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1、中国医药集团 血液制品的质量控制及安全性 中国医药集团主要内容主要内容1 1、血液制品的概况、血液制品的概况2 2、血液制品的分离纯化技术和生产工艺、血液制品的分离纯化技术和生产工艺3 3、血液制品的安全性和病毒灭活、血液制品的安全性和病毒灭活4 4、血液制品的质量标准和质量控制、血液制品的质量标准和质量控制中国医药集团一、血液制品的概况中国医药集团血液制品定义血液制品定义 血液制品是指由健康人的血浆或经特异免疫的人血浆，经分离、提纯或由重组DNA技术制成的血浆蛋白组分，以及血液细胞有形成分。用于治疗和被动免疫预防。 血液制品属于治疗用生物制品。中国医药集团血液制品： 是高投入、高科技含量、高
2、技术门槛、高风险的生物产业。 是宝贵的人源性生物类药品，对许多疾病有着不可替代的防治作用，关乎国计民生安全，属于战略性资源。 随着国内医学进步与实践水平的提高，血液制品的临床使用量和适应症不断扩大。中国医药集团中国医药集团全球血制品销售结构中国医药集团中国医药集团白蛋白类制剂白蛋白类制剂主要作用；主要作用；1、维持血液渗透压、维持血液渗透压2、抗休克作用、抗休克作用3、运输和解毒作用、运输和解毒作用4、调节胶体渗透压紊乱而引进的机能障碍、调节胶体渗透压紊乱而引进的机能障碍5、营养供给、营养供给中国医药集团静脉注射人免疫球蛋白的临床应用静脉注射人免疫球蛋白的临床应用1、特发性血小板减少性紫癜。、
3、特发性血小板减少性紫癜。2、原发性免疫缺陷病的替代治疗。、原发性免疫缺陷病的替代治疗。3、继发性免疫缺陷病的替代治疗。、继发性免疫缺陷病的替代治疗。4、川崎病。、川崎病。5、艾滋病的辅助治疗。、艾滋病的辅助治疗。6、预防成人骨髓移植的感染和移植物抗宿主病。、预防成人骨髓移植的感染和移植物抗宿主病。7、其它免疫调节紊乱的适应症。、其它免疫调节紊乱的适应症。中国医药集团病毒检测及灭活或去除技术进展病毒检测及灭活或去除技术进展提高制品纯度的进展提高制品纯度的进展基因工程血液制品研究进展基因工程血液制品研究进展工艺技术的改进：工艺技术的改进：高度自动化、智能化、扩大生高度自动化、智能化、扩大生产能力产
4、能力病毒灭活和去除技术的提高综合利用的研发病毒灭活和去除技术的提高综合利用的研发:1-AT、AT-、纤原、冷沉淀、富含、纤原、冷沉淀、富含IgM/A-IgG特免球蛋白的系列研发：特免球蛋白的系列研发：破免、乙免、静注乙免、破免、乙免、静注乙免、绿脓杆菌特免、巨细胞病毒特免绿脓杆菌特免、巨细胞病毒特免、狂免、金葡特免、狂免、金葡特免、合胞病毒特合胞病毒特当代血液制品的主要进展当代血液制品的主要进展中国医药集团我国血液制品的发展趋势1、由血浆综合利用低下阶段向全面深度综合利用方、由血浆综合利用低下阶段向全面深度综合利用方向迈进。向迈进。2、由各自单一企业竞争转向战略重组或联盟形式竞、由各自单一企业
5、竞争转向战略重组或联盟形式竞争。争。3、硬件、软件提高的同时，全面开展技术创新。、硬件、软件提高的同时，全面开展技术创新。4、不断开展临床适应症的研究工作。、不断开展临床适应症的研究工作。中国医药集团国内血液制品发展 1950年我国开始用盐析法生产血液制品。 80年代末成都所是国内第一家采用低温乙醇分离技术的企业。 1996年兰州生物制品研究所在国内第一家成功引进Octapharma血浆蛋白组分压滤分离技术。 1998年血液制品生产企业在全国率先通过GMP认证。血液制品生产在GMP条件下进行。 2001年人白蛋白在全国实行批签发制度。揭开了生物制品批签发的序幕。现在血液制品全部实行批签发，以保
6、证每批制品安全有效。 2005年按特殊药品管理.中国医药集团国内血液制品企业及规模 30家血液制品生产企业，160家单采血浆站分布在19个省，设计产能12000吨，目前实际生产4000吨。中国生物技术集团公司是国内最大的血液制品生产企业，下属天坛蓉生，上生，武生，兰州四家企业。有国内最先进的生产车间，先进的生产工艺，完整的全面质量管理体系，先进的质量控制实验室和强大的科研开发团队，实现了血液制品生产过程的自动化、管道化、在线检测。中国医药集团血液制品的相关法规血液制品安全与质量控制体系法规架构血液制品管理条例国务院令（1996年12月30日发布并开始施行）药品管理法 技术法规 技术标准 中国遏
