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1、 第十二章第十二章RNA生物合成生物合成（RNA Biosynthesis） 大连医科大学生物化学与大连医科大学生物化学与分子生物学分子生物学教研室教研室崔秀云崔秀云本章要求本章要求：RNA聚合酶及转录的一般特点聚合酶及转录的一般特点真核生物的转录过程真核生物的转录过程转转录录的的转转录录过过程程：起起始始：（启启动动子子），延长，终止延长，终止真真核核生生物物转转录录后后的的加加工工：剪剪切切，填填加加及及修饰修饰原核生物的转录原核生物的转录过程过程RNA的复制的复制第一节第一节RNA聚合酶及聚合酶及RNA转录的转录的一般特点一般特点一、一、DNA指导的指导的RNA聚合酶聚合酶（DNAdir
2、ectedRNApolymerase，DDRP）是）是RNA合成中最主要的酶类合成中最主要的酶类,RNA聚合酶催化如下反应：聚合酶催化如下反应：1.双链双链DNA中的一条链作为中的一条链作为RNA合成的模板。合成的模板。2四种核糖核苷三磷酸（即四种核糖核苷三磷酸（即ATP、GTP、CTP和和UTP）是该酶的底物。）是该酶的底物。3需要二价金属离子，如需要二价金属离子，如Mg2+和和Mn2+。n(NTP)pppN(pN)n-1+(n-1)PPi DNARNA聚合酶聚合酶图图12-1RNA链中链中3,5-磷酸二酯键的形成磷酸二酯键的形成RNA的合成的方向为的合成的方向为53；聚合反应是通过；聚合反
3、应是通过核苷酸之间形成的核苷酸之间形成的3,5-磷酸二酯键，使核苷酸磷酸二酯键，使核苷酸链延长，同时释放出焦磷酸。链延长，同时释放出焦磷酸。表表12-1真核生物真核生物RNA聚合酶的种类和性质聚合酶的种类和性质种类种类I型型II型型III型型线粒体线粒体分子量分子量5.5105610561056.46.8104分布分布核仁核仁核质核质核质核质线粒体线粒体转录产物转录产物5.8S、mRNA前体前体tRNA前体前体线粒体线粒体RNA18S、snRNA5SrRNA28SrRNA前体前体对利福平对利福平敏感性敏感性不敏感不敏感不敏感不敏感不敏感不敏感敏感敏感对鹅膏蕈碱对鹅膏蕈碱的敏感性的敏感性不敏感不
4、敏感非常敏感非常敏感敏感敏感不敏感不敏感表表12-2大肠杆菌大肠杆菌RNA聚合酶组分及功能聚合酶组分及功能亚基亚基每分子酶中每分子酶中功能功能所含数目所含数目2控制转录的速度控制转录的速度1催化合成催化合成RNA1催化合成催化合成RNA1不清不清1辨认起始点辨认起始点二、二、RNA转录与转录与DNA复制异同点复制异同点RNA转录与转录与DNA复制相同点：复制相同点：RNA转录与转录与DNA复制的基本的化学反应复制的基本的化学反应是相同的，在聚合酶的催化下，核苷酸是相同的，在聚合酶的催化下，核苷酸之间形成磷酸二酯键，释放出焦磷酸；之间形成磷酸二酯键，释放出焦磷酸；核苷酸链的合成方向均为核苷酸链的
5、合成方向均为53；聚合反；聚合反应均需要应均需要DNA作模板。作模板。RNA转录与转录与DNA复制不同点：复制不同点：1.RNA转录是不对称的，即仅用转录是不对称的，即仅用DNA双链中双链中某一单链作为模板进行转录，被作为模板某一单链作为模板进行转录，被作为模板的那条的那条DNA单链称单链称模板链模板链（templatestrand）。与模板链互补的。与模板链互补的DNA单链为单链为编编码链码链(codingstrand)，即合成的，即合成的RNA碱基碱基序列与编码链相同，仅是序列与编码链相同，仅是U替代了替代了T。在。在特定的染色体中，有时基因的编码序列可特定的染色体中，有时基因的编码序列可
6、能位于另一条链中，这种现象称不对称转能位于另一条链中，这种现象称不对称转录。转录后录。转录后DNA模板成分无改变模板成分无改变。图图12-2RNA的不对称转录的不对称转录RNA转录与转录与DNA复制不同点：复制不同点：2.与与DNA聚合酶不同，聚合酶不同，RNA聚合酶不需要引聚合酶不需要引物，可利用物，可利用NTP作底物直接合成作底物直接合成RNA。3.RNA聚合酶没有核酸酶的活性，即没有聚合酶没有核酸酶的活性，即没有3到到5外切酶的活性，也没有外切酶的活性，也没有5到到3外切酶的活性，外切酶的活性，因此，在因此，在RNA合成过程不起较对作用。合成过程不起较对作用。4.对于一个基因组来讲，转录
7、只发生在一部分基对于一个基因组来讲，转录只发生在一部分基因，而且每一个基因的转录都受到相对独立的因，而且每一个基因的转录都受到相对独立的控制。控制。5.RNA合成后需要加工才能成为有功能的合成后需要加工才能成为有功能的RNA。真核生物转录过程除了真核生物转录过程除了RNA聚合酶参加外，聚合酶参加外，还需要一些蛋白质因子参与，这些因子能结还需要一些蛋白质因子参与，这些因子能结合到合到DNA的特殊序列并且与的特殊序列并且与RNA聚合酶结聚合酶结合，促进转录。一类通用合，促进转录。一类通用转录因子转录因子（generaltranscriptionfactors，TF）分别）分别能够与不同的能够与不同
8、的RNA聚合酶结合，形成转录聚合酶结合，形成转录复合体。复合体。第二节真核生物的转录过程第二节真核生物的转录过程通用转录因子通用转录因子分类分类根据根据RNA聚合酶的分类，聚合酶的分类，TF分为三类。分为三类。I型转录因子（型转录因子（transcriptionfactorI，TFl）能够促进能够促进RNA聚合酶聚合酶l转录。转录。Il型型转录因子（转录因子（TFll）促进促进RNA聚合酶聚合酶ll转录转录.包括包括TFIIA，B，D，E，F，H等。等。III型转录因子（型转录因子（TFIII）促进促进RNA聚合酶聚合酶III转录转录。转录过程可分为三个阶段：起始、延转录过程可分为三个阶段：起
