《疟疾镜检培训》PPT课件

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1、肥西疾控肥西疾控全球基金疟疾镜检项目全球基金疟疾镜检项目培训班培训班 肥西县疾病预防控制中心肥西县疾病预防控制中心 吴卫华吴卫华 二二一一一一年四月年四月 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控 疟原虫属原生动物亚界的单细胞真核生疟原虫属原生动物亚界的单细胞真核生物。在生物界的位置：疟原虫为原生动物。在

2、生物界的位置：疟原虫为原生动物门、孢子纲、血孢子目、疟原虫科、物门、孢子纲、血孢子目、疟原虫科、疟原虫属。疟原虫有疟原虫属。疟原虫有149149种，自然界感染种，自然界感染人体的疟原虫只有四种：即人体的疟原虫只有四种：即间日疟间日疟（PvPv）、恶性疟（恶性疟（PfPf）、三日疟（三日疟（PmPm）、蛋形疟（蛋形疟（PoPo）四种）四种。一、概述一、概述 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二、疟原虫生活史二、疟原虫生活史红细胞外期红细胞外期红细胞内期红细胞内期子孢子增殖期子孢子增殖期 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二、疟原虫生活史二、疟原虫生活史lIn mosqui

3、to (final host) 配子体配子体 配子配子Gametocytes() gametes ()(bloodstomach) (stomach of insect) union of 合子合子zygote rupture/release rounds up into 子孢子子孢子 卵卵囊囊 动合子动合子sporozoites oocyst motile ookinete(Salivary glands) ( the body cavity side) 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二、疟原虫生活史二、疟原虫生活史lIn human body 红细胞外期（红外期）红细胞外期

4、（红外期）Exoerythrocytic stage 子孢子子孢子 bite/inject into 红外期裂殖体红外期裂殖体 sporozoites exoerythrocytic schizonts(mosquito blood) (hepatic cell) rupture/release 红外期裂殖子红外期裂殖子 exoerythrocytic sporozoites ( blood) 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二、疟原虫生活史二、疟原虫生活史红细胞内期（红内期）红细胞内期（红内期）Erythrocytic stage 早期滋养体早期滋养体 晚期滋养体晚期滋养体 e

5、arly trophozoite later trophozoite P.f/36-48hrs P.v/48hrs 裂殖子裂殖子 未成熟裂殖体未成熟裂殖体 merozoite immature schizont 成熟裂殖体成熟裂殖体 Mature schizont*the process from trphozoite to merozoite is called schizogony（裂体生殖）裂体生殖）. 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二、疟原虫生活史二、疟原虫生活史配子体形成配子体形成 Gametgenesis 疟原虫经几代红内期裂体增殖后，部分裂殖子侵入红细疟原虫经几代

6、红内期裂体增殖后，部分裂殖子侵入红细胞后不再进行裂体增殖而发育成雌、雄配子体。胞后不再进行裂体增殖而发育成雌、雄配子体。 配子体的发育在肝、脾、骨髓等器官的血窦内进行，成配子体的发育在肝、脾、骨髓等器官的血窦内进行，成熟后释放于外周血。熟后释放于外周血。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控致病致病 PathogenicityPathogenicityl发作发作 Paroxysm (attack of malaria)Paroxysm (attack of malaria) 疟疾的一次典型发作表现为疟疾的一次典型发作表现为寒战寒战、高热高热和和出汗退热出汗退热3 3个连续阶段。发作是

7、由个连续阶段。发作是由红内期的裂体增殖红内期的裂体增殖所致。所致。 成熟裂殖体胀破红细胞后，裂殖子及红细胞碎片成熟裂殖体胀破红细胞后，裂殖子及红细胞碎片进入血流，部分被巨噬细胞、中性粒细胞吞噬，刺进入血流，部分被巨噬细胞、中性粒细胞吞噬，刺激这些细胞产生内源性热原质，它和疟原虫的代谢激这些细胞产生内源性热原质，它和疟原虫的代谢产物共同作用于宿主下丘脑的体温调节中枢，引起产物共同作用于宿主下丘脑的体温调节中枢，引起发热。随着血内刺激物被吞噬和降解，机体通过大发热。随着血内刺激物被吞噬和降解，机体通过大量出汗，体温逐渐恢复正常，机体进入发作间歇阶量出汗，体温逐渐恢复正常，机体进入发作间歇阶段。段。

8、 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控致病致病 PathogenicityPathogenicity 由于红内期裂体增殖是发作的基础，发作具有周期性，由于红内期裂体增殖是发作的基础，发作具有周期性，与红内期裂体增殖周期一致。与红内期裂体增殖周期一致。 p.vp.v. 48 hrs; P.f./36 . 48 hrs; P.f./36 toto 48 hrs ;P.m./72 hrs Process to shows a succession of 3 stagesProcess to shows a succession of 3 stages . .寒战寒战 The cold st

9、age (chill), lasting for The cold stage (chill), lasting for 30 min to 1 hr. 30 min to 1 hr. . .发烧发烧 The hot stage (fever), 1 to 4 hrs.The hot stage (fever), 1 to 4 hrs. (3). (3).出汗出汗 Sweating stageSweating stage， 1 to hrs. 1 to hrs. CharacteristicCharacteristic -(1). -(1).周期性周期性 periodicperiodic (2

10、). (2).重复性重复性 repeatedrepeated (3). (3).规律性规律性 regular regular 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控致病致病 PathogenicityPathogenicityl再然再然 RecrudescenceRecrudescence 疟疾初发停止后，患者若无再感染，仅由于体内残疟疾初发停止后，患者若无再感染，仅由于体内残存的少量红内期疟原虫在一定条件下重新大量繁殖又引存的少量红内期疟原虫在一定条件下重新大量繁殖又引起的疟疾发作，称为疟疾的再燃。起的疟疾发作，称为疟疾的再燃。 再燃与宿主抵抗力和特异性免疫力的下降及疟原虫再燃与宿主

11、抵抗力和特异性免疫力的下降及疟原虫的抗原变异有关。的抗原变异有关。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控致病致病 PathogenicityPathogenicityl复发复发 RelapseRelapse 疟疾复发是指疟疾初发患者红内期疟原虫经药物治疗疟疾复发是指疟疾初发患者红内期疟原虫经药物治疗或宿主的免疫作用被消灭，经过一段时间，由于肝细胞或宿主的免疫作用被消灭，经过一段时间，由于肝细胞内休眠的迟发型子孢子复苏，发育产生的裂殖子进入红内休眠的迟发型子孢子复苏，发育产生的裂殖子进入红细胞繁殖引起的疟疾发作。细胞繁殖引起的疟疾发作。 恶性疟原虫无迟发型子孢子，因而只有再燃而不引起恶

12、性疟原虫无迟发型子孢子，因而只有再燃而不引起复发。问日疟原虫既有再燃又有复发。复发。问日疟原虫既有再燃又有复发。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控致病致病 PathogenicityPathogenicityl贫血贫血 anemiaanemia 疟疾发作数次后可出现贫血，以恶性疟为甚。贫血疟疾发作数次后可出现贫血，以恶性疟为甚。贫血的原因有的原因有： 疟原虫直接破坏红细胞外。疟原虫直接破坏红细胞外。 脾功能亢进，吞噬大量正常的红细胞。脾功能亢进，吞噬大量正常的红细胞。 免疫病理损害（怎样损害红细胞）。免疫病理损害（怎样损害红细胞）。 骨髓造血功能受抑制。骨髓造血功能受抑制。 肥西