7、制艾滋病行动计划（2006-2010）中国医药集团技术体系技术体系- 原料血浆控制- 生产过程控制- 病毒灭活/去除工艺中国医药集团艾滋病防治条例艾滋病防治条例单采血浆站基本标准单采血浆站基本标准单采血浆站质量管理规范单采血浆站质量管理规范实施血液制品生产用原料血浆检疫期的指导原则实施血液制品生产用原料血浆检疫期的指导原则血液制品管理条例血液制品管理条例中国药典（三部）中国药典（三部）中国药典（二部）中国药典（二部）药用辅料管理办法药用辅料管理办法血液制品管理条例血液制品管理条例中国药典（三部）中国药典（三部）药品生产质量管理规范药品生产质量管理规范血液制品病毒灭活指导原则血液制品病毒灭活指导
8、原则生物制品批签发管理办法生物制品批签发管理办法药品经营质量管理规范药品经营质量管理规范药品经营质量管理规范实施细则药品经营质量管理规范实施细则药品流通监督管理办法药品流通监督管理办法原料血浆管理原料血浆管理其他原辅料其他原辅料管理管理药品经营管理药品经营管理药品生产管理药品生产管理血液制品遵循的主要技术法规血液制品遵循的主要技术法规中国医药集团二、血液制品的分离纯化技术和生产工艺中国医药集团血液制品的分离纯化技术大体上可以分为5类: 1、利用蛋白质的亲水性和疏水性即溶解度不同进行分离的方法，包括：盐析法、有机溶剂沉淀法、疏水层析法、冻融法、等电点沉淀法等。 2、根据蛋白质分子大小不同，形状和
9、密度差异进行分离的方法，包括：凝胶过滤层析法、过滤和超过滤、离心和超离心、透析法等。中国医药集团血液制品的分离纯化技术 3、利用蛋白质带电性的分离方法：离子交换层析法、制备电泳法等。 4、利用蛋白质的立体结构中的特定位点与配体的特异亲和力进行分离、纯化的亲和层析法。 5、其它方法：利凡诺，聚乙二醇，硫酸铝钾等。 应多种方法组合 ，符合血浆综合利用的原则。中国医药集团蛋白质在溶液中保持稳定根据蛋白质溶解度不同，即按蛋白质亲水性和疏水性的差异，进行分离的方法（盐析法、等电点沉淀法）。根据蛋白质分子大小、形状和密度差异进行分离的方法（凝胶过滤层析法、透析法、超滤法、离心和超离心法等）。 根据蛋白质所
10、带电性的不同进行分离（离子交换层析法、制备电泳法等）。根据蛋白质立体结构中的特定位点与某种特定配体的特异亲和力进行分离（亲和层析法）。中国医药集团蛋白分离的基本原则被分离和提纯的蛋白质应尽可能保持天然蛋白质的各种理化和生物学特性。如白蛋白多聚体含量的控制、IVIG的Fc活性的检测等；分离过程最大程度地避免或排除微生物及其代谢产物的污染。如热原质检测、无菌检查等；工艺技术应适应工业化规模生产，分离步骤力求简便、低消耗、高产出。如由Cohn氏法改良后的Kistler和Nitschmann法工艺，白蛋白的收率由20g/L增加到27g/L；从血浆中可分离出多种蛋白质成分，符合血浆综合利用的原则。中国医
11、药集团血液制品的分离纯化技术血浆蛋白的分离制备方法：盐析法（硫酸铵盐析法）低温乙醇法离子交换层析法、亲和层析法利凡诺沉淀法（已淘汰）聚乙二醇沉淀法中国医药集团低温乙醇法五变因素蛋白浓度乙醇浓度温度 pH离子强度五种参数加以组合，可形成许多种反应条件中国医药集团低温乙醇法优点 相对简单的操作，产量高，适宜工业化规模生产。 保持蛋白质的天然特性。 抑菌作用。 同时分离多种血浆成分，适于血浆综合利用。 乙醇作为主要原材料，价格低廉，易于获得。中国医药集团中国医药集团白蛋白生产工艺(1) 混合血浆 FI+II+III上清 FIV上清 FV沉淀精制 超 滤配制巴氏消毒除菌过滤和分装培育成品批签发放行中国
