模块一 紫外-可见分光光度法 清远职业技术学院清远职业技术学院 生物制药技术专业生物制药技术专业 知识目标知识目标v教学目标教学目标能力目标能力目标 子项目子项目2 2：用紫外分光光度计对维生素：用紫外分光光度计对维生素C C的含量的进行测定的含量的进行测定 项目项目5：用紫外：用紫外-可见分光光度计对化妆品样品的维生素可见分光光度计对化妆品样品的维生素C和砷和砷含量进行分析评价含量进行分析评价 î 讨论讨论• 有色溶液对光选择性吸收，那么一些无色的有机溶液是有色溶液对光选择性吸收，那么一些无色的有机溶液是否对光没有吸收呢否对光没有吸收呢?•哪些物质对紫外线有吸收？请举例哪些物质对紫外线有吸收？请举例对紫外光区有吸收的无色透明物质都可测定对紫外光区有吸收的无色透明物质都可测定, ,能吸收紫外光能吸收紫外光的物质的物质: :具有具有ππ电子和共轭双键的化合物电子和共轭双键的化合物. . 紫外分光光度法的波长范围：紫外分光光度法的波长范围：200nm-400nm紫外吸收曲线绘制：紫外吸收曲线绘制：即用一束具有连续波长的紫外即用一束具有连续波长的紫外光照射一定浓度的样品溶液，光照射一定浓度的样品溶液，分别测量不同波长下溶液的吸分别测量不同波长下溶液的吸光度，即得到该化合物的紫外光度，即得到该化合物的紫外吸收曲线。
吸收曲线茴香醛紫外吸收曲线茴香醛紫外吸收曲线 紫外吸收曲线绘制紫外吸收曲线绘制问题问题:如何绘制苯的吸收曲线如何绘制苯的吸收曲线? î 紫外光谱产生的原因及其特点紫外光谱产生的原因及其特点p 产生原因：处于基态的电子因为吸收能量，电子在不同轨道间产生原因：处于基态的电子因为吸收能量，电子在不同轨道间发生跃迁发生跃迁分析特点：分析特点：1 1、可用来定性鉴定和结构分析、可用来定性鉴定和结构分析2 2、不需要加显色剂，测量简单方便、不需要加显色剂，测量简单方便3 3、灵敏度高，准确度、灵敏度高，准确度σ→σ*＞n→σ*＞π→π* ＞n→π*电子跃迁和吸收的光的波长有何关系？？电子跃迁和吸收的光的波长有何关系？？ î 紫外光谱常用术语紫外光谱常用术语p 生色团和助色团：产生特征吸收带的具有一个或多个不饱和键生色团和助色团：产生特征吸收带的具有一个或多个不饱和键和未共用电子对的基团和未共用电子对的基团p 红移和蓝移：由于取代基或溶剂的红移和蓝移：由于取代基或溶剂的影响造成化合物结构变化，使吸收峰影响造成化合物结构变化，使吸收峰向长波和短波方向移动的现象向长波和短波方向移动的现象p 增色效应和减色效应：由于有机化合物增色效应和减色效应：由于有机化合物的结构变化使吸收峰摩尔吸光系数增加的的结构变化使吸收峰摩尔吸光系数增加的现象。
现象p 溶剂效应：由于溶剂的极性不同引起某些化合物的吸收峰的波长、溶剂效应：由于溶剂的极性不同引起某些化合物的吸收峰的波长、强度和形状产生变化的现象强度和形状产生变化的现象 î 吸收带的类型吸收带的类型p K吸收带吸收带:π→π＊＊跃迁跃迁,吸收吸收波长波长λ217-280nmp R吸收带吸收带:n→π＊＊跃迁跃迁,吸收吸收波长波长λ>270nmp B吸收带吸收带: 苯环震动和苯环震动和π→π＊＊跃迁跃迁,吸收波长吸收波长λ230-270nmp E吸收带吸收带: →π＊＊跃迁跃迁,芳香芳香族化合物的特征吸收带族化合物的特征吸收带,吸吸收波长收波长λ204nm乙酰苯的紫外吸收光谱乙酰苯的紫外吸收光谱 思考思考1、庚烷、环己烷等烷烃在、庚烷、环己烷等烷烃在200-400nm内有无吸收？内有无吸收？2、甲苯、丁二烯在、甲苯、丁二烯在200-400nm内有无吸收？内有无吸收？3、乙醛、丙酮、乙酸乙酯在、乙醛、丙酮、乙酸乙酯在200-400nm内有无吸收？内有无吸收？4、如果环己烷中含有少量的杂质苯，其紫外吸收曲线会怎样、如果环己烷中含有少量的杂质苯，其紫外吸收曲线会怎样? 请大家归纳总结可见分光光度法和紫外分光光度法的联系和请大家归纳总结可见分光光度法和紫外分光光度法的联系和区别。