13、县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控致病致病 PathogenicityPathogenicityl脾肿大脾肿大 SplenomegalySplenomegaly 初发患者多在发作初发患者多在发作3 34 4天后，脾开始肿大，长天后，脾开始肿大，长期期 不愈或反复感染者，脾肿大十分明显。不愈或反复感染者，脾肿大十分明显。 主要原因是脾充血和单核主要原因是脾充血和单核- -巨噬细胞的增生。巨噬细胞的增生。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控致病致病 PathogenicityPathogenicityl恶性疟疾恶性疟疾( (凶险性疟疾凶险性疟疾) )Malignant mala

14、riaMalignant malaria - -凶险型疟疾绝大多数由恶性疟原虫所致。常见于凶险型疟疾绝大多数由恶性疟原虫所致。常见于无免疫力或因各种原因延误诊治的疟疾患者，因血中无免疫力或因各种原因延误诊治的疟疾患者，因血中原虫数量剧增而出现凶险症状。原虫数量剧增而出现凶险症状。 常见的有脑型、超高热型等，多表现为持续高热、常见的有脑型、超高热型等，多表现为持续高热、抽搐、昏迷、重症贫血、肾功能衰竭等，来势凶猛，抽搐、昏迷、重症贫血、肾功能衰竭等，来势凶猛，若不能及时诊治，死亡率很高。若不能及时诊治，死亡率很高。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三、疟疾的实验室诊断三、疟疾的实验

15、室诊断病原学诊断：显微镜血涂片查见疟原虫，这种病原学诊断：显微镜血涂片查见疟原虫，这种镜检确诊镜检确诊 最可靠。最可靠。免疫学诊断：循环抗体检测免疫学诊断：循环抗体检测 循环抗原检测循环抗原检测分子生物学技术：分子生物学技术：PCRPCR和和DNADNA探针已应用于疟疾探针已应用于疟疾的诊断。的诊断。确诊疟疾的确诊疟疾的“金标准金标准”仍然是血液显微镜检查。仍然是血液显微镜检查。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四、疟原虫的镜检技术四、疟原虫的镜检技术血膜的制作与染色。血膜的制作与染色。厚、薄血膜中间日疟、恶性疟各期疟厚、薄血膜中间日疟、恶性疟各期疟原虫的形态结构及其鉴别要点。原

16、虫的形态结构及其鉴别要点。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四血膜的制作血膜的制作在制作血片前，首先要核对患者的姓名、年在制作血片前，首先要核对患者的姓名、年龄和住址，详细进行编号龄和住址，详细进行编号。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四血膜的制作血膜的制作（所需设备所需设备）载玻片载玻片：新玻片浸入有液态洗涤剂的清水中新玻片浸入有液态洗涤剂的清水中10-2010-20分钟，干净棉巾逐个擦拭，再用清水冲洗分钟，干净棉巾逐个擦拭，再用清水冲洗干净，晾干，最后用干净柔软的棉巾将玻片擦干净，晾干，最后用干净柔软的棉巾将玻片擦亮。亮。已用过的玻片已用过的玻片浸泡于洗涤

17、剂溶液中浸泡于洗涤剂溶液中1-21-2天，天，或浸泡于煮沸的或浸泡于煮沸的5%5%肥皂水中肥皂水中1-21-2小时，在放置新小时，在放置新配置的洗涤剂溶液中配置的洗涤剂溶液中1-21-2小时，逐个擦去血膜痕小时，逐个擦去血膜痕迹，清水漂洗干净、擦亮。迹，清水漂洗干净、擦亮。采血针采血针：一次性。：一次性。玻片盒玻片盒：防止污染和昆虫吸食血膜。：防止污染和昆虫吸食血膜。75%75%酒精棉球酒精棉球：采血前后消毒。：采血前后消毒。记号笔记号笔：薄片上书写号码。：薄片上书写号码。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四血膜的制作血膜的制作（取血时间取血时间）采血时间采血时间：现症病人和流

18、调普查时可不考虑采血时间，但在诊断现症病人和流调普查时可不考虑采血时间，但在诊断或需要某时期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的采血时间。或需要某时期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的采血时间。疟疾典型的临床表现分前驱期、发冷（寒战）期、发热期、出汗期和疟疾典型的临床表现分前驱期、发冷（寒战）期、发热期、出汗期和间歇期五期。间歇期五期。间日疟在间日疟在前驱期前驱期相当于肝内期疟原虫发育，因原虫密度太低，镜检多相当于肝内期疟原虫发育，因原虫密度太低，镜检多为阴性；为阴性；发冷（寒战）期发冷（寒战）期相当于红内期成熟裂殖体胀破红细胞期，镜相当于红内期成熟裂殖体胀破红细胞期，镜检多见裂殖体和环状体；检多见裂殖

19、体和环状体；发热期发热期外周血中以环状体（小滋养体）为主；外周血中以环状体（小滋养体）为主；出汗期出汗期因原虫密度太低，镜检多为阴性；发作后数小时，因原虫密度太低，镜检多为阴性；发作后数小时，间歇期间歇期外周外周血中以大滋养体为主，形态较易辨认，为诊断的有利时机。发作血中以大滋养体为主，形态较易辨认，为诊断的有利时机。发作36-48小时可检出裂殖体；发作小时可检出裂殖体；发作1-2次后，配子体出现较多。次后，配子体出现较多。恶性疟较理想的取血时间是发作后恶性疟较理想的取血时间是发作后20小时内取血，初发患者退热后常小时内取血，初发患者退热后常查不到原虫。查不到原虫。 肥西县肥西县CDC慢病科慢

20、病科肥西疾控肥西疾控四四血膜的制作血膜的制作（取血的部位和方法取血的部位和方法）耳垂或无名指：通常在耳垂取血通常在耳垂取血，先用先用75%75%酒精棉球消毒取血酒精棉球消毒取血部位部位，待酒精干后，用左手拇指和食指紧捏耳待酒精干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方垂上方或无名指指尖或无名指指尖，右手持消毒针迅速刺入，右手持消毒针迅速刺入皮肤，皮肤，不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻挤压出血。挤压出血。厚血膜血量约一粒大米（即火柴头）厚血膜血量约一粒大米（即火柴头）大小大小 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四血膜的制作血膜的制作（取血的部位和方法取血

21、的部位和方法） 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四血膜的制作血膜的制作（制片制片）用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂成薄膜状，叫薄血膜；一种将血液涂成圆液涂成薄膜状，叫薄血膜；一种将血液涂成圆盘状，叫厚血膜。最好一张玻片上制作厚、薄盘状，叫厚血膜。最好一张玻片上制作厚、薄两种血膜。两种血膜。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四血膜的制作血膜的制作（薄血膜的制作薄血膜的制作）薄血膜薄血膜 用推片一端边缘的中点从取血部分用推片一端边缘的中点从取血部分取约取约1 11.51.5微升的血量（微升的血量（相当于相当于1/4

