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1、G试验检测及内毒素检测的临床意义试验检测及内毒素检测的临床意义Part III临床评价临床评价Part IG G G G试验试验试验试验-深部真菌感染检测深部真菌感染检测深部真菌感染检测深部真菌感染检测内毒素检测内毒素检测革兰阴性菌检测革兰阴性菌检测Part II侵袭性真菌感染(IFI)的定义定义定义定义定义: : 指致病性真菌侵犯皮指致病性真菌侵犯皮指致病性真菌侵犯皮指致病性真菌侵犯皮 下组织、黏膜、肌肉和下组织、黏膜、肌肉和下组织、黏膜、肌肉和下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起的真内脏器官等所引起的真内脏器官等所引起的真内脏器官等所引起的真菌感染性疾病,危害性菌感染性疾病,危害性菌感染性
2、疾病,危害性菌感染性疾病,危害性较大。较大。较大。较大。条件致病性真菌条件致病性真菌条件致病性真菌条件致病性真菌1. 1.念珠菌属念珠菌属念珠菌属念珠菌属-念珠念珠念珠念珠菌血症菌血症菌血症菌血症2. 2.曲霉菌属曲霉菌属曲霉菌属曲霉菌属-侵袭性侵袭性侵袭性侵袭性肺曲霉菌病(肺曲霉菌病(肺曲霉菌病(肺曲霉菌病(IPA)IPA)3. 3.其他其他其他其他MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验侵袭性真菌感染的特点1. 1. 不产生内毒不产生内毒不产生内毒不产生内毒 素和外毒素素和外毒素素和外毒素素和外毒素4. 4. 早期症状无特异性,早期症状无特异性,早期症状无特异性,早期症状无特
3、异性,往往被原发病掩盖,病往往被原发病掩盖,病往往被原发病掩盖,病往往被原发病掩盖,病程长,发现较晚,死亡程长,发现较晚,死亡程长,发现较晚,死亡程长,发现较晚,死亡率高率高率高率高2. 2. 致病力一般致病力一般致病力一般致病力一般 较弱,机体免较弱,机体免较弱,机体免较弱,机体免 疫低下时发生疫低下时发生疫低下时发生疫低下时发生3. 3. 感染菌种变化,感染菌种变化,感染菌种变化,感染菌种变化, 白色念珠菌感染下白色念珠菌感染下白色念珠菌感染下白色念珠菌感染下降,曲霉菌感染增降,曲霉菌感染增降,曲霉菌感染增降,曲霉菌感染增长趋势上升明显长趋势上升明显长趋势上升明显长趋势上升明显MB-80系
4、系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验 1.1.1.1.长期使用广谱抗生素长期使用广谱抗生素长期使用广谱抗生素长期使用广谱抗生素 2. 2. 2. 2. 抗肿瘤药物和免疫抑制剂治疗抗肿瘤药物和免疫抑制剂治疗抗肿瘤药物和免疫抑制剂治疗抗肿瘤药物和免疫抑制剂治疗 5 5. .A AI ID DS S感感感感染染染染、基基基基础础础础类类类类疾疾疾疾病病病病侵袭性真菌病(侵袭性真菌病(IFD)的诱因)的诱因4. 4. 骨髓和实体器官移植骨髓和实体器官移植骨髓和实体器官移植骨髓和实体器官移植 3 3. . . . 插管等侵袭性治疗插管等侵袭性治疗插管等侵袭性治疗插管等侵袭性治疗MB-80系系统简介
