴定）。 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离342. 分离分离 现将较常用的方法介绍如下：现将较常用的方法介绍如下：（1

27、）柱层析法）柱层析法 分分离离黄黄酮酮类类化化合合物物常常用用的的吸吸附附剂剂或或载载体体有有硅硅胶胶、聚聚酰酰胺胺及及纤纤维维素素粉粉等等。此此外外，也也有有用用氧氧化化铝铝、氧氧化化镁镁及及硅藻土等。硅藻土等。 1） 硅硅胶胶柱柱层层析析：此此法法应应用用范范围围最最广广，主主要要适适于于分分离离异异黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮醇醇及及高高度度甲甲基基化化（或或乙乙酰酰化化）的的黄黄酮酮及及黄黄酮酮醇醇类类。少少数数情情况况下下，在在加加水水去去活活化化后后也也可可用用于于分分离离极极性性较较大大的的化化合合物物，如如多多羟羟基基黄黄酮醇及其甙类等。酮醇及其甙类等。 三、黄

28、酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离352） 聚聚酰酰胺胺柱柱层层析析：对对分分离离黄黄酮酮类类化化合合物物来来说说，聚聚酰酰胺胺是是较较为为理理想想的的吸吸附附剂剂。其其吸吸附附强强度度主主要要取取决决于于黄黄酮酮类类化化合合物物分分子子中中羟羟基基的的数数目目与与位位置置及及溶溶剂剂与与黄黄酮酮类类化化合合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。 聚聚酰酰胺胺柱柱层层析析可可用用于于分分离离各各种种类类型型的的黄黄酮酮类类化化合合物物，包包括括甙甙及及甙甙元元、查查耳耳酮酮与与二二氢氢黄黄酮酮等等黄黄酮酮类类化化合合物物从从聚酰胺柱上洗

29、脱时大体有下列规律：聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律： 甙元相同，洗脱先后顺序一般是：甙元相同，洗脱先后顺序一般是： 参糖甙参糖甙 双糖甙双糖甙 单糖甙单糖甙 甙元甙元 母核上增加羟基，洗脱速度即相应减缓母核上增加羟基，洗脱速度即相应减缓 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离36 不同类型黄酮化合物，先后流出顺序一般是：不同类型黄酮化合物，先后流出顺序一般是：异黄异黄 酮酮 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 黄酮黄酮 黄酮醇黄酮醇 分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强，故查耳分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强，故查耳 酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱。上述规律也适酮往往比相应的二氢黄酮难

30、于洗脱。上述规律也适 用于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。用于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。3） 葡聚糖疑胶柱层析葡聚糖疑胶柱层析 对对于于黄黄酮酮类类化化合合物物的的分分离离，主主要要用用两两种种型型号号的的凝凝胶胶：葡聚糖葡聚糖-G型及型及葡聚糖葡聚糖-LH-20型。型。 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离37葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是：葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是： 分分离离游游离离黄黄酮酮时时，主主要要靠靠吸吸附附作作用用。凝凝胶胶对对黄黄酮酮类类化化合合物物的的吸吸附附程程度度取取决决于于游游离离酚酚羟羟基基的的数数目目。但但分分离离黄黄酮酮

31、甙甙时时，则则分分子子筛筛的的属属性性起起主主导导作作用用。在在洗洗脱脱时时，黄黄酮酮甙类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体，甙类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体，葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：碱性水溶液（如碱性水溶液（如0.1mol/L NH4OH）、含盐水溶液）、含盐水溶液 (0.5mol/L NaCl等等)。醇及含水醇，如甲醇，甲醇醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水（不同比例）、水（不同比例）、 t-丁醇丁醇-甲醇甲醇(3:1)、乙醇等。、乙醇等。 其它溶剂：如含水丙酮、甲醇其它溶剂：如含水丙酮、甲醇-氯仿等。氯仿等。 三、黄酮类化合物的提取与分

32、离三、黄酮类化合物的提取与分离38 （2）梯度）梯度pH萃取法萃取法 梯梯度度pH萃萃取取法法适适合合于于酸酸性性强强弱弱不不同同的的黄黄酮酮甙甙元元的的分分离离。根根据据黄黄酮酮类类甙甙元元酚酚羟羟基基数数目目及及位位置置不不同同其其酸酸性性强强弱弱也也不不同同的的性性质质，可可以以将将混混合合物物溶溶于于有有机机溶溶剂剂（如如乙乙醚醚 ） 后后 ， 依依 次次 用用 5%NaHCO3、 5%Na2CO3、0.2%NaOH及及4%NaOH水溶液萃取，来达到分离目的。水溶液萃取，来达到分离目的。 酸性：酸性： 7，4 -二二OH 7-或或4 -OH 一般一般OH 5-OH（溶于）：溶于）：5%