12、医药集团白蛋白生产工艺(2) 混合血浆 FI上清 FII+III上清 FIV上清 FV沉淀精制 超 滤配制巴氏消毒除菌过滤和分装培育成品批签发放行中国医药集团现行生产工艺现行生产工艺 现行生产工艺： 低温乙醇法（Cohn法 / Kistler- Nitcschmann法） - 低温乙醇法：离心法 / 压滤法 - 低温乙醇法 / 层析技术中国医药集团柱层析法离子交换层析、凝胶过滤和亲和层析法。离子交换层析法：采用不同的pH值和离子强度的缓冲液，使带不同电荷的蛋白质分离。PCC等凝血因子、白蛋白、免疫球蛋白的制备。交换剂如： DEAE-Sephadex A-50； DEAE-Sepharose C
13、L-6B； CM-Sepharose CL-6B； Lysine-Sepharose 4B ； SP-Sephadex C-50； Q-Sepharose FF； 中国医药集团血浆蛋白分离纯化的工业化生产技术血浆蛋白分离纯化的工业化生产技术中国医药集团血浆蛋白分离纯化的工业化生产技术血浆蛋白分离纯化的工业化生产技术中国医药集团血浆蛋白分离纯化的工业化生产技术血浆蛋白分离纯化的工业化生产技术中国医药集团中国医药集团无菌灌装技术无菌灌装技术中国医药集团巴氏病毒灭活和低巴氏病毒灭活和低pHpH孵放病毒灭活技术孵放病毒灭活技术中国医药集团中国医药集团三、血液制品的安全性和病毒灭活中国医药集团血浆相关病
14、毒的概念血浆相关病毒的概念原料血浆筛查及检疫期管理原料血浆筛查及检疫期管理血液制品生产工艺去除病毒能力血液制品生产工艺去除病毒能力血液制品病毒灭活血液制品病毒灭活/去除工艺去除工艺保证血液制品病毒安全性的其他措施保证血液制品病毒安全性的其他措施中国医药集团原料血浆的特殊性原料血浆的特殊性具有潜在的病毒风险，若获得起始原材料的过程和生产过程具有潜在的病毒风险，若获得起始原材料的过程和生产过程控制不严密，可能导致血源性传染病感染：控制不严密，可能导致血源性传染病感染：p甲型肝炎病毒（甲型肝炎病毒（HAV）p乙型肝炎病毒（乙型肝炎病毒（HBV）p丙型肝炎病毒（丙型肝炎病毒（HCV）p丁型肝炎病毒（丁
15、型肝炎病毒（HDV）p艾滋病病毒（艾滋病病毒（HIV）p巨细胞病毒（巨细胞病毒（CMV）p人类细小病毒（人类细小病毒（HPV）p朊病毒（朊病毒（CJDV）p其他可通过血液传播的病毒其他可通过血液传播的病毒中国医药集团病毒名称病毒名称大小大小（nm）病病毒毒包包膜膜核核酸酸传传播播介介质质全全血血血液制品血液制品乙型肝炎病毒（乙型肝炎病毒（HBV）42DNA丙型肝炎病毒（丙型肝炎病毒（HCV）30-60RNA人类免疫缺陷病毒（人类免疫缺陷病毒（HIV）100RNA人嗜人嗜T淋巴细胞病毒淋巴细胞病毒（HTLV）90-140RNA巨细胞病毒（巨细胞病毒（CMV）200DNAEB病毒（病毒（EBV）1
16、50-180DNA甲型肝炎病毒（甲型肝炎病毒（HAV）27-32RNA丁型肝炎病毒（丁型肝炎病毒（HDV）28-39RNA人细小病毒（人细小病毒（HPV）18-26DNA克雅氏病（克雅氏病（CJD）蛋白质源性的传染因子（朊蛋白蛋白质源性的传染因子（朊蛋白PrionProtein)埃博拉病毒（埃博拉病毒（Ebola）、西尼罗病毒（）、西尼罗病毒（West-nile）、）、SARS病毒、禽流感病毒？病毒、禽流感病毒？中国医药集团单采血浆站及单采血浆血液制品是以人血浆为原料生产的。原料血浆来自单采血浆站采集的血浆。单采血浆站由血液制品生产企业设置和管理，应遵守血液制品管理条例、单采血浆站基本标准、单
17、采血浆站管理办法和单采血浆站质量管理规范等法律法规的相关规定。中国医药集团血浆运输和贮存血浆采集后，应在6小时内冻结，置 -20以下保存，保存期不超过3年。血浆用专用冷藏车在-15 以下运输。中国医药集团 检验 用国家中检所检定合格的批批检试剂测定HBsAg、HIV抗体、HCV抗体、ALT、梅毒、血浆蛋白、抗-HBs等其他抗体含量。中国医药集团原料血原料血浆血清学的血清学的检测：HBsAg抗抗HCV抗抗HIVALT梅毒梅毒中国医药集团原料血浆检疫期 2008年6月31日后建立原料血浆投料前的“检疫期”制度.血浆采集复检合格后放置90天等献浆员第二次献浆检测合格后投产。减少窗口期传染。若用NAT