9、始、延长和终止长和终止。 mRNA的合成是在核内由的合成是在核内由RNA聚合酶聚合酶催催化的。酵母化的。酵母RNA聚合酶聚合酶由由12个亚基组成。个亚基组成。其中最大亚基的羧基末端结构域其中最大亚基的羧基末端结构域（carboxyl-terminaldomain,CTD），富含），富含丝氨酸残基。丝氨酸残基。CTD的磷酸化和去磷酸化对的磷酸化和去磷酸化对酶的活性有重要影响。去磷酸化的酶的活性有重要影响。去磷酸化的CTD在在转录的起始中作用，在转录延长过程中转录的起始中作用，在转录延长过程中CTD的丝氨酸残基被磷酸化。的丝氨酸残基被磷酸化。mRNA的合的合成还需要有一系列转录因子成还需要有一系列
10、转录因子（TF）参）参加。加。一、一、mRNA的合成的合成（一）起始阶段（一）起始阶段（initiation）1.启动子启动子（promoter）是）是DNA上的特殊的序上的特殊的序列，它包括一些保守顺序，其中最重要的顺列，它包括一些保守顺序，其中最重要的顺序称序称TATA(box)盒子。盒子。RNA聚合酶和一些转聚合酶和一些转录因子结合此部位。录因子结合此部位。 二类启动子二类启动子图图12-3真核真核RNA聚合酶聚合酶II识别的识别的的启动子基序的启动子基序转录起始点以转录起始点以“+1”表示，在其上游的核苷酸序列以表示，在其上游的核苷酸序列以“ ”表示。启动子区框内表示与转录有关的共有顺
11、表示。启动子区框内表示与转录有关的共有顺序。序。BRE为为TFB识别元件，识别元件，Y表示表示C或或T。2转录因子转录因子II及转录前起始复合物的及转录前起始复合物的形成形成mRNA的合成是在核内由的合成是在核内由RNA聚合酶聚合酶II催化的，有一系列转录因子催化的，有一系列转录因子II（TFII）参加）参加。图图12-4mRNA转录前起始复合物转录前起始复合物RNA聚合酶聚合酶与其转录因子组成转录前起始复合物。按其与其转录因子组成转录前起始复合物。按其组成的结合顺序排列为：组成的结合顺序排列为：TFDABF-PolEH（Pol代表代表RNA聚合酶聚合酶）。覆盖）。覆盖DNA模板大约模板大约7
12、0bp.第一个磷酸二酯键的形成：第一个磷酸二酯键的形成：此附近此附近DNA双链被双链被RNA聚合酶解开约聚合酶解开约17个碱个碱基对，形成一个基对，形成一个转录泡转录泡（由闭合复合物转变（由闭合复合物转变成开放复合物）成开放复合物）。根据。根据DNA模板链上核苷酸模板链上核苷酸的序列，以的序列，以NTP为原料，按碱基互补原则在为原料，按碱基互补原则在RNA聚合酶催化下，形成第一个聚合酶催化下，形成第一个3,5-磷酸二磷酸二酯键。头一个核苷酸多为嘌呤核苷酸酯键。头一个核苷酸多为嘌呤核苷酸A或或G。（二）（二）RNA链的延长链的延长RNA聚合酶沿着聚合酶沿着DNA模板从模板从53方向移动并不断的解
13、开方向移动并不断的解开DNA双链，同时与双链，同时与DNA模板链序列相互补的核苷酸逐一模板链序列相互补的核苷酸逐一地进入反应体系，地进入反应体系，RNA聚合酶聚合酶II的的CTD被转录延长因子被转录延长因子（TEFb）进一步磷酸化，增强了聚合酶的活性。如此，）进一步磷酸化，增强了聚合酶的活性。如此，合成的合成的RNA逐渐延长（逐渐延长（elongation）（图）（图12-5）。）。RNA链延长时，新合成的部分暂时与模板链延长时，新合成的部分暂时与模板DNA形成一段形成一段RNA-DNA杂合双螺旋；随着杂合双螺旋；随着RNA链的延伸，链的延伸，RNA从从RNA-DNA双螺旋解开。双螺旋解开。D
14、NA双螺旋的解旋及重新恢复双双螺旋的解旋及重新恢复双螺旋是在螺旋是在DNA拓扑异构酶的作用下进行的。拓扑异构酶的作用下进行的。TFIIE和和TFIIH对于对于RNA链的延长不是必需的，它们从延长的复合链的延长不是必需的，它们从延长的复合物上解离下来，物上解离下来，TBP和和TFIIB保留在启动子上。保留在启动子上。图图12-5RNA链的延长链的延长RNA链的延长过程链的延长过程ARNA聚合酶聚合酶II在转录因子的辅助下，将双链在转录因子的辅助下，将双链DNA解开解开一段，形成转录泡。在聚合酶的作用下以一段，形成转录泡。在聚合酶的作用下以NTP为底物，与为底物，与模板链的碱基互补开始合成模板链的
15、碱基互补开始合成RNA。B.复制泡扩大，复制泡扩大，RNA聚合酶聚合酶II继续合成继续合成RNA，以，以U替代替代T，A-U、C-G配对。配对。C.随着随着RNA链的延长，链的延长，RNA聚合酶沿着模板链不断滑动，聚合酶沿着模板链不断滑动，在在DNA拓朴异构酶的作用下，下游不断解链，上游不断恢拓朴异构酶的作用下，下游不断解链，上游不断恢复双链，转录泡不断向下游移动，保持约复双链，转录泡不断向下游移动，保持约17bp大小，直到大小，直到遇到终止信号合成则停止。遇到终止信号合成则停止。DNA双螺旋重新形成。双螺旋重新形成。（三）转录的终止（三）转录的终止RNA聚合酶聚合酶参与整个转录过程，直到出现
16、多聚参与整个转录过程，直到出现多聚腺苷酸化信号为止。这个信号顺序是保守序列腺苷酸化信号为止。这个信号顺序是保守序列AAUAAA和其下游富含和其下游富含GU的序列的序列。这些序列称。这些序列称为转录终止的剪切信号序列（为转录终止的剪切信号序列（cleavagesignalsequence）。具体的剪切点位于）。具体的剪切点位于AAUAAA下游下游1030核苷酸处，距核苷酸处，距GU序列序列2040核苷酸。剪核苷酸。剪切信号序列可被核酸内切酶、多聚腺苷酸聚合酶切信号序列可被核酸内切酶、多聚腺苷酸聚合酶等所识别和结合，并切断此初级转录物。等所识别和结合，并切断此初级转录物。RNA聚合酶聚合酶被释放，
