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1、The Role of the Clinical Bacteriology LabThe Role of the Clinical Bacteriology LabInfectionControlTeam临床微生物检验流程示意临床微生物检验流程示意临床标本临床标本留取留取环节一环节一运送运送实验室实验室环节二环节二分分析析前前分分析析中中标本合格？标本合格？环节三环节三接种接种培养培养检测检测门诊门诊病房病房诊所诊所不合格不合格不合格不合格合格合格环节四环节四 环节五环节五分分析析后后报告报告环节六环节六SOPSOP IQ培养基、冰箱培养基、冰箱温箱、气体温箱、气体直接检测直接检测仪器设备、试
2、剂仪器设备、试剂EQA标本标本标本合格标本合格判定判定SOP对每个环节进行控制，构成质量保证体系对每个环节进行控制，构成质量保证体系+内内 容容微生物鉴定微生物鉴定标本处理标本处理药敏试验药敏试验标本处理标本处理血培养血培养 脑脊液培养脑脊液培养呼吸道标本呼吸道标本 ( (痰标本、咽部标本）痰标本、咽部标本）尿培养尿培养生殖道标本培养生殖道标本培养抽吸物和组织标本的培养（需氧、厌氧培养）抽吸物和组织标本的培养（需氧、厌氧培养）粪便培养粪便培养严格无菌操作严格无菌操作soapsoap脑脊液脑脊液 CEREBROSPINAL FLUIDCEREBROSPINAL FLUID无菌操作，腰椎穿刺采样无
3、菌操作，腰椎穿刺采样无菌操作，腰椎穿刺采样无菌操作，腰椎穿刺采样最少最少最少最少1 mL1 mL1 mL1 mL，最好，最好，最好，最好5 mL5 mL5 mL5 mL打入打入打入打入3 3 3 3个小管中，以第二根小管送检培养个小管中，以第二根小管送检培养个小管中，以第二根小管送检培养个小管中，以第二根小管送检培养 分枝杆菌培养标本需要分枝杆菌培养标本需要分枝杆菌培养标本需要分枝杆菌培养标本需要2 mL2 mL以上，置于以上，置于以上，置于以上，置于4 4保存保存保存保存即时送检即时送检即时送检即时送检绝对不能冷藏！绝对不能冷藏！绝对不能冷藏！绝对不能冷藏！如何看待如何看待CSFCSF的培养
4、结果？的培养结果？（1 1）如如果同期送检的血培养大于果同期送检的血培养大于3天报警，通常不是很紧急天报警，通常不是很紧急（2）假如仍不确定，电话联系微生物室值日主管，了解革兰氏假如仍不确定，电话联系微生物室值日主管，了解革兰氏染色涂片的相关情况。染色涂片的相关情况。（3）必须综合生化和血液学结果必须综合生化和血液学结果（4）如果如果CSF常规检查报告中没有中性粒细胞或脑脊液的其他常规检查报告中没有中性粒细胞或脑脊液的其他指标正常，对报告的致病菌应保持怀疑，可能送检污染。指标正常，对报告的致病菌应保持怀疑，可能送检污染。上呼吸道标本上呼吸道标本 Upper Respiratory Tract
5、Specimens下呼吸道标本下呼吸道标本 Lower Respiratory Tract Specimens 下呼吸道感染下呼吸道感染Lower Respiratory Tract InfectionsLower Respiratory Tract Infections 急性支气管炎急性支气管炎急性支气管炎急性支气管炎 社区获得性肺炎社区获得性肺炎社区获得性肺炎社区获得性肺炎 院内获得性肺炎院内获得性肺炎院内获得性肺炎院内获得性肺炎 免疫妥协患者肺炎免疫妥协患者肺炎免疫妥协患者肺炎免疫妥协患者肺炎下呼吸道标本下呼吸道标本Lower Respiratory Tract SpecimenLowe
