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1、生物：1.1dna重组技术的基本工具课件(新人教版选修3)(1)Stillwatersrundeep.流静水深流静水深,人静心深人静心深Wherethereislife,thereishope。有生命必有希望。有生命必有希望1.1 DNA重组技术的基本工具重组技术的基本工具基因工程的概念基因工程：基因工程： 又叫又叫基因拼接技术基因拼接技术或或DNA重组技术重组技术，是，是按照人们的意愿按照人们的意愿，进行严格的设计，把一种，进行严格的设计，把一种生物的某种生物的某种基因提取基因提取出来，加以出来，加以修饰改造修饰改造，然后然后放到放到另一种生物的细胞里，另一种生物的细胞里，定向地改造定向地改
2、造生物的遗传技术。（生物的遗传技术。（赋予生物新的遗传特性，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品物产品）基因工程的概念基因工程的别名基因工程的别名基因拼接技术或基因拼接技术或DNA重组技术重组技术操作环境操作环境生物体外生物体外操作对象操作对象基因基因操作水平操作水平DNA分子水平分子水平基本过程基本过程剪切剪切拼接拼接导入导入表达表达结果结果人类需要的基因产物人类需要的基因产物抗虫害的玉米抗虫害的玉米转鱼抗寒基转鱼抗寒基因的番茄因的番茄转基因转基因鲑鱼鲑鱼基因工程产品转黄瓜抗青枯病基因的甜椒转黄瓜抗青枯病基因的甜椒乳汁中含有
3、人生长激乳汁中含有人生长激素的转基因牛素的转基因牛( (阿根廷阿根廷) )基础理论和技术的发展催生了基因工程 DNA是遗传物质的证明是遗传物质的证明DNA双螺旋结构和中心法则的确立双螺旋结构和中心法则的确立遗传密码的破译遗传密码的破译基因转移载体的发现基因转移载体的发现工具酶的发明工具酶的发明DNA合成和测序技术的发明合成和测序技术的发明DNA体外重组的实现体外重组的实现重组重组DNA表达实验的成功表达实验的成功第一例转基因动物问世第一例转基因动物问世PCR技术的发明技术的发明基础理论基础理论技术发明技术发明DNA重组技术的基本工具 限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶“分子手术刀分子手术刀”DN
4、A连接酶连接酶“分子缝合针分子缝合针”基因进入受体细胞的载体基因进入受体细胞的载体“分子运分子运输车输车”一、限制性核酸内切酶“分子手术刀”分布：分布：主要在原核生物中主要在原核生物中作用特点：作用特点：特异性。特异性。即即一种一种限制酶限制酶只能识别一只能识别一种种特定的特定的核苷酸序列核苷酸序列，并且能在，并且能在特定的切特定的切点点上切割上切割DNA分子。分子。切点：切点：磷酸二酯键磷酸二酯键结果：结果：产生产生黏性末端黏性末端或或平末端平末端 大肠杆菌大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶的一种限制酶能识别能识别GAATTC序列序列，并在，并在G和和A之间切开。之间切开。限制酶限制酶限制
5、性内切酶限制限制酶酶黏性末端和平末端限制酶所识别的序列有什么特点 限制酶所识别的序列，无论是限制酶所识别的序列，无论是6个碱个碱基还是基还是4个碱基，都可以找到一条中个碱基，都可以找到一条中心轴线，心轴线，中轴线两侧中轴线两侧的双链的双链DNA上的上的碱基碱基是是反向对称重复排列反向对称重复排列的。的。限制酶在原核生物中的作用 原核生物容易受到自然界外源原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但的入侵，但是，生物在是，生物在长期的进化过程中形成了一套完善长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制的防御机制，以防止外来病原物的侵害。，以防止外来病原物的侵害。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源
6、所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。、使之失效，从而达到保护自身的目的。 DNA连接酶连接酶可把黏性末端可把黏性末端之间的缝隙之间的缝隙“缝缝合合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，即把梯子两边扶手的断口之间的磷酸二酯键，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。分子就形成了。二、DNA连接酶“分子缝合针”二、DNA连接酶“分子缝合针”连接酶有两种：一种是从大肠杆菌中分离得到的，连接酶有两种：一种是从大肠杆菌中分离得到的，称之为称之为Ecoli连
