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1、精选 实验二 糖类的颜色反应 一、实验目的 1了解糖类某些颜色反应的原理。 2学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。 二、实验原理 1.-萘酚反应(Molisch 反应)原理 糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。 2.间苯二酚反应(Seliwanoff 反应)原理 在酸作用下,酮糖脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反应是酮糖的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应
2、。 三材料与方法 1.-萘酚反应(Molisch 反应) 取 5 支试管,分别加入 1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各 1mL。再向 5 支试管中各加入 2 滴莫氏试剂,充分混合。斜执试管,沿管壁慢慢加入浓硫酸 1mL,慢慢立起试管,切勿摇动。浓硫酸在试液下形成两层。在二液分界处有紫红色环出现。观察、记录各管颜色。 2.间苯二酚反应(Seliwanoff 反应) 精选 取 3 支试管,分别加入 1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5ml。再向各管分别加入塞氏试剂 5mL,混匀。将 3 支试管同时放入沸水浴中,注意观察、记录各管颜色的变化及变
3、化时间。 四结果与分析 表 1 试剂 现象 产生现象的时间排序 1%葡萄糖 浅紫色环,试样淡棕色 4 1%果糖 浅紫色环,试样深棕色 5 1%蔗糖 深紫色环,试样深棕色 2 1%淀粉 深紫色环,试样淡棕色 3 1%糠醛 深紫色环,试样黑色 1 表 2 试剂 现象 1%葡萄糖 4 分 02 秒开始变红色 1%果糖 2 分 45 秒开始变红色 1%蔗糖 2 分 49 秒开始变红色 1.由表 1 可知, 葡萄糖, 果糖, 蔗糖, 淀粉, 糠醛均可发生 Molisch精选 反应,但产生的紫环颜色不同,反应后试样的颜色也不同,其中糠醛的紫环颜色最深,且试样颜色为深棕接近黑色。加入浓硫酸后,糠醛溶液立刻发
4、生变化,淀粉和蔗糖产生现象时间相当。 发生以上现象是因为糖类在浓硫酸作用下脱水形成糠醛及其衍生物,才能与-萘酚反应,这需要一定的时间,不同种类的糖需要的时间不同,因此产生紫环现象的时间不同,而糠醛溶液可直接与-萘酚反应,所以产生紫环现象的时间最短。且不同的糖性质不同,导致紫环的颜色也不同。 2.由表 2 可知,果糖溶液最先变红,蔗糖溶液出现红色的时间与果糖几乎相同,葡萄糖溶液变红时间最晚,且颜色最淡。 果糖是酮糖,在酸作用下,酮糖脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质,因此果糖反应最快。而蔗糖是二糖,可水解为酮糖。葡萄糖是醛糖,醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸
5、时间较长时,才呈微弱的阳性反应。 五.讨论与结论 Seliwanoff 反应试验中,1%的果糖和蔗糖均在 2 分 40 秒左右出现红色,葡萄糖在 4 分钟左右变色。前人所做试验中 1%的果糖和蔗糖有在 2 分钟时开始变色,有在 3 分钟时开始变色,1%的葡萄糖有在 3 分时变色,有在 4 分钟时变色。因此我所做的试验结果与前人相似。但有些试验中加热时间延长到 20 分钟,分别记录 2 分钟,5 分钟,10分钟,20 分钟时溶液的颜色,发现在 2 分钟时果糖有黑色沉淀生成,其他溶液均无沉淀。加热至 10 分钟后,溶液均变为棕色或黑色。加精选 热时间应在 15 分钟为宜,试样浓度在 0.5%1%最
6、适宜。 本次实验我做的基本正确,通过实验验证了-萘酚反应和间苯二酚反应,了解了糖类颜色反应的原理,操作和现象。 参考文献 1. 张世仙,刘 焱,朱 彬,金 茜,曾启华,萘酚,硫酸法测定酒糟多糖含量J.食品科学 ,2013,34(18):245-248. 2. 陆红 ,何正平 ,吴忠良 ,淀粉与碘的颜色反应与还原糖含量的关系J. 实验室研究与探索,2005,24(3):31-32 3. 杨万政 ,对 Molisch 实验两 个 问题的探讨J.1 河北林院学报 1995,10(4):346-347 4. 朱万仁,关 于 Seliwanoff 反应 机 理 的初 探 J.大学化学,1998,13(2
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