18、/PCR 检测，“窗口期”可由90天缩短至60天.中国医药集团三种病毒的窗口期平均天数三种病毒的窗口期平均天数 ELISA NATHCV 82 23 HIV 22 11 HBV 59 34 中国医药集团原料血原料血原料血原料血浆浆采集管理流程（采集管理流程（采集管理流程（采集管理流程（浆浆站）站）站）站）合格供浆员合格供浆员供浆员注册供浆员注册供血浆者档案查询供血浆者档案查询建立首次供浆者档案建立首次供浆者档案新供浆员新供浆员新供浆员新供浆员合格供浆员合格供浆员合格供浆员合格供浆员问询问询合格？合格？NONO拒绝拒绝YESYES体检体检合格？合格？NONOYESYES血清样本血清样本新供浆员新
19、供浆员新供浆员新供浆员*血清检验血清检验合格？合格？NONO新供浆员注册新供浆员注册YESYES*血浆采集血浆采集入浆站血浆库房入浆站血浆库房血浆检测血浆检测合格供浆员合格供浆员合格供浆员合格供浆员合格？合格？YESYES拒绝拒绝NONO运输至血液制品厂家运输至血液制品厂家*检测用试剂经国家批批检和入厂确认检测用试剂经国家批批检和入厂确认*采浆耗材经入厂检验合格采浆耗材经入厂检验合格中国医药集团原料血原料血原料血原料血浆浆管理（血液制品生管理（血液制品生管理（血液制品生管理（血液制品生产产厂家）厂家）厂家）厂家）检测试剂检测试剂SFDA放行放行检测试剂使用前蓉生确检测试剂使用前蓉生确认认保留样
20、品保留样品中国医药集团血浆采集流程图血浆采集流程图冷链运输冷链运输中国医药集团血液制品的病毒安全性控制血液制品的病毒安全性控制中国医药集团Cohns低温乙醇血浆组分法低温乙醇血浆组分法低温乙醇沉淀低温乙醇沉淀法生产工艺中可去除一定量的病毒；法生产工艺中可去除一定量的病毒；过滤法过滤法包括用于包括用于IVIG的深层过滤，经确证的深层过滤，经确证能大量除去脂包膜和非包膜病毒，模型病毒为能大量除去脂包膜和非包膜病毒，模型病毒为HBV、HIV、ParvovirusB19、HAV。工艺技术去病毒能力工艺技术去病毒能力中国医药集团白蛋白三步沉淀病毒白蛋白三步沉淀病毒Log减少数减少数StepEthand（
21、%）PHLogReductionFactHIVPRVSindbisBEVStepA195.853.33.74.24.2Step405.854.45.75.43.6StepD104.60.91.73.11.2工艺技术去病毒能力工艺技术去病毒能力中国医药集团IVIG三步沉淀病毒三步沉淀病毒Log减少数减少数StepEthand（%）PHLogReductionFactHIVPRVSindbisBEVStepA195.854.03.63.23.4StepB125.155.34.74.64.1StepC257.04.04.72.93.8StepD2.23.01.72.8工艺技术去病毒能力工艺技术去病毒
22、能力中国医药集团血液制品的病毒灭活血液制品的病毒灭活血液制品安全控制血液制品安全控制原料血浆安全控制原料血浆安全控制-不同层次的病原体检测方法不同层次的病原体检测方法-检疫期制度：排除潜在危险的血浆检疫期制度：排除潜在危险的血浆病毒灭活病毒灭活/去除工艺及其效果验证去除工艺及其效果验证生产与质量管理：生产与质量管理：cGMP质量标准与质量控制质量标准与质量控制中国医药集团现行原料血浆的安全控制方法原料血浆：原料血浆：单采血浆站提供单采血浆站提供排查：询问病史、体检、献浆员管理系统排查：询问病史、体检、献浆员管理系统采浆站采浆站/血清学检测（初筛）：血清学检测（初筛）：HBsAg、HCV抗体、抗
23、体、HIV-1/2抗体、抗体、梅毒和梅毒和ALT血液制品生产企业血液制品生产企业/血清学复检：血清学复检：HBsAg、HCV抗体、抗体、HIV-1/2抗体、抗体、梅毒和梅毒和ALT检测试剂：国家药品管理当局批准的、中国药品生物制品检定所逐批检测试剂：国家药品管理当局批准的、中国药品生物制品检定所逐批检定合格的产品检定合格的产品中国医药集团原料血浆病毒安全控制体系血源性疾病传播的潜在危险血源性疾病传播的潜在危险/艾滋病等血源性疾病艾滋病等血源性疾病的控制的控制现行原料血浆病毒检测方法的灵敏度限制现行原料血浆病毒检测方法的灵敏度限制-献浆员管理：有效的身份识别系统献浆员管理：有效的身份识别系统病原