6、r Respiratory Tract Specimen自然咳痰自然咳痰诱导痰诱导痰 气管内吸取物气管内吸取物支气管肺泡灌洗液支气管肺泡灌洗液保护性毛刷保护性毛刷支气管灌洗液支气管灌洗液 肺部组织肺部组织标本质量标本质量带血痰带血痰唾液唾液oror诱导痰诱导痰 (?) (?)脓痰脓痰粘液样痰粘液样痰用革兰氏染色来评估用革兰氏染色来评估 呼吸道标本是否合格呼吸道标本是否合格痰标本痰标本1010鳞状上皮细胞鳞状上皮细胞/ /每低倍视野每低倍视野= =拒收拒收有有有有PMNPMNPMNPMN的痰标本，中性粒细胞多，且鳞状上皮细胞特别少的痰标本，中性粒细胞多，且鳞状上皮细胞特别少的痰标本，中性粒细胞多
7、，且鳞状上皮细胞特别少的痰标本，中性粒细胞多，且鳞状上皮细胞特别少= = = =接受，进行培养接受，进行培养接受，进行培养接受，进行培养粘液丝粘液丝细胞内细菌细胞内细菌胞内细菌胞内细菌 提示感染提示感染柱状纤毛上皮细胞柱状纤毛上皮细胞肺泡巨噬细胞肺泡巨噬细胞滑石颗粒滑石颗粒淀粉样小体淀粉样小体见于迁延长时间的呼吸道疾病见于迁延长时间的呼吸道疾病弹性纤维弹性纤维库什曼螺旋体库什曼螺旋体呈链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上呈链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上皮细胞提示混合厌氧菌感染皮细胞提示混合厌氧菌感染你看见多少种形态？你看见多少种形态？几种细菌的混合形态，缺乏鳞状上
8、皮细胞几种细菌的混合形态，缺乏鳞状上皮细胞几种细菌的混合形态，缺乏鳞状上皮细胞几种细菌的混合形态，缺乏鳞状上皮细胞= = = =混合厌氧菌感染。混合厌氧菌感染。混合厌氧菌感染。混合厌氧菌感染。如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生“提示提示提示提示吸入性肺炎吸入性肺炎吸入性肺炎吸入性肺炎”呼吸道标本中未被染色的，有折射的杆菌呼吸道标本中未被染色的，有折射的杆菌= =抗酸杆菌抗酸杆菌呈链排列的革兰阳性球菌？或革兰阳性分枝杆菌？呈链排列的革兰阳性球菌？或
9、革兰阳性分枝杆菌？肺中的结节吸出物，不规则肺中的结节吸出物，不规则“球菌球菌”，分叉，无短链，链的末端的呈尖状，都，分叉，无短链，链的末端的呈尖状，都证明是分枝状的革兰阳性杆菌，可能是放线菌或诺卡菌（通常来自脑或肺组织证明是分枝状的革兰阳性杆菌，可能是放线菌或诺卡菌（通常来自脑或肺组织的标本）的标本）肺炎肺炎肺炎肺炎- -可接受的可接受的可接受的可接受的不合格标本不合格标本不合格标本不合格标本评述评述评述评述很少的鳞状上皮细胞很少的鳞状上皮细胞很少的鳞状上皮细胞很少的鳞状上皮细胞101010个个个个/ /低倍视野低倍视野低倍视野低倍视野可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞，说明在采可以在玻片上看到
10、许多鳞状上皮细胞，说明在采可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞，说明在采可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞，说明在采集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。很多的中性粒细胞很多的中性粒细胞很多的中性粒细胞很多的中性粒细胞很少有或没有中性粒细胞很少有或没有中性粒细胞很少有或没有中性粒细胞很少有或没有中性粒细胞免疫抑制的病人也会出现免疫抑制的病人也会出现免疫抑制的病人也会出现免疫抑制的病人也会出现中性粒细胞减少中性粒细胞减少中性粒细胞减少中性粒细胞减少中性粒细胞和上皮细
