《药物分析精品教学（吉林大学）第03章 药物检查new》由会员分享，可在线阅读，更多相关《药物分析精品教学（吉林大学）第03章 药物检查new（52页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*1药品品检验工作的根本程序工作的根本程序取取样鉴别检查含量含量测定定写出写出检验报告告第三章药物的杂质检查第一节杂质和杂质限量检查JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*3一、一、药物的物的纯度度药物的纯度是指药物的纯洁程度。杂质是在生产和贮藏过程中引入的，有的杂质没有治疗作用，有的影响疗效和稳定性，有的甚至危害人体健康。检查药物中的杂质控制其纯度是确保用药平安有效保证药品质量的一个重要方面。杂质检查收载在药物的“检查项下，包括检查方法。评价药物的纯度包括性状、理化常数、杂质
2、检查和含量测定等。JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*4药物的纯度要求药物的纯度指药物的纯洁程度杂质检查也称纯度检查杂质impurity无治疗作用，影响药物稳定性和疗效，对人体健康有害的物质。注意注意药物纯度与化学纯度的区别JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*5二、二、药物中的物中的杂质来源来源1.在生产过程中引入：反映物、中间体、副产物、有机溶剂、试剂等。例如盐酸普鲁卡因、在高温灭菌过程中可产生对氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇。2.在贮藏过程中产生：水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解、发霉等药物中的
3、杂质按来源可分为一般杂质和特殊杂质。按其性质可分为信号杂质和有害杂质JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*6种类：按来源分：按结构分：按性质分：无机杂质有机杂质一般杂质特殊杂质信号杂质有害杂质JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*7三、三、杂质的限量的限量检查杂质限量L=式中：杂质最大允许量=(浓度C体积V)标所以：L=CV/S100%杂质最大允许量供试品量（S）100%g,加水加水100ml,加加热热溶解后冷却，溶解后冷却，滤过滤过，取，取滤滤液液25ml，ml 每每1ml 相当相当于于10ug 的的Cl 制
4、成的制成的对对照液比照液比较较，不得更，不得更浓浓。问氯问氯化物的限量是多化物的限量是多少？少？C VL= 100% S10 52 25100 1000000100% =0.01%g，加水，加水23ml溶解后，加醋酸溶解后，加醋酸盐缓盐缓冲液冲液(pH3.5)2ml，依法，依法检查检查重重金属，含重金属不得金属，含重金属不得过过百万分之五。百万分之五。问应问应取取标标准准铅铅溶液多少溶液多少ml 每每1ml 相当于相当于10ug的的Pb ?L SV=C4 5 /1000000 10 1/1000000=2(ml)ml 1ugAs/ml 。应应取供取供试试品多少克？品多少克？ C VS=L2 1
5、 /1000000 0.0004%=0.5 (g)g，加，加盐盐酸溶液酸溶液 91000 使溶解成使溶解成5ml，加，加亚亚硝酸硝酸钠试钠试液液2ml，放置，放置15分分钟钟，加氨，加氨试试液液3ml，mg，加，加盐盐酸溶液酸溶液 9 1000 使溶解成使溶解成100用同用同一方法制成的一方法制成的对对照液比照液比较较，不得更深。，不得更深。问问限量限量为为多少？多少？C VL= 100% S2.0 /100 5.00.10 1000100% =0.1%第三章药物的杂质检查第二节一般杂质的检查方法JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*13一、氯化物检查
