黄花蒿中青蒿素的提取黄花蒿中青蒿素的提取1 目的和意义目的和意义1、了解青蒿素是植物黄花蒿的提取物，、了解青蒿素是植物黄花蒿的提取物，是治疗疟疾的一种特效药物是治疗疟疾的一种特效药物2、掌握用石油醚提取黄花蒿的方法掌握用石油醚提取黄花蒿的方法2 3 青蒿素理化性质及药用价值简介青蒿素理化性质及药用价值简介青蒿素（青蒿素（青蒿素（青蒿素（artemisininartemisinin）是从黄花蒿（）是从黄花蒿（）是从黄花蒿（）是从黄花蒿（Artemisia annua L.Artemisia annua L.）及其变种大头黄花蒿中提取）及其变种大头黄花蒿中提取）及其变种大头黄花蒿中提取）及其变种大头黄花蒿中提取的一种倍半萜内酯过氧化物的一种倍半萜内酯过氧化物的一种倍半萜内酯过氧化物的一种倍半萜内酯过氧化物4 青蒿素的物理性质青蒿素的物理性质 青蒿素为无色针状晶体，味苦，熔点为青蒿素为无色针状晶体，味苦，熔点为156-157℃，密度为，密度为1.30g/cm3，比旋度为＋，比旋度为＋75°至＋至＋78 ° 在氯仿、丙酮、乙酸乙酯、苯在氯仿、丙酮、乙酸乙酯、苯或冰醋酸中易溶，可溶于乙醇、乙醚，微溶或冰醋酸中易溶，可溶于乙醇、乙醚，微溶于冷石油醚，几乎不溶于水。
因其具有特殊于冷石油醚，几乎不溶于水因其具有特殊的过氧集团，对热不稳定，易受热、湿和还的过氧集团，对热不稳定，易受热、湿和还原性物质的影响而分解原性物质的影响而分解5 青蒿素的药用价值青蒿素的药用价值 n n1. 1.抗疟抗疟抗疟抗疟 n n青蒿素的主要功能是抗疟，对鼠疟、猴疟、人疟均有青蒿素的主要功能是抗疟，对鼠疟、猴疟、人疟均有青蒿素的主要功能是抗疟，对鼠疟、猴疟、人疟均有青蒿素的主要功能是抗疟，对鼠疟、猴疟、人疟均有抗疟作用，对疟原虫红细胞内期滋养体有直接杀灭作抗疟作用，对疟原虫红细胞内期滋养体有直接杀灭作抗疟作用，对疟原虫红细胞内期滋养体有直接杀灭作抗疟作用，对疟原虫红细胞内期滋养体有直接杀灭作用，用，用，用，对红细胞外期无效青蒿素可透过血脑屏障，对对红细胞外期无效青蒿素可透过血脑屏障，对对红细胞外期无效青蒿素可透过血脑屏障，对对红细胞外期无效青蒿素可透过血脑屏障，对凶险的脑型疟疾有良好抢救效果凶险的脑型疟疾有良好抢救效果凶险的脑型疟疾有良好抢救效果凶险的脑型疟疾有良好抢救效果 n n青篙素的抗疟机理与其它抗疟药不同，它的主要作用青篙素的抗疟机理与其它抗疟药不同，它的主要作用青篙素的抗疟机理与其它抗疟药不同，它的主要作用青篙素的抗疟机理与其它抗疟药不同，它的主要作用是通过干扰疟原虫的表膜一线粒体功能，而非干扰叶是通过干扰疟原虫的表膜一线粒体功能，而非干扰叶是通过干扰疟原虫的表膜一线粒体功能，而非干扰叶是通过干扰疟原虫的表膜一线粒体功能，而非干扰叶酸代谢，从而导致虫体结构全部瓦解。
