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1、课题课题(kt)2(kt)2土壤中分解尿素的细菌的土壤中分解尿素的细菌的分离与计数分离与计数点此播放点此播放点此播放点此播放(b fn)(b fn)教学视频教学视频教学视频教学视频 第一页，共34页。课题课题(kt)(kt)背景背景1 1、尿素、尿素(nio s)(nio s)的利用的利用: :尿素尿素(nio s)(nio s)是一种重要的农业氮肥。尿素是一种重要的农业氮肥。尿素(nio s)(nio s)不能直接被农作物吸收。土壤中的细不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素菌将尿素(nio s)(nio s)分解成氨之后才能被植物利分解成氨之后才能被植物利用。用。2 2、细菌利用尿素的原
2、因、细菌利用尿素的原因: :点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第二页，共34页。3 3、课题、课题(kt)(kt)目的目的从土壤中分离出能够从土壤中分离出能够(nnggu)(nnggu)分解尿素分解尿素的细菌的细菌统计统计(tngj)(tngj)每克土壤样品中究竟含有多少这样每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌的细菌一一.研究思路研究思路.筛选菌株筛选菌株.统计菌落数目统计菌落数目.设置对照设置对照点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第三页，共34页。（ 一 ） 筛 选(shixun)菌株水生耐热(nai r)细菌Taq耐高温的Ta
3、q DNA聚合酶选择培养基选择培养基选择培养基选择培养基在在在在微微微微生生生生物物物物学学学学中中中中，将将将将允允允允许许许许特特特特定定定定种种种种类类类类的的的的微微微微生生生生物物物物生生生生长长长长，同同同同时时时时抑抑抑抑制制制制或或或或阻阻阻阻止止止止(zzh)(zzh)其其其其他他他他种种种种类类类类微生物生长的培养基。微生物生长的培养基。微生物生长的培养基。微生物生长的培养基。启示启示?点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第四页，共34页。15.0g15.0g琼脂琼脂1.0g1.0g尿素尿素10.0g10.0g葡萄糖葡萄糖0.2g0.2gMgS
4、OMgSO447H7H2 2O O2.1g2.1gNaHNaH2 2POPO4 41.4g1.4gKHKH2 2POPO4 4思考思考(sko)(sko)：从物理性质从物理性质(wl xngzh)(wl xngzh)看此培养基属看此培养基属于哪类？于哪类？固体固体(gt)(gt)培养基培养基点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第五页，共34页。在此培养基中哪些在此培养基中哪些(nxi)(nxi)作为碳源、氮源？作为碳源、氮源？碳源：葡萄糖、尿素碳源：葡萄糖、尿素(nio s) (nio s) 氮源：尿素氮源：尿素(nio s)(nio s)培养基的氮源为尿素培养基
5、的氮源为尿素(nio s)(nio s)，只有能合成脲酶，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素的微生物才能分解尿素(nio s)(nio s)，以尿素，以尿素(nio (nio s)s)作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素素(nio s)(nio s)，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素(nio s)(nio s)的微生物。的微生物。3 3、培养基选择分解尿素的微生物的原理？、培养基选择分解尿素的微生物的原理？点此播放教学视频点此播放教
6、学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第六页，共34页。1.1.间接计数法（活菌计数法）间接计数法（活菌计数法）原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表即一个菌落代表(dibio)(dibio)原先的一个单细胞。原先的一个单细胞。每克样品中的菌落数每克样品中的菌落数(CV)M(CV)M其中，其中，C C代表某一稀释度下平板上生长的代表某一稀释度下平板上生长的平均平均(pngjn)(pngjn)菌落数，菌落数，V V代表涂布平板时代表涂布平板时所用的
