《动物细胞融合与单体克隆抗体 高中生物人教选修 现代生物科技专题学习教案》由会员分享，可在线阅读，更多相关《动物细胞融合与单体克隆抗体 高中生物人教选修 现代生物科技专题学习教案（33页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、会计学1动物细胞融合与单体克隆抗体高中生物人动物细胞融合与单体克隆抗体高中生物人教选修教选修(xunxi)现代生物科技专题现代生物科技专题第一页，共33页。 如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交，如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以阳就可以(ky)挤出牛奶吗？挤出牛奶吗？动物细胞也能融合动物细胞也能融合(rngh)吗？吗？第1页/共32页第二页，共33页。第2页/共32页第三页，共33页。教学(jio xu)目标：了解动物细胞融合的原理、过了解动物细胞融合的原理、过程程(guchng)(guchng)和意义。和意义。 理解单
2、克隆抗体(kngt)制备的过程和应用。 (重难点)比较动物细胞融合与植物体细胞杂交技术的异同。第3页/共32页第四页，共33页。一、动物(dngw)细胞融合1.概念: 或 动物细胞结合(jih)形成 的过程,也称细胞杂交。2.诱导融合的方法(1)物理、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如聚乙二醇、电激法等。(2)生物方法： 。3.融合过程结束的标志: 融合。4.结果:形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为 。5.意义:克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。利用杂交瘤技术制造 。两个(lin )多个一个细胞灭活的病毒细胞核杂交细胞单克隆
3、抗体第4页/共32页第五页，共33页。1.传统(chuntng)抗体的获得(1)方法a.向动物体内反复注射某种 ,使动物产生抗体。b.从动物 中分离所需抗体。(2)特点:产量低、纯度低、特异性差。2.单克隆抗体的制备血清(xuqng)二、单克隆抗体(kngt)抗原(1)浆细胞特点：一种浆细胞只能产生 抗体，B淋巴细 胞在体外 (能/不能)无限增殖。 (2)骨髓瘤细胞特点： (3)杂交瘤细胞特点：浆细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞，既能 ，又能 。3.制备过程一种特异性不能无限增殖无限增殖产生特异性抗体第5页/共32页第六页，共33页。4单克隆抗体(kngt)优点： 、并可大量制备。5单克隆抗
4、体(kngt)的应用(1)作为诊断试剂，具有准确、 、简易、 的优点。(2)用于 和运载药物,如把抗癌细胞的单克隆抗体(kngt)跟 、化学药物或细胞毒素等相结合,制成“生物导弹”。特异性强、灵敏度高治疗(zhlio)疾病放射性同位素高效(o xio)快速思维激活 用单克隆抗体及相关物质制成的“生物导弹”中真正起治疗作用的物质是什么？抗体第6页/共32页第七页，共33页。A细胞细胞B细胞细胞人工诱导人工诱导1.动物(dngw)细胞融合的概念杂交(zjio)细胞 动物细胞融合（也称细胞杂交）动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞融合形成：是指两个或多个细胞融合形成一个一个(y )单核细
5、胞的过程。单核细胞的过程。融合后的细胞具有原来两个或者融合后的细胞具有原来两个或者多个细胞的遗传信息。多个细胞的遗传信息。一、动物细胞融合一、动物细胞融合第7页/共32页第八页，共33页。举例举例(j l)： 两个正在融合(rngh)的鸡血细胞 受精(shu jng)作用第8页/共32页第九页，共33页。 自学教材自学教材自学教材自学教材P52P52P52P52第第第第2 2 2 2、3 3 3 3段及识图段及识图段及识图段及识图2-232-232-232-23，思考下列，思考下列，思考下列，思考下列(xili)(xili)(xili)(xili)问题：问题：问题：问题：2. 2. 常用的诱导
6、因素有哪些常用的诱导因素有哪些? ? 动物细胞融合与植物动物细胞融合与植物原生质体融合所用的诱导方法有何不同原生质体融合所用的诱导方法有何不同? ?3.3.细胞融合技术与有性杂交细胞融合技术与有性杂交(yuxng zjio)(yuxng zjio)相比相比有哪些优点有哪些优点? ?1.2动物(dngw)细胞融合过程1.动物细胞融合依据的原理是什么?请你描述出细胞融合的过程。4.试从融合的原理、方法、诱导手段和用途方面,比较植物体细胞杂交和动物细胞融合。（导学案知识点一）（导学案知识点一）第9页/共32页第十页，共33页。1.2动物(dngw)细胞融合过程原理原理(yun(yunl)l)：A A
7、B B细胞膜的流动性细胞膜融合(rngh)、细胞质融合(rngh)和细胞核融合(rngh)。动物细胞核融合(rngh)发生在杂种细胞的有丝分裂过程中.细胞融合的过程包括：第10页/共32页第十一页，共33页。诱导诱导(yudo)(yudo)方法方法1.2动物(dngw)细胞融合过程电激电激灭活的病毒灭活的病毒(bngd)(bngd)PEGPEG诱导方法诱导方法诱导方法诱导方法诱导方法诱导方法诱导方法诱导方法诱导方法诱导方法灭活丧失感染性，灭活丧失感染性，保留融合活性。保留融合活性。第11页/共32页第十二页，共33页。用灭活的病毒诱导动物用灭活的病毒诱导动物(dngw)细胞融合过细胞融合过程程