在青篙素分子酸代谢，从而导致虫体结构全部瓦解在青篙素分子酸代谢，从而导致虫体结构全部瓦解在青篙素分子酸代谢，从而导致虫体结构全部瓦解在青篙素分子结构与其抗疟活性的关系研究中，最为肯定的结果是结构与其抗疟活性的关系研究中，最为肯定的结果是结构与其抗疟活性的关系研究中，最为肯定的结果是结构与其抗疟活性的关系研究中，最为肯定的结果是分子中必须有过氧基团，无过氧基团将失去活性过分子中必须有过氧基团，无过氧基团将失去活性过分子中必须有过氧基团，无过氧基团将失去活性过分子中必须有过氧基团，无过氧基团将失去活性过氧基是青篙素分子中关键结构，是抗疟活性的决定性氧基是青篙素分子中关键结构，是抗疟活性的决定性氧基是青篙素分子中关键结构，是抗疟活性的决定性氧基是青篙素分子中关键结构，是抗疟活性的决定性因素6 n n2. 2.免疫调节免疫调节免疫调节免疫调节n n用青蒿素油混悬液腹腔注射，能使豚鼠淋巴细胞转化用青蒿素油混悬液腹腔注射，能使豚鼠淋巴细胞转化用青蒿素油混悬液腹腔注射，能使豚鼠淋巴细胞转化用青蒿素油混悬液腹腔注射，能使豚鼠淋巴细胞转化率增加率增加率增加率增加 ，故青蒿素对体液免疫具有抑制或调节作用。
故青蒿素对体液免疫具有抑制或调节作用故青蒿素对体液免疫具有抑制或调节作用故青蒿素对体液免疫具有抑制或调节作用n n3. 3.抗肿瘤抗肿瘤抗肿瘤抗肿瘤n n认为青蒿素能杀死富含铁的乳腺癌细胞认为青蒿素能杀死富含铁的乳腺癌细胞认为青蒿素能杀死富含铁的乳腺癌细胞认为青蒿素能杀死富含铁的乳腺癌细胞 n n4. 4.抗寄生虫抗寄生虫抗寄生虫抗寄生虫n n实验表明青蒿素及其衍生物具有对曼森血吸虫、日本实验表明青蒿素及其衍生物具有对曼森血吸虫、日本实验表明青蒿素及其衍生物具有对曼森血吸虫、日本实验表明青蒿素及其衍生物具有对曼森血吸虫、日本血吸虫、华式睾吸虫、环状素雷尔梨虫、弓形虫、血吸虫、华式睾吸虫、环状素雷尔梨虫、弓形虫、血吸虫、华式睾吸虫、环状素雷尔梨虫、弓形虫、血吸虫、华式睾吸虫、环状素雷尔梨虫、弓形虫、结肠肠袋虫、利什曼病等寄生虫具有高效、安全、结肠肠袋虫、利什曼病等寄生虫具有高效、安全、结肠肠袋虫、利什曼病等寄生虫具有高效、安全、结肠肠袋虫、利什曼病等寄生虫具有高效、安全、方便的特点，是比较理想的预防好治疗药物方便的特点，是比较理想的预防好治疗药物方便的特点，是比较理想的预防好治疗药物方便的特点，是比较理想的预防好治疗药物。
n n5. 5.利胆、祛痰、镇咳、平喘利胆、祛痰、镇咳、平喘利胆、祛痰、镇咳、平喘利胆、祛痰、镇咳、平喘青蒿素的药用价值青蒿素的药用价值 7 n n6. 6.中止妊娠作用中止妊娠作用中止妊娠作用中止妊娠作用n n在足够剂量下导致胚胎胎囊坏死，二氢青蒿素不在足够剂量下导致胚胎胎囊坏死，二氢青蒿素不在足够剂量下导致胚胎胎囊坏死，二氢青蒿素不在足够剂量下导致胚胎胎囊坏死，二氢青蒿素不伤害雌性动物的子宫和卵巢伤害雌性动物的子宫和卵巢伤害雌性动物的子宫和卵巢伤害雌性动物的子宫和卵巢n n7. 7.抗纤维化抗纤维化抗纤维化抗纤维化n n青蒿素对预防性治疗和己患矽肺的治疗均有效青蒿素对预防性治疗和己患矽肺的治疗均有效青蒿素对预防性治疗和己患矽肺的治疗均有效青蒿素对预防性治疗和己患矽肺的治疗均有效n n8. 8.治疗艾滋病治疗艾滋病治疗艾滋病治疗艾滋病n n艾滋病是世界上危害最大的疾病之一，急需研制艾滋病是世界上危害最大的疾病之一，急需研制艾滋病是世界上危害最大的疾病之一，急需研制艾滋病是世界上危害最大的疾病之一，急需研制出治疗出治疗出治疗出治疗AIDSAIDS病人的新药，大量天然产物用于体外病人的新药，大量天然产物用于体外病人的新药，大量天然产物用于体外病人的新药，大量天然产物用于体外抗抗抗抗HIVHIV试验，人们期望青蒿素及其衍生物能在治疗试验，人们期望青蒿素及其衍生物能在治疗试验，人们期望青蒿素及其衍生物能在治疗试验，人们期望青蒿素及其衍生物能在治疗艾滋病和相关疾病方面取得进展。
