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1、常见类型标本病原菌检验常见类型标本病原菌检验细菌标本类别细菌标本类别标本明细标本明细容器容器1 1 静脉血静脉血静脉血、静脉血、骨髓骨髓血液培养瓶血液培养瓶需氧瓶、厌氧瓶、儿童瓶需氧瓶、厌氧瓶、儿童瓶2 2 尿液尿液中段尿中段尿无菌尿杯无菌尿杯3 3 粪便粪便粘液脓血粘液脓血便便无菌粪便容器无菌粪便容器4 4 痰液痰液深咳晨痰深咳晨痰无菌痰盒无菌痰盒抽吸痰专用痰盒抽吸痰专用痰盒5 5 咽拭子咽拭子无菌拭子管无菌拭子管细菌标本类别细菌标本类别 标本明细标本明细容器容器6 6 穿刺液穿刺液（说明标本部（说明标本部位）位）胸水、腹水、关节胸水、腹水、关节腔液、引流液，脑腔液、引流液，脑脊液，深部脓液
2、、脊液，深部脓液、腹透液等各部位穿腹透液等各部位穿刺液刺液直接将注射器送检直接将注射器送检（涂片），注意肝（涂片），注意肝素抗凝素抗凝; ;床旁注射入血培养床旁注射入血培养瓶，瓶，需氧瓶、厌氧需氧瓶、厌氧瓶，如量少可用儿瓶，如量少可用儿童瓶。童瓶。细菌标本类别细菌标本类别标本明细标本明细容器容器7 7 分泌物分泌物（说明标本部（说明标本部位）位）7.17.1前列腺液、尿道、前列腺液、尿道、阴道、宫颈口等生殖阴道、宫颈口等生殖道分泌物道分泌物无菌拭子管无菌拭子管7.27.2伤口分泌物伤口分泌物无菌拭子管无菌拭子管7.37.3各部位组织块各部位组织块无菌拭子管（含无菌拭子管（含少量肉汤或生理少量肉
3、汤或生理盐水）；盐水）；如厌氧菌培养，如厌氧菌培养，则床旁接种厌氧则床旁接种厌氧培养基；培养基；7.47.4气管、食道等部气管、食道等部位刷片位刷片刷片盒刷片盒细菌标本类别细菌标本类别标本明细标本明细容器容器8 8 其他其他8.18.1气管插管气管插管 无菌拭子管无菌拭子管8.28.2动静脉插管、各动静脉插管、各部位引流管部位引流管无菌拭子管无菌拭子管8.38.3各种输液反应液各种输液反应液体，医院感染监测体，医院感染监测物品的无菌试验物品的无菌试验 直接送检相应物直接送检相应物品品8.48.4空气监测，物表空气监测，物表监测，医护人员手监测，医护人员手培养培养 到细菌室取培养到细菌室取培养皿
4、或含洗脱液的皿或含洗脱液的无菌试管无菌试管一、血液标本病原菌检验一、血液标本病原菌检验1、血液培养的意义、血液培养的意义2、血液培养的送检指征、血液培养的送检指征3、血液培养的培养瓶、血液培养的培养瓶4、血液培养的标本采集、血液培养的标本采集5、血液培养的结果分级报告、血液培养的结果分级报告1、血液培养的意义、血液培养的意义目前我国社会老龄化日趋严重，目前我国社会老龄化日趋严重，慢性病及恶性肿瘤、器官移植、爱滋病和结核病病慢性病及恶性肿瘤、器官移植、爱滋病和结核病病人不断增多，人不断增多，侵袭性诊疗技术广泛应用，侵袭性诊疗技术广泛应用，败血症发病率不断增加，败血症病死率败血症发病率不断增加，败