5、介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验 6 6. .使用激素治疗的病人使用激素治疗的病人使用激素治疗的病人使用激素治疗的病人侵袭性真菌感染(IFI)现状I I I IF F F FI I I I诊诊诊诊断断断断困困困困难难难难及及及及漏漏漏漏诊诊诊诊情情情情况况况况严严严严重重重重I IF FI I发发发发生生生生率率率率不不不不断断断断增增增增加加加加IFIIFI感染病死率居高不下感染病死率居高不下感染病死率居高不下感染病死率居高不下123MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验 危重病人的存活期危重病人的存活期延长延长延长了真菌感染延长了真菌感染延长了真菌感染延长了真菌感染的的的
6、的 高高高高 危危危危 期期期期使此类患者业已增加使此类患者业已增加使此类患者业已增加使此类患者业已增加的人数进一步扩大的人数进一步扩大的人数进一步扩大的人数进一步扩大医医学学和和相相关关科科学学的的进进步步国内深部真菌感染不容忽视 引自北京协和医院王爱霞主任课件引自北京协和医院王爱霞主任课件引自北京协和医院王爱霞主任课件引自北京协和医院王爱霞主任课件MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验20年内院内年内院内149例真菌感染的变化例真菌感染的变化侵袭性真菌感染(IFI)现状MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验I I I IF F F FI I I I诊诊诊诊断
7、断断断困困困困难难难难及及及及漏漏漏漏诊诊诊诊情情情情况况况况严严严严重重重重I IF FI I发发发发生生生生率率率率不不不不断断断断增增增增加加加加IFIIFI感染病死率很高感染病死率很高感染病死率很高感染病死率很高123美国四大医疗中心做的关于美国四大医疗中心做的关于IFIIFI的一项回顾性研究的一项回顾性研究Garey KW et al. Clin Infect Dis 2006, 43:2531 .死亡率死亡率死亡率死亡率(%)(%)(%)(%)延迟治延迟治延迟治延迟治疗时间疗时间疗时间疗时间(d d)侵袭性真菌感染(IFI)现状MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验
8、I I I IF F F FI I I I诊诊诊诊断断断断困困困困难难难难及及及及漏漏漏漏诊诊诊诊情情情情况况况况严严严严重重重重I IF FI I发发发发生生生生率率率率不不不不断断断断增增增增加加加加IFIIFI感染病死率很高感染病死率很高感染病死率很高感染病死率很高123 尸检研究发现:尸检研究发现:尸检研究发现:尸检研究发现: 北京协和医院北京协和医院北京协和医院北京协和医院1953-19931953-19931953-19931953-1993年间年间年间年间3447344734473447例尸检,发现深部真菌感染例尸检,发现深部真菌感染例尸检,发现深部真菌感染例尸检,发现深部真菌感
9、染85858585例,其中生前明确真菌感染诊断者仅例,其中生前明确真菌感染诊断者仅例,其中生前明确真菌感染诊断者仅例,其中生前明确真菌感染诊断者仅5 5 5 5例,占例,占例,占例,占5.95.95.95.9,漏诊率高达漏诊率高达漏诊率高达漏诊率高达94.194.194.194.1。 诊断困难的主要原因诊断困难的主要原因诊断困难的主要原因诊断困难的主要原因: - - 临床表现不典型,易被基础疾病所掩盖临床表现不典型,易被基础疾病所掩盖临床表现不典型,易被基础疾病所掩盖临床表现不典型,易被基础疾病所掩盖 - - 确诊常需侵入性手段获得组织标本,侵入性操作常因患者确诊常需侵入性手段获得组织标本,侵