24、体筛选病原体筛选：高灵敏度方法（高灵敏度方法（NAT）原料血浆原料血浆“检疫期检疫期”存放：排除病毒检测的窗口存放：排除病毒检测的窗口期期-原料血浆跟踪系统：献浆后追踪原料血浆跟踪系统：献浆后追踪中国医药集团血浆的检疫期制度血浆的检疫期制度是对混浆投料前的原料血浆进血浆的检疫期制度是对混浆投料前的原料血浆进行固定时间放置和回顾检验的血浆处理方法。行固定时间放置和回顾检验的血浆处理方法。-使投料血浆的病毒污染程度降至最低使投料血浆的病毒污染程度降至最低-国外企业通常将原料血浆在混浆投料前冷冻放国外企业通常将原料血浆在混浆投料前冷冻放置置90天天-电脑化血浆跟踪系统：跟踪检测结果电脑化血浆跟踪系统
25、：跟踪检测结果中国医药集团血液制品的病毒灭活 / 去除工艺病毒灭活的必要性病毒灭活的必要性病毒的窗口期病毒的窗口期试剂灵敏度限制导致漏检试剂灵敏度限制导致漏检人为差错引起漏检人为差错引起漏检已知经血传播尚未检测的病毒：细小病毒已知经血传播尚未检测的病毒：细小病毒B19、巨细胞病、巨细胞病毒（毒（CMV）可能经血传播但尚未检测的病毒可能经血传播但尚未检测的病毒中国医药集团病毒灭活 / 去除工艺国家药监局规定：血液制品生产工艺必须国家药监局规定：血液制品生产工艺必须包括病毒灭活包括病毒灭活/去除步骤去除步骤血浆蛋白制品的生产：包括一步或两步病血浆蛋白制品的生产：包括一步或两步病毒灭活毒灭活/去除工
26、艺步骤去除工艺步骤病毒灭活病毒灭活/去除方法：去除方法：须经国家药品管理部须经国家药品管理部门批准后方可使用门批准后方可使用中国医药集团经血液传播的病毒 HBV：双链：双链DNA；脂包膜；脂包膜；40-45nmHCV：单链：单链RNA；脂包膜；脂包膜；40-50nmHIV：单链：单链RNA；脂包膜；脂包膜；80-130nmHAV：单链：单链RNA；非脂包膜；非脂包膜28-30nm细小病毒细小病毒B19：单链：单链DNA；非脂包膜；非脂包膜；18-26nm中国医药集团病毒灭活方法：病毒灭活方法：1、巴氏消毒法巴氏消毒法（巴氏消毒法（60/10h）即在即在600.5连续加热连续加热10-11小时。
27、小时。白蛋白采用这个方法进行病毒灭活，通常是在除菌过滤、分装到最终容白蛋白采用这个方法进行病毒灭活，通常是在除菌过滤、分装到最终容器以后进行加热处理。通常，为防止蛋白质变性，在除菌过滤前器以后进行加热处理。通常，为防止蛋白质变性，在除菌过滤前要加入低浓度的辛酸钠或辛酸钠与要加入低浓度的辛酸钠或辛酸钠与N-乙酰色氨酸作为保护剂。乙酰色氨酸作为保护剂。几十年的临床使用情况证明，采用低温乙醇法和巴氏灭活方法生产的白几十年的临床使用情况证明，采用低温乙醇法和巴氏灭活方法生产的白蛋白对肝炎病毒和蛋白对肝炎病毒和HIV是安全的。是安全的。中国医药集团2、干热法 (80/72h) 冻干品加热法冻干品加热法蛋
28、白质冻干除去水分以后可以耐受蛋白质冻干除去水分以后可以耐受60-80或更高温度。在或更高温度。在80以上加热以上加热可以产生令人满意的对可以产生令人满意的对HBV、HCV、HIV和和HAV的病毒灭活效果。的病毒灭活效果。冻干品加热法一般多用于凝血因子类产品。由于冻干后病毒也更稳定，冻干品加热法一般多用于凝血因子类产品。由于冻干后病毒也更稳定，因此，必须进行在规定条件下的病毒灭活验证。因此，必须进行在规定条件下的病毒灭活验证。冻干品加热法的病毒灭活效果受产品的水分残留量、组成成分如蛋白质、冻干品加热法的病毒灭活效果受产品的水分残留量、组成成分如蛋白质、糖、盐和氨基酸的含量以及冰冻与冻干时间的影响
29、。糖、盐和氨基酸的含量以及冰冻与冻干时间的影响。由于病毒灭活对水分残留量特别敏感，因此要根据验证结果设置允许的由于病毒灭活对水分残留量特别敏感，因此要根据验证结果设置允许的水分残留限度，并保持瓶间残留水分的差异处于限度内。水分残留限度，并保持瓶间残留水分的差异处于限度内。中国医药集团3、S/D法S/D法法TNBP(0.3%)/Cholate(0.2%)（30/6h）TNBP(0.3%)/Tween-80(1%)（24/6h）TNBP(0.3%)/Triton-100(1%)（24/46h）有机溶剂与去污剂的混合物（有机溶剂与去污剂的混合物（S/D）能够破坏包膜）能够破坏包膜病毒的脂膜结构，导致