7、稀释液的体积所用的稀释液的体积(ml)(ml)，M M代表稀释倍代表稀释倍数。数。2 2、显微镜直接、显微镜直接(zhji)(zhji)计计数：数：.统计菌落数目：统计菌落数目：点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第七页，共34页。思考书思考书本本22页页问题：问题：说明设置重复组的重要性。说明设置重复组的重要性。第第一一位位同同学学只只涂涂布布了了一一个个平平板板，没没有有设设置置重重复复组组，因因此此结结果果(ji(jigu)gu)不不具具有有说说服服力力。第第二二位位同同学学考考虑虑到到设设置置重重复复组组的的问问题题，涂涂布布了了3 3个个平平板板，但但是
8、是，其其中中1 1个个平平板板的的计计数数结结果果(ji(jigu)gu)与与另另2 2个个相相差差太太远远，说说明明在在操操作作过过程程中中可可能能出出现现了了错错误误，因因此此，不不能能简简单单地地将将3 3个个平平板板的的计计数数值值用用来来求求平平均均值值。这这个个实实例例启启示示学学生生，在在设设计计实实验验时时，一一定定要要涂涂布布至至少少3 3个个平平板板，作作为为重重复复组组，才才能能增增强强实实验验的的说说服服力力与与准准确确性性。在在分分析析实实验验结结果果(ji(jigu)gu)时时，一一定定要要考考虑虑所所设设置置的的重重复复组组的的结结果果(ji(jigu)gu)是是
9、否否一一致致，结结果果(ji(jigu)gu)不不一一致致，意意味味着着操操作作有有误误，需要重新实验。需要重新实验。第八页，共34页。注意事项注意事项为了保证结果准确，一般选择菌落为了保证结果准确，一般选择菌落(jnlu)(jnlu)数在数在3030030300的平板上进行的平板上进行计数。计数。为使结果接近真实值可将同一稀释度为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落培养计算出菌落(jnlu)(jnlu)平均数。平均数。统计的菌落统计的菌落(jnlu)(jnlu)往往比活菌的实往往比活菌的实际数目低。际数目低。点此
10、播放教学点此播放教学点此播放教学点此播放教学(jio (jio xu)xu)视频视频视频视频 第九页，共34页。计数法计数法直接计数法、直接计数法、活菌平板计数法、活菌平板计数法、比浊法（原理是在一定范围内，比浊法（原理是在一定范围内，菌的悬液中细胞菌的悬液中细胞(xbo)(xbo)浓度与浓度与混浊度成正比，即与光密度成混浊度成正比，即与光密度成正比，菌越多，光密度越大。正比，菌越多，光密度越大。因此可以借助于分光光度计，因此可以借助于分光光度计，在一定波长下，测定菌悬液的在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度表示菌量。）光密度，以光密度表示菌量。） 膜过滤法（当样品中菌数很低膜过滤法（当
11、样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水海时，可以将一定体积的湖水海水或饮用水等样品通过膜过滤水或饮用水等样品通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色，器。然后将滤膜干燥、染色，并经处理使膜透明，再在显微并经处理使膜透明，再在显微镜下计算膜上镜下计算膜上 ( ( 或一定面积中或一定面积中 ) ) 的细菌数的细菌数 ）第十页，共34页。设置对照的主要目的是排除实验组中非测试设置对照的主要目的是排除实验组中非测试(csh)(csh)因素对实验结果的影响，提高实验结果因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。的可信度。.设置设置(shzh)对照：对照：实例：在做分解尿素的细菌的筛选实例：在做分解尿素的细菌
12、的筛选(shixun)(shixun)与统计与统计菌落数目的实验时，菌落数目的实验时，A A同学从对应的同学从对应的106106倍稀释的培养倍稀释的培养基中筛选基中筛选(shixun)(shixun)出大约出大约150150个菌落，但是其他同个菌落，但是其他同学在同样的稀释度下只选择出大约学在同样的稀释度下只选择出大约5050个菌落。分析其个菌落。分析其原因。原因。原原因因：土土样样不不同同，培培养养基基污污染染或或操操作作失失误误(或或者者是混入了其他的含氮物质是混入了其他的含氮物质)点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第十一页，共34页。小结小结(xioji)