10、入性操作常因患者确诊常需侵入性手段获得组织标本,侵入性操作常因患者确诊常需侵入性手段获得组织标本,侵入性操作常因患者 的病情所限难以实施的病情所限难以实施的病情所限难以实施的病情所限难以实施- - 真菌检测项目开展相对不足或滞后真菌检测项目开展相对不足或滞后真菌检测项目开展相对不足或滞后真菌检测项目开展相对不足或滞后IFIIFI诊断困难及漏诊情况严重诊断困难及漏诊情况严重MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验方方方方 法法法法特特特特 点点点点传传传传 统统统统检检检检 查查查查直接培养真菌法直接培养真菌法直接培养真菌法直接培养真菌法耗时长耗时长耗时长耗时长, , , , 阳性
11、率低,结果是定阳性率低,结果是定阳性率低,结果是定阳性率低,结果是定性的,有些标本采集困难。可性的,有些标本采集困难。可性的,有些标本采集困难。可性的,有些标本采集困难。可以区分菌种。以区分菌种。以区分菌种。以区分菌种。辅助方法:临床表现,免疫学,病辅助方法:临床表现,免疫学,病辅助方法:临床表现,免疫学,病辅助方法:临床表现,免疫学,病理学,影像学检查等理学,影像学检查等理学,影像学检查等理学,影像学检查等观察期不确定,费时费力,特观察期不确定,费时费力,特观察期不确定,费时费力,特观察期不确定,费时费力,特征性不明显并对医师的专业水征性不明显并对医师的专业水征性不明显并对医师的专业水征性不
12、明显并对医师的专业水平要求高平要求高平要求高平要求高 非传统非传统非传统非传统检查检查检查检查1.G1.G1.G1.G试验:试验:试验:试验:通过检测通过检测通过检测通过检测(1-3)-D-(1-3)-D-(1-3)-D-(1-3)-D-葡葡葡葡聚糖的含量,判断是否有真菌感染聚糖的含量,判断是否有真菌感染聚糖的含量,判断是否有真菌感染聚糖的含量,判断是否有真菌感染耗时短,灵敏度高,特异性强,耗时短,灵敏度高,特异性强,耗时短,灵敏度高,特异性强,耗时短,灵敏度高,特异性强,定量检测可判断感染严重程度定量检测可判断感染严重程度定量检测可判断感染严重程度定量检测可判断感染严重程度2.GM2.GM2
13、.GM2.GM试验:试验:试验:试验:曲霉属半乳甘露聚糖抗曲霉属半乳甘露聚糖抗曲霉属半乳甘露聚糖抗曲霉属半乳甘露聚糖抗原检测。判断是否曲霉属真菌感染原检测。判断是否曲霉属真菌感染原检测。判断是否曲霉属真菌感染原检测。判断是否曲霉属真菌感染3.PCR3.PCR3.PCR3.PCR技术:技术:技术:技术:真菌的抗原、抗体及代真菌的抗原、抗体及代真菌的抗原、抗体及代真菌的抗原、抗体及代谢产物的血清学检查和真菌核酸检谢产物的血清学检查和真菌核酸检谢产物的血清学检查和真菌核酸检谢产物的血清学检查和真菌核酸检测测测测侵袭性真菌感染的临床检测方法对比侵袭性真菌感染的临床检测方法对比MB-80系系统简介介侵侵
14、袭性真菌感染性真菌感染G试验G 试 验1-3-D1-3-D- -葡聚糖葡聚糖葡聚糖葡聚糖可特异性激活鲎(可特异性激活鲎(可特异性激活鲎(可特异性激活鲎(LimulusLimulus)变形细胞裂解物中的变形细胞裂解物中的变形细胞裂解物中的变形细胞裂解物中的G G因子,引起裂解物凝因子,引起裂解物凝因子,引起裂解物凝因子,引起裂解物凝固,故称固,故称固,故称固,故称G G试验。试验。试验。试验。MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验(1-31-3) -D-Glucan-D-Glucan LAL-RM( LAL-RM(反应物反应物反应物反应物) )GG因子因子因子因子活化活化活化活化