5、血症病死率30%30%以上；以上；早期病原学诊断和合理用药，明显降低病死率。早期病原学诊断和合理用药，明显降低病死率。血液培养的意义血液培养的意义2、血液培养的送检指征、血液培养的送检指征血液培养的送检指征血液培养的送检指征发热发热38,38,或低温或低温36101010109 9/L/L，“核左移核左移”白细胞增多；白细胞增多；粒细胞减少，成熟的多核白细胞粒细胞减少，成熟的多核白细胞19090次次/ /分；分；呼吸频率呼吸频率2020次次/ /分；分；血液培养的送检指征血液培养的送检指征二氧化碳分压二氧化碳分压32mmHg32mmHg；昏迷；多器官衰竭；昏迷；多器官衰竭；休克，寒颤，僵直；休
6、克，寒颤，僵直；严严重重的的局局部部感感染染( (脑脑膜膜炎炎，心心内内膜膜炎炎，肺肺炎炎，肾肾盂肾炎，腹部术后感染等盂肾炎，腹部术后感染等) )；低血压或高血压；低血压或高血压；C C反应蛋白或降钙素原升高。反应蛋白或降钙素原升高。3、血液培养的培养瓶、血液培养的培养瓶需氧瓶，需氧瓶，中和抗生素的树脂瓶中和抗生素的树脂瓶帽子和标签纸左上方为灰色，帽子和标签纸左上方为灰色，“PLUS+Aerobic/FPLUS+Aerobic/F” ，血液量血液量3-10ml 3-10ml ，8-10ml8-10ml最佳最佳, ,穿穿刺刺液液、脓脓液液等等标标本本也也可可用用血血培培养养瓶。瓶。BD BACT
7、ECBD BACTECTMTM Resin Resin树脂技术树脂技术CHCHCH2CH2CH CH2CHCH2CH2CHCH2CHCHCH2CH2CHCH2SO3- H+SO3- H+阳离子交换树脂阳离子交换树脂多价吸附树脂多价吸附树脂树脂包含有非离子树脂和阳离子树脂包含有非离子树脂和阳离子交换树脂，能中和患者血液中可交换树脂，能中和患者血液中可能存在的各种抗菌药物和其它潜能存在的各种抗菌药物和其它潜在抑制细菌生长的物质。在抑制细菌生长的物质。有助于溶解血细胞，以便释放被有助于溶解血细胞，以便释放被吞噬的细菌，使其更为快速生长。吞噬的细菌，使其更为快速生长。为细菌提供生长中心为细菌提供生长中
8、心，提高生长，提高生长速度，提高检出率，一个速度，提高检出率，一个BACTECBACTEC血培养瓶的树脂作用表面积血培养瓶的树脂作用表面积=5=5个个标准足球场的面积标准足球场的面积。厌氧瓶，厌氧瓶，提高兼性厌氧菌检出率提高兼性厌氧菌检出率帽子和标签纸左上方为黄色，帽子和标签纸左上方为黄色，“Standard Anaerobic/FStandard Anaerobic/F”，血液量血液量3-10ml3-10ml，8-10ml8-10ml最佳，最佳，不不仅仅用用于于厌厌氧氧菌菌培培养养，由由于于营营养养丰丰富富，还还可可以以大大大大提提高高兼兼性性厌氧菌的检出率；厌氧菌的检出率；穿穿刺刺液液或或
9、中中段段尿尿等等厌厌氧氧菌菌培培养养也可用厌氧血培养瓶。也可用厌氧血培养瓶。 70727072份标本，同时需氧瓶和厌氧瓶血培养；份标本，同时需氧瓶和厌氧瓶血培养；640640份阳性，份阳性，阳性率阳性率9%9%；需氧瓶和厌氧瓶同时阳性，需氧瓶和厌氧瓶同时阳性，352352份，占份，占55%55%；仅需氧瓶阳性，而厌氧瓶阴性，仅需氧瓶阳性，而厌氧瓶阴性，166166份，占份，占26%26%；如仅用单瓶如仅用单瓶需氧瓶，需氧瓶，阳性合计，阳性合计，518518份，占份，占81%81%；仅仅厌氧瓶厌氧瓶阳性，而需氧瓶阴性，阳性，而需氧瓶阴性，122122份，占份，占19%19%；所以强调每次采血所以