艾滋病和相关疾病方面取得进展艾滋病和相关疾病方面取得进展艾滋病和相关疾病方面取得进展青蒿素的药用价值青蒿素的药用价值 8 青蒿素的来源青蒿素的来源n n青蒿素是继奎宁后最为有效的抗疟药物，目前青蒿素是继奎宁后最为有效的抗疟药物，目前青蒿素是继奎宁后最为有效的抗疟药物，目前青蒿素是继奎宁后最为有效的抗疟药物，目前商用的青蒿素的主要来源于从植物黄花蒿中直商用的青蒿素的主要来源于从植物黄花蒿中直商用的青蒿素的主要来源于从植物黄花蒿中直商用的青蒿素的主要来源于从植物黄花蒿中直接提取，除黄花蒿外尚未发现含有青蒿素的其接提取，除黄花蒿外尚未发现含有青蒿素的其接提取，除黄花蒿外尚未发现含有青蒿素的其接提取，除黄花蒿外尚未发现含有青蒿素的其它天然植物资源它天然植物资源它天然植物资源它天然植物资源n n黄花蒿为世界广布种，在中国各省区均有分布，黄花蒿为世界广布种，在中国各省区均有分布，黄花蒿为世界广布种，在中国各省区均有分布，黄花蒿为世界广布种，在中国各省区均有分布，据国家有关部门调查，在全球范围内据国家有关部门调查，在全球范围内据国家有关部门调查，在全球范围内据国家有关部门调查，在全球范围内, ,目前只有目前只有目前只有目前只有我国重庆东部、福建、云南、广西、海南部分我国重庆东部、福建、云南、广西、海南部分我国重庆东部、福建、云南、广西、海南部分我国重庆东部、福建、云南、广西、海南部分地区生长的青蒿素才具有工业提炼价值。
因此，地区生长的青蒿素才具有工业提炼价值因此，地区生长的青蒿素才具有工业提炼价值因此，地区生长的青蒿素才具有工业提炼价值因此，从资源上讲，我国具有明显的优势从资源上讲，我国具有明显的优势从资源上讲，我国具有明显的优势从资源上讲，我国具有明显的优势9 青蒿素的来源青蒿素的来源n n青蒿素制备大体分为四个途径：青蒿素制备大体分为四个途径：青蒿素制备大体分为四个途径：青蒿素制备大体分为四个途径：n n（（（（1 1）青蒿素的化学合成）青蒿素的化学合成）青蒿素的化学合成）青蒿素的化学合成 n n以以以以R(+)-R(+)-香草醛为原料，经十几步合成青蒿素香草醛为原料，经十几步合成青蒿素香草醛为原料，经十几步合成青蒿素香草醛为原料，经十几步合成青蒿素 10 n n（（（（2 2）青蒿素的生物合成）青蒿素的生物合成）青蒿素的生物合成）青蒿素的生物合成 n n包括通过添加生物合成的前体来增加青蒿素的包括通过添加生物合成的前体来增加青蒿素的包括通过添加生物合成的前体来增加青蒿素的包括通过添加生物合成的前体来增加青蒿素的含量，通过对控制青蒿素合成的关键酶进行调含量，通过对控制青蒿素合成的关键酶进行调含量，通过对控制青蒿素合成的关键酶进行调含量，通过对控制青蒿素合成的关键酶进行调控，或者对关键酶控制的基因进行激活来大幅控，或者对关键酶控制的基因进行激活来大幅控，或者对关键酶控制的基因进行激活来大幅控，或者对关键酶控制的基因进行激活来大幅度增加青蒿素的含量；利用基因工程手段度增加青蒿素的含量；利用基因工程手段度增加青蒿素的含量；利用基因工程手段度增加青蒿素的含量；利用基因工程手段 来改来改来改来改变关键基因以增加它们所控制酶的效率。