22、1/4火柴头大小火柴头大小），使血滴），使血滴与平置的载玻片接触，并形成与平置的载玻片接触，并形成252535350 0夹角，待血液向夹角，待血液向两侧扩展约两侧扩展约 2cm2cm2.5cm2.5cm宽时，均匀而迅速地从右向宽时，均匀而迅速地从右向左推成舌状薄血膜（约左推成舌状薄血膜（约2.5cm2.5cm长）。推制时速度要均匀，长）。推制时速度要均匀，血滴大小、推片与载玻片之间夹角大小及展开血膜的血滴大小、推片与载玻片之间夹角大小及展开血膜的速度快慢等常影响血膜的厚薄。制成的薄血膜应在玻速度快慢等常影响血膜的厚薄。制成的薄血膜应在玻片上形成平铺的血细胞，细胞之间互相接触而不相互片上形成平铺

23、的血细胞，细胞之间互相接触而不相互重叠。重叠。薄血膜外观：舌状厚薄均匀，无划痕，薄血膜外观：舌状厚薄均匀，无划痕，位位于玻片于玻片1/21/21/31/3处。处。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四血膜的制作血膜的制作（厚血膜的制作厚血膜的制作）厚血膜厚血膜 用推片的左下角，从取血部位刮取用推片的左下角，从取血部位刮取约约4 45 5微升微升血量（相当于火柴头大小），使血滴与平血量（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转置的载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转2 24 4圈，涂成圈，涂成直径直径0.80.81cm1cm大小圆形厚血膜大小圆形厚

24、血膜( (厚血厚血膜的厚度以一个油镜视野内可见到膜的厚度以一个油镜视野内可见到5 51010个白细胞个白细胞为宜为宜) )，厚血膜的位置，位于玻片右厚血膜的位置，位于玻片右1/31/3处。处。厚厚血膜外观：圆形厚薄均匀，无划痕。过厚易于脱落，血膜外观：圆形厚薄均匀，无划痕。过厚易于脱落，过薄达不到检出率的要求。过薄达不到检出率的要求。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四血膜的制作血膜的制作（厚薄血膜的制作厚薄血膜的制作） 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四血膜的制作血膜的制作（血膜的位置血膜的位置）l涂涂制制厚厚、薄薄血血膜膜的的位位置置 通通常常将将厚厚、薄薄

25、血血膜膜涂涂在在一一张张载载玻玻片片上上。方方法法是是将将载载片片分分为为6 6等等分分，第第1 1、2 2格格备备贴贴标标签签及及编编号号用用；厚厚血血膜膜涂涂在在第第3 3格格中中央央，薄薄血血膜膜涂涂在在第第4 4格格前前缘缘至至第第6 6格格中中部部。作作为为标标本本的的血血片片每每张张玻玻片片涂涂厚厚、薄薄血血膜膜各各1 1个个；门门诊诊和和发发热热病病人人血血片片每每片片1 1人人，涂涂2 2个厚血膜个厚血膜1 1个薄血膜，个薄血膜，以防血膜脱落而影响检查；以防血膜脱落而影响检查； 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四各种不同的疟疾血片涂制法各种不同的疟疾血片涂制法标

26、准血片（标准血片（1 1人）人）门诊发热病人血片门诊发热病人血片（1人）人）居民普查血片居民普查血片（2 2人）人） 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四标准的疟疾厚薄血膜位置标准的疟疾厚薄血膜位置 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控四四血膜的制作（编号）血膜的制作（编号） 血膜制成后，立即在玻片面上写上受血膜制成后，立即在玻片面上写上受检者的号码，以防差错；待薄血膜干后检者的号码，以防差错；待薄血膜干后再用铅笔于薄血膜中写上血片种类的代再用铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号和受检者的个人编号，依次顺序插入号和受检者的个人编号，依次顺序插入标本盒内。标本盒内。 肥西县肥

27、西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控 四四血膜的制作（注意事项）血膜的制作（注意事项）清洗玻片，且勿碰撞、磨损清洗玻片，且勿碰撞、磨损。 刚涂制的血膜要平放，注意防尘、防昆虫吸吮刚涂制的血膜要平放，注意防尘、防昆虫吸吮血膜血膜。 厚血膜未干前勿使标本盒倾斜，以免血膜倾向一侧，造成血膜厚血膜未干前勿使标本盒倾斜，以免血膜倾向一侧，造成血膜厚薄不均，厚处不易溶血和着色而影响检查结果；晾干血膜时应厚薄不均，厚处不易溶血和着色而影响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜；干后应及时装入标注意防尘、防止苍蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜；干后应及时装入标本盒并盖严。本盒并盖严。血膜应自然干

28、燥。血膜应自然干燥。 切忌在毒太阳下晒或火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。夏切忌在毒太阳下晒或火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。夏天标本尽可能天标本尽可能24-48h24-48h内固定染色；冬天也不能超过内固定染色；冬天也不能超过72h72h。放置时间放置时间越久，厚血膜越不易溶血，染色效果也差。若不能及时染色，薄越久，厚血膜越不易溶血，染色效果也差。若不能及时染色，薄血膜宜先用甲醇固定（血膜宜先用甲醇固定（1-31-3分钟）然后用过滤清水对厚血膜溶血，分钟）然后用过滤清水对厚血膜溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待以后染色。晾干固定后装入盒内盖严，待以后染色。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西

29、疾控肥西疾控五五染色（染液的种类）染色（染液的种类）l目前临床上应用最广泛的是目前临床上应用最广泛的是瑞氏和吉氏染瑞氏和吉氏染液液，这些染液中包含，这些染液中包含美兰美兰、伊红伊红和美兰氧和美兰氧化所成的化所成的天青天青，所以称多色性染剂。我们，所以称多色性染剂。我们主要用吉氏染液，它具有方便、染色效果主要用吉氏染液，它具有方便、染色效果稳定，便于长期保存的优点。瑞氏染液染稳定，便于长期保存的优点。瑞氏染液染色时间短，但染色效果不如吉氏稳定，主色时间短，但染色效果不如吉氏稳定，主要在门诊量大的门诊实验室使用。要在门诊量大的门诊实验室使用。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控五五染色

30、（染色原理）染色（染色原理）l红细胞和疟原虫的蛋白质均由氨基酸组成，每个红细胞和疟原虫的蛋白质均由氨基酸组成，每个氨基酸电离出一个带正电荷的氨基酸电离出一个带正电荷的- -NHNH3 3+ +和一个带负电和一个带负电荷的荷的- -COOHCOOH- -。碱性染料美兰的有色基团带阳离子，可与细胞中带负电。碱性染料美兰的有色基团带阳离子，可与细胞中带负电荷的荷的COOHCOOH- -部分结合，使之成为蓝色。部分结合，使之成为蓝色。疟原虫的酸性蛋白质被染成蓝色。疟原虫的酸性蛋白质被染成蓝色。l酸性染料伊红的有色基团带阴离子，可与细胞中带正电荷的酸性染料伊红的有色基团带阴离子，可与细胞中带正电荷的NH

31、NH3 3+ +部分结合，部分结合，使之呈红色；美兰和伊红都不能使疟原虫的核着色，但美兰氧化后产生的天使之呈红色；美兰和伊红都不能使疟原虫的核着色，但美兰氧化后产生的天青有媒染作用。在媒染物与染料的共同作用下，青有媒染作用。在媒染物与染料的共同作用下，疟原虫的核被染成紫红色。疟原虫的核被染成紫红色。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控五五染色（染色原理）染色（染色原理）l注意：注意：l蛋白质和氨基酸都是两性电解质，要求染蛋白质和氨基酸都是两性电解质，要求染液的液的PH值值6.8-7.2做好。做好。l染液偏酸时，所带的正电荷增加，易于伊染液偏酸时，所带的正电荷增加，易于伊红结合，使红