33、NaHCO3 5%Na2CO3 0.2%NaOH 4%NaOH液液 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离39（3）根据分子中某些特定官能团进行分离）根据分子中某些特定官能团进行分离 在在黄黄酮酮类类成成分分的的混混合合物物中中，具具有有邻邻二二酚酚羟羟基基成成分分与与无无此此结结构构的的成成分分，可可用用铅铅盐盐法法分分离离。有有邻邻二二酚酚羟羟基基的的成成分分可可被被醋醋酸酸铅铅沉沉淀淀，不不具具有有邻邻二二酚酚羟羟基基的的成成分分可可被碱式醋酸铅沉淀，达到分离的目的。被碱式醋酸铅沉淀，达到分离的目的。 与与黄黄酮酮类类成成分分混混存存的的其其它它杂杂质质，如如分分子子中

34、中有有羧羧基基（如如树树胶胶、粘粘液液、果果胶胶、有有机机酸酸、蛋蛋白白质质、氨氨基基酸酸等等）或或邻邻二二酚酚羟羟基基（如如鞣鞣质质等等）时时，也也可可为为醋醋酸酸铅铅沉沉淀淀达达到去杂目的。到去杂目的。 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离40 具具黄黄酮酮类类化化合合物物与与铅铅盐盐生生成成的的沉沉淀淀，滤滤集集后后按按常常法法悬悬在在浮浮在在乙乙醇醇中中，通通入入H2S进进行行复复分分解解，滤滤除除硫硫化化铅铅沉沉淀淀，滤滤液液中中可可得得到到黄黄酮酮类类化化合合物物。但但初初生生态态的的PbS沉沉淀淀具具有有较较高高的的吸吸附附性性，因因此此现现多多不不主主张张用

35、用H2S脱脱铅铅，而而用用硫硫酸酸盐盐或或磷磷酸酸盐盐，或或用用阳阳离离子子交交换换树树脂脂脱脱铅铅。有有邻邻二二酚酚羟羟基基的的黄黄酮酮可可与与硼硼酸酸络络合合，生生成成物物易易溶溶于于水水，借借此此也可与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。也可与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。 在在实实际际工工作作中中，常常将将上上述述柱柱层层析析法法与与各各种种经经典典方方法相互配合应用，以达到较好的分离效果。法相互配合应用，以达到较好的分离效果。 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离41 1.黄酮类化合物在甲醇中的黄酮类化合物在甲醇中的UV谱特征谱特征 溶剂：溶剂：MeOH四、

36、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱421.黄酮类化合物在甲醇中的黄酮类化合物在甲醇中的UV谱特征谱特征1、MeOH+NaOMe: 带带I 红移红移40-60nm2、NaOAc（熔融）熔融）: 带带I 红移红移40-65nm 强度下降强度下降四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱431.黄酮类化合物在甲醇中的黄酮类化合物在甲醇中的UV谱特征谱特征NaOAc（未熔融）未熔融）:带带红移红移5-20nm四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱44AlCl3/HCl 谱图谱图AlCl3 ：无邻二酚：无邻二酚羟基。羟基。AlCl3/HCl 谱图谱图AlCl3 ：B环环有邻二酚羟基：有邻二

37、酚羟基：带带I 紫移紫移30-40nm四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱45AlCl3/HCl 谱图谱图AlCl3 ：无邻二酚：无邻二酚羟基。羟基。AlCl3/HCl 谱图谱图AlCl3 ：A环和环和B环环有邻二酚羟基：有邻二酚羟基：带带I 紫移紫移 50-65nm四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱46AlCl3/HCl 谱图谱图MeOH：无：无3OH或或5OHAlCl3/HCl 谱图谱图MeOH：可能有可能有3OH或或5OH（1）带带I 红移红移35-55nm, 可能只有可能只有5OH（2）带带I 红移红移60nm, 可能只有可能只有3OH四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类

38、化合物的波谱472. 黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱(DMSO-d6)特征特征5OH：12 ppm7OH： 11 ppm3OH： 10 ppm四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱482. 黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 A环上的芳氢：环上的芳氢：6H: 5.7-6.9 (d, J=2.5)8H: 5.7-6.9 (d, J=2.5)四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱492.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 黄酮醇黄酮醇 A环上的芳氢：环上的芳氢：5-H： 7.98.2（d, J=9.0 ）6-H： 6.77.1（dd, J=9.0, 2.5 ）8-

39、H： 6.77.0（d, J=2.5 ）四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱502.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱二氢黄酮醇二氢黄酮醇 A环上的芳氢：环上的芳氢：5-H： 7.77.9（d, J=9.0 ）6-H： 6.46.5（dd, J=9.0, 2.5 ）8-H： 6.36.4（d, J=2.5 ）四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱512. 黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 B环环上的芳氢（上的芳氢（H-3,5 较为高场）：较为高场）：H-3, 5 ： 6.57.1（d, J8.5 ）H-2, 6： 6.57.9（ d, J8.5 ）四、黄酮类化合物的

