EDC交联羧甲基甲壳素制备组织工程皮肤支架课件

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1、EDC交联羧甲基甲壳素 制备组织工程皮肤支架 演讲人:邢涛指导老师:吴奕光组织工程皮肤 组织工程皮肤是一种较为完善的组织工程化组织,是将真皮成纤维细胞与细胞外基质替代物混合制成人工皮肤,或单纯使用多孔的细胞外基质替代真皮植入创面,上面移植上皮细胞覆盖或待自身上皮覆盖取代病损的皮肤。在组织工程中,种子细胞、可降解支架材料和细胞生长调节因子并称为组织工程的三大基本要素,其中支架材料在组织工程研究中起到中心作用,它为特定的细胞提供细胞支撑作用并起到模板作用,引导组织再生和控制组织结构 。12 羧甲基甲壳素的制备及表征羧甲基甲壳素的制备及表征3组织工程支架的制备与表征组织工程支架的制备与表征 课题背景

2、及意义课题背景及意义4三维多孔支架生物学评价三维多孔支架生物学评价国外已经成功制备国外已经成功制备用于深度烧伤的修用于深度烧伤的修复支架,美国已经复支架,美国已经有多个人工皮肤产有多个人工皮肤产品,并占据了许多品,并占据了许多世界市场份额,但世界市场份额,但价格昂贵价格昂贵目前国内关于组织目前国内关于组织工程支架的研究尚工程支架的研究尚处于摸索阶段,尽处于摸索阶段,尽快开展组织工程支快开展组织工程支架的研究具有重要架的研究具有重要的理论与实际应用的理论与实际应用价值价值.课题背景课题背景本课题创新点和意义:一、首次用EDC交联无毒、生物相容性好、天然羧甲基甲壳素制备单一成分的皮肤组织工程支架.

3、二、合成的三维多孔支架无毒,生物相容性好,成本相对较低,具有很强的实际应用价值.京尼平交联京尼平交联辐射交联辐射交联EDC/DCC交联交联醛交联醛交联DTH交联交联环氧类交联环氧类交联环氧类交联环氧类交联组织工组织工组织工组织工程支架程支架程支架程支架支架的交联方式:支架的交联方式:方案:Second stepThird stepFirst step不同取代度的不同取代度的羧甲基甲壳素羧甲基甲壳素的制备的制备EDC交联支架交联支架及表征及表征支架的生物学支架的生物学评价评价羧甲基甲壳素的制备示意图:不同取代度的羧甲基甲壳素的制备:甲壳素:氯乙酸:氢氧化钠(摩尔比)碱液浓度碱化条件温度反应时间脱

4、乙酰度(DD)取代度(DS)1:3.7:8.2745%(w/w)抽真空0.5h后,在-20下12h606h0.47881.19801:3.7:945%(w/w)抽真空0.5h后,在-20下12h608h0.49690.94421:3.5:845%(w/w)抽真空0.5h后,在-20下12h706h0.53350.68861:1.8:7.645%(w/w)抽真空0.5h后,在-20下12h606h0.44020.56131:2.8:8.645%(w/w)抽真空0.5h后,在-20下12h606h0.44480.4273FTIR:a: CM-chitin; b: chitin; c: CMCHNa

5、元素分析和电位滴定:XRD:CM-chitin的DSC/TG:酸化的CM-chitin溶液NHS,MESEDC搅拌快速搅拌CM-chitin凝胶冷冻干燥多孔支架0.1MNa2HPO4洗涤24h去离子水洗涤72h冷冻干燥多孔支架羧甲基甲壳素支架的制备过程示意图:EDC/NHS与羧基和胺基的交联机理:不同浓度制备的交联支架的吸水率:交联程度与孔隙率的测定: 交联程度( ) 孔隙率( ) 2 83.26 96.82 2.5 88.94 96.33 3 87.16 95 .56 3.5 92.16 96.51 4 85.33 94.82 支架的交联程度和孔隙率:三种不同取代度支架的体外酶降解:SEM:未交联的支架的未交联的支架的SEMSEM交联后的支架的交联后的支架的SEMSEM生物学评价生物学评价 三维多孔支架三维多孔支架全身毒全身毒全身毒全身毒性急性性急性性急性性急性实验实验实验实验皮肤皮肤皮肤皮肤原原原原发发发发刺激刺激刺激刺激性实验性实验性实验性实验细胞毒细胞毒细胞毒细胞毒性试验性试验性试验性试验大鼠皮下大鼠皮下埋植实验埋植实验人工真皮人工真皮的构建的构建生物学实验部分:生物学实验部分:

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