17、剪切点下游被被释放，剪切点下游被RNA聚合酶聚合酶合合成的多余成的多余RNA片段被水解。片段被水解。图图12-6mRNA转录的终止转录的终止RNA聚合酶聚合酶参与整个转录过程，并可超越转录终止参与整个转录过程，并可超越转录终止的剪切信号序列。剪切信号序列可被核酸内切酶等识的剪切信号序列。剪切信号序列可被核酸内切酶等识别，并在剪切点切断别，并在剪切点切断mRNA前体。前体。二二.rRNA的合成的合成 rRNA基因位于染色体的特殊区域称基因位于染色体的特殊区域称核仁组织者核仁组织者（nucleolarorganizer）。）。rRNA基基因属于重复序列，每个重复序列都作为一个转录因属于重复序列，每
18、个重复序列都作为一个转录单位单位。每一个转录单位包括每一个转录单位包括28S，5.8S及及18SrRNA。RNA聚合酶聚合酶I及转录因子及转录因子I（TFI）识别位于非转）识别位于非转录间隔区上的启动子序列。录间隔区上的启动子序列。图图12-7rRNA基因转录调控区基因转录调控区人类人类rRNA基因启动子属第一类启动子，由两个元件组成，基因启动子属第一类启动子，由两个元件组成，一个是核心元件，此元件包括转录起始点，存在富含一个是核心元件，此元件包括转录起始点，存在富含AT的保守序列，为转录所必须；另一个为上游启动子元件，的保守序列，为转录所必须；另一个为上游启动子元件，从从107开始，约开始，
19、约50bp长，此元件的作用是增强转录效率长，此元件的作用是增强转录效率一类启动子一类启动子 合成合成rRNA的转录前起始复合物比较简单，的转录前起始复合物比较简单，由启动子、由启动子、RNA聚合酶聚合酶和两个和两个TF组成。组成。一种一种TF是核心结合因子，称是核心结合因子，称TFB，（人，（人类是类是SL），具有募集），具有募集RNA聚合酶聚合酶到启动到启动子上的作用。另一种是上游结合因子子上的作用。另一种是上游结合因子（UBF），与启动子的上游起始元件），与启动子的上游起始元件（upstreampromoterelement,UPE）结合，）结合，协助协助TFB组装到启动子上。组装到启动子
20、上。rRNA的转录过程与的转录过程与mRNA相似相似 。rRNA的合成的合成核糖体的合成是细胞生长的限速因素。核糖体的合成是细胞生长的限速因素。rRNA的转录可以非常迅速，的转录可以非常迅速，RNA聚合酶聚合酶I的磷酸化可以特别激活的磷酸化可以特别激活rRNA迅速的转录，迅速的转录，例如在胚胎生长及肝的再生过程中。当生长例如在胚胎生长及肝的再生过程中。当生长不太迅速时，仅有一些不太迅速时，仅有一些rDNA重复序列被用重复序列被用于转录。核糖体的合成则减少。于转录。核糖体的合成则减少。三三5SRNA和和tRNA的合成的合成 5SrRNA和和tRNA基因的启动子位于被转基因的启动子位于被转录的序列
21、之中，称录的序列之中，称内启动子内启动子。所有的。所有的tRNA基因都有两个内启动子元件（图基因都有两个内启动子元件（图12-8）。）。5SrRNA合成的启动子与合成的启动子与tRNA的相似，两的相似，两个个TF与与RNA聚合酶聚合酶的结合顺序也相同。的结合顺序也相同。图图12-8tRNA基因的内启动子及基因的内启动子及RNA聚合酶聚合酶III与与其转录因子的结合其转录因子的结合转录因子转录因子IIIC（TFIIIC）首先与启动子的）首先与启动子的A和和B框框结合，然后结合，然后TFIIIC与与TFIIIB结合，最后结合，最后RNA聚合聚合酶酶III与与TFIII因子结合，并启动转录。因子结合
22、，并启动转录。三类启动子三类启动子第三节第三节真核生物真核生物RNA转录后的加工转录后的加工几乎所有真核生物几乎所有真核生物RNA转录的初级产物都需转录的初级产物都需经过一系列变化后才能生成具有生物活性的经过一系列变化后才能生成具有生物活性的RNA分子。这一系列变化过程称为转录后的分子。这一系列变化过程称为转录后的RNA加工加工(RNAprocessing)。加工过程包括核。加工过程包括核苷酸部分水解、连接反应、末端核苷酸苷酸部分水解、连接反应、末端核苷酸“戴戴帽帽”、“接尾接尾”，以及核苷的修饰。，以及核苷的修饰。一、信使一、信使RNA的加工的加工 （一）（一）mRNA前体通过剪接去除内含子
23、前体通过剪接去除内含子 真核生物真核生物mRNA的前体是的前体是核不均一核不均一RNA（heterogenousnuclearRNA,hnRNA），），其核苷酸顺序其核苷酸顺序有一些不出现有一些不出现在成熟的在成熟的mRNA中。中。此部分在转录产物的加工过程中被切除。被切除此部分在转录产物的加工过程中被切除。被切除的部分称为的部分称为内含子（内含子（intron）。内含子是不编码内含子是不编码蛋白质的核苷酸序列。末被切除的部分称蛋白质的核苷酸序列。末被切除的部分称外显子外显子(exon)，是编码蛋白质的部分序列是编码蛋白质的部分序列。由于内含子由于内含子是插入外显子之间，故内含子又称是插入外显
24、子之间，故内含子又称插入序列插入序列(interveningsequences)。 真核生物内含子碱基序列的共同特点是开始于真核生物内含子碱基序列的共同特点是开始于GU，结束，结束于于AG，分别称，分别称5剪接供体和剪接供体和3剪接受体。位于剪接受体。位于3剪接部位剪接部位上游上游20-50个碱基处有分支点个碱基处有分支点A。hnRNA中的内含子称为中的内含子称为剪接体内含子，这些内含子的切除是由称作剪接体内含子，这些内含子的切除是由称作剪接体剪接体（spliceosome）的蛋白复合物催化的。的蛋白复合物催化的。snRNP是一种特异的是一种特异的RNA-蛋白质复合体，含有多种蛋白质复合体，含
25、有多种小核小核RNA（smallnuclearRNA,snRNA）。snRNA的长度约的长度约100-200个核苷酸。各种个核苷酸。各种snRNA因富含尿嘧啶（因富含尿嘧啶（U）而被命）而被命名为名为U1、U2、U4、U5、U6等。等。snRNA参与剪接。剪切参与剪接。剪切后的几个外显子片段拼接起来形成一个完整的后的几个外显子片段拼接起来形成一个完整的mRNA(图图12-9，12-10)。切除的内含子很快被降解。切除的内含子很快被降解。图图12-9mRNA的拼接体的拼接体一些小核核蛋白（一些小核核蛋白（snRNP）与）与RNA前体形成拼接体前体形成拼接体（spliceosome）。）。U1RN
