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1、实验四实验四 病原性球菌病原性球菌1. 1. 五类病原性球菌的形态、排列及染色性五类病原性球菌的形态、排列及染色性2. 2. 葡萄球菌、链球菌的培养物葡萄球菌、链球菌的培养物3. 3. 血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验-玻片法玻片法 试管法试管法4 4、抗链球菌溶血素、抗链球菌溶血素”O O”(ASOASO)乳胶试验)乳胶试验5 5、脓汁中葡萄球菌的分离鉴定、脓汁中葡萄球菌的分离鉴定示教示教示教示教(操作,(操作,1人人/组)组)示教示教示教示教示教示教示教示教示教示教示教示教(操作,(操作,1人人/组)组)1 1教学教学8 8 G+球菌:球菌:金葡菌金葡菌链球菌链球菌肺炎双球菌肺炎双球菌1. 五
2、类病原性球菌的形态、排列及染色性五类病原性球菌的形态、排列及染色性示教示教示教示教2 2教学教学8 8 G-球菌:球菌: 淋球菌淋球菌 脑膜炎球菌脑膜炎球菌3 3教学教学8 82. 葡萄球菌、链球菌的培养物葡萄球菌、链球菌的培养物示教示教示教示教 普通琼脂平板普通琼脂平板 血平板血平板 菌落形状菌落形状 色素色素 溶血性溶血性 金葡金葡 圆形凸起光滑中等大小圆形凸起光滑中等大小 金黄色金黄色 + +柠葡柠葡 同上同上 柠檬色柠檬色 - - 白葡白葡 同上同上 白色白色 - - 表表14 4教学教学8 8 血平板血平板甲型链球菌甲型链球菌 针尖小菌落、草绿色狭窄溶血环针尖小菌落、草绿色狭窄溶血环
3、乙型链球菌乙型链球菌 针尖小菌落、透明宽大溶血环针尖小菌落、透明宽大溶血环 巧克力血平板巧克力血平板脑膜炎双球菌脑膜炎双球菌 菌落透明似露滴状菌落透明似露滴状 表表2 表表35 5教学教学8 83. 血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验-玻片法玻片法(操作,(操作,1人人/组)组) 原理:原理:方法:方法: 兔血浆兔血浆 兔血浆兔血浆 生理盐水生理盐水 123金葡金葡 白葡白葡 金葡金葡 + + + + +凝集(凝集(+)不凝集(不凝集(-)不凝集(不凝集(-)6 6教学教学8 84、血浆凝固酶试验(试管法)、血浆凝固酶试验(试管法) 金葡菌金葡菌 白葡菌白葡菌 + + + 兔血浆兔血浆 兔血浆兔血浆
4、 37303730水浴观察水浴观察凝凝集集为为阳阳性性不不凝凝集集为为阴阴性性示教示教示教示教7 7教学教学8 8凝固酶实验凝固酶实验(试管法)(试管法) 8 8教学教学8 8五、抗链球菌溶血素五、抗链球菌溶血素“O”(ASO) 快速胶乳法快速胶乳法 高滴度病人血清被适量溶血素中和了正常水平高滴度病人血清被适量溶血素中和了正常水平 的抗体后,还有多余的抗体后,还有多余ASOASO,这些多余抗体即与,这些多余抗体即与SLOSLO胶乳胶乳 试剂反应,出现清晰、均匀的凝集颗粒。试剂反应,出现清晰、均匀的凝集颗粒。 (操作,(操作,1人人/组)组) 原理:原理:9 9教学教学8 8 阳性对照阳性对照
5、阴性对照阴性对照 待测血清待测血清 各加溶血素各加溶血素“O O” 1 1滴轻摇滴轻摇1min1min 再加再加SLOSLO胶乳胶乳1 1滴轻摇滴轻摇3min3min 观察结果观察结果 方法:方法:1010教学教学8 8稀释度稀释度 ASO (IU/ml)1:15 4001:30 8001:60 1600ASO250 IU/ml 阴性阴性 结果判定:结果判定:1111教学教学8 8注意事项:注意事项:1.液体量要一样,菌量一样。液体量要一样,菌量一样。2.血浆多挑几环(一滴的量),菌少挑点,血浆多挑几环(一滴的量),菌少挑点, 不能干。不能干。3. 涂菌时间一样,出现凝集为阳性,再涂涂菌时间一样,出现凝集为阳性,再涂 凝集物可被涂散,变阴性。凝集物可被涂散,变阴性。1212教学教学8 8