32、结合，使红细胞和疟原虫的核染成鲜红红细胞和疟原虫的核染成鲜红色色，而淋巴细胞和原虫的着色较差。反之，而淋巴细胞和原虫的着色较差。反之，当染液偏碱时，当染液偏碱时，红细胞和嗜伊红白细胞等红细胞和嗜伊红白细胞等颗粒被染成紫蓝色颗粒被染成紫蓝色，不易观察，不易观察。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控五五染色（染色（吉氏染液的染色方法吉氏染液的染色方法）先用甲醇或无水酒精固定薄血膜先用甲醇或无水酒精固定薄血膜, ,再用清水对厚血膜溶脱血红蛋白，然再用清水对厚血膜溶脱血红蛋白，然后再进行染色。后再进行染色。 注意：注意：吸取母液时，不要晃动瓶子吸取母液时，不要晃动瓶子, ,以免沉淀物泛起影

33、响染色效果以免沉淀物泛起影响染色效果. .成批血片染色成批血片染色：将已用甲醇固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入将已用甲醇固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入3%3%吉氏吉氏染液稀释液（染液稀释液（3 3毫升吉氏原液加缓冲液或净水毫升吉氏原液加缓冲液或净水9797毫升，混匀）浸没血片，毫升，混匀）浸没血片，同时对厚薄血膜染色同时对厚薄血膜染色30min30min（根据当地实际情况，酌情增减染色时间和（根据当地实际情况，酌情增减染色时间和浓度），然后用清水轻轻将染液漂洗干净，将血片标本（血膜面朝下）浓度），然后用清水轻轻将染液漂洗干净，将血片标本（血膜面朝下）插于晾干板上晾干，包装，镜检。插于晾干板上

34、晾干，包装，镜检。单张血片染色单张血片染色：将处理好的血膜，加姬氏母液：将处理好的血膜，加姬氏母液1-21-2滴，加中性蒸馏水滴，加中性蒸馏水15-15-3030滴，染色滴，染色3030分钟左右，然后用清水轻轻将片上的染液冲洗干净，晾干分钟左右，然后用清水轻轻将片上的染液冲洗干净，晾干镜检。镜检。较理想的染色结果是红细胞为较理想的染色结果是红细胞为淡红或淡紫红色淡红或淡紫红色，疟原虫的胞质呈，疟原虫的胞质呈蓝色蓝色，核为核为紫红色紫红色，疟色素为，疟色素为棕褐色棕褐色。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控五五染色（染色（吉氏染液浓度吉氏染液浓度）门诊染色门诊染色操作操作1 1 （快

35、染）（快染） 配制配制5%5%染液，（每张血片约需染液染液，（每张血片约需染液2ml2ml）：量筒内量：量筒内量2ml2ml缓冲液或新鲜凉开水，直接滴加吉缓冲液或新鲜凉开水，直接滴加吉氏原液氏原液7 7滴，混匀，滴入待染标本的厚薄血膜上，染色滴，混匀，滴入待染标本的厚薄血膜上，染色10min10min，清水细缓冲洗，晾干镜检。，清水细缓冲洗，晾干镜检。操作操作2 (2 (慢染慢染) ) 配制配制3%3%染液：染液：在染色量筒内量在染色量筒内量2ml2ml蒸蒸馏水或馏水或新鲜凉开新鲜凉开水，水， 再滴加再滴加吉氏原液吉氏原液4 4滴，混匀，滴，混匀，滴入滴入待染标本上，待染标本上，染色染色304

36、0min3040min。清水细缓冲洗，。清水细缓冲洗，晾干镜检。晾干镜检。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控五五染色染色（影响染色效果的因素影响染色效果的因素）l血血片片的的染染色色好好坏坏除除与与玻玻片片清清洁洁度度，血血片片的的制制作作质质量量和和染染色色技技术术等等有有关外，还受到以下因素影响：关外，还受到以下因素影响：l染染料料和和溶溶剂剂的的质质量量; ;染染料料、甲甲醇醇和和甘甘油油必必须须用用分分析析纯纯，且且在在配配置置时时所所用的器具必须干净且无水份。用的器具必须干净且无水份。l染染液液的的新新旧旧：染染液液存存放放的的时时间间越越久久，染染色色力力越越强强。新

37、新配配置置的的染染液液因因色色素素尚尚未未充充分分分分解解，染染色色力力较较弱弱且且常常呈呈现现偏偏碱碱性性，通通常常在在染染液液配配置置1-21-2周周后后才才使用，盛装染液的瓶子应加塞盖密，以防吸潮而影响染液质量。使用，盛装染液的瓶子应加塞盖密，以防吸潮而影响染液质量。l染染液液稀稀释释后后的的使使用用时时间间：必必须须现现用用现现稀稀释释染染液液，当当时时使使用用，一一般般在在0.50.5小小时时内内染染色色最最强强。吉吉氏氏和和瑞瑞氏氏染染液液的的主主要要成成分分是是美美兰兰、伊伊红红和和由由美美兰兰氧氧化化产产生生的的天天青青，三三者者能能在在酒酒精精溶溶液液中中溶溶解解，但但在在水

38、水溶溶液液中中伊伊红红遇遇到到美美兰兰和和天青即产生沉淀。天青即产生沉淀。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控五五染色染色（影响染色效果的因素影响染色效果的因素）l染染液液的的稀稀释释浓浓度度：染染液液的的浓浓度度高高，着着色色就就快快而而深深，从从而而使使疟疟原原虫虫寄寄生生的的红红细细胞胞薛薛氏氏点点粗粗大大显显著著，但但颜颜色色常常偏偏碱碱；染染液液浓浓度度过过低则染色时间久，颜色偏酸，薛氏点不明显或消失。低则染色时间久，颜色偏酸，薛氏点不明显或消失。l染染色色时时间间：染染色色时时间间根根据据染染液液质质量量、新新旧旧、浓浓度度和和气气温温而而适适当当增增减减。染染色色时时

39、间间长长，效效果果好好，反反之之较较差差。室室温温高高，着着色色快快，染染色色时间可略缩短，气温低可适当延长。时间可略缩短，气温低可适当延长。l染染色色用用水水：染染液液的的稀稀释释用用水水和和染染色色后后冲冲洗洗用用水水应应选选择择PH6.8-PH6.8-7.27.2的清洁用水，通常用新鲜的蒸馏水和过滤的冷开水。的清洁用水，通常用新鲜的蒸馏水和过滤的冷开水。l冲冲洗洗方方法法：应应沿沿玻玻片片或或染染色色缸缸边边缘缘加加水水使使染染液液表表面面一一层层溢溢出出，并轻轻冲洗以免染液色素颗粒玷污血膜。并轻轻冲洗以免染液色素颗粒玷污血膜。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控六六血片制作