6、法供供试液：取液：取规定量供定量供试品，加水溶解成品，加水溶解成25ml25ml，加稀硝酸，加稀硝酸10ml10ml；如不澄清，；如不澄清，应过滤，置置50ml50ml纳氏比色官中，加水成氏比色官中，加水成40ml40ml标准液：准液：规定量定量标准准氯化化钠溶液，加稀硝溶液，加稀硝酸酸10ml10ml，置，置50ml50ml纳氏比色官中，加水成氏比色官中，加水成40ml40ml于供于供试液、液、标准液中，分准液中，分别参加硝酸参加硝酸银，用水稀用水稀释到到50ml50ml，在暗，在暗处放放5min5min，在黑色，在黑色背景下从上到下比背景下从上到下比较。JILIN UNIVERSITYCO
7、LLEGE OF LIFE SCIENCE*14二、硫酸盐检查法供供试液：取液：取规定量供定量供试品，加水溶解成品，加水溶解成40ml40ml，如不澄清，如不澄清，应过滤，置，置50ml50ml纳氏比氏比色官中，加稀色官中，加稀盐酸酸2ml2ml，摇匀。匀。标准液：准液：规定量定量标准硫酸准硫酸钾溶液，置溶液，置50ml50ml纳氏比色官中，加水成氏比色官中，加水成40ml40ml，加稀，加稀盐酸酸2ml2ml，摇匀。匀。于供于供试液、液、标准液中，分准液中，分别参加参加25%25%氯化化钡5ml5ml，用水稀，用水稀释到到50ml50ml，在暗，在暗处放放10min10min，在黑色背景下从
8、上到下比，在黑色背景下从上到下比较。JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*15三、铁盐检查法OHSCNNOHSCNHNO22+-+24424382242)(2)(2SOSONHFeOSNHFeHF e3 + 6 S C N-H+ F e ( S C N )63 -JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*16供供试液：取液：取规定量供定量供试品，加水溶解成品，加水溶解成25ml，置，置50ml纳氏比色氏比色官中，加稀官中，加稀盐酸酸4ml与与过硫酸硫酸铵50mg，加水稀，加水稀释成成35ml后，加后，加30%硫硫氰
9、酸酸铵3ml，再加水至，再加水至50ml，摇匀。匀。标准液：取准液：取规定量硫酸定量硫酸铁按，加水溶解成按，加水溶解成25ml，置，置50ml纳氏比氏比色官中，加稀色官中，加稀盐酸酸4ml与与过硫酸硫酸铵50mg，加水稀，加水稀释成成35ml后，后，加加30%硫硫氰酸酸铵3ml，再加水至，再加水至50ml，摇匀。匀。JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*17四、重金属检查法重金属是指在重金属是指在实验条件下能与条件下能与S2-作用作用显色的金属色的金属杂质，如，如银、铅、贡、铜等。主等。主要以要以铅为主。主。硫代乙硫代乙酰胺法胺法取各取各药品品项下下规
10、定量的供定量的供试品品, ,加醋酸加醋酸盐缓冲液冲液(pH3.5)2ml(pH3.5)2ml与水适量使成与水适量使成25ml,25ml,加加硫代乙硫代乙酰胺胺2ml,2ml,放置放置2min2min后后, ,与与标准准铅溶溶液一定量按同法制成的液一定量按同法制成的对照液所形成的棕照液所形成的棕色色进行比行比较。.CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2SCH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2SH2S+Pb2+PbS+H2S+Pb2+PbS+2H+2H+JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*19第二种方法将供将供试品品炽灼破坏后灼破坏后检查
11、或取或取炽灼残渣灼残渣项下下遗留的残渣留的残渣进行行检查用于在水、乙醇中用于在水、乙醇中难溶或能与重金属形成配位化合物而干溶或能与重金属形成配位化合物而干扰检查的有机的有机药物。物。温度影响温度影响较大，大，500600500600度度为宜。宜。必必须蒸干除尽氧化氮。否那么形成蒸干除尽氧化氮。否那么形成亚硝酸可氧化硫化硝酸可氧化硫化氢析出析出硫，影响比色。硫，影响比色。蒸干后加蒸干后加盐酸使成酸使成盐酸酸盐，再蒸干残留的，再蒸干残留的盐酸，加水溶解，酸，加水溶解，以氨以氨调pHpH至中性，加醋酸至中性，加醋酸盐缓冲液冲液(Ph3.5)(Ph3.5)微微热溶解，依法溶解，依法测量。量。对照液按同
