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1、 植物组织逆境伤害程度的测定植物组织逆境伤害程度的测定 电导法电导法 （ 实实 验验 37 ) 37 )教师处理材料（教师处理材料（教师处理材料（教师处理材料（-20-20-20-20 C,20minC,20minC,20minC,20min冷冻材料冷冻材料冷冻材料冷冻材料 ）学生进入实验室先洗试管学生进入实验室先洗试管学生进入实验室先洗试管学生进入实验室先洗试管 教师将水浴锅及电导率仪打开教师将水浴锅及电导率仪打开教师将水浴锅及电导率仪打开教师将水浴锅及电导率仪打开农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件逆
2、境伤害程度的测定方法：逆境伤害程度的测定方法： 1 1 紫外法：紫外法： 根据渗出物质对紫外的吸收根据渗出物质对紫外的吸收2 2 电导法电导法: : 测定受损质膜外渗电解质的电导测定受损质膜外渗电解质的电导农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件实验原理实验原理 植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择重要的作用。在正常情况下，细
3、胞膜对物质具有选择重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。透性能力。透性能力。透性能力。 逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨 当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物组织性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物组织性增大，从而使细胞内的电解
4、质外渗，以致植物组织性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物组织浸入去离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。浸入去离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。浸入去离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。浸入去离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。 用用用用电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件 膜透性增大的程度与逆境胁迫强
5、度有膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。因此，关，也与植物抗逆性的强弱有关。因此，电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。方法。农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件大叶扶芳藤叶片大叶扶芳藤叶片实验材料：实验材料：农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件操作方法操作方法1.1. 实验处理：
6、实验处理： 正常植物叶片正常植物叶片 冷冻胁迫处理冷冻胁迫处理（-20-20），处理），处理20min20min。洗刷试管，去离子水中含有吐温洗刷试管，去离子水中含有吐温2020农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件 正常、冻害各取正常、冻害各取正常、冻害各取正常、冻害各取3 3 3 3个叶片，用去离子水洗净个叶片，用去离子水洗净个叶片，用去离子水洗净个叶片，用去离子水洗净 每每每每叶叶叶叶片片片片打打打打取取取取叶叶叶叶圆圆圆圆片片片片9 9 9 9个个个个，放放放放到到到到小小小小烧烧烧烧杯杯杯杯中中中
7、中用用用用去去去去离离离离子水冲洗；子水冲洗；子水冲洗；子水冲洗； 每支试管放入每支试管放入每支试管放入每支试管放入9 9 9 9个叶圆片；个叶圆片；个叶圆片；个叶圆片； 加入加入加入加入15ml15ml15ml15ml去离子水；去离子水；去离子水；去离子水； 放放放放入入入入塑塑塑塑料料料料纱纱纱纱网网网网（距距距距液液液液面面面面1-2cm1-2cm1-2cm1-2cm），用用用用去去去去离离离离子子子子水水水水漂洗；漂洗；漂洗；漂洗； 2. 2. 步骤步骤农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件放置到塑