26、A和和U2RNA分别为分别为snRNP的组的组份。份。U1RNA的核苷酸序列与的核苷酸序列与mRNA前体内含子中的前体内含子中的GU顺序（称连接供体位点）相配对，顺序（称连接供体位点）相配对，U2RNA识别内含子识别内含子3端连接受体位点。拼接体利用端连接受体位点。拼接体利用ATP供能，除去内含子。供能，除去内含子。图图12-10mRNA前体内含子套环式剪接机制前体内含子套环式剪接机制mRNA前体内含子套索式剪接机制：前体内含子套索式剪接机制：hnRNA内含子剪接分两步转酯化反应。第一步，位内含子剪接分两步转酯化反应。第一步，位于内含子分支点的腺嘌呤核苷酸于内含子分支点的腺嘌呤核苷酸2-OH亲
27、核攻击连在外显亲核攻击连在外显子子1上的磷酸二酯键，使内含子与外显子上的磷酸二酯键，使内含子与外显子1之间的键断裂。之间的键断裂。生成游离的外显子生成游离的外显子1和套索状的内含子和套索状的内含子-外显子外显子2中间物中间物（内含子（内含子5端端G与分支点的与分支点的A以以2,5-磷酸二酯键相连）。磷酸二酯键相连）。第二步，外显子第二步，外显子1游离的游离的3-OH亲核攻击连在内含子和外亲核攻击连在内含子和外显子显子2之间的磷酸二酯键，将内含子以套环形式被切除，之间的磷酸二酯键，将内含子以套环形式被切除，两个外显子连接在一起。两个外显子连接在一起。图图12-11原肌球蛋白原肌球蛋白mRNA前体
28、及前体及不同的剪不同的剪接方式接方式剪接位点的突变也能引起拼接错误，导致翻剪接位点的突变也能引起拼接错误，导致翻译后的蛋白质结构及功能的改变。译后的蛋白质结构及功能的改变。如如-地中海贫血（地中海贫血（-thalassemia）。这是由于）。这是由于内含子剪接点的内含子剪接点的GU中的中的G突变成突变成A，剪接体，剪接体不能识别此序列，导致不能识别此序列，导致-珠蛋白异常，由此产珠蛋白异常，由此产生贫血。生贫血。图图12-12mRNA5帽端的结构帽端的结构5端第一个核苷酸是端第一个核苷酸是7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸甲基鸟嘌呤核苷三磷酸,第二个和第三个核苷酸的核糖第二个和第三个核苷酸的核糖2羟基甲
29、基化。羟基甲基化。（二）二）mRNA前体在前体在5末端加入末端加入“帽帽”结构结构加帽（加帽（capping）是一个多步过程，加帽过程需是一个多步过程，加帽过程需要两种酶参与，即由要两种酶参与，即由加帽酶（加帽酶（cappingenzyme）和甲基转移酶和甲基转移酶(methyltransferase)催化生成催化生成7-甲基鸟嘌呤核苷的帽结构。其过程首先是将甲基鸟嘌呤核苷的帽结构。其过程首先是将GTP与与mRNA的的5末端三磷酸缩合，然后此鸟嘌末端三磷酸缩合，然后此鸟嘌呤呤N-7甲基化。此外，甲基化。此外，mRNA的第一和第二位核的第一和第二位核苷酸苷酸2-OH也常常被甲基化（图也常常被甲基
30、化（图12-12）。）。5帽结帽结构可以使构可以使mRNA免遭核酸酶的水解，它帮助免遭核酸酶的水解，它帮助mRNA通过核膜孔进入胞浆，它也能与帽结合通过核膜孔进入胞浆，它也能与帽结合蛋白质复合体结合，并参与和核糖体的结合，蛋白质复合体结合，并参与和核糖体的结合，启动蛋白质的生物合成。启动蛋白质的生物合成。（三）（三）mRNA前体在前体在3末端多聚腺苷酸化末端多聚腺苷酸化mRNA前体首先在前体首先在AAUAAA信号下游大约信号下游大约1030个核个核苷酸处的剪切点处被切断。然后在苷酸处的剪切点处被切断。然后在多聚腺苷酸聚合酶多聚腺苷酸聚合酶（poly（A）polymerase）的催化下，逐一加入
31、腺苷）的催化下，逐一加入腺苷酸。多聚腺苷酸聚合酶催化的反应无需酸。多聚腺苷酸聚合酶催化的反应无需DNA模板。模板。RNA+nATPRNA-(AMP)n+nPPi(n=80250)mRNA的的polyA尾是一些特异蛋白质的结合部位，能尾是一些特异蛋白质的结合部位，能增加增加mRNA的稳定性，可以避免的稳定性，可以避免3-核酸外切酶的水解。核酸外切酶的水解。polyA与与polyA结合蛋白结合有助于蛋白质生物合成结合蛋白结合有助于蛋白质生物合成（见第十三章）。（见第十三章）。（四）（四）mRNA前体的修饰和编辑前体的修饰和编辑 所谓所谓修饰修饰包括包括mRNA分子核糖上分子核糖上2-羟基的甲羟基的
32、甲基化反应和嘌呤碱的甲基化反应。基化反应和嘌呤碱的甲基化反应。 所谓所谓编辑编辑是指在转录后对是指在转录后对mRNA序列中的碱序列中的碱基进行变换的过程。基进行变换的过程。 图图12-13载脂蛋白载脂蛋白BmRNA的编辑加工的编辑加工图图12-14mRNA的加工过程示意图的加工过程示意图二、核糖体二、核糖体RNA的加工的加工在哺乳动物细胞的核仁内，三种在哺乳动物细胞的核仁内，三种rRNA的合的合成过程均先形成成过程均先形成45S的共同前体。然后，该的共同前体。然后，该前体再断裂成相应的前体再断裂成相应的rRNA。图图12-15rRNA前体的转换前体的转换rRNA前体的加工是由多亚基的核蛋白复合
33、前体的加工是由多亚基的核蛋白复合物来完成的（图物来完成的（图12-16）。真核细胞的）。真核细胞的5SRNA基因与其它基因与其它rRNA基因相分开。基因相分开。转录后经过适当的加工，转录后经过适当的加工，28S、5.8S与相关与相关的蛋白质一起组成核糖体的大亚基。的蛋白质一起组成核糖体的大亚基。18S则则是小亚基的成分。是小亚基的成分。rRNA的成熟过程中也包的成熟过程中也包括碱基的甲基化修饰和部分核糖的括碱基的甲基化修饰和部分核糖的2-OH甲甲基化反应。甲基的供体是基化反应。甲基的供体是S-腺苷蛋氨酸。腺苷蛋氨酸。图图12-16rRNA的加工过程的加工过程rRNA的初级转录物是的初级转录物是