12、法照液按同法处理，保持平行理，保持平行JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*20第三法在碱性条件下，以硫化钠为试液，适合于不溶于稀酸而溶于碱的药物。取供试品适量+NaOH+H2O溶解+Na2S试液，与一定量标准铅液同法处理后的颜色比较。第四法微孔滤膜过滤法，适合于重金属含量低的药物原理与一法同。显色后用50ml注射器转移至滤器中进行压滤，取下滤膜，枯燥，比较生成的斑点颜色。上盖上盖垫圈滤膜辅助滤板连接头滤器下部支撑器滤器下部支撑器JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*22w注意w供试品溶液有色：在对照管中加少量
13、稀焦糖溶液，也可加其他无干扰的指示剂等使两管色调一致。如果外消色法不能消除干扰，可采用内消色法。w供试品含有微量Fe3+：会氧化H2S析出S，可加VitC0.5-1.0g，使Fe3+Fe2+，同时在对照管中加等量的VitC，再依法测定。JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*23五、砷盐检查法砷砷盐是有毒的物是有毒的物质中国中国药典典20002000年版采用古蔡法和二年版采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸乙基二硫代氨基甲酸银法法Ag-DDCAg-DDC检查药物中的砷物中的砷盐。JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*
14、24第一法第一法 古蔡法古蔡法原理原理: :As3+3Zn+3H+AsH3+3Zn2+As3+3Zn+3H+AsH3+3Zn2+AsO33+3Zn+9H+AsH3+3Zn2+3H2OAsO33+3Zn+9H+AsH3+3Zn2+3H2OAsH3+3HgBr23HBr+As(HBr)3AsH3+3HgBr23HBr+As(HBr)3试纸砷斑砷斑与与2ml2ml标准砷溶液同法操作。准砷溶液同法操作。砷斑：砷斑：As(HgBr)3(As(HgBr)3(黄色黄色) )；AsH(HgBr)2(AsH(HgBr)2(棕色棕色) )；As2Hg3(As2Hg3(棕黑色棕黑色) )JILIN UNIVERSI
15、TYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*25第二法二乙基二硫代氨基甲酸银法简称Ag(DDC)法AsH3+6Ag(DDC)+3吡啶As(DDC)3+6Ag红色胶态银+3吡啶HDDC于510nm波长处测定吸收度，以Ag(DDC) 溶液为空白。古蔡法测砷瓶测砷管Hg(Br)试纸Pb(Ac)2棉花反应液玻璃试管Ag(DDC)Ag(DDC)法(KI, SnCl2)JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*27六、炽灼残渣Residueonignition炽灼残渣也称硫酸盐灰分-有机药物经炽灼炭化，加硫酸湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，于高温700800炽
16、灼灰化逸出，残留下非挥发性无机杂质金属氧化物或无机盐类成为硫酸盐。限量一般控制在0.1-0.2%,取样量为1-2gJILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*28注意遗留的炽灼残渣需留作重金属检查时，炽灼温度应控制在500-600C炽灼至恒重的第二次称重应在规定温度继续炽灼30分钟以上。mg。含氟药物对磁坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*29七、枯燥失重Lossondrying是指药物在规定的条件下经枯燥后所减失的重量。主要指水分，也包括其他挥发性杂质。测定方法有：1常压恒温枯燥法105