15、GG因子因子因子因子凝固酶原凝固酶原凝固酶原凝固酶原凝固酶凝固酶凝固酶凝固酶凝固蛋白原凝固蛋白原凝固蛋白原凝固蛋白原凝固蛋白(凝胶)凝固蛋白(凝胶)凝固蛋白(凝胶)凝固蛋白(凝胶)试验反应机理图:试验反应机理图:试验反应机理图:试验反应机理图: 1,6葡聚糖葡聚糖 磷脂双分子层几丁质麦角固醇b1,3葡聚糖合成酶甘露糖蛋白MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验 (1,31,31,31,3)-D-D-D-D-葡聚糖广泛存在于真菌细胞壁葡聚糖广泛存在于真菌细胞壁葡聚糖广泛存在于真菌细胞壁葡聚糖广泛存在于真菌细胞壁中,占真菌壁成分中,占真菌壁成分中,占真菌壁成分中,占真菌壁成分50%5
16、0%50%50%以上。以上。以上。以上。 是真菌细胞壁上的特有成分是真菌细胞壁上的特有成分是真菌细胞壁上的特有成分是真菌细胞壁上的特有成分 用于侵袭性真菌感染的早期诊断用于侵袭性真菌感染的早期诊断用于侵袭性真菌感染的早期诊断用于侵袭性真菌感染的早期诊断1-3-D-葡聚糖本质及特点(1-3)-D-葡聚糖特性1.2.3. 对热极为稳对热极为稳对热极为稳对热极为稳定,高压定,高压定,高压定,高压121121并并并并不能使其灭活。在不能使其灭活。在不能使其灭活。在不能使其灭活。在念珠菌和曲霉菌细念珠菌和曲霉菌细念珠菌和曲霉菌细念珠菌和曲霉菌细胞壁中含量较多,胞壁中含量较多,胞壁中含量较多,胞壁中含量较
17、多,对对对对GG试验灵敏试验灵敏试验灵敏试验灵敏。 当真菌进入人当真菌进入人当真菌进入人当真菌进入人体血液或深部组织体血液或深部组织体血液或深部组织体血液或深部组织后,经吞噬细胞的后,经吞噬细胞的后,经吞噬细胞的后,经吞噬细胞的吞噬、消化等处理吞噬、消化等处理吞噬、消化等处理吞噬、消化等处理后,后,后,后,(1-3)-D-(1-3)-D-葡葡葡葡聚糖可从胞壁中释聚糖可从胞壁中释聚糖可从胞壁中释聚糖可从胞壁中释放出来,从而使血放出来,从而使血放出来,从而使血放出来,从而使血液及其它体液中含液及其它体液中含液及其它体液中含液及其它体液中含量增高。当真菌在量增高。当真菌在量增高。当真菌在量增高。当真
18、菌在体内含量减少时,体内含量减少时,体内含量减少时,体内含量减少时,机体免疫系统可将机体免疫系统可将机体免疫系统可将机体免疫系统可将其清除其清除其清除其清除。 在浅部真菌在浅部真菌在浅部真菌在浅部真菌感染中,感染中,感染中,感染中,(1-3)-(1-3)-D-D-葡聚糖未被释葡聚糖未被释葡聚糖未被释葡聚糖未被释放出来,故其在放出来,故其在放出来,故其在放出来,故其在体液中的量不增体液中的量不增体液中的量不增体液中的量不增高高高高。MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验G试验检测的特点可检测多种致病真菌感染:可检测多种致病真菌感染:可检测多种致病真菌感染:可检测多种致病真菌感染:
19、念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,毛孢子菌等毛孢子菌等毛孢子菌等毛孢子菌等MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验 G G G G试验检测一般先于临床症状平均四天试验检测一般先于临床症状平均四天试验检测一般先于临床症状平均四天试验检测一般先于临床症状平均四天 BGBG值升高平均早于发热值升高平均早于发热值升高平均早于发热值升高平均早于发热5 d5 d, 早于呼吸道症状平均早于呼吸道症状平均早于呼吸道症状平均早于呼吸道症状平均10107 d7 d, 早于早于早于早于