11、胞都很少的标本需要培养中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养很多中性粒细胞混合有形态多很多中性粒细胞混合有形态多很多中性粒细胞混合有形态多很多中性粒细胞混合有形态多样的细菌（革兰氏阴性杆菌，样的细菌（革兰氏阴性杆菌，样的细菌（革兰氏阴性杆菌，样的细菌（革兰氏阴性杆菌，纺锤形，革兰氏阳性球菌）纺锤形，革兰氏阳性球菌）纺锤形，革兰氏阳性球菌）纺锤形，革兰氏阳性球菌）吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只吸入性肺炎标本革兰氏染色的典
12、型形式，培养只会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断的方法。的方法。的方法。的方法。许多或中等量的中性粒细胞，许多或中等量的中性粒细胞，许多或中等量的中性粒细胞，许多或中等量的中性粒细胞，以一种形态的细菌为主以一种形态的细菌为主以一种形态的细菌为主以一种形态的细菌为主酵母菌样，酵母菌是一种酵母菌样，酵母菌是一种酵母菌样，酵母菌是一种酵母菌样，酵母菌是一种很少引起肺炎的细菌，常很少引起肺炎的细菌，常很少引起肺炎的细菌，常很少引起肺炎的细菌，常由口腔污染由口腔污染由口腔
13、污染由口腔污染成双革兰氏阳性球菌，短链成双革兰氏阳性球菌，短链成双革兰氏阳性球菌，短链成双革兰氏阳性球菌，短链=肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌革兰氏阳性菌成群排列革兰氏阳性菌成群排列革兰氏阳性菌成群排列革兰氏阳性菌成群排列=金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌革兰氏阴性球杆菌（小）革兰氏阴性球杆菌（小）革兰氏阴性球杆菌（小）革兰氏阴性球杆菌（小）=流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌革兰氏阴性杆菌大且肥厚革兰氏阴性杆菌大且肥厚革兰氏阴性杆菌大且肥厚革兰氏阴性杆菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他肺炎克雷伯菌或其他肺炎克雷伯菌或其他肺炎克雷伯菌或其他肠道菌肠道
14、菌肠道菌肠道菌革兰氏阴性双球菌革兰氏阴性双球菌革兰氏阴性双球菌革兰氏阴性双球菌=卡他莫拉菌卡他莫拉菌卡他莫拉菌卡他莫拉菌许多不着色的有折射的杆状细许多不着色的有折射的杆状细许多不着色的有折射的杆状细许多不着色的有折射的杆状细菌菌菌菌可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染色。色。色。色。呼吸道标本的涂片评估模呼吸道标本的涂片评估模式式尿道感染尿道感染每年每年850万例尿路感染万例尿路感染, 90%为女为女性性1/2.5个妇女在一生中会得个妇女在一生中会得UTI下行性感
15、染：血流下行性感染：血流肾脏肾脏膀胱膀胱（金黄色葡萄球菌，酵母菌，结（金黄色葡萄球菌，酵母菌，结核分枝杆菌）核分枝杆菌）上行性感染：尿道上行性感染：尿道膀胱膀胱肾盂肾盂 血流血流用于尿液培养的标本用于尿液培养的标本 肾活检或肾抽吸物（外科）肾活检或肾抽吸物（外科） 耻骨上膀胱抽吸物耻骨上膀胱抽吸物（孕妇，婴儿，全膀胱）（孕妇，婴儿，全膀胱） 微导管尿（内部导管和外部导管）微导管尿（内部导管和外部导管）- -老年人老年人 中段尿，清洁留取中段尿，清洁留取急诊成年人急诊成年人 留置导尿管中采集的标本（经常被三种以上细菌污染）留置导尿管中采集的标本（经常被三种以上细菌污染）尿液标本尿液标本 采采采采
