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1、菊花的组织培养2、植物组织培养的应用：、植物组织培养的应用： （1）试管苗的快速繁殖）试管苗的快速繁殖（2）无病毒植物的培育）无病毒植物的培育（3）提取原料）提取原料（4）人工种子）人工种子（5）转基因植物的培育）转基因植物的培育（二）（二） 植物组织培养植物组织培养 植物组织培养 现现在在已已有有胡胡萝萝卜卜、芹芹菜菜、柑柑橘橘、咖咖啡啡、棉棉花花、玉玉米米、水水稻稻、橡橡胶胶等等几几十十种种植植物物的的人人工工种种子子试试种种成成功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。 （一）（一） 细胞的全能性细胞的全能性1、定义：、定义： 生物体的细胞具有使后代
2、细胞形成完整个生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。体的潜能的特性。 2、原理：原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个体的每一个活细胞活细胞都应该具有全能性。都应该具有全能性。 3、差异：、差异： （1） 受精卵的全能性受精卵的全能性最高最高 4、潜在全能性的原因：、潜在全能性的原因： 基因的选择性表达基因的选择性表达（2） 受精卵分化后的细胞中，体细胞的受精卵分化后的细胞中，体细胞的
3、全能性比生殖细胞的全能性比生殖细胞的低低。 5、例题辨析：、例题辨析： 例例1、下列有关细胞全能性的含义，正确的是：、下列有关细胞全能性的含义，正确的是：A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能 B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能部功能 C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能的潜能 D、 生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程生长、衰老、死亡的全过程 正确答案：正确答案： C 例例2
4、、在生物体内，细胞没有表现出全能性，、在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，是因为：而是分化为不同的组织、器官，是因为： 正确答案：正确答案： A、细胞丧失了全能性细胞丧失了全能性 B、基因的表达有选择性基因的表达有选择性 C、不同的细胞内基因不完全相同不同的细胞内基因不完全相同 B D、在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变化了变化 科学研究表明，处于离体状态的植物活细科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的作
5、用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。人工条件下实现的这一过程，就是植的植株。人工条件下实现的这一过程，就是植物组织培养。物组织培养。 （二）（二） 植物组织培养植物组织培养 1、植物组织培养过程：、植物组织培养过程： 离体的离体的植物植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞愈伤愈伤组织组织根根 芽芽植物体植物体脱脱分化分化再再分化分化脱脱分分化化 由由高度分化的植物器官、组织或高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。植物细胞的脱分化。 再再分分化化脱分化产生的愈伤组织继续脱分化产生的愈伤组织继续培养又可以重新分化成根或培养又可以重
6、新分化成根或芽等器官，这一过程称为植芽等器官，这一过程称为植物细胞的再分化。物细胞的再分化。外植体外植体: :用于离体培养的植物用于离体培养的植物器官或组织片段器官或组织片段2 2、影响植物组织培养的因素、影响植物组织培养的因素营养：营养：矿质元素：大量元素，微量元素矿质元素：大量元素，微量元素植物激素：植物激素：细胞分裂素，生长素细胞分裂素，生长素 环境条件：环境条件：适宜光照、温度、适宜光照、温度、 PHPH外外因因内内 因因 ：植物植物种类种类，同一种植物材料的，同一种植物材料的年龄年龄、保存时间的长短保存时间的长短 ，有有机机物物 ：蔗蔗糖糖、氨氨基基酸酸等等2 2、影响植物组织培养的
7、因素、影响植物组织培养的因素激素的影响激素的影响植物激素中生长素和细胞分裂素是启动植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，都会影响实验结果以及用量的比例等，都会影响实验结果按照不同的顺序使用这两类激素，按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果会得到不同的实验结果。使用顺序使用顺序实验结果实验结果先使用生长素，后先使用生长素，后使用细胞分裂素使用细胞分裂素有利于细胞分裂，有利于细胞分裂，但细胞但细胞不不分化分化先使用细胞分裂素，先使用细胞分
8、裂素，后使用生长素后使用生长素细胞细胞既既分裂分裂又又分化分化同时使用同时使用分化率分化率提高提高当同时使用这两类激素时，两者用量的比当同时使用这两类激素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。例影响植物细胞的发育方向。生长素用量比细胞分生长素用量比细胞分裂素用量裂素用量植物细胞的发育方向植物细胞的发育方向比值高时比值高时有利于有利于根根的分化、抑的分化、抑制芽的形成制芽的形成比值低时比值低时有利于有利于芽芽的分化、抑的分化、抑制根的形成制根的形成比值适中时比值适中时促进促进愈伤组织愈伤组织的生长的生长一、制备一、制备MS固体培养基固体培养基n1、配制各种母液。、配制各种母液。 配制母液时，
