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1、Leishmania donovani杜氏利什曼原虫杜氏利什曼原虫隶属于肉足鞭毛门的动鞭纲杜氏利什曼原虫杜氏利什曼原虫-内脏利什曼病(黑热病Kalazar)巴西利什曼原虫-粘膜皮肤利什曼病热带利什曼原虫/墨西哥利什曼原虫-皮肤利什曼病P80教学要求杜氏利什曼原虫形态、生活史、致病及诊杜氏利什曼原虫形态、生活史、致病及诊断要点。断要点。重点难点重点:利什曼原虫的形态、致病。重点:利什曼原虫的形态、致病。难点:利什曼原虫的致病与流行。难点:利什曼原虫的致病与流行。一、形态一、形态(一)无鞭毛体(一)无鞭毛体 (利杜体利杜体)(amastigote)骨髓液涂片 Giemsa染色细胞质呈淡蓝色,核呈红
2、色或紫红色,动基体紫红色卵圆形虫体很小 2-3m有一较大圆形核动基体位于核旁细小杆状高倍镜下可见基体和根丝体A Macrophage Filled With Leishmania amastigotes无鞭毛体寄生于人和其它哺乳动物单核吞噬细胞内细胞内充满大量的利杜体巨噬细胞破裂,无鞭毛体游离又进入其它巨噬细胞,重复增殖利杜体利杜体骨髓涂片中的无鞭毛体骨髓涂片中的无鞭毛体一、形态一、形态(二)前鞭毛体(鞭毛体)(二)前鞭毛体(鞭毛体)(promastigote)寄生于白蛉白蛉消化道内,运动活跃,排列呈菊花状细胞质呈蓝色,核呈紫红色前鞭毛体运动活泼,鞭毛不停地摆动虫体呈梭形大小为1020m1.5
3、4m核位于虫体中部动基体在前部基体发出一鞭毛,长与虫体相近,弯曲在培养基内常以虫体前端聚集成团而排列成菊花状。 前鞭毛体前鞭毛体(一)发育过程:(一)发育过程:二、生活史二、生活史2. 在白蛉体内的发育在白蛉体内的发育 无鞭毛体无鞭毛体(病人血内)(病人血内)雌白蛉吸血雌白蛉吸血白蛉胃内:3-4天成熟前鞭毛体成熟前鞭毛体(白蛉喙内)2分裂分裂被多形核白细胞吞噬被多形核白细胞吞噬 前鞭毛体前鞭毛体(白蛉喙内)(白蛉喙内)雌白蛉雌白蛉叮人吸血叮人吸血 无鞭毛体无鞭毛体(巨噬细胞)2分裂分裂1. 在人体内的发育在人体内的发育二分裂繁殖二分裂繁殖二分裂繁殖二分裂繁殖生活史特点生活史特点1.感染阶段:前
4、鞭毛体2. 感染途径:主要经媒介昆虫,偶可经腔黏膜、破损皮肤、胎盘、输血3. 寄生部位:肝、脾、淋巴结、骨髓(网状内皮系统-单核巨噬细胞)4.传播媒介:白蛉 5. 宿主关系:脊椎动物宿主脊椎动物宿主人、犬、鼠 昆虫宿主昆虫宿主白蛉白白白白 蛉蛉蛉蛉(Phlebotomus sand fly)体小,体小,3,约为蚊,约为蚊子子1/3,驼背状,全身,驼背状,全身密生细毛,灰黄色密生细毛,灰黄色黑热病三大症状黑热病三大症状n 脾、肝、淋巴结肿大n 全血细胞贫血n 长期不规则发热三、三、 致病致病1. 脾脾、肝、淋巴结肿大、肝、淋巴结肿大原因:(1)巨噬细胞大量破坏和增生 (2)浆细胞也大量增生 (3
5、)网状纤维结缔组织增生质地变硬2. 血浆中白蛋白血浆中白蛋白/球蛋白比例倒置球蛋白比例倒置1. 临床症状临床症状浆细胞大量增生球蛋白增加白/球蛋白比例倒置肾功能受损白蛋白排出增加血浆白蛋白减少肝功能受损白蛋白合成减少黑热病黑热病病人-肝脾肿大示脾肿大示脾肿大黑热病俗称黑热病俗称“大肚子病大肚子病” ” 1212岁男孩岁男孩脾肿大脾肿大贫血贫血严重消瘦严重消瘦3. 全血细胞均减少全血细胞均减少脾功能亢进血细胞在脾内大量破坏4. 贫血贫血 原因:1)脾功能亢进 2)免疫溶血 患者红细胞表面附有利什曼原虫抗原 原虫代谢产物中有1-2种抗原与 人红细胞抗原相同5. 出血出血 (鼻衄、齿龈出血)6.血尿