20、HRCTHRCT检查平均检查平均检查平均检查平均9 93 d3 d。 高高 蕾,蕾, 周周 新新.(1,3)一一 D葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的诊断意义葡聚糖检测在侵袭性真菌感染中的诊断意义J.中国感染与化疗杂志中国感染与化疗杂志,2008,3 (2),123-125. 对于念珠菌血症对于念珠菌血症对于念珠菌血症对于念珠菌血症, G, G, G, G试验检测是首选检查试验检测是首选检查试验检测是首选检查试验检测是首选检查 J. Clin. Microbiol. 2008.46:10091013. 侵袭性真菌感染的诊断标准侵袭性真菌感染的诊断标准EORTC/MSG2008EORTC/MSG20
21、08修订版修订版 宿主因素宿主因素宿主因素宿主因素 临床特征临床特征临床特征临床特征 病原学病原学病原学病原学 真菌镜检真菌镜检真菌镜检真菌镜检 真菌培养真菌培养真菌培养真菌培养 组织病理学检查组织病理学检查组织病理学检查组织病理学检查 血清学检查方法(间接证据)血清学检查方法(间接证据)血清学检查方法(间接证据)血清学检查方法(间接证据) G-testG-test临床诊断临床诊断临床诊断临床诊断Clinical Infectious Diseases 2008; 46微生物学标准: (1 1)痰或支气管肺泡灌洗液培养呈霉菌)痰或支气管肺泡灌洗液培养呈霉菌)痰或支气管肺泡灌洗液培养呈霉菌)痰或
22、支气管肺泡灌洗液培养呈霉菌 (2 2)鼻窦抽取液直接镜检或细胞学检查,或培养呈霉菌)鼻窦抽取液直接镜检或细胞学检查,或培养呈霉菌)鼻窦抽取液直接镜检或细胞学检查,或培养呈霉菌)鼻窦抽取液直接镜检或细胞学检查,或培养呈霉菌阳性;阳性;阳性;阳性; (3 3)痰或支气管肺泡灌洗液经直接镜检或细胞学检查发)痰或支气管肺泡灌洗液经直接镜检或细胞学检查发)痰或支气管肺泡灌洗液经直接镜检或细胞学检查发)痰或支气管肺泡灌洗液经直接镜检或细胞学检查发现霉菌或隐球菌;现霉菌或隐球菌;现霉菌或隐球菌;现霉菌或隐球菌; (4 4)支气管肺泡灌洗液、脑脊液或)支气管肺泡灌洗液、脑脊液或)支气管肺泡灌洗液、脑脊液或)支
23、气管肺泡灌洗液、脑脊液或2 2份以上的血液样品份以上的血液样品份以上的血液样品份以上的血液样品呈曲霉菌抗原(半乳甘露聚糖检测、呈曲霉菌抗原(半乳甘露聚糖检测、呈曲霉菌抗原(半乳甘露聚糖检测、呈曲霉菌抗原(半乳甘露聚糖检测、GMGM试验)阳性;试验)阳性;试验)阳性;试验)阳性;(5)血液中)血液中(1,3)-D葡聚糖检测(葡聚糖检测(G试验)阳性;试验)阳性;(6 6)血中隐球菌抗原阳性;)血中隐球菌抗原阳性;)血中隐球菌抗原阳性;)血中隐球菌抗原阳性; (7 7)无菌体液中经直接镜检或细胞学检查发现真菌;)无菌体液中经直接镜检或细胞学检查发现真菌;)无菌体液中经直接镜检或细胞学检查发现真菌;
24、)无菌体液中经直接镜检或细胞学检查发现真菌; (8 8)未留置尿管的情况下,连续)未留置尿管的情况下,连续)未留置尿管的情况下,连续)未留置尿管的情况下,连续2 2份尿样培养均呈酵母份尿样培养均呈酵母份尿样培养均呈酵母份尿样培养均呈酵母菌阳性或尿检见念珠菌管型;菌阳性或尿检见念珠菌管型;菌阳性或尿检见念珠菌管型;菌阳性或尿检见念珠菌管型; (9 9)血培养呈酵母菌阳性;)血培养呈酵母菌阳性;)血培养呈酵母菌阳性;)血培养呈酵母菌阳性; (1010)肺部异常,与下呼吸道感染相关的标本中(血液、)肺部异常,与下呼吸道感染相关的标本中(血液、)肺部异常,与下呼吸道感染相关的标本中(血液、)肺部异常,