13、：通过这个事例可以看出，实验结果：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。要有说服力，对照的设置是必不可少的。方案方案(fng n)一：由其他同学用与一：由其他同学用与A同学相同土样进行同学相同土样进行实验实验 方案二：将方案二：将A同学同学(tng xu)配制的培养基在不配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。明培养基是否受到污染。结果预测：结果预测：如果结果与如果结果与A同学一致，则证明同学一致，则证明A无误；无误；如果结果不同，则证明如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培养同学
14、存在操作失误或培养基的配制有问题。基的配制有问题。点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第十二页，共34页。二二. .实验的具体操作实验的具体操作 . .土壤土壤(trng)(trng)取样取样. .制备培养基：制备培养基：制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。点此播放点此播放点此播放点此播放(b fn)(b fn)教学视频教学视频教学视频教学视频 第十三页，共34页。应在火焰应在火焰应在火焰应在火焰(huyn)(huyn)(huyn)(huyn)旁称取土壤旁称取土壤旁称取土壤旁称取土壤10g10g10g10g。在稀释土壤溶液的过程中，
15、每一步都要在火焰在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰(huyn)(huyn)(huyn)(huyn)旁旁旁旁进行进行进行进行分离不同的微生物采用不同的稀释度分离不同的微生物采用不同的稀释度原因：不同微生物在土壤中含量不同原因：不同微生物在土壤中含量不同目的：保证获得菌落数在目的：保证获得菌落数在3030300300之间、适于计数之间、适于计数(j sh)(j sh)的平板的平板 三三三三 样样样样品品品品(yngpn)(yngpn)的的的的稀稀稀稀释释释释点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放
16、教学视频 第十四页，共34页。思思考考：为为什什么么分分离离不不同同的的微微生生物物要要采采用用不不同同的的稀稀释释度度 ？ 测测 定定 (cdng)(cdng)土土 壤壤 中中 细细 菌菌 的的 总总 量量 和和 测测 定定(cdng)(cdng)土土壤壤中中能能分分解解尿尿素素的的细细菌菌的的数数量量，选选用用的的稀释范围相同吗？稀释范围相同吗？原原因因：土土壤壤(trng)中中各各类类微微生生物物的的数数量量（单位：株（单位：株/kg）是不同的。）是不同的。结结论论：为为获获得得不不同同类类型型的的微微生生物物，就就需需要要按按不不同同的的稀稀释释度度进进行行分分离离，同同时时还还应应当
17、当有有针针对对性地提供选择培养的条件。性地提供选择培养的条件。点此播放教学点此播放教学点此播放教学点此播放教学(jio (jio xu)xu)视频视频视频视频 第十五页，共34页。. .取样取样(qyng)(qyng)涂布涂布实验时要实验时要对培养皿作对培养皿作好好(zu ho)(zu ho)标记。注明标记。注明培养基类型、培养基类型、培养时间、培养时间、稀释度、培稀释度、培养物等。养物等。如果得到了如果得到了2个或个或2个以上菌落数目在个以上菌落数目在30300的平的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行(jnxng)菌菌落的计数，如果同一稀释倍数的三
18、个重复的菌落数相差落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。较大，表明试验不精确，需要重新实验。点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第十六页，共34页。.微生物的培养微生物的培养(piyng)与观察与观察在菌落计数在菌落计数(j sh)(j sh)时，每隔时，每隔24h24h统计一次菌落数统计一次菌落数目。目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。 培养不同微生物往往培养不同微生物往往(wngwng)(wngw
19、ng)需要不同培养需要不同培养温度。温度。细菌：细菌：30303737培养培养1 12d2d放线菌：放线菌：25252828培养培养5 57d7d霉菌：霉菌：25252828的温度下培养的温度下培养3 34d4d。点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第十七页，共34页。实验设计步骤：实验设计步骤： 1 1、土壤取样、土壤取样2 2、制备培养基：、制备培养基：3 3、样品的稀释、样品的稀释(xsh)(xsh)4 4、取样涂布、取样涂布5 5、微生物的培养与观察、微生物的培养与观察点此播放点此播放点此播放点此播放(b fn)(b fn)教教教教学视频学视频学视频学视频
