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1、、实验原理、目的要求、材料用具(、实验原理、目的要求、材料用具(P39P39)、方法步骤、方法步骤(1 1)根尖培养根尖培养(2 2)装片制作装片制作:解离解离漂洗漂洗染色染色制片制片(3 3)观察观察:低倍镜观察低倍镜观察(根据分生区细胞的特点找(根据分生区细胞的特点找到分生区细胞)到分生区细胞)高倍镜观察高倍镜观察(根据有丝分裂各期特(根据有丝分裂各期特点找出各期并仔细观察各期染色体变化的特点)点找出各期并仔细观察各期染色体变化的特点)(4 4)绘图绘图:绘制有丝分裂各期染色体变化简图:绘制有丝分裂各期染色体变化简图实验:观察植物细胞的有丝分裂实验:观察植物细胞的有丝分裂、实验成功的关键和
2、注意事项、实验成功的关键和注意事项(1)、实验成功的关键)、实验成功的关键取材取材:一定要剪取生长旺盛、一定要剪取生长旺盛、带有分生区带有分生区的根尖,的根尖,注意剪取的时间,一般在上午注意剪取的时间,一般在上午1010时至下午时至下午2 2时洋葱根时洋葱根尖有丝分裂活跃期。取材尖有丝分裂活跃期。取材长度为根尖的长度为根尖的2-3mm2-3mm。充分解离充分解离:解离液(解离液(15%15%的盐酸的盐酸95%95%的酒精溶液的酒精溶液1111),室温,),室温,3-53-5分钟分钟根尖酥软根尖酥软(时间要掌握(时间要掌握好,好,短则细胞没有完全分离短则细胞没有完全分离,在压片时难以形成单,在压
3、片时难以形成单层细胞;层细胞;长则可能使根尖烂掉长则可能使根尖烂掉)。)。压片充分压片充分:用镊子弄碎根尖并压片(不能错动)用镊子弄碎根尖并压片(不能错动)使组织细胞充分分散开使组织细胞充分分散开成为单层细胞成为单层细胞细胞在盖细胞在盖玻片下分散成云雾状玻片下分散成云雾状(2 2)、注意事项:)、注意事项:培养根尖时培养根尖时应置于应置于温暖温暖的地方,的地方,每天每天至少要至少要换换一次一次水水(由于水中微生物的活动和根细胞的活动,使水中代(由于水中微生物的活动和根细胞的活动,使水中代谢产物增多谢产物增多, ,水质受到污染水质受到污染, ,不利于根的生长,甚至烂根不利于根的生长,甚至烂根)。
4、)。剪取的根尖的长度不要超过剪取的根尖的长度不要超过3mm3mm。解离目的解离目的:使组织细胞分离开;杀死并固定细胞使组织细胞分离开;杀死并固定细胞。漂洗要充分漂洗要充分,其目的是保证下一步的染色效果。其目的是保证下一步的染色效果。染色染色:染液及浓度(质量浓度染液及浓度(质量浓度0.01g/mL0.01g/mL的龙胆紫或的龙胆紫或0.02g/mL0.02g/mL的醋酸洋红)要掌握好,染色时间为的醋酸洋红)要掌握好,染色时间为3 35 5分钟分钟染色体或染色质被碱性染料染成深色,染色体或染色质被碱性染料染成深色,以与细胞中其以与细胞中其它结构相区别,从而它结构相区别,从而便于观察便于观察。压片
5、时用力要恰当压片时用力要恰当。过重过猛可能将组织压碎、压过重过猛可能将组织压碎、压烂;过轻则烂;过轻则细胞细胞未未充分分散开充分分散开而重叠,二者都影响观而重叠,二者都影响观察。压片时拇指用力要垂直,避免盖玻片移动。察。压片时拇指用力要垂直,避免盖玻片移动。加盖玻片时,防止产生气泡。加盖玻片时,防止产生气泡。在观察装片时,可见在观察装片时,可见处于间期的细胞往往最多处于间期的细胞往往最多,这这是是由于在细胞周期中间期的时间最长由于在细胞周期中间期的时间最长。用高倍镜观察时,在一个视野中一般不会同时有各用高倍镜观察时,在一个视野中一般不会同时有各个时期的细胞,可通过移动装片去寻找,但要个时期的细
6、胞,可通过移动装片去寻找,但要注意玻注意玻片移动的方向(与物像的方向相反)片移动的方向(与物像的方向相反)细胞在解离时已被杀死细胞在解离时已被杀死,已永久地处于细胞周期中,已永久地处于细胞周期中的某个时期,所以的某个时期,所以不可能看到某个细胞连续分裂的过不可能看到某个细胞连续分裂的过程。程。注意:注意:三种浓度三种浓度:盐酸是盐酸是质量分数浓度质量分数浓度(15%15%)、酒精是)、酒精是体积分数体积分数(95%95%)、染液是)、染液是质量浓度质量浓度(0.01g/mL0.01g/mL的的龙胆紫或龙胆紫或0.02g/mL0.02g/mL的醋酸洋红)。的醋酸洋红)。三个时间三个时间:解离解离
7、3 35min5min、漂洗、漂洗10min10min、 染色染色3 35min5min。1 1、在观察植物细胞的有丝分裂实验中,制作装片的正确、在观察植物细胞的有丝分裂实验中,制作装片的正确顺序是(顺序是( )A A固定固定解离解离染色染色压片压片 B B解离解离漂洗漂洗染色染色压片压片C C漂洗漂洗解离解离染色染色压片压片 D D解离解离染色染色漂洗漂洗压片压片 2 2、在显微镜下观察洋葱根尖分生区细胞时,视野内看到、在显微镜下观察洋葱根尖分生区细胞时,视野内看到最多的细胞为(最多的细胞为( ) A A间期细胞间期细胞 B B前期细胞前期细胞 C C后期细胞后期细胞 D D末期细胞末期细胞
8、BA3 3右右图表示在低倍表示在低倍显微微镜视野中看到的野中看到的洋葱根尖部位被洋葱根尖部位被捣碎后的部分碎后的部分细胞。胞。(1 1)观察洋葱根尖细胞有丝分裂,需找)观察洋葱根尖细胞有丝分裂,需找到生长点,下图所示生长点的是到生长点,下图所示生长点的是,其特点是其特点是。(2 2)为了把要观察的部位移向视野正中央,应向)为了把要观察的部位移向视野正中央,应向方向方向移动装片。看清楚后,为了看清染色体需将转换器换到移动装片。看清楚后,为了看清染色体需将转换器换到。(3 3)若换上高倍镜后,物象模糊不清,此时应)若换上高倍镜后,物象模糊不清,此时应 。(4 4)显微镜下看到的生长点细胞,以处于)
9、显微镜下看到的生长点细胞,以处于 期的细胞期的细胞数目最多见。原因是数目最多见。原因是 。(5 5)制作洋葱根尖装片时,常有同学在视野里看到结构完)制作洋葱根尖装片时,常有同学在视野里看到结构完整的根尖,使实验无法进行,检查整的根尖,使实验无法进行,检查后后发现用药品均正确,分发现用药品均正确,分析实验失败的原因析实验失败的原因 。 细胞呈方形,排列紧密,有细胞正在分裂细胞呈方形,排列紧密,有细胞正在分裂右右高倍物镜下观察高倍物镜下观察用细准焦螺旋调节用细准焦螺旋调节间间解离时间不够或制作装片时没有加解离时间不够或制作装片时没有加载玻片,盖上玻片后用手轻压载玻片,盖上玻片后用手轻压由于在细胞周期中间期的时间最长由于在细胞周期中间期的时间最长