实验二实验二 细菌、放线菌形态观察细菌、放线菌形态观察 河南工业大学微生物学实验室河南工业大学微生物学实验室 1. 掌握细菌的制片和染色技术掌握细菌的制片和染色技术2. 掌握放线菌形态观察方法掌握放线菌形态观察方法3. 熟练油镜的使用方法熟练油镜的使用方法一、实验目的及要求一、实验目的及要求 二、细菌染色的基本原理二、细菌染色的基本原理 细菌细胞小而透明，在普通光学显微镜细菌细胞小而透明，在普通光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色细菌常下不易识别，必须对它们进行染色细菌常用碱性染料来进行简单染色，这是因为在中用碱性染料来进行简单染色，这是因为在中性，碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带性，碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷，很容易使细菌结合使菌体色部分带正电荷，很容易使细菌结合使菌体着色，经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明着色，经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下更易于识别的对比，在显微镜下更易于识别 三、实三、实 验验 材材 料料 1、菌种、菌种 金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌、、巨巨大大芽芽孢孢杆杆菌菌、、大大肠肠杆杆菌菌、、灰色链霉菌等。
灰色链霉菌等2、器材、器材 显微镜、载玻片、盖玻片、接种针、无菌水、显微镜、载玻片、盖玻片、接种针、无菌水、香柏油、碱性染料番红、结晶紫等香柏油、碱性染料番红、结晶紫等 四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤1、细菌简单染色、细菌简单染色 取取菌菌（（要要求求无无菌菌操操作作））—涂涂片片—干干燥燥—固固定定—染染色色（（1min））—水水洗洗—干干燥燥—镜镜检检（（注注意意形形状、大小、排列方式）状、大小、排列方式） 四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤1、细菌简单染色、细菌简单染色 取取菌菌（（要要求求无无菌菌操操作作））—涂涂片片—干干燥燥—固固定定—染染色色（（1min））—水水洗洗—干干燥燥—镜镜检检（（注注意意形形状、大小、排列方式）状、大小、排列方式）葡萄球菌葡萄球菌 四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤2、、放放线线菌菌菌菌落落形态观察形态观察（（1））表表面面形形状状 大大小小、、颜颜色色、、边边缘缘、、紧密程度等紧密程度等2））区区别别营营养养菌菌丝丝、、气气生生菌菌丝丝、、孢孢子丝子丝 四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤（（2））区区别别营营养养菌菌丝丝、、气气生生菌菌丝丝、、孢孢子丝子丝 四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤3. 气生菌丝、孢子丝的活体观察气生菌丝、孢子丝的活体观察 将将培培养养皿皿盖盖打打开开，，选选择择菌菌丝丝和和孢孢子子丝丝生生长长较较薄薄的的部部位，直接用低倍镜和高倍镜观察。
位，直接用低倍镜和高倍镜观察4．气生菌丝、孢子丝的印片观察．气生菌丝、孢子丝的印片观察 载载玻玻片片—滴滴1滴滴美美兰兰染染液液—盖盖玻玻片片印印片片—印印片片面面向向下下置置于于美美兰兰中中—吸吸去去多多余余染染液液—镜镜检检（（用用油油镜镜观观察察））——维护还原显微镜维护还原显微镜 1、、绘绘出出所所观观察察的的几几种种细细菌菌和和放放线线菌菌的的形形态态并并注注明名称和放大倍数明名称和放大倍数2、放线菌菌落和细菌菌落有何不同之处？、放线菌菌落和细菌菌落有何不同之处？3、放细菌的菌体为何不易挑取？、放细菌的菌体为何不易挑取？ 五、五、 思思 考考 题题 。