9、大量元素浓缩配制母液时，大量元素浓缩_，微量，微量元素浓缩元素浓缩 _ 。常温保存。激素类、。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以维生素类以及用量比较小的有机物可以按照按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。液的浓缩倍数，计算用量。实验操作过程10倍倍100倍倍2、配制培养基。、配制培养基。配制配制1LMS培养基时，先将称量好的培养基时，先将称量好的琼脂加入琼脂加入800mL蒸馏水，加热使琼脂蒸馏水，加热使琼脂熔化，然后加入蔗糖熔化，然后加入蔗糖30g,取配制好的
10、取配制好的母液，依次加入，然后定容至母液，依次加入，然后定容至1000mL。调节。调节pH值，然后分装到锥值，然后分装到锥形瓶中，每瓶分装形瓶中，每瓶分装50或或100mL3、灭菌。高压蒸汽灭菌、灭菌。高压蒸汽灭菌二、外植体消毒冲洗冲洗酒精酒精无菌水冲洗无菌水冲洗氯化汞氯化汞无菌水无菌水冲洗至少三次之上冲洗至少三次之上三、接种接种前，用体积分数接种前，用体积分数70%的酒精的酒精将工作将工作台擦拭，然后点燃酒精灯。所有的接种台擦拭，然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行，并且每次使操作必须在酒精灯旁进行，并且每次使用器械后，都要用火焰用器械后，都要用火焰灼烧灼烧灭菌。将外灭菌。将外植
11、体插入培养基中应注意方向，植体插入培养基中应注意方向，不要倒不要倒插插，每瓶接种，每瓶接种6-8块外植体。块外植体。四、培养接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养期间定期消毒，温度控制在培养期间定期消毒，温度控制在18-22，并且，并且每天每天用日光灯光照用日光灯光照12h五、移栽移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日，然后用清水清洗根部的培养基，长几日，然后用清水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩将幼苗移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环
12、境下生活一段时间，等幼苗长壮后等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中再移栽到土壤中六、栽培每天要观察记录幼苗的生长情况，适时每天要观察记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花浇水、施肥，直至开花此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物体的光能自养现其整个植物体的光能自养在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程是由细胞到一
13、个个体的演变过程1、高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组、高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？织培养过程中还需要提供有机物培养基？2、培养过程中为什么需要进行光照、培养过程中为什么需要进行光照思思 考考1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）灼烧）4、无菌箱中的培养；、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。3、在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的
14、？、在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？课题延伸课题延伸一般来说容易进行无性繁殖的植物，一般来说容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养。也容易进行组织培养。3、例题辨析：、例题辨析：例例1、 植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，植物组织培养形成的愈伤组织进行培养， 又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为：又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为： 正确答案：正确答案：CA、脱分化脱分化 B、去分化去分化 C、再分化再分化 D、脱分化或去分化脱分化或去分化例例2、下列不能作为植物组织培养的材料是：、下列不能作为植物组织培养的材料是：正确答案：正确答案：DA、秋海棠的叶秋海棠的叶 B、
15、马铃薯的块茎马铃薯的块茎C、成熟的花粉成熟的花粉 D、木质部中的导管细胞木质部中的导管细胞n练习练习n1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。n2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。况好，容易诱导脱分化和再分化。谢谢 谢谢 !