17、适用于受热较稳定的药物。将样品研细平铺于扁称量瓶中，厚度5mm。枯燥时间一般在到达指定温度后枯燥2-4h，称重，再枯燥，直至恒重。2 枯燥枯燥剂剂枯燥法枯燥法本法适用于受本法适用于受热热易分解或易易分解或易挥发挥发的的药药物。物。 将将样样品置枯燥器内枯燥品置枯燥器内枯燥至恒重。至恒重。常用枯燥常用枯燥剂剂有：有：硅胶、硫酸、无水硅胶、硫酸、无水氯氯化化钙钙、五氧化二磷等。、五氧化二磷等。其中五氧化二磷吸水效力最其中五氧化二磷吸水效力最强强，但，但P2O5吸水后吸水后产产生生H3PO4，假，假设样设样品品对对酸不酸不稳稳定，可能会受影响。定，可能会受影响。3 减减压压枯燥法枯燥法适用于适用于m
18、pKPa20mmHg。N通常分析一个药物时，枯燥失重与含量测定应同时进行，然后根据枯燥失重%，将样品折算成枯燥品，再计算含量。JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*324 热热分析法分析法 Thermal analysis 热热分析是指在程序控制温度下，分析是指在程序控制温度下，测测量物量物质质的物理、化学的物理、化学变变化与温化与温度关系的一度关系的一类类技技术术。物物质质在加在加热热 冷却冷却 过过程中，往往会脱水、程中，往往会脱水、挥发挥发或或发发生相生相变变 熔化、熔化、冷凝、升冷凝、升华华、沸、沸腾腾 及及发发生分解、氧化、复原等化学生分解、
19、氧化、复原等化学变变化，化，热热分析就是将分析就是将这这些些变变化作化作为为温度的函数来温度的函数来进进行研究和行研究和测测定。定。 常用方法有：常用方法有：JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*33八、水分八、水分测定法定法I2 +SO2+H2O=2HI+SO3(A-B)F供试品中水分含量= *100%WJILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*34九、有机溶剂残留量测定法用以检查药物在合成过程中引入的有害有机溶剂。ChP规定：二氧六环0.038%吡啶0.02%苯0.0002%甲苯0.089%氯仿0.006%二氯
20、甲烷0.06%环氧乙烷0.001%Ch.P 对残留有机溶剂采用GC法测定第一法-直接进样法内标法RSD5 %n=5外标法- RSD10 %n=5第二法-顶空进样法可免去样品萃取、浓集等步骤，并可防止非挥发性组分对色谱柱的污染，但要求待测物有足够的挥发性。10-20ml玻璃瓶（具有硅橡胶隔垫片盖）1-2g固体或1-5ml液体（平衡30-60min）恒温水浴样品顶空分析法headspacechromatography也称液上气相色谱分析，是指用气相色谱法来分析封闭系统中与液体或固体样品相平衡的气体的一种方法。JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*37第三节
21、特殊杂质检查方法色谱法TLC、HPLC、GC光谱法化学分析法物理分析法JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*第三节 特殊杂质的检查方法一、色谱分析法一、色谱分析法( (一一) )TLC法法比移值一般要求：颗粒直径一般要求：颗粒直径1040m1040m薄层涂布：无粘合剂薄层涂布：无粘合剂 含粘合剂：含粘合剂： 常参加常参加1015% 1015% 煅石膏煅石膏 (CaSO42H2O,180 (CaSO42H2O,180烘烘4h)4h) 或或0.50.7%0.50.7%羧甲基纤维素钠水溶液羧甲基纤维素钠水溶液JILIN UNIVERSITYCOLLEGE O
22、F LIFE SCIENCE*第三节 特殊杂质的检查方法 杂质对照法 适用于杂质并能够得到杂质对照品的情况 供试品溶液自身稀释法 适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况(仅限于二者的颜色相近或相同的情况) 杂质对照法与供试品溶液自身稀释法对照使用 对照药物法 无适宜的杂质对照品，或者是供试品显示的杂质斑点颜色和主成分颜色有差异，难以判断限量。JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*40TLC法杂质对照品法A供试品自身对照法上下浓度法B对照物质法C不允许有杂质斑点以方法灵敏度来控制杂质量 样对 样对 样对A B CJILIN UNIVERSITYCO