34、45S前前rRNA,经过一系列剪接、经过一系列剪接、修饰，最后成为三种修饰，最后成为三种rRNA三、转移三、转移RNA的加工的加工tRNA前身物通常包括一个以上前身物通常包括一个以上tRNA，通过核酸水解加工过程将它们分开。成通过核酸水解加工过程将它们分开。成熟的熟的tRNA比初级转录产物核苷酸数目少。比初级转录产物核苷酸数目少。加工过程包括插入顺序的去除和相当于加工过程包括插入顺序的去除和相当于外显子转录产物的拼接。外显子转录产物的拼接。tRNA3-末端的末端的CCA顺序也是转录后加上去的。一些稀顺序也是转录后加上去的。一些稀有碱基的修饰也在核内进行（图有碱基的修饰也在核内进行（图12-17
35、）。）。图图12-17tRNA的加工过程的加工过程.原核生物原核生物RNA聚合酶聚合酶是多亚基的酶。从大肠杆菌提是多亚基的酶。从大肠杆菌提取的取的RNA聚合酶有六个亚基组成，分子量为聚合酶有六个亚基组成，分子量为500KD。两个两个亚基，一个亚基，一个亚基，一个亚基，一个及及亚基组成亚基组成核心酶核心酶（coreenzyme），），核心酶（核心酶（2 ）能进行转录，）能进行转录，但是没有但是没有RNA合成的特异性。第六个蛋白质亚基称合成的特异性。第六个蛋白质亚基称因子，这六种亚基构成因子，这六种亚基构成全酶全酶（holoenzyme）,在体内在体内及体外只有全酶才能特异的合成及体外只有全酶才能
36、特异的合成RNA。因子参与识因子参与识别特异的启动子别特异的启动子。原核生物。原核生物RNA聚合酶能被利福平聚合酶能被利福平（rifampicin）所抑制。利福平与所抑制。利福平与亚基相结合，从亚基相结合，从而抑制酶的活性。而抑制酶的活性。第四节第四节原核生物的转录原核生物的转录图图12-18原核生物原核生物RNA聚合酶全酶的组成聚合酶全酶的组成（2 ）一、原核生物一、原核生物RNA转录的起始转录的起始图图12-19RNA聚合酶（含聚合酶（含 70）可识别的大肠杆菌）可识别的大肠杆菌的典型启动子的典型启动子原核生物原核生物启动子启动子区包括两个高度保守的序列。一个序列位区包括两个高度保守的序列
37、。一个序列位于转录起始点的上游约于转录起始点的上游约10bp，保守序列为，保守序列为T*A*TAAT*，此区由此区由D.Pribnow首先发现，所以也称首先发现，所以也称Pribnow盒。第二盒。第二个序列是位于个序列是位于-10上游的上游的-35序列，为序列，为T*T*G*ACA。在。在35区到区到10区之间的区之间的17个核苷酸也是高度保守的个核苷酸也是高度保守的图图12-20细菌转录的启动子区细菌转录的启动子区RNA转录的起始合成需要两个步骤：转录的起始合成需要两个步骤：第一步，第一步，因子辨认起始点，因子辨认起始点，RNA聚合酶全酶相对弱的结聚合酶全酶相对弱的结合到合到DNA启动子上，
38、形成一个启动子上，形成一个闭合的启动子复合物闭合的启动子复合物（closedpromotercomplex）。然后，）。然后，DNA双链在双链在 10区区部分解旋，全酶形成更紧密的部分解旋，全酶形成更紧密的开放启动子复合物开放启动子复合物(openpromotercomplex)。第二步，解链的第二步，解链的DNA与起始的三磷酸嘌呤核苷酸结合，开与起始的三磷酸嘌呤核苷酸结合，开始转录，然后形成第一个磷酸二酯键。始转录，然后形成第一个磷酸二酯键。RNA聚合酶向下游聚合酶向下游移动，合成继续。一旦起始的核苷酸链形成一小段移动，合成继续。一旦起始的核苷酸链形成一小段（8 9nt）后，）后，因子便从全
39、酶释放出来，核心酶进入延长因子便从全酶释放出来，核心酶进入延长阶段继续发挥其催化作用。阶段继续发挥其催化作用。图图12-21原核原核RNA的的转录过转录过程程二、原核生物二、原核生物RNA转录的延长阶段转录的延长阶段与与RNA聚合酶结合的聚合酶结合的DNA区域解旋区域解旋17 18bp，形成所谓的，形成所谓的转录泡（转录泡（transcriptionbubble）。转录泡随）。转录泡随RNA聚合酶向聚合酶向下游移动，下游的下游移动，下游的DNA双链不断地被解旋，上游已解旋的双链不断地被解旋，上游已解旋的DNA链又不断地复性。这样，链又不断地复性。这样，RNA聚合酶连续的合成新聚合酶连续的合成新
40、的磷酸二酯键，平均每秒钟合成的磷酸二酯键，平均每秒钟合成40个核苷酸。在这一过程个核苷酸。在这一过程中，中，DNA模板的碱基与正在延长的模板的碱基与正在延长的RNA链碱基配对，形链碱基配对，形成大约成大约8 9bp的的RNA/DNA杂化双链。原核生物没有核膜，杂化双链。原核生物没有核膜，RNA转录尚未完成，翻译就开始了。而真核生物有核膜，转录尚未完成，翻译就开始了。而真核生物有核膜，故转录和翻译不能同时进行。故转录和翻译不能同时进行。三、原核生物三、原核生物RNA转录的终止转录的终止终止分为终止分为因子依赖性及因子依赖性及因子不依赖性两类因子不依赖性两类1.因子不依赖性的终止其特征是因子不依赖
41、性的终止其特征是DNA模板上有特殊的序模板上有特殊的序列，转录产生的列，转录产生的RNA有两个特征，第一是转录产物含有有两个特征，第一是转录产物含有一段一段G-C丰富的发夹序列，能形成茎丰富的发夹序列，能形成茎-环的二级结构，环的二级结构，RNA聚合酶与茎聚合酶与茎-环结构作用后，即停止转录。第二是环结构作用后，即停止转录。第二是在发夹结构的紧后面有在发夹结构的紧后面有6-7U残基序列。几个残基序列。几个U与模板与模板DNA上的上的A碱基配对很不稳定，容易使新生成的碱基配对很不稳定，容易使新生成的RNA与与模板脱离模板脱离 图图12-22RNA转录的终止转录的终止( 因子不依赖性的因子不依赖性