40、与染色注意事项血片制作与染色注意事项 l使用前载玻片一定要清洁，不然会影响血片制使用前载玻片一定要清洁，不然会影响血片制作和镜检结果。作和镜检结果。 l厚血膜干燥时不要加热，加热会使原虫变形，厚血膜干燥时不要加热，加热会使原虫变形，影响镜检结果。影响镜检结果。 l配置母液时过滤可除去杂质颗粒，有助于提高配置母液时过滤可除去杂质颗粒，有助于提高镜检质量。镜检质量。l固定薄血膜时不要将甲醇触碰到厚血膜固定薄血膜时不要将甲醇触碰到厚血膜l 冲洗染液时，不要冲走厚血膜。冲洗染液时，不要冲走厚血膜。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控七七血片镜检血片镜检l在学习镜检疟原虫之前，必须对正常厚薄

41、血膜中各种血细胞的在学习镜检疟原虫之前，必须对正常厚薄血膜中各种血细胞的形态、内部结构和染色性质加以区别。形态、内部结构和染色性质加以区别。l镜检疟原虫，首先学看薄血膜，在基本掌握薄血膜中疟原虫基镜检疟原虫，首先学看薄血膜，在基本掌握薄血膜中疟原虫基本形态后，再学习镜检厚血膜。本形态后，再学习镜检厚血膜。l镜检疟原虫一般只检查厚血膜，薄血膜仅作为原虫分类时参考镜检疟原虫一般只检查厚血膜，薄血膜仅作为原虫分类时参考和血片编号之用。和血片编号之用。l镜检疟原虫须用油镜头配合镜检疟原虫须用油镜头配合5低倍目镜镜检，档发现疑难问题低倍目镜镜检，档发现疑难问题时再调换时再调换10 目镜进行观察。目镜进行

42、观察。l检查时应从厚血膜的上缘开始，使血膜从上而下，自左至右，检查时应从厚血膜的上缘开始，使血膜从上而下，自左至右，一行接一行，一个视野稍叠一个视野顺序地查完整个血膜。一行接一行，一个视野稍叠一个视野顺序地查完整个血膜。l一般情况下。厚血膜四周（稍薄些）疟原虫数量较多，且形态一般情况下。厚血膜四周（稍薄些）疟原虫数量较多，且形态较清楚，镜检时不要忽略。每张厚血膜检查时间最好不少于较清楚，镜检时不要忽略。每张厚血膜检查时间最好不少于20分钟。分钟。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控七七血片镜检血片镜检 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控七七血片镜检血片镜检l看完血片后，

43、若为阳性，应立即按血片标号登记原虫的种、期，以防看完血片后，若为阳性，应立即按血片标号登记原虫的种、期，以防差错。为检查后记录结果方便起见，对疟原虫的种、期可使用英文字差错。为检查后记录结果方便起见，对疟原虫的种、期可使用英文字母缩写作为代号：母缩写作为代号：l间日疟：间日疟： P.Vl恶性疟：恶性疟： P.Fl卵形疟：卵形疟： P.Ol三日疟：三日疟： P.Ml环状体环状体: Rl大滋养体大滋养体: Tl裂殖体裂殖体: Sl配子体配子体: G 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控八八原虫密度计算原虫密度计算l估计疟原虫感染程度有三种方法估计疟原虫感染程度有三种方法l半定量计算法半定

44、量计算法 检查厚血膜检查厚血膜l白细胞原虫密度计算法白细胞原虫密度计算法 检查厚血膜检查厚血膜l红细胞感染率计算法红细胞感染率计算法 检查薄血膜检查薄血膜 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控八八原虫密度计算（半定量计算法）原虫密度计算（半定量计算法）l用厚血膜每个视野中观察到疟原虫的平均数粗略地估计出疟原用厚血膜每个视野中观察到疟原虫的平均数粗略地估计出疟原虫密度。虫密度。l国内常用，此方法将密度分为国内常用，此方法将密度分为6及：及：l全厚血膜查见疟原虫数在全厚血膜查见疟原虫数在10个以内，记录实际数字。个以内，记录实际数字。l全厚血膜查见疟原虫数在全厚血膜查见疟原虫数在10个以

45、上，但平均每个视野不到个以上，但平均每个视野不到1个虫，个虫，记录少。记录少。l平均每个视野平均每个视野1-5个虫，记录个虫，记录“+”。l平均每个视野平均每个视野6-10个虫，记录个虫，记录“+”。l平均每个视野平均每个视野11-100个虫，记录个虫，记录“+”。l平均每个视野平均每个视野100个以上虫，记录个以上虫，记录“+”。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控八八原虫密度计算（白细胞疟原虫密度计算法）原虫密度计算（白细胞疟原虫密度计算法）l用于疟疾研究。用于疟疾研究。l用于临床诊断。用于临床诊断。l用于抗疟后疟疾考核。用于抗疟后疟疾考核。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西

46、疾控肥西疾控八八原虫密度计算（白细胞疟原虫密度计算法）原虫密度计算（白细胞疟原虫密度计算法）l在厚血膜中，按要求选择视野，计算每个视野中的在厚血膜中，按要求选择视野，计算每个视野中的疟原虫数和白细胞数，一般情况下计算疟原虫数和白细胞数，一般情况下计算200个白细胞，个白细胞，如果原虫密度较低，可增加白细胞计数（如果原虫密度较低，可增加白细胞计数（500-1000个）。个）。l白细胞疟原虫计算公式：白细胞疟原虫计算公式：l疟原虫数疟原虫数白细胞数白细胞数每微升血中白细胞数每微升血中白细胞数= =疟原虫疟原虫数数/微升血微升血l制作厚血膜的同时计算每微升血中白细胞数，如果制作厚血膜的同时计算每微升

47、血中白细胞数，如果无法进行白细胞计数，则以无法进行白细胞计数，则以6000个个/每微升计算。每微升计算。（国际标准（国际标准8000个）个） 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控八八原虫密度计算（原虫密度计算（白细胞疟原虫密度计算法白细胞疟原虫密度计算法）l假设假设200200个个WBCWBC中有中有3535个疟原虫，在不知患者个疟原虫，在不知患者WBCWBC的情况下，以每微升血的情况下，以每微升血60006000个计算，由个计算，由此计算疟原虫的密度为：此计算疟原虫的密度为：l352006000=1050/ul352006000=1050/ul 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾

48、控肥西疾控九九如何确定疟原虫血片为阴性如何确定疟原虫血片为阴性l检查全部厚血膜未查见疟原虫。检查全部厚血膜未查见疟原虫。l最少检查最少检查100个油镜视野未查见疟原虫。个油镜视野未查见疟原虫。l镜检时间不少于镜检时间不少于20分钟。分钟。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十十人体疟原虫的基本结构人体疟原虫的基本结构l疟原虫的基本构造为细胞质（胞浆）、核和疟色素三部分。疟原虫的基本构造为细胞质（胞浆）、核和疟色素三部分。l细胞浆细胞浆：被染成：被染成蔚蓝色或深蓝色，蔚蓝色或深蓝色，随着虫体发育长大，细随着虫体发育长大，细胞浆逐渐增多。胞浆逐渐增多。l核：核：即细胞质或染色质粒，在正