23、LLEGE OF LIFE SCIENCE*供试品供试品10l N-甲基哌嗪甲基哌嗪10l 50mg/ml 50g/ml 枸橼酸乙胺嗪I2蒸气显色JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*规定：如显杂质斑点，不得多于2个，其颜色与对照品主斑点相比较，不得更深地塞米松磷酸钠地塞米松磷酸钠 地塞米松地塞米松 20mg/ml JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*如有如有12个杂质点超过时，应个杂质点超过时，应不得深于不得深于0.01%对照液的主斑对照液的主斑点。点。其中有其中有1个杂质点应不深于个杂质点应不深于0.00
24、2%供试品的主斑点。供试品的主斑点。氨苯砜中检查“有关物质规定0.01%供试品供试品100g/ml1%供试品供试品10mg/ml0.002%供试品供试品20g/mlJILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*44vHPLCGC法v峰面积归一化法A杂总/A总100%=杂%A总=A杂1A杂2A样 杂1 杂2 样内标法校正因子测定液=对照品内标样品测定液=样品同样量内标分别进样，记录色谱图。校正因子F=A内/A对m对/m内m杂=FA杂/ A内m内杂质限量%=m杂/W样100%F=(A内/A对)(m对/m内)m杂=F(A杂/ A内)m内对照样品杂质限量%=m杂/W样
25、100%外标法m杂=A杂/ A对m对杂质限量%=m杂/W样100%杂质对照品样品JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*48不加校正因子的主成分自身对照法A杂总/A自C自/取样100%=杂质%样品测定液 1 2 3A杂总=A1A2A3自身对照液1%JILIN UNIVERSITYCOLLEGE OF LIFE SCIENCE*49第三章药物的杂质检查药物的物的纯度概念度概念 杂质的来源的来源(生生产和和贮藏藏)杂质的种的种类(一般和特殊一般和特殊)杂质的限量的限量检查(L = C V / S 100%)一般一般杂质检查(Cl,SO4,Fe,重金属重金属,
26、砷等砷等)特殊特殊杂质检查(TLC,HPLC,UV等等)AsO杂质原理原理反反应条件条件适宜适宜浓度范度范围标准溶液准溶液氯化物化物Cl+ Ag AgCl(白)稀硝酸5080g/50ml(标准液58ml)氯化钠(10g Cl/ml)硫酸硫酸盐SO42 + Ba2+ BaSO4(白)稀盐酸100500g/50ml(标准液15ml)硫酸钾(100g SO4/ml)铁Fe3+ + 6SCN Fe(SCN)63(红)盐酸1050g/50ml(标准液15ml)硫酸铁铵(10g Fe/ml)重金属重金属Pb2+ + S2 PbS （黄-黑）均匀混悬液醋酸盐缓冲液(pH3.5)1020/27ml(标准液12
27、ml)硝酸铅(10g Pb /ml)砷砷盐AsO33-+ 3Zn +9H+ AsH3+Zn2+AsH3+ 2HgBr2(试纸) 砷斑盐酸2g/反应液中(标准砷液2ml)三氧化二砷(1gAs/ml)杂质加酸的作用加酸的作用供供试品不澄明品不澄明供供试品有色品有色氯化物化物加速AgCl，产生好的乳浊，避免Ag2CO3, Ag2O, Ag3PO4的形成用含硝酸的水洗净滤纸中Cl后过滤供试液内消色法或外消色法硫酸硫酸盐防止BaCO3,Ba3(PO4)2 形成用含盐酸的水洗净滤纸中(SO4)2 后过滤供试液内消色法或外消色法铁防止Fe3+水解。Fe2+无反应，加过硫酸铵氧化Fe2+Fe3+标准液与样品液色调不一致，用正丁醇或异戊醇提取红色产物重金属重金属PbS完全。若酸度增大，呈色变浅，甚至不呈色。加稀焦糖液或用内消色法TLC法杂质对照品法供试品自身对照法上下浓度法对照药物法不允许有杂质斑点以方法灵敏度来控制杂质量HPLCGC法峰面积归一化法不加校正因子的主成分自身对照法加校正因子的主成分自身对照法内标法外标法