7、接酶。另一种是从连接酶。另一种是从T4噬菌体中分噬菌体中分离得到，称为离得到，称为T4连接酶。连接酶。这两种连接酶催化反应基本相同，都是连接双链这两种连接酶催化反应基本相同，都是连接双链DNA的缺口，而不能连接单链的缺口，而不能连接单链DNA。Ecoli连接酶只能连接黏性末端；连接酶只能连接黏性末端； T4连接酶既连接酶既可可“缝合缝合”黏性末端，又可黏性末端，又可“缝合缝合”平末端。平末端。DNA连接酶“分子缝合针”DNA连接酶与连接酶与DNA聚合酶一样吗？为什么？聚合酶一样吗？为什么？ 三、基因的载体“分子运输车”载体必须具备的条件：载体必须具备的条件： 1、能够在受体细胞中、能够在受体细
8、胞中复制并稳定地保存复制并稳定地保存； 2、具有、具有一个或多个限制酶切点一个或多个限制酶切点，以便与外源基因连接；，以便与外源基因连接； 3、具有某些、具有某些标记基因标记基因，便于进行筛选。（如抗菌素的，便于进行筛选。（如抗菌素的 抗性基因、产物具有颜色反应的基因等抗性基因、产物具有颜色反应的基因等 ） 4、对受体细胞、对受体细胞无害无害载体的作用：载体的作用： 1、将外源基因、将外源基因转移转移到受体细胞中去。到受体细胞中去。 2、利用运载体在受体细胞内，对外源基因进行、利用运载体在受体细胞内，对外源基因进行大大量复制量复制。常用的载体有：常用的载体有： 质粒，质粒，噬菌体的衍生物，动植
9、物病毒等噬菌体的衍生物，动植物病毒等质粒广泛地存在于细菌广泛地存在于细菌中、中、独立与拟核外、独立与拟核外、能自主复制、能自主复制、双链闭环双链闭环DNA分子、分子、很小（大小只有普很小（大小只有普通细菌拟核通细菌拟核DNA的百的百分之一）分之一）要对天然质粒进行人工改造要对天然质粒进行人工改造; http:/ 济南阳光女子医院 wpe47xrz 是在这里蹲点吧！”“你就不能配合点吗。”“你又没让我配合。”被人遗忘的慕容凌娢终于从地上站了起来，但感觉自己的脑细胞正急速死亡，智商再次跌入谷底。韩哲轩怎么会知道我的真名？百蝶好像也知道他去找过夏桦。“呃”慕容凌娢强壮镇定的笑了笑，“韩哲轩你怎么会在
10、这里？”“百蝶不是说了吗，我就是在这里专门等你们的。”韩哲轩极其爽快的承认了自己的行为，“我看见你们两个出来，就跟上了。刚想叫住你就看见你往后摔了幸好我闪的快”这剧情跟我想的怎么不一样？按照言情小说的正常套路，我不是应该被人准确无误的接住吗？然后不就顺理成章的慕容凌娢居然做起了花痴的白日梦。慕容凌娢把自己的幻想和现实仔细对照了一下，又看了看面前这个笑得漫不经心的人，悲痛的捂住了脸童话里的故事果真都是骗人的自己怎么能指望这种人呢？“凌娢你怎么了？”百蝶看着一直发呆的慕容凌娢，稍许有些担忧，“不会真的摔傻了吧！”“没没事。”慕容凌娢紧张的摇了摇头，生怕百蝶看出什么端倪。“不过韩哲轩，你怎么会知道我
11、的真名？”既然韩哲轩知道了自己的名字，也就是知道了自己一开始就说了谎，真的好尴尬啊！“像我这种开挂玩家，怎么能连这种东西都不知道呢。”韩哲轩居然没有再提起“白绫”这个化名，这让慕容凌娢很是欣慰。“是夏先生告诉你的吧！”慕容凌娢绝对不会相信这是可以猜到的东西。“如果你乐意这样想，我不介意。”(古风一言)那时，谁绣芙蓉鸳鸯戏。而今，谁惹青丝千里外。第016章 原来不是青楼“是夏先生告诉你的吧！我的真名。”慕容凌娢绝对不会相信这是可以猜到的东西。“如果你乐意这样想，我不介意。”韩哲轩摊开双手，还是一副漫不经心的样子。“那看来是我想错了，你是怎么知道的？”“猜得。”“哦，原来是这样啊”慕容凌娢表面上笑
12、着说，心里却在告诫自己，冷静一定要冷静，不能着急，不能生气这算是答复吗？太敷衍了吧！不想告诉我就直说吗，真是烦人。韩哲轩最终也没有告诉慕容凌娢他是怎么知道她的真实姓名的，因为这个话题很快就被百蝶机智的转移了，她可不想看着两个人如此尴尬的僵持在大街上，毕竟这样太引人注意了。“凌娢，你不是觉得饿了吗？赶快走吧。”百蝶拉着慕容凌娢的胳膊便将她向前拖去，强行拉开了她和韩哲轩的距离。“就是，如果为了那种小事而饿死在大街上可就划不来了。”要不是被百蝶拉着，慕容凌娢早就扑上去把韩哲轩暴打一顿了，尤其是他那张好看但欠揍的脸，总是笑得让人很不爽。不过话说回来，那个高度对她来说可能不太好触碰。“要不是害怕胳膊疼，我早就把你的脸打成猪头了！”就算打不成，气势