20、 第十八页，共34页。微微生生物物的的培培养养(piyng)与与观观察察第十九页，共34页。1 1、结结合合对对照照，分分析析培培养养物物中中是是否否有有杂杂菌菌污污染染以以及及选选择择培培养养基基是是否否筛筛选选出一些菌落。出一些菌落。2 2、是是否否获获得得了了某某一一稀稀释释度度下下，菌菌落落数数目目在在3030300300的的平平板板。在在这这稀稀释释度下，是否至少度下，是否至少(zh(zh sho)sho)有两个平板的菌落数相近？有两个平板的菌落数相近？3 3、你你统统计计的的每每克克土土壤壤中中含含有有能能分分解解尿尿素素的的细细菌菌的的菌菌落落数数是是多多少少？与与其其他同学的结
21、果接近吗？如果差异很大，可能是什么原因引起的？他同学的结果接近吗？如果差异很大，可能是什么原因引起的？三三.结果结果(ji gu)分析与评价分析与评价对照的培养皿在培养中无菌落生长，对照的培养皿在培养中无菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显大于选择培养基，说明选择培养显大于选择培养基，说明选择培养基具有基具有(jyu)选择作用。选择作用。第二十页，共34页。四四. .课外延伸课外延伸 在以尿素为唯一氮源的培养基在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果后，
22、如果PHPH升高升高(shn o)(shn o)，指示，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。素。测定饮水中大肠杆菌数量测定饮水中大肠杆菌数量测定饮水中大肠杆菌数量测定饮水中大肠杆菌数量(shling)(shling)(shling)(shling)的方法是将一定体积的方法是将一定体积的方法是将一定体积的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到 伊红美蓝伊红美蓝伊红美蓝伊红美蓝 培养基培养基培养基培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记述得出水样中大上
23、培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记述得出水样中大上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记述得出水样中大上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量肠杆菌的数量肠杆菌的数量肠杆菌的数量(shling)(shling)(shling)(shling)。点此播放点此播放点此播放点此播放(b fn)(b fn)教学视频教学视频教学视频教学视频 第二十一页，共34页。大肠杆菌大肠杆菌(d chn n jn)(d chn n jn)呈呈 黑色中心黑色中心 , ,有或无金属光泽有或无金属光泽大肠杆菌在伊红美蓝琼脂大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(qingzh)(EMB)(qingzh)(EMB)上典型特
24、征上典型特征 点此播放教学点此播放教学点此播放教学点此播放教学(jio (jio xu)xu)视频视频视频视频 第二十二页，共34页。本课题知识本课题知识(zh shi)(zh shi)小结小结: :点此播放点此播放点此播放点此播放(b fn)(b fn)教教教教学视频学视频学视频学视频 第二十三页，共34页。例题例题(lt)解析解析 例例1 1对细菌群体生长对细菌群体生长(shngzhng)(shngzhng)规律测定的正确的表规律测定的正确的表述是述是A A在液体培养基上进行在液体培养基上进行 B B至少接种一种细菌至少接种一种细菌 C C接种一个细菌接种一个细菌 D D及时补充消耗的营养
25、物质及时补充消耗的营养物质 解析：细菌群体生长规律的测定是人们在一定条件下进行的。这些条解析：细菌群体生长规律的测定是人们在一定条件下进行的。这些条件是：一种细菌、恒定容积的培养基，液体件是：一种细菌、恒定容积的培养基，液体(yt)培养基、定时测定细菌培养基、定时测定细菌总数。在这些条件下，才能测定出细菌的生长规律。测定时只能用一种总数。在这些条件下，才能测定出细菌的生长规律。测定时只能用一种细菌的子细胞群体的变化规律表达微生物的生长；恒定容积是给微生物细菌的子细胞群体的变化规律表达微生物的生长；恒定容积是给微生物提供一定的生存环境；液体提供一定的生存环境；液体(yt)培养基才能通过样品推测细