16、集集集集中中中中段段段段尿尿尿尿时时时时要要要要先先先先用用用用肥肥肥肥皂皂皂皂清清清清洗洗洗洗女女女女性性性性的的的的外外外外阴阴阴阴和和和和男男男男性性性性的的的的外外外外生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗 长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。 做厌氧培养时应耻骨上膀胱穿刺采集尿。做厌氧培养时应耻骨上膀胱穿刺采集尿。做厌氧培养时应耻骨上膀胱穿刺采集尿。
17、做厌氧培养时应耻骨上膀胱穿刺采集尿。尿液运输方法尿液运输方法如不能及时送检，需冷藏。如不能及时送检，需冷藏。4 4小时延迟送检，须废弃标本小时延迟送检，须废弃标本。 过夜培养过夜培养否否自然排尿自然排尿是是继续培养；继续培养；随后观察；发送初步的培养阴性报告随后观察；发送初步的培养阴性报告24小时后仍不生长则发出小时后仍不生长则发出最终的生长阴性报告最终的生长阴性报告 105 CFU/ml1 organism一种以上细菌生长一种以上细菌生长多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清洁标本多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清洁标本纯培养的机会致病菌纯培养的机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注
18、释）（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）ID & Suscept.鉴定鉴定&药敏药敏 105 CFU/ml)1-2种机会致病菌种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）进行鉴定和药敏，若数量进行鉴定和药敏，若数量 104 CFU/ml一种以上细菌生长一种以上细菌生长多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清洁标本洁标本 纯培养的机会致病菌纯培养的机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）鉴定鉴定& &药敏药敏 104 CFU/ml1-21-2种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释种机
19、会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释进行鉴定和药敏，若数量进行鉴定和药敏，若数量 10 104 4CFU/mlCFU/ml，仍然对可能的致病菌进行操作仍然对可能的致病菌进行操作检出检出三种或以上的机会致病菌包括酵母菌三种或以上的机会致病菌包括酵母菌（病人的首份尿标本显示如此的培养结果，（病人的首份尿标本显示如此的培养结果，若重复的尿标本仍然培养出相同的细菌，若重复的尿标本仍然培养出相同的细菌，则需要对菌株进行操作）则需要对菌株进行操作）多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清洁标本重新采集清洁标本. .若为腐生葡萄球菌，若为腐生葡萄球菌，则处理与其他致病
20、菌相同；则处理与其他致病菌相同；其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污染染评价尿培养的标准评价尿培养的标准病人病人病人病人标本特征标本特征标本特征标本特征有意义菌落形成单位有意义菌落形成单位有意义菌落形成单位有意义菌落形成单位/ml/ml（非皮肤污染）（非皮肤污染）（非皮肤污染）（非皮肤污染）无症状者无症状者无症状者无症状者清洁留取清洁留取清洁留取清洁留取100,000100,000有症状者，不固定的有症状者，不固定的有症状者，不固定的有症状者，不固定的清洁留取清洁留取清洁留取清洁留取10,000 1-210,000 1-2种机会致病菌。若多于种机会致病菌。若多于种机