42、的)A：DNA模板有特殊的序列，富含模板有特殊的序列，富含GC和和AT区，反转区，反转重复顺重复顺序（阴影所示）。序（阴影所示）。B：RNA转录物可形成茎、环结构。转录物可形成茎、环结构。图图12-23转录终止转录终止因子的作用因子的作用因子是由因子是由6个亚基组成的蛋白质，它具有个亚基组成的蛋白质，它具有ATP酶和解旋酶和解旋酶的活性，能将酶的活性，能将RNA-DNA杂交双链解开，使杂交双链解开，使RNA脱离脱离模板，从而终止模板，从而终止RNA转录。转录。2.因子依赖性转录终止因子依赖性转录终止 四、四、原核生物原核生物RNA转录后的加工转录后的加工原核生物原核生物RNA转录与翻译过程是偶
43、联的。即转录与翻译过程是偶联的。即mRNA在转录过程中即进行翻译。原核生物在转录过程中即进行翻译。原核生物mRNA初级转录物没有内含子，故没有剪接过程。核糖体初级转录物没有内含子，故没有剪接过程。核糖体RNA转录时即刻被剪切成转录时即刻被剪切成23S及及16SrRNA（图（图12-24）。）。tRNA也进行一些剪接及修饰。也进行一些剪接及修饰。图图12-24原核原核rRNA的加工的加工第五节第五节RNA依赖的依赖的RNA合成合成有有些些病病毒毒或或噬噬菌菌体体的的基基因因组组是是由由RNA而而不不是是由由DNA组组成成的的。病病毒毒进进入入宿宿主主细细胞胞后后，还还可可以以进进行行复复制制生生
44、成成RNA。催催化化此此种种RNA复复制制的的酶酶为为RNA复复制制酶酶，是是一一种种RNA指指导导的的RNA聚聚合合酶酶(RNAdirectedRNApolymerase)。RNA复复制制酶酶催催化化的的合合成成反反应应是是以以RNA为为模模板板，由由53方方向向进进行行RNA链链的的合合成成。反反应应机机理理与与DNA作作模模板板合合成成RNA反反应应相相似似。RNA复复制制酶酶仅仅对对特特异异的的病病毒毒RNA起起作作用用，对对宿宿主主细细胞胞的的RNA一一般般不不进进行行复复制制。为为此此当当病病毒毒侵侵入入宿宿主主细细胞胞后后，病病毒的毒的RNA能大量复制。能大量复制。Summary
45、 SynthesisofanRNAinvolvesonestrandofDNAasatemplateandthenucleotidesareincorporatedintothetranscriptbyRNApolymerase.Inthenucleiofeukaryoticcells,therearethreedistinctDNA-dependentRNApolymerase:RNApolymeraseI,II,andIII.TheseenzymessynthesizerRNA;mRNAandsnRNA;tRNAand5SRNAprecursors,respectively.Inproka
46、ryoticcells,thereisonekindofRNApolymerasethatisresponsivetosynthesizealloftheRNA.Transcriptionprocessincludesthreephase:initiation,elongationandtermination.TranscriptioninitiationrequiresspecializedDNAsequencescalledpromoters.TherecognitionofpromotersequencesinvolvestranscriptionfactionsandRNApolyme
47、rases.AnewlysynthesizedRNAmoleculeiscalledprimarytranscripts.RNAprocessingincludesremove,add,andmodifynucleotidesreactions.EukaryoticmRNAhaveappended5capandpoly(A)tail.TheintronsofhnRNAarepreciselyexcisedandtheirflankingexonsaresplicedtogethertoformmaturemRNA,somemRNAsaresubjecttoRNAediting.Theeukar
48、yotic18S,5.8Sand28SrRNAaretranscribedasa45sprecursorwhichareexcisedandmodifiedtoformthematurerRNAs.tRNAtranscriptsalsorequiretheexcisionofashortintronandenzymaticadditionofa3-terminalCCAtoformthematuretRNA.ProkaryoticmRNAtranscriptsrequirenoadditionalprocessing.TheprimarytranscriptofrRNAcontainsallt
49、hreerRNAstogetherwithsometRNAs.Theseareexcisedandtrimmed.TherRNAsarealsomodifiedbythemethylationofspecificnucleosides.ProkaryotictRNAareexcisedfromtheirprimarytranscriptsandtrimmed.ManyvirusescontainRNAasgeneticmaterial.RNA-dependentRNApolymerasesynthesizestheirgenomes.问问题题单单选选题题1.RNA的生物合成见于的生物合成见于R