49、常情况下核呈即细胞质或染色质粒，在正常情况下核呈鲜红色。鲜红色。l疟色素：不着色，疟色素：不着色，颜色和颗粒的形状，因疟原虫种类而异。颜色和颗粒的形状，因疟原虫种类而异。间日疟原虫的色素颗粒呈短棒状，黄褐色；恶性疟原虫间日疟原虫的色素颗粒呈短棒状，黄褐色；恶性疟原虫的色素颗粒呈细砂状，呈的色素颗粒呈细砂状，呈黑褐色黑褐色。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十一、薄血膜中常见的血液成分十一、薄血膜中常见的血液成分中中性性白白细细胞胞酸酸性性粒粒细细胞胞血血小小板板大单核细胞大单核细胞淋巴细胞淋巴细胞 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十二、薄血膜中被疟原虫寄生十二、薄血

50、膜中被疟原虫寄生 红血球形态特征红血球形态特征l间日疟原虫被寄生红细胞间日疟原虫被寄生红细胞l胀大色浅，薛氏点鲜红色，胀大色浅，薛氏点鲜红色，细小，数多细小，数多l恶性疟原虫被寄生红细胞恶性疟原虫被寄生红细胞l大小正常，色稍紫；茂氏点大小正常，色稍紫；茂氏点紫红色，粗大，数少紫红色，粗大，数少 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十三、薄血膜疟原虫形态l 间日疟间日疟 环状体环状体l红血球：正常。红血球：正常。l大小：较大，约为红大小：较大，约为红 细胞直径细胞直径1/3。l胞浆：环状，浅蓝色。胞浆：环状，浅蓝色。l核：红色，一个，偶有核：红色，一个，偶有 二个。二个。l色素：没有。

51、色素：没有。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十三、薄血膜间日疟环状体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十三、薄血膜间日疟环状体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十三、薄血膜疟原虫形态l恶性疟恶性疟环状体环状体l红血球：大小正常红血球：大小正常, ,颜色较深。颜色较深。l大小：大小： 较小，约为红细胞较小，约为红细胞 直径直径1/51/61/51/6。l胞浆：胞浆： 兰色，环状纤细，兰色，环状纤细， 有时位于红细胞的边缘。常有时位于红细胞的边缘。常见多个同寄生一红细胞现象。见多个同寄生一红细胞现象。l核：红色一个核：红色一个, ,常有二个。常有二个。l

52、色素：没有。色素：没有。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十三、薄血膜疟原虫形态恶性疟环状体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十三、恶性疟薄血膜环状体十三、恶性疟薄血膜环状体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十三、恶性疟薄血膜环状体十三、恶性疟薄血膜环状体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十三、恶性疟薄血膜环状体十三、恶性疟薄血膜环状体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十四、薄血膜中小滋养体形态特征十四、薄血膜中小滋养体形态特征l恶性疟原虫小滋养体恶性疟原虫小滋养体l约为红细胞的约为红细胞的 1/6；环纤；环纤细；核细；核1

53、2个；个；l一个红细胞寄生一个红细胞寄生2个环状个环状体的常见体的常见l间日疟原虫小滋养体间日疟原虫小滋养体l约为红细胞直径的约为红细胞直径的13；环较粗大；核；环较粗大；核1个；个；2个核和一个红细胞寄生个核和一个红细胞寄生2个环状体，不如恶性疟原个环状体，不如恶性疟原虫多见虫多见 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十五、薄血膜疟原虫形态l 间日疟大滋养体间日疟大滋养体红细胞：胀大褪色，出现形状大小相红细胞：胀大褪色，出现形状大小相等，分布均匀，数等，分布均匀，数 目较多，鲜红目较多，鲜红色薛氏小色薛氏小 点。点。大小：较大。大小：较大。胞浆：不规则，浅兰色，出现阿米巴胞浆：不规

54、则，浅兰色，出现阿米巴伪足，有空泡。伪足，有空泡。核：核： 红色，一个。红色，一个。疟色素：有，细小杆状，黄褐色，疟色素：有，细小杆状，黄褐色，分布不均匀。分布不均匀。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十五、薄血膜疟原虫形态间间日日疟疟大大滋滋养养体体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十五、薄血膜疟原虫形态 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十五、薄血膜间日疟滋养体薄血膜间日疟滋养体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十五、薄血膜间日疟滋养体薄血膜间日疟滋养体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十五、薄血膜疟原虫形态l恶性疟大滋养

55、体恶性疟大滋养体l红细胞：大小正常，颜色红细胞：大小正常，颜色较深，可出现较粗、大较深，可出现较粗、大小不一、分布不匀、数小不一、分布不匀、数目较少红色茂氏小点。目较少红色茂氏小点。l大小：较小。大小：较小。l胞浆：兰色，圆形，坚实，胞浆：兰色，圆形，坚实，体积小。体积小。l核：一个，红色。核：一个，红色。l色素：较细的黑褐色颗粒，色素：较细的黑褐色颗粒，常集成块。常集成块。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十六、薄血膜中大滋养体形态特征十六、薄血膜中大滋养体形态特征l间日疟原虫大滋养体间日疟原虫大滋养体l虫体不规则，较大；虫体不规则，较大；阿米巴样空泡明显；阿米巴样空泡明显；疟

56、色素细小，黄褐色疟色素细小，黄褐色l恶性疟原虫大滋养体恶性疟原虫大滋养体l体小，圆形；空泡小；体小，圆形；空泡小；早期疟色素细小，金早期疟色素细小，金黄色，晚期结成块状，黄色，晚期结成块状，黑褐色黑褐色 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十七、薄血膜疟原虫形态十七、薄血膜疟原虫形态间日疟间日疟未成熟裂殖体未成熟裂殖体红细胞：胀大，褪色，可有薛红细胞：胀大，褪色，可有薛氏小点。氏小点。胞浆：较不规则，空泡小或消胞浆：较不规则，空泡小或消失，失，浅兰色。浅兰色。核：核： 红色，分裂为二个以上。红色，分裂为二个以上。色素：黄褐色，分布不均匀。色素：黄褐色，分布不均匀。 肥西县肥西县CDC

57、慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十七、薄血膜疟原虫形态十七、薄血膜疟原虫形态 间间 日日 疟疟 未未 成成 熟熟 裂裂 殖殖 体体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十七、薄血膜疟原虫形态十七、薄血膜疟原虫形态 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十七、薄血膜疟原虫形态十七、薄血膜疟原虫形态 恶性疟未成熟裂殖体红细胞：大小正常，颜色较深，可 有茂氏小点。大小： 较小。胞浆： 规则，圆形或卵圆形，兰 色。核： 分裂为二个以上，红色。色素： 黄褐色颗粒，常集成黑褐 色团块。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十八、薄血膜中裂殖体前期形态特征十八、薄血膜中裂殖体前期形态

58、特征l间日疟原虫裂殖体前期间日疟原虫裂殖体前期l圆形或不规则；核分裂为圆形或不规则；核分裂为2个以上，空泡消失；疟个以上，空泡消失；疟色素分布不匀色素分布不匀l恶性疟原虫裂殖体前恶性疟原虫裂殖体前期期l圆形，核分裂为圆形，核分裂为2个以个以上；疟色素集成团快上；疟色素集成团快 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十九、薄血膜疟原虫形态十九、薄血膜疟原虫形态 间日疟间日疟成熟裂殖体成熟裂殖体红细胞红细胞：胀大，褪色，可见薛氏：胀大，褪色，可见薛氏 小点。小点。大小大小： 个体较大。个体较大。胞浆和核胞浆和核：裂殖子：裂殖子1224个平均个平均 16个，排列不规则，个，排列不规则， 核核