30、受到破坏的病毒无法与感病毒的脂膜结构，导致受到破坏的病毒无法与感染细胞结合。但该方法不能灭活非脂包膜病毒。染细胞结合。但该方法不能灭活非脂包膜病毒。中国医药集团4、低pH法（pH：.000.20;24,21天）低低pH法法在某些酸性条件下在某些酸性条件下,脂包膜病毒可以被灭活。免疫球蛋脂包膜病毒可以被灭活。免疫球蛋白经低白经低pH如如pH4）处理，可以有效灭活几种脂包膜病毒。）处理，可以有效灭活几种脂包膜病毒。如在免疫球蛋白生产中，通常采用如在免疫球蛋白生产中，通常采用20-22，pH4.1培育培育21天。天。灭活条件如灭活条件如pH值、孵放时间和温度、胃酶含量、蛋白值、孵放时间和温度、胃酶含
31、量、蛋白质浓度、溶质含量等因素，可能影响灭活效果，应确定这质浓度、溶质含量等因素，可能影响灭活效果，应确定这些参数允许变化的幅度。些参数允许变化的幅度。中国医药集团5、（亚甲基蓝）法MMB在白色荧光在白色荧光45000lux照射小时。照射小时。MB法已用于临床血浆的病毒灭活法已用于临床血浆的病毒灭活中国医药集团6、荧光法补骨脂补骨脂S-59(150M)结合结合UVA(3J/cm2)中国医药集团7、纳米膜过滤法使用20nm或50nm的膜过滤。 8、射线法中国医药集团病毒去除方法病毒去除方法沉淀沉淀层析（离子交换或亲和层析）层析（离子交换或亲和层析）纳米膜过滤纳米膜过滤中国医药集团血液制品常用病毒
32、灭活方法血液制品常用病毒灭活方法1.人血白蛋白：巴氏消毒法人血白蛋白：巴氏消毒法（60/10小时）小时）2.IVIG/IMIG（包括特异性免疫球蛋白）：（包括特异性免疫球蛋白）：-低低pH孵放法孵放法（pH4）-巴氏消毒法巴氏消毒法-低低pH孵放法加纳米膜过滤孵放法加纳米膜过滤-巴氏消毒法加低巴氏消毒法加低pH孵放法孵放法-S/D法法3.人凝血因子人凝血因子:-S/D法法（有机溶剂（有机溶剂/去污剂）去污剂）-S/D法法/100、30分钟，分钟，干热法：干热法：80、72小时。小时。中国医药集团四、血液制品的质量 标准和质量控制中国医药集团质量控制体系质量控制体系 - 国家批签发管理 - 检测
33、实验室认证体系中国医药集团质量标准体系质量标准体系国家标准国家标准 - - 中国药典中国药典 - SFDA- SFDA标准标准企业标准企业标准 - - 注册标准注册标准 - - 申报标准申报标准 - - 内部考核和放行标准内部考核和放行标准参考标准参考标准 - WHO- WHO、 USPUSP、BPBP、EPEP中国医药集团安全性安全性有效性有效性稳定性稳定性血液制品生产的质量控制血液制品生产的质量控制中国医药集团安全性安全性原材料的质量控制原材料的质量控制生产过程中的质量控制生产过程中的质量控制成品的质量控制成品的质量控制外源性污染的控制外源性污染的控制中国医药集团安全性安全性原材料的质量控
34、制原材料的质量控制供应商的质量审核供应商的质量审核原材料的质量检验原材料的质量检验中国医药集团安全性安全性生产过程中的质量控制生产过程中的质量控制生产工艺验证生产工艺验证防止污染和交叉污染防止污染和交叉污染 防腐剂和稳定剂防腐剂和稳定剂中间品保存和效期中间品保存和效期血液制品生产中应注意的问题血液制品生产中应注意的问题中国医药集团安全性安全性成品成品的质量控制的质量控制成品外观检测成品外观检测鉴别试验鉴别试验无菌试验无菌试验热原质试验热原质试验异常毒性试验异常毒性试验中国医药集团外源性污染的控制外源性污染的控制产品单支污染的控制产品单支污染的控制热原的控制热原的控制Al3+含量的控制含量的控制