6、及蛋白尿血尿及蛋白尿(肾小球淀粉样变性以及免疫复合物的沉积)7.易并发多种感染易并发多种感染 为主要致死原因为主要致死原因8.皮肤病变皮肤病变 可与内脏症状并发或单独并发或单独出现 结节型:颜面部及颈部 褐色型:色素沉着9.淋巴结型淋巴结型 仅出现淋巴结肿大2. 机理机理型变态反应利利杜杜体体大大量量繁繁殖殖浆细胞 球蛋白免疫复合 型变 肾功 白蛋白物沉积 态反应 受损 排出白/球蛋白倒置单核-巨噬细胞破裂增生淋巴结肿大肝肿大 肝功受损 白蛋白WBC 抵抗力血小板 出血RBC 贫血脾肿大 脾功亢进 全血粘膜皮肤利什曼病粘膜皮肤利什曼病内脏型利什曼病内脏型利什曼病黑热病患者(黑热病患者(一家五个
7、儿童同患黑热病)一家五个儿童同患黑热病)侏儒型黑热病侏儒型黑热病患者女,26岁,肝脾肿大,腹水,身高120 cm,体重32 kg,肝季肋下8 cm,剑突下12 cm,脾大平脐,质硬。白细胞2.2109/L, 骨髓片查见利杜体黑热病合并走马牙疳黑热病合并走马牙疳我国黑热病特殊临床表现我国黑热病特殊临床表现皮肤型黑热病皮肤型黑热病:多数为结节型。结节呈大小不等的肉芽肿,或呈暗色丘疹状,常见于面部及颈部,在结节内可查到无鞭毛体。淋巴结型黑热病淋巴结型黑热病:无黑热病病史,局部淋巴结肿大,大小不一,较表浅,无压痛,无红肿,嗜酸性粒细胞增多。活检可查到无鞭毛体。(一)病原学检查(一)病原学检查1. 穿刺
8、检查:穿刺检查: 取取材材:一般取髂骨骨髓穿刺液,淋巴结也可穿刺,但原虫检出率不高。 脾穿刺原虫检出率高但安全性较差,较少应用。 方法方法: (1)涂片染色法:无鞭毛体 (2)培养法:穿刺物接种于NNN培养基,置22-25培养一周,有活动的前鞭毛体长出为阳性。 (3)动物接种法:穿刺物接种于易感动物(如地鼠、BALB/c小鼠等),1-2个月后取肝、脾作印片或涂片,瑞氏染液染色,镜检。2.皮肤活组织检查:皮肤活组织检查:适用皮肤结节型四、诊断四、诊断(二)免疫学诊断(二)免疫学诊断 1. 检测血清抗体:IHA、ELISA、IFA等。阳性率较高,但有交叉反应 2. 检测血清循环抗原:以单克隆抗体-
9、抗原斑点试验(McAb-AST)用以诊断黑热病敏感性高,特异性强,未见假阳性。(三)分子生物学方法(三)分子生物学方法 PCR/ DNA探针技术四、诊断四、诊断五、流行五、流行 分分 型型传染源传染源病人病人传播媒介传播媒介人源型人源型(平原型)(平原型)病人病人年龄较大的儿童年龄较大的儿童和青少年和青少年家栖型家栖型中华白蛉中华白蛉犬源型犬源型(山丘型)(山丘型)病犬病犬10岁岁野栖型野栖型中华白蛉中华白蛉自然疫源型自然疫源型(荒漠型)(荒漠型)野生动物野生动物2岁岁吴氏白蛉吴氏白蛉流行病学类型流行病学类型黑黑热热病病在在世世界界上上分分布布很很广广,主主要要流流行行于于中中国国、印度及地中
10、海沿岸国家印度及地中海沿岸国家50年代年代1990-1995长江以北16个省市自治区,甘肃、四川、陕西、山西、新疆和内蒙古更多见。我国在黑热病防治工作成绩卓著1958-1960年先后达到了基本消灭的要求1958年山东率先在全国达到基本消灭要求六、防治六、防治1. 控制传染源:控制传染源: 治疗病人治疗病人 药物:葡萄糖酸锑钠葡萄糖酸锑钠(又名斯锑黑克stibiihexonas) ,疗效可达97.4% 抗锑病人采用戊脘脒、二脒替。 手术:脾切除 预后:治疗不及时常因并发症死亡, 治愈后可获得终生免疫力,一般不会再感染。2. 病犬防治病犬防治 捕杀病犬,或给家犬进行溴氰菊酯药浴,以驱避或减少白蛉叮咬。3. 防蛉灭蛉防蛉灭蛉简述杜氏利什曼原虫的生活史巴西利什曼原虫、墨西哥利什曼原虫、热带利什曼原虫致病自自 学学鞭毛虫小结蓝氏贾第鞭毛虫 流行广泛,全球分布,旅游者腹泻 生活史简单 寄生部位、感染方式、感染阶段、主要症状和寄生部位、感染方式、感染阶段、主要症状和诊断方法诊断方法杜氏利什曼原虫 发育阶段(利杜体/前鞭毛体),两种宿主(昆虫宿主/脊椎动物宿主),诊断方法 发热、贫血、肝脾肿大、