变关键基因以增加它们所控制酶的效率变关键基因以增加它们所控制酶的效率变关键基因以增加它们所控制酶的效率青蒿素的来源青蒿素的来源11 n n（（（（3 3）植物组织培养合成青蒿素）植物组织培养合成青蒿素）植物组织培养合成青蒿素）植物组织培养合成青蒿素 n n青蒿组织培养的研究工作主要集中在利用生物技术青蒿组织培养的研究工作主要集中在利用生物技术青蒿组织培养的研究工作主要集中在利用生物技术青蒿组织培养的研究工作主要集中在利用生物技术的手段来进行组织培养物的改进和青蒿素含量培养的手段来进行组织培养物的改进和青蒿素含量培养的手段来进行组织培养物的改进和青蒿素含量培养的手段来进行组织培养物的改进和青蒿素含量培养的筛选和建立，对于利用反应器培养组织来进行青的筛选和建立，对于利用反应器培养组织来进行青的筛选和建立，对于利用反应器培养组织来进行青的筛选和建立，对于利用反应器培养组织来进行青蒿素的研究工作仍处于起步阶段蒿素的研究工作仍处于起步阶段蒿素的研究工作仍处于起步阶段蒿素的研究工作仍处于起步阶段n n （（（（4 4）黄花蒿植物中提取青蒿素）黄花蒿植物中提取青蒿素）黄花蒿植物中提取青蒿素）黄花蒿植物中提取青蒿素 n n目前青蒿素及其衍生物的生产仍主要依赖天然资源，目前青蒿素及其衍生物的生产仍主要依赖天然资源，目前青蒿素及其衍生物的生产仍主要依赖天然资源，目前青蒿素及其衍生物的生产仍主要依赖天然资源，除黄花蒿外，尚未发现含有青蒿素的其它天然植物除黄花蒿外，尚未发现含有青蒿素的其它天然植物除黄花蒿外，尚未发现含有青蒿素的其它天然植物除黄花蒿外，尚未发现含有青蒿素的其它天然植物资源资源资源资源 ，所以，通过黄花蒿提取青蒿素的各种方法，，所以，通过黄花蒿提取青蒿素的各种方法，，所以，通过黄花蒿提取青蒿素的各种方法，，所以，通过黄花蒿提取青蒿素的各种方法，也就成为青蒿素制备研究的热点问题。
也就成为青蒿素制备研究的热点问题也就成为青蒿素制备研究的热点问题也就成为青蒿素制备研究的热点问题 青蒿素的来源青蒿素的来源12 实验试剂、器皿与仪器实验试剂、器皿与仪器n n石油醚，石油醚，70%乙醇，活性碳乙醇，活性碳n n植物粉碎机，电子天平，水浴锅，旋转植物粉碎机，电子天平，水浴锅，旋转蒸发仪，真空抽滤机，布氏漏斗蒸发仪，真空抽滤机，布氏漏斗n n9 cm、、5 cm漏斗，滤纸，称量纸，漏斗，滤纸，称量纸，500 mL、、50 mL三角瓶，称量匙，玻璃棒，三角瓶，称量匙，玻璃棒，250 mL量筒，量筒，5 mL移液管移液管13 黄花蒿中青蒿素提取工艺流程黄花蒿中青蒿素提取工艺流程 取黄花蒿全草，粉碎，用取黄花蒿全草，粉碎，用20倍的石油醚倍的石油醚（（60-90），恒温），恒温30℃振荡，振荡频率振荡，振荡频率120次次/分，振荡提取分，振荡提取24 