35、不溶性微粒的控制不溶性微粒的控制中国医药集团单支污染的控制单支污染的控制自动灌装系统自动灌装系统严格的检疫孵放过程严格的检疫孵放过程分装车间良好的净化控制分装车间良好的净化控制中国医药集团热原的控制热原的控制鲎试验的应用生产过程，原液，成品鲎试验的应用生产过程，原液，成品微生物限度控制微生物限度控制主要原材料主要原材料助滤剂，滤板的吸附作用助滤剂，滤板的吸附作用过滤分离的去热原作用过滤分离的去热原作用全封闭的分离系统降低热原二次污染的机会全封闭的分离系统降低热原二次污染的机会中国医药集团Al3+含量的控制含量的控制 铝离子的来源：铝离子的来源：原材料：助滤剂、滤板原材料：助滤剂、滤板内包材：胶
36、塞、瓶子内包材：胶塞、瓶子 铝离子的去除：超滤铝离子的去除：超滤2005年版年版中国药典中国药典：人血白蛋白铝离：人血白蛋白铝离子子200ug/L中国医药集团不溶性微粒的控制不溶性微粒的控制微粒污染的危害微粒污染的危害注射液中常出现的微粒有：炭黑、碳酸钙、橡胶屑、纤注射液中常出现的微粒有：炭黑、碳酸钙、橡胶屑、纤维素、玻璃屑、纸屑、细菌、真菌及芽孢、结晶等。维素、玻璃屑、纸屑、细菌、真菌及芽孢、结晶等。微粒污染的危害：异物微粒引起的病理现象：微粒污染的危害：异物微粒引起的病理现象：（1）肺肉芽肿和肺水肿；）肺肉芽肿和肺水肿；（2）静脉炎；）静脉炎；（3）过敏反应；）过敏反应；（4）局部组织栓塞
37、与坏死）局部组织栓塞与坏死（5）肿瘤形成或肿瘤样反应。）肿瘤形成或肿瘤样反应。中国医药集团不溶性微粒的控制不溶性微粒的控制微粒污染的来源及控制微粒污染的来源及控制洁净室内的发尘量，洁净室内的发尘量，90左右来自人员，为此，必须采左右来自人员，为此，必须采取隔离人体污染的卫生措施。取隔离人体污染的卫生措施。室内微粒的其他污染源室内微粒的其他污染源空气空气室内墙体、地面室内墙体、地面设备、容器设备、容器物料物料进入洁净室的物品进入洁净室的物品中国医药集团静脉输注产品渗透压的控制静脉输注产品渗透压的控制人血白蛋白：渗透压摩尔浓度应为210360 mOsmol/kg。以成品中蛋白浓度为以成品中蛋白浓度
38、为5%25%（渗透压理论值约为（渗透压理论值约为1070mOsmol/kg）、钠离子不得过）、钠离子不得过160mmol/L（含氯化钠、（含氯化钠、辛酸钠，辛酸钠，n均以均以1.84计的渗透压理论值为计的渗透压理论值为294mOsmol/kg）计算，本品渗透压理论值最大约）计算，本品渗透压理论值最大约360mOsmol/kg，静注人免疫球蛋白（pH4）：渗透压摩尔浓度不得低于240 mOsmol/kg。（参考EP）序号样品渗透压（mOsmol/kg）目测法分光光度法OD值溶血率1阴性对照管（0.9%NaCl）285未溶血0.02920.72%NaCl226未溶血0.023030.63%NaCl
39、201未溶血0.0371.7%40.54%NaCl174微溶血0.08311.6%50.45%NaCl146溶血0.49198.9%60.36%NaCl115 溶血0.49399.4%7阳性对照管溶血0.496100%中国医药集团有效性有效性免疫球蛋白抗体效价：免疫球蛋白抗体效价：抗抗HBs每克蛋白质应不低于每克蛋白质应不低于6.0IU;白喉抗体每克蛋白质应不低于白喉抗体每克蛋白质应不低于3.0HAU;IVIG:Fc活性、活性、IgG亚类齐全；亚类齐全；凝血因子活性：凝血因子活性：凝血因子特异活性凝血因子特异活性应应1.0IU/mg蛋白；蛋白；效价或蛋白含量的限量要求效价或蛋白含量的限量要求:
40、如如IVIG的的IGg含量应含量应50g/L；白蛋白蛋白总量应；白蛋白蛋白总量应标示量；特免的抗体标示量；特免的抗体效价应效价应100IU/ml;中国医药集团1.保持天然的分子结构和完整的识别、保持天然的分子结构和完整的识别、效应功能效应功能2.IgG亚类齐全，符合正常人血浆配比。亚类齐全，符合正常人血浆配比。3.具有广谱抗体。具有广谱抗体。4.IgG完整性和完整性和Fc段活性的测定段活性的测定如何评价如何评价IVIG的有效性的有效性中国医药集团稳定性稳定性指在规定的制剂有效期内，或经过运输、贮存等指在规定的制剂有效期内，或经过运输、贮存等环境因素影响后，任能到达原规定的合格指标。环境因素影响