10、强调每次采血“双瓶双瓶”（需氧瓶和厌氧瓶）。（需氧瓶和厌氧瓶）。Khanna P. Eur J Clinical Microbiol Infect Dis, 2001,20:217-219厌氧瓶提高血培养阳性率厌氧瓶提高血培养阳性率20%20%以上以上儿童瓶，儿童瓶，中和抗生素，粉红色帽中和抗生素，粉红色帽帽子和标签纸左上方为粉红色，帽子和标签纸左上方为粉红色，“PEDS PLUS/FPEDS PLUS/F”, , 血液量血液量1-3ml1-3ml。 4、血液培养的标本采集、血液培养的标本采集采采血血前前先先在在培培养养瓶瓶标标签签纸纸左左侧侧空空白白处处（箭箭头头所所指指处处）填填写写抽抽血
11、血时时间间和和病病人人科科别别、床号和姓名；床号和姓名；不不要要在在培培养养瓶瓶条条形形码码上上涂涂写，以免影响扫描。写，以免影响扫描。注注射射器器采采血血后后，将将血血培培养养瓶瓶帽帽子子揭揭下下，橡橡皮皮由由金金属属皮（围脖）固定于瓶上；皮（围脖）固定于瓶上；将将橡橡皮皮塞塞用用70%70%酒酒精精消消毒毒，注注射射器器针针头头刺刺穿穿橡橡皮皮塞塞将将血血注注入入培培养养瓶瓶内内，立立即即颠颠倒混匀，防止凝固；倒混匀，防止凝固；最好用真空采血针；最好用真空采血针；橡皮塞裸露即可。橡皮塞裸露即可。最好在抗生素使用前采集，最好在抗生素使用前采集，若若已已用用抗抗菌菌药药须须，则则尽尽量量避避开
12、开血血药药浓浓度度的的高高峰峰期期，最好在下次用药前。最好在下次用药前。血液标本采集时间血液标本采集时间血液标本采集时间血液标本采集时间建议在病人发热初期（寒战开始）至高峰期采集；建议在病人发热初期（寒战开始）至高峰期采集；根据病人发热情况，在根据病人发热情况，在24h24h内采集内采集2-32-3次标本。次标本。血液标本采集时间血液标本采集时间最佳方案：每天最佳方案：每天“2-32-3次次”，每次，每次“2 2套套”，每套，每套“2 2瓶瓶”。也称也称“双套双套”“双瓶双瓶”“双套双套”要求每套要求每套不同穿刺点不同穿刺点采血，提高阳性率、采血，提高阳性率、区分病原菌和污染菌。区分病原菌和污
13、染菌。“双瓶双瓶”包括包括需氧瓶需氧瓶和和厌氧瓶厌氧瓶，可提高培养阳性率，可提高培养阳性率20%20%以上。以上。血液标本采集次数及套数血液标本采集次数及套数对于血液中含菌量少的患者；对于血液中含菌量少的患者；研究表明血培养的血量在研究表明血培养的血量在2-30ml2-30ml范围内，病原菌的范围内，病原菌的阳性培养率与血量成正比；阳性培养率与血量成正比；即每增加即每增加1ml1ml，血培养阳性率提高，血培养阳性率提高2-3%2-3%；所以强调每次采血所以强调每次采血“双套双套”“双瓶双瓶”以保证血量。以保证血量。血培养的血量与阳性率血培养的血量与阳性率2 23 3套血培养，有助于污染的判断。