8、料烧杯中（放置到塑料烧杯中（放置到塑料烧杯中（放置到塑料烧杯中（不盖塞子不盖塞子），统一抽气），统一抽气），统一抽气），统一抽气15min15min15min15min。（设置空白（设置空白（设置空白（设置空白1 1 1 1只试管）只试管）只试管）只试管）农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件4.4.电导仪测定初电导值电导仪测定初电导值S S1 15.5.沸沸水水浴浴15 15 minmin（杀杀死死植植物物组组织织），自自来来水水冷冷却却，用用力力摇摇1-2min1-2min后后即即可可测测定定终终电电导
9、导S S2 2（注注意意：沸沸水水浴浴时时需需将将塞塞子子松动一下，以防加热后打不开）松动一下，以防加热后打不开）3.3.抽气后取出纱网，室温摇动抽气后取出纱网，室温摇动20min20min （时间可以更长）（时间可以更长）（时间可以更长）（时间可以更长）农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件 结果计算结果计算:（参照课本）参照课本） 相对电导度（相对电导度（L）= (S(S1 1- -空白）空白）/ (S/ (S2 2- -空白）空白） 冻害的伤害度（）冻害的伤害度（）= Lt冻害处理的相对电导度冻害处理
10、的相对电导度 Lck室温对照的相对电导度室温对照的相对电导度农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件实实实实验验验验材材材材料料料料空空空空白白白白电电电电导导导导值值值值处理处理处理处理初电导值初电导值初电导值初电导值(S)(S)(S)(S)终电导值终电导值终电导值终电导值(S)(S)(S)(S)相相相相对对对对电电电电导导导导度度度度(L)(L)(L)(L)伤伤伤伤害害害害度度度度(%)(%)(%)(%)重复重复重复重复平平平平均均均均重复重复重复重复平平平平均均均均室温室温室温室温- - - -2020
11、2020植物组织逆境伤害程度的测定记载表植物组织逆境伤害程度的测定记载表农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件实验步骤简图实验步骤简图取材（各取材（各3片叶）片叶） 打取叶圆片打取叶圆片 9片片/管管15ml蒸馏水蒸馏水/管管 集中抽气集中抽气15min 平衡平衡20min 测量测量S1 煮沸煮沸15min冷却冷却冷却冷却 摇匀摇匀 测量测量S2农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件DDS-307型电导率仪操作规程型电导
12、率仪操作规程1、打开电源开关，预热、打开电源开关，预热30分钟。分钟。2、仪仪器器校校准准：将将“选选择择”旋旋钮钮指指向向“检检查查”档档，调调节节常常数数补补偿偿旋旋钮钮到到“1” 刻刻度度线线，调调节节温温度度补补偿偿旋旋钮钮到到“25”刻刻度度线线，然然后后调调节节“校校准准”旋旋钮钮，使仪器显示使仪器显示100.0S/cm，校正完毕。，校正完毕。按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿旋钮，按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿旋钮，按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿旋钮，按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿旋钮，使仪器显示值与电极所标常数一致。使仪器显示值与电极所标常数一致。使
13、仪器显示值与电极所标常数一致。使仪器显示值与电极所标常数一致。农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件 3 3、样品测定：样品测定：样品测定：样品测定： 将将将将“选选选选择择择择”旋旋旋旋钮钮钮钮置置置置于于于于适适适适合合合合的的的的量量量量程程程程位位位位置置置置。当当当当测测测测定定定定过过过过程程程程中中中中显显显显示示示示值值值值熄熄熄熄灭灭灭灭时时时时，说说说说明明明明测测测测量量量量值值值值超超超超出出出出量量量量程程程程范范范范围，此时应将选择旋钮置于高一挡量程。围，此时应将选择旋钮置于高一