26、菌总数。若培养基才能通过样品推测细菌总数。若接种多种细菌，则会发生种间斗争而不能测定一种微生物的生长规律。接种多种细菌，则会发生种间斗争而不能测定一种微生物的生长规律。在接种时，要保证一定的接种量。在接种时，要保证一定的接种量。答案：答案：A A点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第二十四页，共34页。例例2 2在微生物群体生长规律的测定在微生物群体生长规律的测定(cdng)(cdng)中，种中，种内斗争最显著最激烈的时期是内斗争最显著最激烈的时期是A A调整期调整期 B B对数期对数期 C C稳定期稳定期 D D衰亡期衰亡期解析：种内斗争是一种生态解析：种内斗争
27、是一种生态(shngti)(shngti)因素。种内斗争反应了种内生因素。种内斗争反应了种内生物对生存空间和生活资源的争夺。在生活空间充裕，营养充足的时候，种物对生存空间和生活资源的争夺。在生活空间充裕，营养充足的时候，种内斗争的程度是比较低的。随着微生物个体数目的增加，每个个体的生存内斗争的程度是比较低的。随着微生物个体数目的增加，每个个体的生存空间越来越少，营养物质也越来越少，每个个体对生存空间和资源的争夺空间越来越少，营养物质也越来越少，每个个体对生存空间和资源的争夺也越来越激烈，种内斗争就越来越激烈。由此可知，在稳定期的种内斗争也越来越激烈，种内斗争就越来越激烈。由此可知，在稳定期的种
28、内斗争最激烈。在衰亡期，微生物的数目已经开始减少，最激烈。在衰亡期，微生物的数目已经开始减少，pHpH已经极度不适于微生已经极度不适于微生物的生存，次级代谢产物积累到很高的程度，这时的微生物的生存斗争主物的生存，次级代谢产物积累到很高的程度，这时的微生物的生存斗争主要是与无机环境的斗争。要是与无机环境的斗争。答案答案(d n)(d n)：C C点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频点此播放教学视频 第二十五页，共34页。3.3.使用选择培养基的目的是（使用选择培养基的目的是（ ） A. A.培养细菌培养细菌 B. B.培养真菌培养真菌(zhnjn)(zhnjn) C. C.使需要的微
29、生物大量繁殖使需要的微生物大量繁殖 D. D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别4.4.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( ( ) ) A.CO2 A.CO2和和N2 B.N2 B.葡萄糖和葡萄糖和NH3NH3 C.CO2 C.CO2和尿素和尿素 D. D.葡萄糖和尿素葡萄糖和尿素C CD D点此播放教学点此播放教学点此播放教学点此播放教学(jio xu)(jio xu)视频视频视频视频 第二十六页，共34页。5.5.下列说法下列说法(shuf)(shuf)不正确的是（不正确的是（ ） A.
30、A.科学家从科学家从70708080度热泉中分离到耐高温的度热泉中分离到耐高温的TaqDNATaqDNA聚合聚合酶酶 B. B.统计某一稀释度的统计某一稀释度的5 5个平板的菌落数依次为个平板的菌落数依次为M1M1、M2M2、M3M3、M4M4、M5M5，以，以M3M3作为该样品菌落数的估计值作为该样品菌落数的估计值 C. C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度对实验结果的影响，提高实验结果的可信度 D. D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，
31、种类最多。类最多。6.6.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（）（） A. A.较多的氮源物质较多的氮源物质 B. B.较多的碳源物质较多的碳源物质 C. C.青霉素类药物青霉素类药物 D. D.高浓度食盐高浓度食盐B BC C点此播放点此播放点此播放点此播放(b fn)(b fn)教学教学教学教学视频视频视频视频 第二十七页，共34页。利用生物工程生产啤酒、味精、胰岛素、酸奶的常用(chn yn)菌种分别是（ ）A酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌 B酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌 C酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌 D