50、NA复制和复制和A.半保留复制半保留复制B.不对称转录不对称转录C.逆转录逆转录D.翻译翻译E.半不连续复制半不连续复制2.转录需要的原料是转录需要的原料是:A.dNTPB.B.dNDPC.C.dNMPD.D.NTPE.E.NMP3.真核细胞转录发生于真核细胞转录发生于:A.细胞浆细胞浆B.内质网内质网C.细胞核细胞核D.线粒体线粒体E.核蛋白体核蛋白体4.转录需要转录需要:A.引物酶引物酶B.RDRPC.DDDPD.DDRPE.RDDP5.DNA模模板板链链为为5-ATTCAG-3,其其转转录录产物是产物是:A.5-GACTTA-3B.5-CTGAAT-3C.5-UAAGUC-3D.5-CU
51、GAAU-3E.5-TAAGTC-36.DNA复复制制和和转转录录过过程程有有许许多多相相同同点点,下下列描述哪项是错误的列描述哪项是错误的?A.转转录录以以DNA一一条条链链为为模模板板,而而以以DNA两两条链为模板进行复制条链为模板进行复制B.在这两个过程中合成均为在这两个过程中合成均为5-3方向方向C.复制的产物通常情况下大于转录的产物复制的产物通常情况下大于转录的产物D.两过程均需两过程均需RNA引物引物E.DNA聚合酶和聚合酶和RNA聚合酶均需要聚合酶均需要Mg2+7.关于启动子的描述关于启动子的描述,哪一项是正确的哪一项是正确的?A.mRNA开始被翻译的那段开始被翻译的那段DNA序
52、列序列B.开始转录生成开始转录生成mRNA的那段的那段DNA顺序顺序C.RNA聚合酶最初与聚合酶最初与DNA结合的那段结合的那段DNA顺序顺序D.开始生成的开始生成的mRNA顺序顺序E.调节基因结合的部位调节基因结合的部位8.mRNA的转录后加工的转录后加工不不包括包括:A.5端加入端加入7-甲基鸟苷三磷酸甲基鸟苷三磷酸B.3端加端加polyAC.切除内含子切除内含子,连接外显子连接外显子D.碱基修饰碱基修饰E.加加CCA尾尾9.原核细胞原核细胞RNA聚合酶由以下亚基组成聚合酶由以下亚基组成:A. B. B. C. C. D. D. E. E. 10原核原核RNA聚合酶聚合酶亚基亚基A.是核心
53、酶的一部分是核心酶的一部分B.与抗生素利福平相结合与抗生素利福平相结合C.被被-鹅膏蕈碱所抑制鹅膏蕈碱所抑制D.大多存在于转录的开始大多存在于转录的开始E.特异性识别启动子位点特异性识别启动子位点11.下下列列有有关关真真核核生生物物初初级级转转录录物物的的论论述述是是正确的，但除外正确的，但除外A.通常比有功能的通常比有功能的RNA长长B.许许多多核核苷苷酸酸序序列列不不存存在在于于有有功功能能的的RNA中中C.全部不含有修饰的碱基全部不含有修饰的碱基D.可能含有一个以上的可能含有一个以上的RNA信息信息E.含有含有TATA盒子盒子12.下列参与转移下列参与转移RNA的加工，的加工，但除外但
54、除外，A.在在5末端加入甲基化的鸟苷末端加入甲基化的鸟苷B.从从3及及5端均出去多余的碱基端均出去多余的碱基C.核苷酸序列特异的碱基甲基化核苷酸序列特异的碱基甲基化D.有时从反密码环去掉内含子有时从反密码环去掉内含子E.通过核苷酸转移酶的作用加入通过核苷酸转移酶的作用加入CCA顺序顺序多选题多选题1.转录需要以下原料转录需要以下原料A.CTPB.UTPC.TTPD.ATPE.GTP 2.转录的主要特点有转录的主要特点有A.不对称转录不对称转录B.半不连续转录半不连续转录C.不需要引物不需要引物D.合成方向为合成方向为5到到3E.真核细胞内含子不转录真核细胞内含子不转录 3.参与转录的酶与蛋白因
55、子有参与转录的酶与蛋白因子有A.DNA指导的指导的RNA聚合酶（聚合酶（DDRP）B.RNA指导的指导的RNA聚合酶聚合酶（RDRP）C.引物酶引物酶D.RNA连接酶连接酶E.转录因子（转录因子（TF） 4.抑制细菌抑制细菌RNA聚合酶的抗结核药物有聚合酶的抗结核药物有A.利福平利福平B.利福霉素利福霉素C.链霉素链霉素D.放线菌素放线菌素DE.红霉素红霉素 5.真核生物真核生物mRNA转录后加工过程有转录后加工过程有A.5端加端加m7G帽帽B.3端加多聚端加多聚A尾尾C.去除内含子去除内含子D.去掉启动子去掉启动子E.3端加端加CCA答答 案案1.答案答案B即即仅仅用用DNA双双链链中中某某
56、一一条条链链作作为为模模板板进进行行转转录录。有有时时是是这这条条链链的的某某区区段段，有有时时是是另另一一条条链链的的某某区区域域具具有有模模板板作作用用。通通常常将将模模板板链链称称为为有有(意意)义义链链，将将其其互互补补链链称称为为反反(意意)义义链链或或编编码码链链。这这种种转转录录称不对称转录。称不对称转录。2.答案答案DRNA聚聚合合酶酶需需要要以以四四种种核核苷苷三三磷磷酸酸（NTP），即即ATP，GTP，UTP和和CTP为为原原料料。RNA的的合合成成反反应应是是一一个个消消耗耗能能量量的的过过程程，释释放放出出焦焦磷磷酸酸驱驱动动反应的进行。反应的进行。单选题单选题3.答案
57、答案CRNA转转录录是是以以DNA为为模模板板，在在DNA指指导导的的RNA聚聚合合酶酶催催化化下下进进行行的的。DNA位位于于细细胞胞核核内内，故故真真核核细细胞胞的的转转录录发生在细胞核内。发生在细胞核内。4.答案答案DDNA指指 导导 的的 RNA聚聚 合合 酶酶 （ DNA directed RNApolymerase，DDRP）是）是RNA合成中最主要的酶类。合成中最主要的酶类。5.答案答案DRNA转转录录物物与与DNA模模板板的的碱碱基基互互补补，而而且且方方向向相相反反，U取取代代T与与A配配对对。DNA模模板板链链为为5-ATTCAG-3，其其转转录产物是录产物是:5-CUGA
58、AU-36.答案答案DDNA复复制制需需要要引引物物，RNA转转录录不不需需要要引引物物，故故这两个过程均需这两个过程均需RNA引物是错误的。引物是错误的。7.答案答案CRNA聚聚合合酶酶最最初初与与DNA结结合合的的那那段段DNA顺顺序序为为启启动动子子。启启动动子子（promoter）是是DNA上上的的特特殊殊的的序列。序列。8.答案答案EtRNA3-末末端端的的CCA顺顺序序是是转转录录后后加加上上去去的的。mRNA的的3末端是多聚末端是多聚A，而不包括加，而不包括加CCA尾。尾。9.答案答案B原核细胞原核细胞RNA聚合酶由聚合酶由六种亚基构成全酶六种亚基构成全酶（），），核心酶的组成为