40、波谱四、黄酮类化合物的波谱522.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱B环环上的芳氢：上的芳氢：H-5 ： 6.77.1（d, J8.5 ）H-2： 7.27.9（ d, J2.5 ）H-6： 7.27.9（ dd, J8.5, 2.5 ）四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱53H-2（异黄酮）异黄酮）: 7.67.8( 1H, s ); 8.58.7( 1H, s, DMSO-d6 )2. 黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 C环环上的氢：上的氢：H-3（黄酮）黄酮）: 6.3( 1H, s )四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱542. 黄酮类化合物黄酮类化合物1

41、H-NMR谱谱 C环环上的氢（二氢黄酮）：上的氢（二氢黄酮）：H-2: 5.22( 1H,dd, J=11.5, 5.0 )H-3: 2.80( 1H, dd, J=17.0,11.5 ) ( 1H, dd, J=17.0,5.0 )四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱552.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 C环环上的氢（二氢黄酮醇上的氢（二氢黄酮醇）：）：化合物化合物 H-2 H-3二氢黄酮醇二氢黄酮醇 4.80-5.00 d( 11.0) 4.10-4.30 d(11.0)二氢黄酮醇二氢黄酮醇3-O-糖苷糖苷 5.00-5.60 d ( 11.0) 4.30-4.60 d

42、(11.0)四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱562. 黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 C环环上的氢（上的氢（查耳酮查耳酮）：）：H- ： 6.50-6.70 ( 1H,d, J=17.0 )H- ： 7.30-7.70 ( 1H,d, J=17.0 )四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱572.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 C环环上的氢（上的氢（橙酮橙酮）：）：苄氢苄氢:6.50-6.70( 1H,s ) 6.37-6.94( 1H,s, DMSO-d6 )四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱582. 黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱

43、化合物化合物 糖上的糖上的H-1黄酮醇黄酮醇3-O-葡萄糖苷葡萄糖苷5.70-6.00黄酮醇黄酮醇7-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 4.80-5.20黄酮醇黄酮醇4-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 黄酮醇黄酮醇5-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 黄酮醇黄酮醇6及及8-C-糖苷糖苷黄酮醇黄酮醇3-O-鼠李糖苷鼠李糖苷 5.00-5.10二氢黄酮醇二氢黄酮醇3-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 4.10-4.30二氢黄酮醇二氢黄酮醇3-O-鼠李糖苷鼠李糖苷 4.00-4.20糖糖上上的的氢氢四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱592. 黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱苯环上其他取代基的氢苯环上其他取代基的氢： 取代基取代

44、基 甲基甲基 2.04-2.45 ( 3H,s ) 乙酰氧基乙酰氧基 2.30-2.45 ( 3H, s ) 甲氧基甲氧基 3.45-4.10 ( 3H, s )四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱603. 黄酮类化合物黄酮类化合物13C-NMR谱谱四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱613. 黄酮类化合物黄酮类化合物13C-NMR谱谱苷化苷化位置位置 C-1(糖糖)7或或2,3,4 100.0-102.55-O-葡萄糖苷葡萄糖苷104.37-O-鼠李糖苷鼠李糖苷 99.0（1）糖上苷化位移和）糖上苷化位移和C-1信号信号苷化位移（酚性苷中）苷化位移（酚性苷中）4.0+6.0（

45、C-1）四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱623.黄酮类化合物黄酮类化合物13C-NMR谱谱 苷苷元元糖苷化后，直接与糖相连的糖苷化后，直接与糖相连的C-1向向高场位移高场位移，而，而邻、对位的邻、对位的C则向低场位移则向低场位移（2）苷元的苷化位移）苷元的苷化位移四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱634. 黄酮类化合物黄酮类化合物MS谱谱途径途径I：途径途径II：四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱645. 黄酮类化合物黄酮类化合物碱熔降解碱熔降解四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱65 提取分离示例提取分离示例1. 1. 某植物药材某植物药材含有以下化合物含有以下化合物,用用分离流程示意分离流程示意图图表示过程提取表示过程提取,分离。请判断各化合物在分离分离。请判断各化合物在分离流程示意图中的位置流程示意图中的位置(也就是将每个化合物的也就是将每个化合物的英英文代号文代号与分离流程示意图上的与分离流程示意图上的阿拉伯数字阿拉伯数字代号代号配对配对)。66 67 68 2.某药材含有以下化合物某药材含有以下化合物,以图示过程提取、分离，请以图示过程提取、分离，请 判断各化合物在图中的位置。判断各化合物在图中的位置。69 分离流程示意图：分离流程示意图：70