区别定义、条件、仪器、应用定义、条件、仪器、应用) 可见分光光度法可见分光光度法紫外分光光度法紫外分光光度法定义定义基于物质对可见光的吸收基于物质对可见光的吸收而对而对物质进行定性和定量分析物质进行定性和定量分析的一的一类方法类方法基于物质对紫外光的吸收基于物质对紫外光的吸收而对而对物质进行定性和定量分析物质进行定性和定量分析的一的一类方法类方法仪器仪器400-780nm,钨灯钨灯,玻璃吸玻璃吸收池收池200-400nm,氘灯氘灯,石英吸石英吸收池收池条件条件有色溶液；显色剂；控制有色溶液；显色剂；控制PH;绘制吸收曲线绘制吸收曲线,选择最大选择最大波长波长减小干扰减小干扰;合适的参比液合适的参比液绘制吸收曲线绘制吸收曲线,选择最大选择最大波长；合适的参比液波长；合适的参比液 紫外吸收光谱的应用紫外吸收光谱的应用1、定性鉴定、定性鉴定未知样品采用比较光谱法，标准物对照，或者标准图谱对照未知样品采用比较光谱法，标准物对照，或者标准图谱对照2、推测结构、推测结构推定化合物的共扼关系、部分骨架；区分化合物的构型；互变异构推定化合物的共扼关系、部分骨架；区分化合物的构型；互变异构体的鉴别；体的鉴别；3、化合物纯度的检测、化合物纯度的检测化合物在紫外区没有明显的吸收峰，而杂质在紫外区有较强的吸化合物在紫外区没有明显的吸收峰，而杂质在紫外区有较强的吸收，就可以紫外吸收曲线检测出该化合物所含的杂质。
收，就可以紫外吸收曲线检测出该化合物所含的杂质 如乙醇中杂质如乙醇中杂质苯测定检查苯测定检查 了解共轭程度、空间效应、氢键等；可对饱和与不饱和化了解共轭程度、空间效应、氢键等；可对饱和与不饱和化合物、异构体及构象进行判别合物、异构体及构象进行判别 紫外紫外—可见吸收光谱中有机物发色体系信息分析的一般规可见吸收光谱中有机物发色体系信息分析的一般规律是：律是： ⑴⑴若在若在200～～750nm波长范围内无吸收峰，则可能是直链烷波长范围内无吸收峰，则可能是直链烷烃、环烷烃、饱和脂肪族化合物或仅含一个双键的烯烃等烃、环烷烃、饱和脂肪族化合物或仅含一个双键的烯烃等 ⑵⑵若在若在270～～350nm波长范围内有低强度吸收峰波长范围内有低强度吸收峰(ε＝＝10～～100L·mol-1·cm-1),（（n→π跃迁），则可能含有一个简单非共跃迁），则可能含有一个简单非共轭且含有轭且含有n电子的生色团，如羰基电子的生色团，如羰基 î 有机紫外吸收光谱的解析有机紫外吸收光谱的解析 ⑶⑶若在若在2５５0～～300nm波长范围内有中等强度的吸收峰则可波长范围内有中等强度的吸收峰则可能含苯环。
能含苯环 ⑷⑷若在若在210～～250nm波长范围内有强吸收峰波长范围内有强吸收峰，则可能含有，则可能含有2个共轭双键；若在个共轭双键；若在260～～300nm波长范围内有强吸收峰，则波长范围内有强吸收峰，则说明该有机物含有说明该有机物含有3个或个或3个以上共轭双键个以上共轭双键 ⑸⑸若该有机物的吸收峰延伸至可见光区，则该有机物可能若该有机物的吸收峰延伸至可见光区，则该有机物可能是长链共轭或稠环化合物是长链共轭或稠环化合物。