21、会致病菌。若多于种机会致病菌。若多于2 2种则种则种则种则认为尿液被污染认为尿液被污染认为尿液被污染认为尿液被污染有症状，性活跃女性有症状，性活跃女性有症状，性活跃女性有症状，性活跃女性清洁留取清洁留取清洁留取清洁留取100100个纯菌落肠杆菌科菌个纯菌落肠杆菌科菌个纯菌落肠杆菌科菌个纯菌落肠杆菌科菌男性男性男性男性清洁留取清洁留取清洁留取清洁留取10001000个，机会致病菌个，机会致病菌个，机会致病菌个，机会致病菌任何人任何人任何人任何人内置导尿管内置导尿管内置导尿管内置导尿管100,000100,000任意数量机会致病菌任意数量机会致病菌任意数量机会致病菌任意数量机会致病菌任何人任何人任
22、何人任何人通过直接导管获得通过直接导管获得通过直接导管获得通过直接导管获得100100任意数量机会致病菌任意数量机会致病菌任意数量机会致病菌任意数量机会致病菌任何人任何人任何人任何人外科手术从肾脏获得外科手术从肾脏获得外科手术从肾脏获得外科手术从肾脏获得任意数量（肉汤增菌，厌氧菌）任意数量（肉汤增菌，厌氧菌）任意数量（肉汤增菌，厌氧菌）任意数量（肉汤增菌，厌氧菌）任何人任何人任何人任何人经皮穿刺膀胱吸取经皮穿刺膀胱吸取经皮穿刺膀胱吸取经皮穿刺膀胱吸取任意数量（肉汤增菌，厌氧菌）任意数量（肉汤增菌，厌氧菌）任意数量（肉汤增菌，厌氧菌）任意数量（肉汤增菌，厌氧菌）任何人任何人任何人任何人任意标本任
23、意标本任意标本任意标本任何数量金黄色葡萄球菌任何数量金黄色葡萄球菌任何数量金黄色葡萄球菌任何数量金黄色葡萄球菌不同人不同人不同人不同人有争议有争议有争议有争议任何数量的酵母菌任何数量的酵母菌任何数量的酵母菌任何数量的酵母菌出现如下情况时，怎样判断？出现如下情况时，怎样判断？尿常规结果尿常规结果尿常规结果尿常规结果尿培养结果尿培养结果尿培养结果尿培养结果可能原因可能原因可能原因可能原因WBC WBC PRO PRO 计数计数计数计数 10 +WBC +PRO +PRO +计数计数计数计数 10 +WBC +PRO +PRO +计数计数计数计数 10 105 5培养出一种致病菌培养出一种致病菌培养
24、出一种致病菌培养出一种致病菌预示患者泌尿系统感染。按药敏结预示患者泌尿系统感染。按药敏结预示患者泌尿系统感染。按药敏结预示患者泌尿系统感染。按药敏结果选择性用药。果选择性用药。果选择性用药。果选择性用药。WBC +WBC +PRO +PRO +计数计数计数计数 10 105 5培养出大于两种致病菌培养出大于两种致病菌培养出大于两种致病菌培养出大于两种致病菌患者泌尿系统可能感染，但标本可患者泌尿系统可能感染，但标本可患者泌尿系统可能感染，但标本可患者泌尿系统可能感染，但标本可能被污染，应重复送检。能被污染，应重复送检。能被污染，应重复送检。能被污染，应重复送检。WBC +*/WBC 10 105
25、 5培养出大于两种致病菌培养出大于两种致病菌培养出大于两种致病菌培养出大于两种致病菌标本污染标本污染标本污染标本污染女性生殖道标本送检女性生殖道标本送检宫颈或宫颈内部：淋病奈瑟菌，沙眼衣宫颈或宫颈内部：淋病奈瑟菌，沙眼衣原体，人乳头瘤病毒原体，人乳头瘤病毒阴道高位拭子：酵母菌，阴道毛滴阴道高位拭子：酵母菌，阴道毛滴虫，细菌性阴道感染虫，细菌性阴道感染肛门或直肠拭子：淋病奈瑟菌，肛门或直肠拭子：淋病奈瑟菌，B B群链球群链球菌（菌（+ +阴道拭子）阴道拭子）女性下生殖道标本采集女性下生殖道标本采集早发早发B群链球菌病群链球菌病 1%1%的新生儿因母亲定植的新生儿因母亲定植的新生儿因母亲定植的新生