41、后，任能到达原规定的合格指标。中国医药集团不同制剂的特殊要求不同制剂的特殊要求白蛋白类：白蛋白类：多聚体（多聚体（5%）、引起降压反应的物质、引起降压反应的物质（细菌内毒素（细菌内毒素1.67EU/ml、PKA35IU/ml）、外源性）、外源性污染物（铝离子污染物（铝离子200ug/L）；）；免疫球蛋白类：免疫球蛋白类：裂解物含量裂解物含量(分子大小分布分子大小分布95%)95%)、抗、抗补体活性补体活性(50%)、降压物质（、降压物质（PKA35.0IU/ml）、血、血型抗体（抗型抗体（抗A、抗、抗B血凝素血凝素1:64）、IgA含量；含量；凝血因子类制剂：凝血因子类制剂：病毒安全性（必须有
42、两步病毒灭活病毒安全性（必须有两步病毒灭活工艺）。工艺）。中国医药集团血液制品的质量标准和检验血液制品的质量标准和检验项目人血白蛋白静注人免疫球蛋白（pH4)人免疫球蛋白人乙型肝炎免疫球蛋白鉴别试验（免疫双扩散法）仅与抗人的血清产生沉淀线，与抗马、抗牛、抗猪、抗羊血清不产生沉淀线仅与抗人的血清产生沉淀线，与抗马、抗牛、抗猪、抗羊血清不产生沉淀线仅与抗人的血清产生沉淀线，与抗马、抗牛、抗猪、抗羊血清不产生沉淀线仅与抗人的血清产生沉淀线，与抗马、抗牛、抗猪、抗羊血清不产生沉淀线鉴别试验（免疫电泳法） 与正常人血清比较，主要沉淀线应为白蛋白与正常人血清比较，主要沉淀线应为IgG与正常人血清比较，主要
43、沉淀线应为IgG与正常人血清比较，主要沉淀线应为IgG外观应为略黏稠、黄色或绿色至棕色澄明液体，不应出现浑浊应为无色或淡黄色澄清液体，可带轻微乳光应为无色或淡黄色澄清液体，可带乳光，不应出现浑浊应为无色或淡黄色澄清液体，可带乳光，不应出现浑浊可见异物应符合规定应符合规定应符合规定应符合规定装量应不低于标示量应不低于标示量应不低于标示量应不低于标示量中国医药集团项目人血白蛋白静注人免疫球蛋白（pH4)人免疫球蛋白人乙型肝炎免疫球蛋白热稳定性试验取供试品置570.5 水浴箱中保温50小时后，用可见异物检查装置，与同批未保温的供试品比较，除颜色有轻微变化外，应无肉眼可见的其他变化取供试品置570.5
44、 水浴箱中保温4小时后，用可见异物检查装置，肉眼观察应无凝胶化或絮状物取供试品置570.5 水浴箱中保温4小时后，用可见异物检查装置，肉眼观察应无凝胶化或絮状物取供试品置570.5 水浴箱中保温4小时后，用可见异物检查装置，肉眼观察应无凝胶化或絮状物pH值6.47.43.84.46.47.46.47.4蛋白质含量IgG含量应不低于标示量的95.0%应不低于标示量的90.0%应不低于标示量的95.0%应不高于180g/L纯度应不低于蛋白质总量的96.0%应不低于蛋白质总量的95.0%应不低于蛋白质总量的90.0%应不低于蛋白质总量的90.0%钠离子含量应不高于2mmol/L钾离子含量应不高于16
45、0mmol/L中国医药集团项目人血白蛋白静注人免疫球蛋白（pH4)人免疫球蛋白人乙型肝炎免疫球蛋白吸光度在波长403nm处测定吸光度，应不大于0.15多聚体含量应不高于5.0%辛酸钠含量每1g蛋白质中应为0.1400.180mmol铝残留量应不高于200ug/L激肽释放酶原激活剂含量应不高于34IU/ml应不高于35.0IU/mlHBsAg应符合规定无菌检查应符合规定应符合规定应符合规定应符合规定异常毒性检查应符合规定应符合规应符合规定应符合规定中国医药集团项目人血白蛋白静注人免疫球蛋白（pH4)人免疫球蛋白人乙型肝炎免疫球蛋白热原检查应符合规定应符合规定应符合规定应符合规定糖及糖醇含量应为90110g/L应不高于50g/L应不高于50g/L分子大小分布IgG单体与二聚体含量之和应不低于95.0%IgG单体与二聚体含量之和应不低于90.0%IgG单体与二聚体含量之和应不低于90.0%抗-HBs每1g IgG应不低于6.0IU每1g IgG应不低于6.0IU应不低于100IU/ml白喉抗体每1g IgG应不低于3.0HAU每1g IgG应不低于3.0HAU抗补体活性应不高于50%抗A、抗B血凝素应不高于1：64硫柳汞含量其含量应不高于0.1g/L其含量应不高于0.1g/L中国医药集团谢谢大家！