59、红色红色，胞浆，胞浆浅兰色浅兰色。色素色素： 黄褐色黄褐色常集于疟原虫的一常集于疟原虫的一 边。边。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十九、薄血膜间日疟成熟裂殖体十九、薄血膜间日疟成熟裂殖体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十九、薄血膜间日疟成熟裂殖体十九、薄血膜间日疟成熟裂殖体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十九、薄血膜间日疟成熟裂殖体十九、薄血膜间日疟成熟裂殖体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控十九、薄血膜疟原虫形态十九、薄血膜疟原虫形态 恶性疟恶性疟成熟裂殖体成熟裂殖体红细胞红细胞： 大小正常，颜色较深，大小正常，颜色较深， 可见

60、茂氏小点。可见茂氏小点。大小大小： 虫体较小。虫体较小。胞浆和核胞浆和核：裂殖子：裂殖子836个平个平 均均1824个，排列个，排列 不规则或呈二重排列，不规则或呈二重排列， 核核红色红色胞浆胞浆兰色兰色。色素色素： 黑褐色黑褐色，集中于中央，集中于中央 或一侧。或一侧。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十、二十、薄血膜中成熟裂殖体形态特征薄血膜中成熟裂殖体形态特征l间日疟原虫裂殖体间日疟原虫裂殖体l大于正常红细胞；裂殖子大于正常红细胞；裂殖子1224个，通常个，通常16个，排列不个，排列不规则；疟色素常集于一侧，黄规则；疟色素常集于一侧，黄褐色褐色l恶性疟原虫裂殖体恶性疟原虫

61、裂殖体l小于正常红细胞；裂殖子较小于正常红细胞；裂殖子较小，小，826个，排列不规则；个，排列不规则；疟色素成团快状，黑褐色疟色素成团快状，黑褐色 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十一、薄血膜疟原虫形态二十一、薄血膜疟原虫形态间日疟大（雌）配子体间日疟大（雌）配子体l形状大小：圆或椭圆，较大。l胞浆： 深兰色。l核：一个，较小，深红色常偏于一边，核周可见明显不染色带。l色素：黄褐色，均匀散在，数目较多。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十一、薄血膜疟原虫形态二十一、薄血膜疟原虫形态 间日疟小（雄）配子体间日疟小（雄）配子体 形状大小：圆形，虫体较大。胞浆： 浅兰

62、色。核： 一个，较大，疏松， 位于中央，浅红色， 周围有明显不着色 带。色素： 黄褐色，散在分布。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十一、二十一、薄血膜配子体薄血膜配子体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十一、二十一、薄血膜配子体薄血膜配子体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十一、薄血膜疟原虫形态二十一、薄血膜疟原虫形态 恶性疟恶性疟大（雌）配子体大（雌）配子体形状大小形状大小：新月形，两端稍尖。：新月形，两端稍尖。胞浆胞浆： 深兰色深兰色。核核： 一个，较小，致一个，较小，致密，密， 深红色深红色位于中位于中央，央， 核周可见透明核周可见透明不

63、染不染 色带。色带。色素色素： 黑褐色黑褐色，密布于核，密布于核 的周围的周围 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十一、薄血膜疟原虫形态二十一、薄血膜疟原虫形态 恶性疟恶性疟小（雄）配子体小（雄）配子体形状大小形状大小：腊肠形，两端钝圆。：腊肠形，两端钝圆。胞浆胞浆： 浅兰色浅兰色或或淡紫红色淡紫红色。核核： 一个，较大，疏松，一个，较大，疏松， 位于中央，位于中央，浅红色浅红色， 核周可见不染色带。核周可见不染色带。色素色素： 黑褐色黑褐色，疏松地分，疏松地分 布于核周围。布于核周围。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十一、二十一、恶性疟配子体恶性疟配子体 肥西

64、县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十一、二十一、恶性疟配子体恶性疟配子体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十一、二十一、恶性疟配子体恶性疟配子体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十二、薄血膜中大（雌）配子体形态特征二十二、薄血膜中大（雌）配子体形态特征l间日疟原虫雌配子体间日疟原虫雌配子体l小于正常红细胞，圆形；小于正常红细胞，圆形；核小，致密，深红色，核小，致密，深红色，偏于一侧，胞浆深蓝色；偏于一侧，胞浆深蓝色；疟色素散在疟色素散在l恶性疟原虫雌配子体恶性疟原虫雌配子体l新月型，两端较尖；新月型，两端较尖；核小，致密，深红色，核小，致密，深红色，位

65、于中央；胞浆深蓝位于中央；胞浆深蓝色；疟色素块围于核色；疟色素块围于核周周 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十三、二十三、薄血膜中小（雌）配子体形态特征薄血膜中小（雌）配子体形态特征l间日疟原虫雄配子体间日疟原虫雄配子体l大于正常红细胞，圆大于正常红细胞，圆形；核大，疏松，浅形；核大，疏松，浅红色，多位于中央；红色，多位于中央；胞浆浅蓝色或淡红色；胞浆浅蓝色或淡红色；疟色素散在疟色素散在l恶性疟原虫雄配子体恶性疟原虫雄配子体l腊肠形，两端钝圆；腊肠形，两端钝圆；核大，疏松，淡红色，核大，疏松，淡红色，位于中央；胞浆浅蓝位于中央；胞浆浅蓝色或浅红色；疟色素色或浅红色；疟色素围于核

66、周围于核周 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十四、大配子体与大滋养体区别二十四、大配子体与大滋养体区别虫体大小虫体大小:几乎充满被寄生的红几乎充满被寄生的红细胞细胞l核核:一个，较大且致密，周一个，较大且致密，周围有一圈空白的不染色带围有一圈空白的不染色带l胞浆胞浆:边缘清楚，不含空泡边缘清楚，不含空泡l疟色素疟色素:颗粒较多较粗，均颗粒较多较粗，均匀散在匀散在l虫体大小虫体大小:不超过被寄生红不超过被寄生红细胞的细胞的3/4l核核:一个，延长呈带状，周一个，延长呈带状，周围无明显的不染色带围无明显的不染色带l浆浆:边缘不整齐，多有空泡边缘不整齐，多有空泡l疟色素疟色素:颗粒较

67、少较细，分颗粒较少较细，分布不均匀布不均匀 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十五、厚血膜中疟原虫的形态二十五、厚血膜中疟原虫的形态l厚血膜由于用血量较多，厚血膜由于用血量较多，涂制的血膜小，红细胞重涂制的血膜小，红细胞重叠且干燥慢，致使虫体皱叠且干燥慢，致使虫体皱缩，空泡消失，胞浆变形，缩，空泡消失，胞浆变形，其形态改变的程度与疟原其形态改变的程度与疟原虫运动的强弱、空泡有无虫运动的强弱、空泡有无和大小有关。各期疟原虫和大小有关。各期疟原虫在发育中，大小滋养体明在发育中，大小滋养体明显的阿米巴样运动，其他显的阿米巴样运动，其他期仅有轻微运动；大、小期仅有轻微运动；大、小滋养体含