26、儿因母亲定植（10-30%10-30%的孕妇）发展为的孕妇）发展为的孕妇）发展为的孕妇）发展为EODEOD 50% 50%病死率病死率病死率病死率 25% 25%的美国女性在的美国女性在的美国女性在的美国女性在L&DL&D期间期间期间期间得到得到得到得到IVIV预防预防预防预防 长期病症包括：在长期病症包括：在长期病症包括：在长期病症包括：在30%30%以上的以上的以上的以上的新生儿中产生严重精神运动新生儿中产生严重精神运动新生儿中产生严重精神运动新生儿中产生严重精神运动发展障碍发展障碍发展障碍发展障碍Adriaanse et al. Neonatal early onset group B
27、streptococcal infection: a nine-year retrospective study in a tertiary care hospital. J Perinat Med. 1996;24:5315381.在孕期在孕期3537周时的普查培养周时的普查培养a.阴道和直肠拭子阴道和直肠拭子b.肉汤过夜增菌肉汤过夜增菌c.接种于血平板上接种于血平板上d.再孵育过夜和鉴定可疑菌落再孵育过夜和鉴定可疑菌落2.任何有任何有GBS菌尿的患者需要在分娩期做好预菌尿的患者需要在分娩期做好预防防3.分娩时快速检测敏感性不够分娩时快速检测敏感性不够男性生殖道标本送检男性生殖道标本送检男性
28、的生殖道致病菌与女性绝大部分一致；男性的生殖道致病菌与女性绝大部分一致；男性的生殖道致病菌与女性绝大部分一致；男性的生殖道致病菌与女性绝大部分一致；尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起；尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起；尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起；尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起；可能并发于生殖器溃疡；可能并发于生殖器溃疡；可能并发于生殖器溃疡；可能并发于生殖器溃疡；淋病奈瑟氏菌感染淋病奈瑟氏菌感染 挤压尿道或直接获取尿道挤压尿道或直接获取尿道挤压尿道或直接获取尿道挤压尿道或直接获取尿道口分泌物；口分泌物；口分泌物；口分泌物； 直接涂片直接涂片
29、直接涂片直接涂片 如果培养，须直接接种温暖如果培养，须直接接种温暖如果培养，须直接接种温暖如果培养，须直接接种温暖的筛选性平板，保温并即刻的筛选性平板，保温并即刻的筛选性平板，保温并即刻的筛选性平板，保温并即刻送微生物室培养。送微生物室培养。送微生物室培养。送微生物室培养。任何不能及时送检的生殖道标本，都应采任何不能及时送检的生殖道标本，都应采用运送培养基采样保存。用运送培养基采样保存。禁止冷藏禁止冷藏标本采样和送检标本采样和送检 临床常常送检脓液和渗出液的拭子给实验室做检查。临床常常送检脓液和渗出液的拭子给实验室做检查。临床常常送检脓液和渗出液的拭子给实验室做检查。临床常常送检脓液和渗出液的