14、套血培养，有助于污染的判断。Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333 采集采集1套无法判套无法判断是病原菌还断是病原菌还是污染菌。是污染菌。血液标本采集次数及套数血液标本采集次数及套数表皮葡萄球菌培养阳性结果？成人常经肘静脉采血；儿童和婴幼儿多为颈部和腹成人常经肘静脉采血；儿童和婴幼儿多为颈部和腹股沟，但皮肤皱褶多，须严格皮肤消毒。股沟，但皮肤皱褶多，须严格皮肤消毒。采血三步消毒：采血三步消毒：首先首先70%-75%70%-75%乙醇擦拭穿刺部位，乙醇擦拭穿刺部位，等待等待3
15、030秒以上；再用碘伏或碘酊棉签消毒；再用秒以上；再用碘伏或碘酊棉签消毒；再用70%-75%70%-75%乙醇脱碘。乙醇脱碘。如患者对碘过敏，则乙醇消毒如患者对碘过敏，则乙醇消毒6060秒，待乙醇挥发后秒，待乙醇挥发后采血。采血。为避免皮肤污染，采集时须严格消毒为避免皮肤污染，采集时须严格消毒在在ICUICU病房内携带中心静脉导管超过病房内携带中心静脉导管超过48h48h，出现原因不明的发热或低血压的患者，出现原因不明的发热或低血压的患者，儿童出现低体温者，儿童出现低体温者，临床医生首先判断导管是否仍有保留的必要性，临床医生首先判断导管是否仍有保留的必要性，按导管保留与否分别采用不同的送检方法
16、。按导管保留与否分别采用不同的送检方法。导管相关性血流感染导管相关性血流感染采集至少采集至少2 2套血培养，套血培养，其中至少其中至少1 1套来自外周静脉，并做好标志，套来自外周静脉，并做好标志，另外的另外的1 1套则从导管中心或硅酮隔膜无菌采集，套则从导管中心或硅酮隔膜无菌采集，两个来源的采血时间必须接近（两个来源的采血时间必须接近（5min5min），各自做），各自做好标记。好标记。导管相关性血流感染保留导管导管相关性血流感染保留导管从独立的外周静脉无菌采集从独立的外周静脉无菌采集2 2套血培养，套血培养，无菌状态下取出导管并剪下无菌状态下取出导管并剪下5cm5cm导管尖端或近心导管尖端或
17、近心端，进行端，进行MakiMaki半定量平板滚动培养或者定量培养。半定量平板滚动培养或者定量培养。导管相关性血流感染不保留导管导管相关性血流感染不保留导管采血后在采血后在2h2h内送到检验科，内送到检验科，立即放入血液培养仪，立即放入血液培养仪，自动培养自动培养并实时检测。如不能及时运送，则室温保存，不要放冰箱，并实时检测。如不能及时运送，则室温保存，不要放冰箱，以免嗜血杆菌、奈瑟菌、链球菌冻死。以免嗜血杆菌、奈瑟菌、链球菌冻死。5、血液培养的结果分级报告、血液培养的结果分级报告阳性初步结果报告：阳性初步结果报告：仪器阳性报警，仪器阳性报警，80%80%以上阳性标本以上阳性标本24h24h内
18、检出；内检出；取出阳性瓶，对血液涂片及革兰染色；取出阳性瓶，对血液涂片及革兰染色；立立即即将将涂涂片片结结果果（G+G+、G-G-细细菌菌，球球菌菌或或杆杆菌菌，或真菌）电话通知相应科室。或真菌）电话通知相应科室。结果报告形式结果报告形式阳性报警血液涂片阳性报警血液涂片阳性报警血液涂片阳性报警血液涂片阳性报警血液涂片阳性报警血液涂片阳性报警血液涂片阳性报警血液涂片阳性报警血液涂片阳性报警血液涂片利利 用用 阳阳 性性 血血 液液0.2ml0.2ml，直直接接涂涂布布MHMH平平板板，K-BK-B纸纸片片法药敏试验，法药敏试验，第第二二天天将将初初步步药药敏敏结结果果，电电话话通通知相应科室。知