32、黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌C C点此播放教学点此播放教学点此播放教学点此播放教学(jio (jio xu)xu)视频视频视频视频 第二十八页，共34页。测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释(xsh)液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释(xsh)，其原因是()A细菌个体小，真菌个体大B细菌易稀释(xsh)，真菌不易稀释(xsh)C细菌在土壤中数量比真菌多D随机的，没有原因C点此播放点此播放点此播放点此播放(b fn)(b fn)教学视频教学视频教学视频教学视频 第二十九页，共34页。用来判断选择培养基是否(sh fu)起到了选择作用需
33、要设置的对照是()A未接种的选择培养基B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D接种了的选择培养基C选选C。将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养。将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此，应选牛肉膏蛋白胨培养基作为因此，应选牛肉膏蛋白胨培养基作为(zuwi)对照。对照。对照遵循的是单一变量原则，所以与选择培养基一样对照遵循的是单一变量原则，所以与选择培养基一样接种、培养。接种、培养。点此播放教学点此播放教学点此播放教学点此播放教学(jio xu)(jio xu)视频视频视频视
34、频 第三十页，共34页。分离土壤中分解尿素分离土壤中分解尿素(nio s)(nio s)的细菌，对培养基的要的细菌，对培养基的要求是求是( () )加尿素加尿素(nio s)(nio s)不加尿素不加尿素(nio s)(nio s)加琼脂加琼脂不加琼脂不加琼脂加葡萄糖加葡萄糖不加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐加硝酸盐不加硝酸盐不加硝酸盐A A B BC C D DC土壤中分解尿素的细菌土壤中分解尿素的细菌(xjn)能够合成脲酶，将尿素分解生成氨，能够合成脲酶，将尿素分解生成氨，利用尿素中的氮合成自身有机物。培养基中只加尿素，分解尿素的利用尿素中的氮合成自身有机物。培养基中只加尿素，分解尿素的细菌细菌
35、(xjn)能生长，其他微生物不能生长；分离微生物要用固体培能生长，其他微生物不能生长；分离微生物要用固体培养基；土壤中分解尿素的细菌养基；土壤中分解尿素的细菌(xjn)属于异养微生物，需要加葡萄属于异养微生物，需要加葡萄糖作为碳源。糖作为碳源。第三十一页，共34页。根据实验原理和材料用具，设计实验确定细菌质粒的抗菌素根据实验原理和材料用具，设计实验确定细菌质粒的抗菌素基因所抗的抗菌素的类别。基因所抗的抗菌素的类别。实验原理：作为实验原理：作为(zuwi)(zuwi)运载体的质粒带有标记基因，这一运载体的质粒带有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因，即有抗性基因的质粒可用做标记基因是抗菌素抗性
36、基因，即有抗性基因的质粒可用做运载体。运载体。材料用具：青霉素、四环素各材料用具：青霉素、四环素各1010万单位溶液、菌种试管、灭万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、无菌水、恒温箱。射器、无菌水、恒温箱。方法步骤：方法步骤：第一步：分组。第一步：分组。_，用三只注射器分别向用三只注射器分别向3 3个培养基中注入个培养基中注入1 mL1 mL无菌水无菌水_、_，并使之均匀分布在整个培养基，并使之均匀分布在整个培养基表面。表面。第二步：接种。将接种环在第二步：接种。将接种环在_，_接种于接种于三个培养基。
37、三个培养基。第三步：培养。将第三步：培养。将_。答案：方法步骤：答案：方法步骤：第一步：取三个含培养基的培养皿，分别编号为第一步：取三个含培养基的培养皿，分别编号为1 1、2 2、3 3青霉素液四环素液青霉素液四环素液第二步：酒精灯上灼烧第二步：酒精灯上灼烧(zhu sho)(zhu sho)并在酒精灯旁并在酒精灯旁取菌种取菌种第三步：接种后的培养基放在第三步：接种后的培养基放在37 37 的恒温箱中培养的恒温箱中培养2424小时小时预期结果及结论：预期结果及结论：第三十二页，共34页。结果结果结论结论1 12 23 3有菌落有菌落有菌落有菌落无菌落无菌落有菌落有菌落无菌落无菌落有菌落有菌落质粒上有两种抗性基因质粒上有两种抗性基因预期结果预期结果(ji gu)及结论：及结论：结果结果结论结论1 12 23 3质粒上有抗青霉素基因质粒上有抗青霉素基因质粒上有抗四环素基因质粒上有抗四环素基因有菌落有菌落有菌落有菌落有菌落有菌落第三十三页，共34页。点此播放教学点此播放教学点此播放教学点此播放教学(jio (jio xu)xu)视频视频视频视频 第三十四页，共34页。