59、（核心酶的组成为（2 ）10答案答案E原原核核RNA聚聚合合酶酶亚亚基基参参与与识识别别DNA模模板板上上特特异异的的启启动动子子，它它与与核核心心酶酶一一起起结结合合到到DNA模模板板的的起起始始位位置置上上。以以NTP为为原原料料，全全酶酶催催化化合合成成RNA合合成成。当当RNA链链延延长长到到大大约约10核核苷苷酸酸时时，因因子子从全酶上脱离，参与另外一次循环。从全酶上脱离，参与另外一次循环。 11.答案答案ETATA盒盒子子是是位位于于DNA上上启启动动子子区区的的特特殊殊序序列列，它不是真核生物它不是真核生物RNA初级转录物的组分。初级转录物的组分。12.答案答案A转转移移RNA的
60、的加加工工过过程程中中5末末端端要要切切除除一一些些核核苷苷酸酸，而而不不是是在在5末末端端加加入入甲甲基基化化的的鸟鸟苷苷。只只有有在在mRNA的加工中的加工中5端加入端加入甲基化的鸟苷。甲基化的鸟苷。多选题答案多选题答案1.答案答案A、B、D、E转录需要四种核苷三磷酸，即转录需要四种核苷三磷酸，即CTP，UTP，ATP和和GTP。2.答案答案A、C、D转录的主要特点有不对称转录，不需要引物，转录的主要特点有不对称转录，不需要引物，RNA合成合成的方向是的方向是5到到3。3.答案答案A、E参与参与RNA转录的酶是转录的酶是DDRP，转录因子（，转录因子（TF）协助）协助DDRP也参与转录过程
61、。也参与转录过程。4.答案答案A、B抑制细菌抑制细菌RNA聚合酶的抗结核药物有聚合酶的抗结核药物有A.利福平利福平B.利福霉素利福霉素5.答案答案A、B、C真核生物真核生物mRNA转录后加工过程有转录后加工过程有A.5端加端加m7G帽帽B.3端加多聚端加多聚A尾尾C.去除内含子去除内含子科学家的故事科学家的故事断裂基因的发现断裂基因的发现1977年年，在在冷冷泉泉港港会会议议上上，来来自自冷冷泉泉港港实实验验室室的的罗罗伯伯茨茨（RicharlJ.Roberts）和和麻麻省省理理工工学学院院癌癌症症研研究究中中心心的的夏夏普普（PilipA.sharp）报报道道了了他他们们关关于于真真核核生生
62、物物断断裂裂基基因因的的发发现现。因因为为这这一一发发现现，他他们们分分享享了了1993年年诺诺贝贝尔尔生生理理医医学学奖奖。断断裂裂基基因因的的发发现现揭揭示示了了真真核核生生物物不不同同于于原原核核生生物物。其其次次，这这一一过过程程体体现现了了生生物物进进化化中中的的自自然然选选择择机机制制的的美美妙妙。第第三三，它成为生物研究的一个重要生长点。它成为生物研究的一个重要生长点。英国科学家，因发英国科学家，因发现断裂基因于现断裂基因于1993年获诺贝尔奖年获诺贝尔奖罗伯茨（罗伯茨（RicharlJ.Roberts）1943年出生于年出生于英格兰。英格兰。1968年获得生物化年获得生物化学博
63、士学位。其后，他到美学博士学位。其后，他到美国哈佛大学做博士后。国哈佛大学做博士后。1972-1992年，他在冷泉港实验室年，他在冷泉港实验室工作。他对腺病毒工作。他对腺病毒Ad2进行进行了精细的研究。了精细的研究。1974年，他年，他们对这些片段进行测序。其们对这些片段进行测序。其中有一个小片段包含中有一个小片段包含Ad2mRNA的末端和一个启动子。的末端和一个启动子。正是对这个包含启动子片段正是对这个包含启动子片段的搜索，导致对的搜索，导致对RNA剪切及剪切及断裂基因的发现。断裂基因的发现。美国科学家，因美国科学家，因发现发现mRNA的剪的剪接于接于1993年获诺年获诺贝尔奖贝尔奖夏夏普普
64、于于（PilipA.sharp）1944年年出出生生在在美美国国肯肯塔塔基基州州。获获得得伊伊利利诺诺伊伊大大学学博博士士学学位位。他他先先后后在在加加州州理理工工学学院院的的戴戴维维森森和和冷冷泉泉港港实实验验室室watson(沃沃森森)手手下下做做过过博博士士后后。1974年年，他他来来到到麻麻省省理理工工学学院院的的癌癌症症研研究究中中心心。他他集集中中于于肿肿瘤瘤病病毒毒的的分分子子生生物物学学和和RNA剪剪接接研研究究。夏夏暜暜关关注注腺腺病病毒毒的的基基因因表表达达 过过 程程 。 他他 想想 看看 看看 hnRNA和和 mRNA有有什什么么不不同同。他他利利用用DNA和和RNA杂
65、杂交交的的方方法法找找到到了了二二者者的的不不同同。他他们们发发现现hnRNA明明显显长长于于mRNA.mRNA不不能能与与DNA全全部部杂杂交。他们获得了交。他们获得了1993年诺贝尔奖。年诺贝尔奖。霍霍利利1922年年出出生生于于美美国国。1942年年，他他以以优优异异成成绩绩毕毕业业于于伊伊利利诺诺斯斯大大学学。1947年年在在康康内内尔尔大大学获有机化学博士学位。学获有机化学博士学位。1964年，他受聘于康内尔大学年，他受聘于康内尔大学生物化学和分子生物学教授。生物化学和分子生物学教授。从从1957年起，他的研究方向便年起，他的研究方向便集中精力在细胞内蛋白质和核集中精力在细胞内蛋白质和核酸的分析及其合成方面。为了酸的分析及其合成方面。为了深入研究深入研究tRNA在蛋白质合成中在蛋白质合成中的作用，的作用，1963年霍利从年霍利从100磅酵磅酵母中提取出母中提取出65克克tRNA。利用各。利用各种分离技术，最终得到了高纯种分离技术，最终得到了高纯度的酵母丙氨酸度的酵母丙氨酸tRNA。并分析。并分析了全部化学结构。为此，了全部化学结构。为此，1968年，霍利获得诺贝尔奖。年，霍利获得诺贝尔奖。二二.转移核糖核酸的发转移核糖核酸的发现现霍利霍利