19、相应科室。阳性报警血液直接初步药敏结果报告阳性报警血液直接初步药敏结果报告将阳性血液接种血平板培养细菌；将阳性血液接种血平板培养细菌；第第二二天天将将血血平平板板上上生生长长的的细细菌菌鉴鉴定定及及MICMIC法法药药敏敏试试验；验；第三天发鉴定及第三天发鉴定及MICMIC法药敏结果的正式报告。法药敏结果的正式报告。如如果果是是真真菌菌，则则接接种种念念珠珠菌菌选选择择性性平平板板或或沙沙保保平平板。板。阳性最终结果报告阳性最终结果报告如培养如培养5 5天仍为阴性；天仍为阴性；CLSICLSI推荐全自动系统只需孵育推荐全自动系统只需孵育5 5天。天。阴性结果报告阴性结果报告血液标本分离菌株种类
20、及构成比血液标本分离菌株种类及构成比% %二、尿液标本病原菌检验二、尿液标本病原菌检验检测泌尿系统感染；检测泌尿系统感染；一般进行细菌和真菌培养、菌落计数和药敏；一般进行细菌和真菌培养、菌落计数和药敏；离心后对沉渣涂片检查，革兰染色或抗酸染色；离心后对沉渣涂片检查，革兰染色或抗酸染色；也可用于淋球菌培养和涂片检查。也可用于淋球菌培养和涂片检查。目的和意义目的和意义最常采集中段尿，最常采集中段尿，晨起第一次尿送检最佳；晨起第一次尿送检最佳；先先用用肥肥皂皂水水、或或1 1：10001000高高锰锰酸酸钾钾水水溶溶液液冲冲洗洗女女性性外外阴阴部部及及尿尿道道口口或或男男性性尿尿道道口口，再再用用灭
21、灭菌菌水水清清洗洗，最后用灭菌纱布檫拭；最后用灭菌纱布檫拭；排排尿尿弃弃去去前前段段尿尿，留留取取中中段段尿尿约约10ml10ml于于无无菌菌容容器器内内加盖送检。加盖送检。采集方法采集方法尿尿道道病病原原菌菌可可在在温温暖暖尿尿液液中中繁繁殖殖，中中段段尿尿标标本本采采集集后应尽快送检，否则将影响病原菌计数的准确性；后应尽快送检，否则将影响病原菌计数的准确性；排排尿尿困困难难者者可可导导尿尿，避避免免多多次次导导尿尿所所致致尿尿路路感感染染，导尿包必须为无菌的合格产品。导尿包必须为无菌的合格产品。采集方法采集方法不染色涂片不染色涂片尿沉渣真菌尿沉渣真菌 中段尿中段尿“培养出培养出3 3种以上
22、细菌，疑采集污染，重留标本种以上细菌，疑采集污染，重留标本”：如培养出如培养出3 3种或以上细菌，且无优势菌；种或以上细菌，且无优势菌；约约10%10%的标本不合格，采集时污染，的标本不合格，采集时污染，采采集集中中段段尿尿（尤尤其其女女性性）最最好好由由专专门门医医护护人人员员指指导导采集，以减少污染。采集，以减少污染。结果报告形式结果报告形式“培养出少量某种细菌、菌落计数结果培养出少量某种细菌、菌落计数结果”：如菌量较少如菌量较少 1010105 5ml ml ，且且必必须须有有优优势势，才才可以确定为感染，对优势菌进行鉴定和药敏。可以确定为感染，对优势菌进行鉴定和药敏。10104 4ml
23、ml至至10105 5mlml，也有意义。，也有意义。 结果报告形式结果报告形式尿液标本分离菌株种类及构成比尿液标本分离菌株种类及构成比% %三、粪便标本病原菌检验三、粪便标本病原菌检验对肠道感染进行病原学诊断。对肠道感染进行病原学诊断。涂片革兰染色查细菌、球涂片革兰染色查细菌、球/ /杆菌比、真菌。杆菌比、真菌。涂片暗视野查弧菌；涂片暗视野查弧菌；抗抗酸酸染染色色（如如阳阳性性，需需考考虑虑有有无无耻耻垢垢杆杆菌菌污污染染可可能）。能）。培养沙门氏和志贺菌；培养沙门氏和志贺菌；培养弧菌；培养弧菌；培养真菌；培养真菌；菌群失调病人，对占优势细菌进行鉴定药敏。菌群失调病人，对占优势细菌进行鉴定药