8、细胞核细胞核病毒颗粒病毒颗粒细胞核细胞核灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子(fnz)(fnz)和脂质分子和脂质分子(fnz)(fnz)重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合 练习册练习册P41P41第12页/共32页第十三页，共33页。1.2动物(dngw)细胞融合过程A AB BABAB杂种杂种(zzhng)(zzhng)细细胞遗传物质有什么胞遗传物质有什么特点？特点？含两种生物含两种生物(shngw)(shngw)的遗传物质的遗传物质融合后的细胞进行有丝分裂，形融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞成完整的杂交细胞第13
9、页/共32页第十四页，共33页。A AB B第14页/共32页第十五页，共33页。比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合融合原理融合原理融合前处理融合前处理诱导融合的诱导融合的方法方法主要用途主要用途细胞(xbo)膜的流动性细胞(xbo)的全能性细胞膜的流动性 物理方法（离心(lxn)、振荡、电激） 化学方法（PEG）物理、化学(huxu)方法灭活的病毒获得杂种植株制备单克隆抗体纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶酶去除细去除细胞壁后诱导原生质体融胞壁后诱导原生质体融合合胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合1.3 比较动、植物细胞杂交技术练习册练习册P41P41第15页/共
10、32页第十六页，共33页。1.4动物细胞融合技术(jsh)的意义和应用突破有性杂交方法的局突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可限，使远缘杂交成为可能能最主要用途：制造单克最主要用途：制造单克隆抗体隆抗体第16页/共32页第十七页，共33页。强调：效应强调：效应B B淋巴细胞是淋巴细胞是能够产生抗体的能够产生抗体的B B淋巴细淋巴细胞，下文胞，下文(xiwn)(xiwn)将其简将其简称为称为B B淋巴细胞。淋巴细胞。抗体：能够与抗原(kngyun)发生特异性结合的免疫球蛋白。能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。二、单克隆抗体二、单克隆抗体(kngt)分化分化效应效应B B淋巴细胞淋巴细
11、胞记忆记忆B B淋巴细胞淋巴细胞B B淋巴细胞淋巴细胞第17页/共32页第十八页，共33页。抗体的传统抗体的传统(chuntng)生生产方法产方法抗原(kngyun) 反复注射反复注射(zhsh)(zhsh)动动物物从动物的血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵抗体的特异性差、灵敏度低。敏度低。 单克隆抗体第18页/共32页第十九页，共33页。 利用利用B B淋巴细胞产生淋巴细胞产生(chnshng)(chnshng)抗体的功抗体的功能。能。 利用骨髓瘤细胞无限增殖的特性。利用骨髓瘤细胞无限增殖的特性。 利用细胞融合的技术将
12、两种细胞融合获得利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有具有B B淋巴细胞和骨髓瘤细胞特性的杂交瘤细淋巴细胞和骨髓瘤细胞特性的杂交瘤细胞。胞。 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞。胞。第19页/共32页第二十页，共33页。一个一个B B淋巴细胞只分泌一种淋巴细胞只分泌一种(y zhn)(y zhn)特异特异性抗体性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞杂交瘤细胞(xbo)动物(dngw)细胞培养技术设计方案：动物细胞融合技术单克隆抗体 既能产生特异性抗体，既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞又能大量增殖的细胞19751975年英国科
13、学家年英国科学家米尔斯坦米尔斯坦和和科勒科勒的实验的实验第20页/共32页第二十一页，共33页。BBBB 、B B瘤瘤 、瘤瘤瘤瘤 （B B、瘤）、瘤）（一选）选择（一选）选择性培养基：只性培养基：只有杂交瘤细胞有杂交瘤细胞(xbo)才能存才能存活活获得产生获得产生(chnshng)(chnshng)相相应抗体的应抗体的B B细胞细胞（二选）克隆化（二选）克隆化培养和抗体检测：培养和抗体检测：选能产生选能产生(chnshng)所所需专一抗体的杂需专一抗体的杂交瘤细胞交瘤细胞体外培养体外培养小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点：杂交瘤细胞特点：既能产生特异性既能产生特异性抗体，又能大量抗体
14、，又能大量增殖。增殖。第21页/共32页第二十二页，共33页。2.制备(zhbi)单克隆抗体时,为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞?答案： 每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,但不能无限增殖;骨髓瘤细胞可大量快速增殖,却不能产生抗体。若将两种细胞融合在一起,既能产生一种特异性抗体又能快速增殖。3.在细胞融合的过程中共形成(xngchng)几种融合细胞? 共形成三种融合细胞:B淋巴细胞间的融合、B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合、骨髓瘤细胞间的融合。答案： 第22页/共32页第二十三页，共33页。4.请比较血清(xuqng)抗体与单克隆抗体的区别。答案(d n)： 名称名称产生产