14、挡量程。围，此时应将选择旋钮置于高一挡量程。围，此时应将选择旋钮置于高一挡量程。 测定时电极完全浸没到溶液中。测定时电极完全浸没到溶液中。测定时电极完全浸没到溶液中。测定时电极完全浸没到溶液中。 （如如如如果果果果试试试试管管管管口口口口小小小小，电电电电极极极极不不不不能能能能全全全全部部部部浸浸浸浸没没没没时时时时，可可可可以以以以全全全全部部部部加加加加去去去去离离离离子子子子水水水水至至至至20ml20ml。）。）。）。） 测测测测定定定定一一一一个个个个样样样样品品品品后后后后用用用用去去去去离离离离子子子子水水水水冲冲冲冲洗洗洗洗后后后后，再再再再用用用用滤滤滤滤纸纸纸纸将将将将电
15、电电电极表面的水份吸干后测定下一个样品。极表面的水份吸干后测定下一个样品。极表面的水份吸干后测定下一个样品。极表面的水份吸干后测定下一个样品。农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件问题与注意事项问题与注意事项1.1.叶片大小一致，防止打出不圆片使误差增大，并保证各重复来自同三个叶片。叶片大小一致，防止打出不圆片使误差增大，并保证各重复来自同三个叶片。叶片大小一致，防止打出不圆片使误差增大，并保证各重复来自同三个叶片。叶片大小一致，防止打出不圆片使误差增大，并保证各重复来自同三个叶片。2.2.材料不可混放。材
16、料不可混放。材料不可混放。材料不可混放。3.3.抽气前，切记将纱网放入试管。纱网距离液面抽气前，切记将纱网放入试管。纱网距离液面抽气前，切记将纱网放入试管。纱网距离液面抽气前，切记将纱网放入试管。纱网距离液面1-2cm1-2cm，可以防止抽气时叶圆，可以防止抽气时叶圆，可以防止抽气时叶圆，可以防止抽气时叶圆片翻出试管。片翻出试管。片翻出试管。片翻出试管。4.4.抽气的目的。抽气的目的。抽气的目的。抽气的目的。5.5.平衡时振荡的作用。平衡时振荡的作用。平衡时振荡的作用。平衡时振荡的作用。6.6.温度对电导影响较大，故温度对电导影响较大，故温度对电导影响较大，故温度对电导影响较大，故S S1 1
17、和和和和S S2 2应在相同温度下测定。应在相同温度下测定。应在相同温度下测定。应在相同温度下测定。7.CO7.CO2 2在水中溶解度较高，测定电导时要防止高在水中溶解度较高，测定电导时要防止高在水中溶解度较高，测定电导时要防止高在水中溶解度较高，测定电导时要防止高COCO2 2气源和口中呼出的气源和口中呼出的气源和口中呼出的气源和口中呼出的COCO2 2进进进进入试管。入试管。入试管。入试管。8.8.测定时，电极要完全插入待测液中。且不可甩电极，防止碰破电极。测定一测定时，电极要完全插入待测液中。且不可甩电极，防止碰破电极。测定一测定时，电极要完全插入待测液中。且不可甩电极，防止碰破电极。测
18、定一测定时，电极要完全插入待测液中。且不可甩电极，防止碰破电极。测定一个样品后用去离子水冲洗后，再用滤纸将电极表面的水份吸干后测定下一个个样品后用去离子水冲洗后，再用滤纸将电极表面的水份吸干后测定下一个个样品后用去离子水冲洗后，再用滤纸将电极表面的水份吸干后测定下一个个样品后用去离子水冲洗后，再用滤纸将电极表面的水份吸干后测定下一个样品。样品。样品。样品。9.9.蒸馏水中加吐温，洗仪器时出现泡沫。蒸馏水中加吐温，洗仪器时出现泡沫。蒸馏水中加吐温，洗仪器时出现泡沫。蒸馏水中加吐温，洗仪器时出现泡沫。 吐温作用：阴离子表面活性剂，促进水分与叶片表面接触。吐温作用：阴离子表面活性剂，促进水分与叶片表
19、面接触。吐温作用：阴离子表面活性剂，促进水分与叶片表面接触。吐温作用：阴离子表面活性剂，促进水分与叶片表面接触。 吐温吐温吐温吐温2020聚氧乙烯（聚氧乙烯（聚氧乙烯（聚氧乙烯（2020）山梨醇酐单月桂酸酯）山梨醇酐单月桂酸酯）山梨醇酐单月桂酸酯）山梨醇酐单月桂酸酯 农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件下一个实验：下一个实验：五、植物叶片光合、蒸腾和呼吸速率的测定五、植物叶片光合、蒸腾和呼吸速率的测定（实验（实验19） 六、植物叶片叶绿素荧光参数的测定六、植物叶片叶绿素荧光参数的测定（实验讲义（实验讲义）时间时间: 第第11周周 地点：地点：B-125农业生物学基础实验教学中心农业生物学基础实验教学中心张海森张海森2 2植物组织逆境伤害程度测定课件植物组织逆境伤害程度测定课件