68、明显空泡，裂殖滋养体含明显空泡，裂殖前期的空泡不明显或消失，前期的空泡不明显或消失，成熟裂殖体和配子体均无成熟裂殖体和配子体均无空泡空泡 。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十五、厚血膜中疟原虫的形态二十五、厚血膜中疟原虫的形态l在厚血膜中，各期在厚血膜中，各期疟原虫的体积都略疟原虫的体积都略为缩小，其中只有为缩小，其中只有大、小滋养体的形大、小滋养体的形态有较大改变，而态有较大改变，而裂殖体和配子体的裂殖体和配子体的形态则无明显变化。形态则无明显变化。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十六、厚血膜小滋养体二十六、厚血膜小滋养体 形态形态l小滋养体小滋养体 胞浆

69、呈环状胞浆呈环状或向核的一侧或两侧收或向核的一侧或两侧收缩，使环的中间断裂，缩，使环的中间断裂，或围绕核。间日疟原虫或围绕核。间日疟原虫的环较大，常呈分号的环较大，常呈分号“；”和感叹号和感叹号“！”状；状；而恶性疟原虫的环纤细，而恶性疟原虫的环纤细，常呈分号常呈分号“：”、飞鸟、飞鸟“.”.”、V V状和断环状和断环状。状。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十六、二十六、厚血膜恶性疟小滋养体厚血膜恶性疟小滋养体l恶性疟环状体在发恶性疟环状体在发育不同阶段，其个育不同阶段，其个体大小有很大变化。体大小有很大变化。注意粗环与间日疟注意粗环与间日疟环状体的区别。环状体的区别。 肥西

70、县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十七、厚血膜间日疟大滋养体 形态大滋养体大滋养体l间间日日疟疟大大滋滋养养体体呈呈阿阿米米巴巴样样运运动动，胞胞浆浆常常断断裂裂几几块块或或缩缩成成圆圆形形，核核和和疟疟色色素素均均被被包包在在胞胞浆浆之之中中，着着色色深深，只只隐隐约约可可见见红红色色的的核核和和黄黄绿绿色色的的疟疟色色素素。胞胞浆浆可可皱皱缩缩断断裂裂成成几几个个块块状状，大大小小不不一一，似似互互不不连连接接。核核位位于于胞胞浆浆之之中中或或外外边边。疟疟色色素素分分布布不不均均匀匀。有有些些仅仅见见胞胞浆浆和和疟疟色色素素而而核核看不清楚。看不清楚。 肥西县肥西县CDC慢病科

71、慢病科肥西疾控肥西疾控二十八、厚血膜恶性疟大滋养体形态大滋养体大滋养体l恶性疟原虫大滋恶性疟原虫大滋养体，与薄血膜养体，与薄血膜形态相似，常呈形态相似，常呈圆形，体小结实，圆形，体小结实，疟色素细小，金疟色素细小，金黄色，结成块状黄色，结成块状后，呈黑褐色后，呈黑褐色。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控二十九、厚血膜裂殖体 形态l裂殖体裂殖体 间日疟原虫、恶性疟原虫的裂殖体前间日疟原虫、恶性疟原虫的裂殖体前期及成熟殖体，除虫体略为缩小着色较深外，期及成熟殖体，除虫体略为缩小着色较深外，均与薄血膜相似。均与薄血膜相似。 间日疟间日疟裂殖体裂殖体恶性疟裂殖体恶性疟裂殖体 肥西县肥西县

72、CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十、厚血膜间日疟配子体三十、厚血膜间日疟配子体 形态形态小配子体小配子体大配子体大配子体l间日疟原虫的配子体呈间日疟原虫的配子体呈圆形或卵圆形，除虫体圆形或卵圆形，除虫体略缩小且着色深外，均略缩小且着色深外，均与薄血膜相似。间日疟与薄血膜相似。间日疟雄配子体，核大，疏松，雄配子体，核大，疏松，圆形或呈星状，胞浆较圆形或呈星状，胞浆较少，着色淡，疟色素颗少，着色淡，疟色素颗粒大，数量较多，散在粒大，数量较多，散在分布。雌配子体与圆形分布。雌配子体与圆形成熟的大滋养体相似，成熟的大滋养体相似，但配子体疟色素颗粒粗但配子体疟色素颗粒粗大，多而散在分布。大，多而散在

73、分布。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十一、厚血膜恶性疟配子体 形态小配子体小配子体大配子体大配子体l恶性疟原虫的配子体呈新月形或腊肠形，如血膜干燥较慢，则可缩成圆形，核居中，疟色素围在核周，外围一圈胞浆。此外，还可见配子体的胞浆部分或全部消失，只留下核和疟色素，或核和胞浆均消失，只留下一些疟色素。 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜间日疟原虫形态三十二、厚血膜间日疟原虫形态 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜间日疟原虫形态三十二、厚血膜间日疟原虫形态 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜间日疟原虫形

74、态三十二、厚血膜间日疟原虫形态 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜间日疟原虫形态三十二、厚血膜间日疟原虫形态 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜间日疟原虫形态三十二、厚血膜间日疟原虫形态 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜间日疟原虫形态三十二、厚血膜间日疟原虫形态 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜间日疟原虫形态三十二、厚血膜间日疟原虫形态间日疟环状体间日疟环状体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜间日疟原虫形态三十二、厚血膜间日疟原虫形态图图注注：本本片片上上、下

75、下、左左、右右各各有有一一个个疟疟原原虫虫。上上、右右、左左均均为为大大小小不不同同的的环环状状体体；下下为为大大滋滋养养体体，虫虫体体已已断断裂裂成成数数块块，但但可可见见有有薛薛氏氏点点的的红红细细胞胞残残骸骸间间日日疟疟 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜间日疟原虫形态三十二、厚血膜间日疟原虫形态本片中部有两个白细胞，在其左上方、左下方各有一个大滋养体；其右本片中部有两个白细胞，在其左上方、左下方各有一个大滋养体；其右上方有两个大滋养体，胞浆皆已绉缩成数块，但皆有红细胞残骸可见上方有两个大滋养体，胞浆皆已绉缩成数块，但皆有红细胞残骸可见间日疟间日疟 肥西县肥西县

76、CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜间日疟原虫形态三十二、厚血膜间日疟原虫形态虫体位于本片中部，胞浆皱缩为多块，色素聚集于虫体右虫体位于本片中部，胞浆皱缩为多块，色素聚集于虫体右上方；本虫上方为一个大滋养体上方；本虫上方为一个大滋养体滋养体滋养体裂殖体裂殖体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜恶性疟环状体三十二、厚血膜恶性疟环状体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控7 7个环状体散在于个环状体散在于5 5个白细胞之间，每个虫体可见一个红色的核和蓝色断裂个白细胞之间，每个虫体可见一个红色的核和蓝色断裂的或皱缩的原浆的或皱缩的原浆恶性疟恶性疟 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十二、厚血膜恶性疟配子体三十二、厚血膜恶性疟配子体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科肥西疾控肥西疾控三十三、厚血膜恶性疟配子体三十三、厚血膜恶性疟配子体人人人人体体体体四四四四种种种种疟疟疟疟原原原原虫虫虫虫红红红红内内内内期期期期各各各各期期期期形形形形态态态态鉴鉴鉴鉴别别别别 环状体环状体大滋养体大滋养体未成熟裂殖体未成熟裂殖体成熟裂殖体成熟裂殖体雄配子体雄配子体雌配子体雌配子体 肥西县肥西县CDC慢病科慢病科