15、生特点特点血清抗体血清抗体由由B B淋巴细胞淋巴细胞( (浆细胞浆细胞) )分泌分泌一般从血清中分离一般从血清中分离, ,产量低、产量低、纯度低、特异性差纯度低、特异性差单克隆抗单克隆抗体体由杂交瘤细胞由杂交瘤细胞分泌分泌特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高, ,能大能大量制备量制备第23页/共32页第二十四页，共33页。2.32.3单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体(kngt)(kngt)的应用的应用的应用的应用1、诊断、诊断(zhndun)试剂试剂最广泛应用最广泛应用准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点(yudin)：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。第
16、24页/共32页第二十五页，共33页。“生物导弹” 单克隆抗体药物 单抗导向(do xin)，药物为弹头2 2、治疗、治疗(zhlio)(zhlio)疾病和运载药物疾病和运载药物 主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物(yow)，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。第25页/共32页第二十六页，共33页。两个两个(lin )过程过程动物动物(dngw)细胞融细胞融合过程合过程单克隆抗体单克隆抗体(kngt)制制备过程备过程三个三个“一一”一个诱导细胞融合的新方法一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒灭活病毒一个新细胞杂交瘤细胞一个新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性一个优势单克
17、隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势强、灵敏度高的优势第26页/共32页第二十七页，共33页。第27页/共32页第二十八页，共33页。【例【例1 1】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到某种细胞融合，得到(d do)(d do)杂杂交细胞，经培养可产生大量的单交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（是（ ）A.A.经过免疫的经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞 C. C.经过经过免疫的免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞B.B.不经过免疫的不经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 D. D.不经不经过免疫的过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞
18、【例【例2 2】单克隆抗体是由下列哪种细】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的胞产生的 （ ）B B淋巴细胞淋巴细胞 B BT T淋巴细胞淋巴细胞 C C骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 D D杂交瘤细杂交瘤细胞胞AD第28页/共32页第二十九页，共33页。4下图是单克隆抗体的制备过程,请据图回答(hud)问题:(1)抗体的化学本质是 ,主要分布(fnb)于中,也分布(fnb)于组织液及外分泌液中。(2)若想通过过程获得所需的B淋巴细胞,应先对小鼠进行的处理是 ,该处理的实质是在小鼠体内发生 的过程。制备单克隆抗体的B淋巴细胞一般从中采集。球蛋白球蛋白血清血清(xuqng)(xuqng)体液免疫体液免疫注射注
19、射(相应的相应的)抗原抗原脾脾第29页/共32页第三十页，共33页。(3)过程除了采用诱导植物细胞(xbo)原生质体融合的方法外,还可以用 作为诱导剂。细胞(xbo)两两融合后,可出现种融合细胞(xbo)。(4)过程中杂交瘤细胞(xbo)从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的方式是。(5)过程要挑选出能产生 的细胞(xbo)群继续培养。灭活的病毒灭活的病毒(bngd)(bngd)3 3主动主动(zhdng)(zhdng)运输运输特定抗体特定抗体( (或所需抗体或所需抗体) )【解析】(1)抗体的化学本质为球蛋白,主要分布于血清中。(2)获得杂交瘤细胞所用的B淋巴细胞是能产生专一性抗体的浆细胞(效应B细
20、胞),需要用相应的抗原对小鼠进行免疫处理,使之发生体液免疫。(3)通过灭活的病毒进行诱导是动物细胞融合特有的促融方法。(4)葡萄糖、氨基酸进入杂交瘤细胞的方式为主动运输。(5)进行促融处理后,要经过两次筛选,选择出能产生特定抗体的细胞群继续培养。第30页/共32页第三十一页，共33页。第31页/共32页第三十二页，共33页。内容(nirng)总结会计学。动物细胞融合与单体克隆抗体高中生物人教选修现代生物科技专题。(1)物理、化学方法：与植物体细胞杂交(zjio)相同，如聚乙二醇、电激法等。动物细胞融合（也称细胞杂交(zjio)）：是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。自学教材P52第2、3段及识图2-23，思考下列问题：。杂交(zjio)瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。若将两种细胞融合在一起,既能产生一种特异性抗体又能快速增殖。灭活病毒。谢谢第三十三页，共33页。