30、拭子给实验室做检查。风风风风险险险险 标本不足量标本不足量标本不足量标本不足量 拭子干燥拭子干燥拭子干燥拭子干燥 拭子吸附细菌，难于释放到平板培养拭子吸附细菌，难于释放到平板培养拭子吸附细菌，难于释放到平板培养拭子吸附细菌，难于释放到平板培养 尽可能抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤口前沿取样深部尽可能抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤口前沿取样深部尽可能抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤口前沿取样深部尽可能抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤口前沿取样深部伤口和特殊原因造成的伤口，如动物咬伤，应考虑厌氧培伤口和特殊原因造成的伤口，如动物咬伤，应考虑厌氧培伤口和特殊原因造成的伤口，如动物咬伤，应考虑厌氧培伤口和特殊原因
31、造成的伤口，如动物咬伤，应考虑厌氧培养；养；养；养； 发现发现发现发现评述评述评述评述出现鳞状上皮细胞出现鳞状上皮细胞出现鳞状上皮细胞出现鳞状上皮细胞提示标本采集技术不过关；培养出来的可提示标本采集技术不过关；培养出来的可提示标本采集技术不过关；培养出来的可提示标本采集技术不过关；培养出来的可能是皮肤正常菌群能是皮肤正常菌群能是皮肤正常菌群能是皮肤正常菌群大量的中性粒细胞大量的中性粒细胞大量的中性粒细胞大量的中性粒细胞如果查见细胞内的细菌，则更有意义。如果查见细胞内的细菌，则更有意义。如果查见细胞内的细菌，则更有意义。如果查见细胞内的细菌，则更有意义。大量的中性粒细胞染色多样染色阳性和阴性，大
32、量的中性粒细胞染色多样染色阳性和阴性，大量的中性粒细胞染色多样染色阳性和阴性，大量的中性粒细胞染色多样染色阳性和阴性，小的细菌小的细菌小的细菌小的细菌混合有厌氧或兼性厌氧菌感染混合有厌氧或兼性厌氧菌感染混合有厌氧或兼性厌氧菌感染混合有厌氧或兼性厌氧菌感染出现少量破碎的中性粒细胞和比较大的面包车出现少量破碎的中性粒细胞和比较大的面包车出现少量破碎的中性粒细胞和比较大的面包车出现少量破碎的中性粒细胞和比较大的面包车样的染色不定的杆菌样的染色不定的杆菌样的染色不定的杆菌样的染色不定的杆菌可能是梭菌引起的组织坏死，紧急外科手可能是梭菌引起的组织坏死，紧急外科手可能是梭菌引起的组织坏死，紧急外科手可能是
33、梭菌引起的组织坏死，紧急外科手术，产气荚膜梭菌引起的气性坏疽术，产气荚膜梭菌引起的气性坏疽术，产气荚膜梭菌引起的气性坏疽术，产气荚膜梭菌引起的气性坏疽很少有中性粒细胞，但是有其他体细胞很少有中性粒细胞，但是有其他体细胞很少有中性粒细胞，但是有其他体细胞很少有中性粒细胞，但是有其他体细胞患者不能产生足够的免疫反应或微生物不患者不能产生足够的免疫反应或微生物不患者不能产生足够的免疫反应或微生物不患者不能产生足够的免疫反应或微生物不能趋化中性粒细胞（如球菌）。仍然高度能趋化中性粒细胞（如球菌）。仍然高度能趋化中性粒细胞（如球菌）。仍然高度能趋化中性粒细胞（如球菌）。仍然高度怀疑细菌病因。怀疑细菌病因
34、。怀疑细菌病因。怀疑细菌病因。细胞内微生物细胞内微生物细胞内微生物细胞内微生物细菌感染细菌感染细菌感染细菌感染成块的小的灰白的染色不规则的阳性成链的球成块的小的灰白的染色不规则的阳性成链的球成块的小的灰白的染色不规则的阳性成链的球成块的小的灰白的染色不规则的阳性成链的球菌菌菌菌如果分离自脓肿，提示咽峡炎链球菌（米如果分离自脓肿，提示咽峡炎链球菌（米如果分离自脓肿，提示咽峡炎链球菌（米如果分离自脓肿，提示咽峡炎链球菌（米勒链球菌）感染。勒链球菌）感染。勒链球菌）感染。勒链球菌）感染。很细小的革兰氏阴性杆菌很细小的革兰氏阴性杆菌很细小的革兰氏阴性杆菌很细小的革兰氏阴性杆菌特别是从淋巴结或组织中分离