24、敏。标本采集：标本采集：挑取含脓、血或粘液粪便约挑取含脓、血或粘液粪便约2-3g2-3g；置于清洁容器或置于保存液中送检；置于清洁容器或置于保存液中送检；排便困难者或婴幼儿可用直肠拭子采集。排便困难者或婴幼儿可用直肠拭子采集。检查上下呼吸道感染检查上下呼吸道感染痰液（下呼吸道）和咽拭子（咽喉部）；痰液（下呼吸道）和咽拭子（咽喉部）；可进行涂片查细菌、真菌或抗酸杆菌；可进行涂片查细菌、真菌或抗酸杆菌；可进行细菌、真菌或结核杆菌培养；可进行细菌、真菌或结核杆菌培养；上上述述检检查查只只要要一一口口痰痰即即可可，在在一一张张检检查查申申请请单单上上选上述多个项目。选上述多个项目。四、呼吸道标本病原菌
25、检验四、呼吸道标本病原菌检验采集深部痰，不是唾液和口水。采集深部痰，不是唾液和口水。自自然然咳咳痰痰法法，最最好好为为清清晨晨第第一一口口痰痰，用用清清水水反反复复漱漱口用力咳出第一口痰于无菌容器内；口用力咳出第一口痰于无菌容器内；支气管镜采集法。支气管镜采集法。采集方法采集方法 痰液痰液痰液痰液痰液痰液痰液痰液痰液痰液痰液痰液痰液痰液WBC25/LP上皮细胞上皮细胞90%90%；对对慢慢性性无无症症状状淋淋病病的的女女性性患患者者涂涂片片检检查查漏漏诊诊率率达达40%40%，故必须同时进行培养。，故必须同时进行培养。培养鉴定及药敏培养鉴定及药敏结果准确，诊断金标准。结果准确，诊断金标准。解脲
26、解脲/ /人型支原体：人型支原体：开展了培养鉴定及药敏试验；开展了培养鉴定及药敏试验；需注意的是标本采集后应尽快送检；需注意的是标本采集后应尽快送检；部分细菌可能导致假阳性。部分细菌可能导致假阳性。诊断试剂和方法要符合卫生部相关规定；诊断试剂和方法要符合卫生部相关规定；注意保护病人的隐私。注意保护病人的隐私。七、其他标本病原菌检验七、其他标本病原菌检验静脉插管等标本：静脉插管等标本：放入无菌拭子管送检；放入无菌拭子管送检；无菌试验：无菌试验：怀疑医疗用品被污染时送检；怀疑医疗用品被污染时送检；空空气气培培养养：到到微微生生物物室室取取培培养养平平皿皿，血血平平板板和和营营养养平平板板，置置于于
27、待待测测地地点点，打打开开平平皿皿盖盖10min10min或或更更久久，在检验单上注明时间，盖上后送检；在检验单上注明时间，盖上后送检；医医护护人人员员手手培培养养和和物物表表培培养养：到到微微生生物物室室取取含含消消毒毒剂剂中中和和液液的的无无菌菌试试管管，用用棉棉签签涂涂抹抹后后放放入入试试管管中送检。中送检。一、一、血液血液病原菌检验病原菌检验二、二、尿液尿液病原菌检验病原菌检验三、三、粪便粪便病原菌检验病原菌检验四、四、痰液和咽拭子痰液和咽拭子标本病原菌检验标本病原菌检验五、五、穿刺液穿刺液标本病原菌检验标本病原菌检验六、六、伤口和生殖道分泌物伤口和生殖道分泌物标本病原菌检验标本病原菌检验七、七、其他标本其他标本标本病原菌检验标本病原菌检验
