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1、 荧光探针综述荧光探针综述李婷婷李婷婷 2010.12.101、荧光相关知识简介、荧光相关知识简介2、荧光探针综述、荧光探针综述3、花菁类荧光探针研究思路、花菁类荧光探针研究思路 当紫外或可见光照射到某些物质上时，这些物质就发射出波当紫外或可见光照射到某些物质上时，这些物质就发射出波长和强度各不相同的光线，停止照射光照射时，这种光线马长和强度各不相同的光线，停止照射光照射时，这种光线马上或逐渐消失，这就是荧光。上或逐渐消失，这就是荧光。1、荧光相关知识简介、荧光相关知识简介反映荧光特性的几个主要参数：反映荧光特性的几个主要参数：Stokes位移（位移（） = em- ex荧光强度（荧光强度（F
2、）F=0.23 FIbc F 荧光量子产率荧光量子产率F =发射的荧光光子数吸收激发光的光子数发射的荧光光子数吸收激发光的光子数 摩尔消光系数摩尔消光系数 I激发光的强度激发光的强度 b 检测池厚度检测池厚度 c 物质浓度物质浓度荧光寿命（荧光寿命（）2、荧光探针综述、荧光探针综述荧光探针是与氨基酸、多肽、蛋白质和荧光探针是与氨基酸、多肽、蛋白质和DNA等生等生物大分子结构以共价键或其他形式结合形成发荧物大分子结构以共价键或其他形式结合形成发荧光的络合物或聚集体的一类物质。光的络合物或聚集体的一类物质。近年来，荧光标记技术在生物技术领域得到了广近年来，荧光标记技术在生物技术领域得到了广泛而重要
3、的应用。泛而重要的应用。譬如，荧光探针在譬如，荧光探针在DNA自动测序，蛋白质检测，自动测序，蛋白质检测，抗体免疫分析，疾病诊断，抗癌药物分析等方面抗体免疫分析，疾病诊断，抗癌药物分析等方面应用广泛。应用广泛。2.1 分类分类 按照制备方法分：按照制备方法分：化学荧光探针化学荧光探针: 用化学方法合成用化学方法合成有机小分子荧光探针有机小分子荧光探针纳米荧光探针纳米荧光探针基因荧光探针基因荧光探针: 可遗传、由可遗传、由DNA编码、蛋白编码、蛋白质组成质组成荧光蛋白荧光蛋白(GFP、YFP、DsRed等等)2.2 有机小分子荧光探针有机小分子荧光探针 有机荧光试剂都含有荧光团，荧光团必须含有共
4、轭有机荧光试剂都含有荧光团，荧光团必须含有共轭大大键，共轭键，共轭键达到一定程度才能发射荧光，键达到一定程度才能发射荧光， 比如：比如： （CH=CH）n （n2）有机荧光试剂与结构的关系有机荧光试剂与结构的关系分子共轭体系大小对荧光的影响分子共轭体系大小对荧光的影响共轭大共轭大键共平面及其刚性的影响键共平面及其刚性的影响取代基对荧光的影响取代基对荧光的影响取代基的种类取代基的种类取代基的数量取代基的数量取代基的位置取代基的位置 有机小分子荧光探针在紫外有机小分子荧光探针在紫外-可见可见-近红外区近红外区有特征荧光，对环境变化非常敏感，按照有特征荧光，对环境变化非常敏感，按照荧光发射波长（荧光
5、发射波长（em ），分类如下：），分类如下：紫外可见区荧光探针紫外可见区荧光探针近红外区荧光探针近红外区荧光探针2.2.1 紫外可见区荧光探针紫外可见区荧光探针按照化学结构，主要有以下几类：按照化学结构，主要有以下几类：香豆素类香豆素类萘衍生物类萘衍生物类啡啶和吖啶类啡啶和吖啶类荧光素类荧光素类罗丹明类罗丹明类BODIPY类类芘类芘类2.2.2 近红外区荧光探针近红外区荧光探针噻嗪和噁嗪类噻嗪和噁嗪类酞菁类酞菁类方酸菁类方酸菁类TO 和和YO类类3、花菁类荧光探针研究思路、花菁类荧光探针研究思路3.1 结构及特点结构及特点近红外区荧光探针近红外区荧光探针结构特点是中间为多亚甲基桥，两端为吲哚、苯结构特点是中间为多亚甲基桥，两端为吲哚、苯并噻唑、苯并噁唑和苯并咪唑等。并噻唑、苯并噁唑和苯并咪唑等。 为了提高探针的稳定性，常将母体中的多亚甲基链为了提高探针的稳定性，常将母体中的多亚甲基链改变为方酸环、环戊烯、环己烯等刚性环结构。改变为方酸环、环戊烯、环己烯等刚性环结构。3.2 研究思路研究思路思路思路1：提高光稳定性和水溶性：提高光稳定性和水溶性思路思路2：制成荧光微球：制成荧光微球文献报道：文献报道：谢谢 谢谢