h，收集提取液，，收集提取液，按每克生药加入活性碳按每克生药加入活性碳0.4 g的比例脱色，的比例脱色，抽滤，得无色澄明液体，抽滤，得无色澄明液体，45℃减压回收，减压回收，重结晶，得到白色针状晶体重结晶，得到白色针状晶体14 n n 取黄花蒿全草取黄花蒿全草(10 g) 粉碎粉碎粉碎粉碎加加加加2020倍体积的石油醚（倍体积的石油醚（倍体积的石油醚（倍体积的石油醚（60-9060-90））））3030℃℃℃℃恒温振荡，恒温振荡，恒温振荡，恒温振荡，120120次次次次/ /分分分分振荡振荡振荡振荡24 h24 h收集提取液收集提取液收集提取液收集提取液15 按每克生药量加入活性碳按每克生药量加入活性碳按每克生药量加入活性碳按每克生药量加入活性碳0.4 g0.4 g的比例脱色的比例脱色的比例脱色的比例脱色抽滤抽滤抽滤抽滤得无色澄清透明液体得无色澄清透明液体得无色澄清透明液体得无色澄清透明液体45℃45℃减压回收减压回收减压回收减压回收 重结晶重结晶重结晶重结晶 75%(v/v)75%(v/v)乙醇乙醇乙醇乙醇 白色针状晶体白色针状晶体白色针状晶体白色针状晶体16 17 n n薄层色谱法鉴定薄层色谱法鉴定18 19 n n疟疾是由疟原虫引起的寄生虫病，于夏秋季发疟疾是由疟原虫引起的寄生虫病，于夏秋季发病较多。
在热带及亚热带地区一年四季都可以病较多在热带及亚热带地区一年四季都可以发病，并且容易流行发病，并且容易流行 典型的疟疾多呈周期性发作，表现为间歇性寒典型的疟疾多呈周期性发作，表现为间歇性寒热发作一般在发作时先有明显的寒战，全身热发作一般在发作时先有明显的寒战，全身发抖，面色苍白，口唇发绀，寒战持续约发抖，面色苍白，口唇发绀，寒战持续约10分分钟至钟至2小时，接着体温迅速上升，常达小时，接着体温迅速上升，常达40℃或更或更高，面色潮红，皮肤干热，烦躁不安，高热持高，面色潮红，皮肤干热，烦躁不安，高热持续约续约2～～6小时后，全身大汗淋漓，大汗后体温小时后，全身大汗淋漓，大汗后体温降至正常或正常以下经过一段间歇期后，又降至正常或正常以下经过一段间歇期后，又开始重复上述间歇性定时寒战、高热发作开始重复上述间歇性定时寒战、高热发作 治疗疟疾应采用抗疟原虫药物，如氯喹、奎宁、治疗疟疾应采用抗疟原虫药物，如氯喹、奎宁、青蒿素等青蒿素等 参考资料参考资料参考资料参考资料20 n n只有雌性蚊子才叮人吸血，用来使它的只有雌性蚊子才叮人吸血，用来使它的卵健全成长所以，只有雌性蚊子才会卵健全成长所以，只有雌性蚊子才会传播疟疾。
传播疟疾 n n疟疾现在几乎已经在城市和城镇内绝迹疟疾现在几乎已经在城市和城镇内绝迹的，但仍然流行于许多农村地区，特别的，但仍然流行于许多农村地区，特别是非洲，拉丁美洲和东南亚地区的农村是非洲，拉丁美洲和东南亚地区的农村 21 n n病原学病原学 寄生于人体的疟原虫有四种：间日疟原虫、寄生于人体的疟原虫有四种：间日疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫恶性疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫n n我国以前二种为常见，卵形疟仅发现几例我国以前二种为常见，卵形疟仅发现几例各种脊椎动物（主要是禽类、鼠和猴猿类）各种脊椎动物（主要是禽类、鼠和猴猿类）的疟原虫有的疟原虫有100多种，仅灵长类的疟原虫偶可多种，仅灵长类的疟原虫偶可感染人n n疟原虫在人体内发育增殖分为两个时期，即疟原虫在人体内发育增殖分为两个时期，即寄生于肝细胞内的红细胞外期和寄生于红细寄生于肝细胞内的红细胞外期和寄生于红细胞内的红细胞内期胞内的红细胞内期 22 n n红细胞外期：当受染的雌性按蚊吮吸人血时，疟红细胞外期：当受染的雌性按蚊吮吸人血时，疟原虫子孢子随蚊唾液进入人体血循环，约半小时原虫子孢子随蚊唾液进入人体血循环，约半小时全部侵入肝细胞，速发型子孢子即进行裂体增殖，全部侵入肝细胞，速发型子孢子即进行裂体增殖，迟发型子孢子则进入休眠状态，在肝细胞内裂体迟发型子孢子则进入休眠状态，在肝细胞内裂体增殖的疟原虫，经过增殖的疟原虫，经过5～～40天发育成熟，胀破肝天发育成熟，胀破肝细胞逸出成千上万的裂殖子（细胞逸出成千上万的裂殖子（meroxoite）进入）进入血流，进入血流的裂殖子部分被吞噬细胞吞噬杀血流，进入血流的裂殖子部分被吞噬细胞吞噬杀灭，部分侵入红细胞并在其内发育增殖，称为红灭，部分侵入红细胞并在其内发育增殖，称为红细胞内期。
细胞内期n n迟发型子孢子经过休眠后，在肝细胞内增殖，释迟发型子孢子经过休眠后，在肝细胞内增殖，释放裂殖子入血，即造成疟疾的复发放裂殖子入血，即造成疟疾的复发n n恶性疟疾无复发，是由于恶性疟疾子孢子无休眠恶性疟疾无复发，是由于恶性疟疾子孢子无休眠期23 n n红细胞内期：裂殖子侵入红细胞内，初期似戒指红细胞内期：裂殖子侵入红细胞内，初期似戒指状，红色的核点，兰色环状的胞浆称为环状体状，红色的核点，兰色环状的胞浆称为环状体即小滋养体即小滋养体n n环状体发育长大，胞浆可伸出不规则的伪足，以环状体发育长大，胞浆可伸出不规则的伪足，以摄噬血红蛋白，此为阿米巴滋养体或大滋养体摄噬血红蛋白，此为阿米巴滋养体或大滋养体n n未被利用的血红蛋白分解成正铁血红素颗粒蓄积未被利用的血红蛋白分解成正铁血红素颗粒蓄积在原浆内呈棕褐色，称为疟色素在原浆内呈棕褐色，称为疟色素(malarial pigment)大滋养体继续发育，其核与原浆进行大滋养体继续发育，其核与原浆进行分裂，形成裂殖体分裂，形成裂殖体(schizont)成熟的裂殖体破裂，成熟的裂殖体破裂，裂殖子逸出，一部分再侵入正常红细胞，一部分裂殖子逸出，一部分再侵入正常红细胞，一部分被吞噬细胞吞噬。
释出的疟色素也被吞噬被吞噬细胞吞噬释出的疟色素也被吞噬 24 n n经过细胞内经过细胞内3～～5次裂体增殖后，次裂体增殖后，部分进入红细胞的裂殖子在红细部分进入红细胞的裂殖子在红细胞内不再进行无性分裂，而逐渐胞内不再进行无性分裂，而逐渐发育成为雌或雄配子体配子体发育成为雌或雄配子体配子体在人体内可生存在人体内可生存2～～3个月，此期个月，此期间如被雌性按蚊吸入胃内，则在间如被雌性按蚊吸入胃内，则在蚊体内进行有性增殖蚊体内进行有性增殖 25 。