35、的，可能是特别是从淋巴结或组织中分离的，可能是特别是从淋巴结或组织中分离的，可能是特别是从淋巴结或组织中分离的，可能是生物恐怖试剂（布鲁氏杆菌，耶尔森，弗生物恐怖试剂（布鲁氏杆菌，耶尔森，弗生物恐怖试剂（布鲁氏杆菌，耶尔森，弗生物恐怖试剂（布鲁氏杆菌，耶尔森，弗朗西斯）要在风厨中操作。平板用胶条密朗西斯）要在风厨中操作。平板用胶条密朗西斯）要在风厨中操作。平板用胶条密朗西斯）要在风厨中操作。平板用胶条密封在生物安全柜中操作，不可以嗅标本。封在生物安全柜中操作，不可以嗅标本。封在生物安全柜中操作，不可以嗅标本。封在生物安全柜中操作，不可以嗅标本。组织和抽吸物涂片检查组织和抽吸物涂片检查微生物鉴定
36、微生物鉴定微生物鉴定（微生物鉴定（1）血平皿上的菌落形态血平皿上的菌落形态血平皿上的菌落形态血平皿上的菌落形态革兰阳性细菌革兰阳性细菌革兰阳性细菌革兰阳性细菌所有的链球菌所有的链球菌所有的链球菌所有的链球菌-溶血链球菌溶血链球菌溶血链球菌溶血链球菌-溶血链球菌与肺炎链球菌溶血链球菌与肺炎链球菌溶血链球菌与肺炎链球菌溶血链球菌与肺炎链球菌葡萄球菌属葡萄球菌属葡萄球菌属葡萄球菌属肠道革兰阴性杆菌肠道革兰阴性杆菌肠道革兰阴性杆菌肠道革兰阴性杆菌沙门菌属，志贺菌属沙门菌属，志贺菌属沙门菌属，志贺菌属沙门菌属，志贺菌属假单胞菌属假单胞菌属假单胞菌属假单胞菌属嗜血杆菌属嗜血杆菌属嗜血杆菌属嗜血杆菌属 微生
37、物鉴定（微生物鉴定（2）奈瑟菌属、莫拉菌属奈瑟菌属、莫拉菌属不动杆菌属不动杆菌属布氏杆菌属、巴斯德菌属布氏杆菌属、巴斯德菌属芽胞杆菌属芽胞杆菌属产单核李斯特菌产单核李斯特菌酵母菌属酵母菌属药敏试验药敏试验纸片扩散法药敏试验纸片扩散法药敏试验 特殊药敏试验特殊药敏试验 MRSA 克林霉素耐药的葡萄球菌克林霉素耐药的葡萄球菌 VISA或或VRSA 青霉素耐药的葡萄球菌青霉素耐药的葡萄球菌 超广谱超广谱-内酰胺酶内酰胺酶 纸片扩散法纸片扩散法-测量抑菌圈（测量抑菌圈（1）使用透射光观察使用透射光观察 ： Staphylococcus spp. 葡萄球菌属葡萄球菌属 linezolid利奈唑烷利奈唑烷
38、 oxacillin苯唑西林苯唑西林 vancomycin万古霉素万古霉素 任何生长均有意义任何生长均有意义Enterococcus spp.肠球菌属肠球菌属 vancomycin万古霉素万古霉素LightLight光线光线光线光线纸片扩散法纸片扩散法-测量抑菌圈（测量抑菌圈（2）使用反射光观察：使用反射光观察：所有其他药物所有其他药物/ /菌株组菌株组合合LightLight光线光线光线光线变形杆菌属变形杆菌属变形杆菌属变形杆菌属.忽略迁徙性生长忽略迁徙性生长忽略迁徙性生长忽略迁徙性生长纸片扩散法纸片扩散法-测量抑菌圈（测量抑菌圈（3）测量完全抑菌的圈测量完全抑菌的圈测量完全抑菌的圈测量完全
39、抑菌的圈纸片扩散法纸片扩散法-测量抑菌圈（测量抑菌圈（4）Linezolid利奈唑烷利奈唑烷铜绿假单胞菌耐药亚群铜绿假单胞菌耐药亚群铜绿假单胞菌耐药亚群铜绿假单胞菌耐药亚群 ；测量无；测量无；测量无；测量无菌区域菌区域菌区域菌区域圈内菌落圈内菌落纸片扩散法纸片扩散法-测量抑菌圈（测量抑菌圈（5）大肠埃希菌混杂有肠球菌；用纯培养大肠埃希菌混杂有肠球菌；用纯培养大肠埃希菌混杂有肠球菌；用纯培养大肠埃希菌混杂有肠球菌；用纯培养重复试验重复试验重复试验重复试验致谢：致谢： Ms Ellen Jo Baron (Stanford Univ.Dept.Pathology) (Stanford Univ.Dept.Pathology) Ms Janet Hindler (UCLA Medical Center Los Angeles ,California)(UCLA Medical Center Los Angeles ,California) 提供提供提供提供“ “临床微生物实验室基本操作流程临床微生物实验室基本操作流程临床微生物实验室基本操作流程临床微生物实验室基本操作流程” ”图片资料。图片资料。图片资料。图片资料。谢谢谢谢! !