25、与下呼吸道感染相关的标本中(血液、痰液和支气管肺泡灌洗液等)多次培养无任何致病细菌。痰液和支气管肺泡灌洗液等)多次培养无任何致病细菌。痰液和支气管肺泡灌洗液等)多次培养无任何致病细菌。痰液和支气管肺泡灌洗液等)多次培养无任何致病细菌。 宿主宿主因素因素临床临床表现表现+组织组织病理病理+微生微生物学物学+Ascioglu et al 2002 Clin Infect Dis 34 7-14拟诊拟诊临床诊断临床诊断确诊确诊侵袭性真菌感染的诊断标准侵袭性真菌感染的诊断标准:0 0 0 036363636373737373838383839393939404040404141体温体温体温体温 (C)
26、 (C) (C) (C)实验室检查指导临床诊断与治疗组织培养组织培养组织培养组织培养+组织学检查组织学检查组织学检查组织学检查 +G G G G、GMGMGMGM试验试验试验试验+PCRPCRPCRPCR +治疗策略治疗策略疾病疑似疾病疑似程度程度-7-7-7-70 0 0 07 7 7 71414141421212121282828283535353542424242494949495656565663636363-14-14-14-140.10.10.10.11 1 1 110101010粒细胞粒细胞粒细胞粒细胞 (log (log (log (log10101010x10x10x10x1
27、09 9 9 9/L/L/L/L) ) ) )经验性治疗经验性治疗经验性治疗经验性治疗拟诊拟诊拟诊拟诊预防预防预防预防低低低低特异治疗特异治疗特异治疗特异治疗确诊确诊确诊确诊抢先治疗抢先治疗抢先治疗抢先治疗临床诊断临床诊断临床诊断临床诊断宿主宿主因素因素-常平常平常平常平 南方医科大学珠江医院南方医科大学珠江医院南方医科大学珠江医院南方医科大学珠江医院 重症医学科重症医学科重症医学科重症医学科Part III临床评价临床评价Part IGG试验试验试验试验- -真菌检测真菌检测真菌检测真菌检测内毒素检测内毒素检测Part II内毒素定量检测内毒素定量检测内毒素定量检测内毒素定量检测在临床治疗中
28、的重要意义在临床治疗中的重要意义在临床治疗中的重要意义在临床治疗中的重要意义项目介绍:项目介绍:项目介绍:项目介绍:定义细菌内毒素(细菌内毒素(细菌内毒素(细菌内毒素( EndotoxinEndotoxinEndotoxinEndotoxin )是是是是G G- -菌菌菌菌细胞壁上的特有结构,为外源性致热细胞壁上的特有结构,为外源性致热细胞壁上的特有结构,为外源性致热细胞壁上的特有结构,为外源性致热原,它可激活中性粒细胞等,使之释原,它可激活中性粒细胞等,使之释原,它可激活中性粒细胞等,使之释原,它可激活中性粒细胞等,使之释放出一种内源性热原质,作用于体温放出一种内源性热原质,作用于体温放出一
29、种内源性热原质,作用于体温放出一种内源性热原质,作用于体温调节中枢引起发热。内毒素的主要化调节中枢引起发热。内毒素的主要化调节中枢引起发热。内毒素的主要化调节中枢引起发热。内毒素的主要化学成分为学成分为学成分为学成分为脂多糖脂多糖脂多糖脂多糖(LPSLPS)中的类脂)中的类脂)中的类脂)中的类脂A A。内毒素的代谢内毒素的代谢内毒素的代谢内毒素的代谢目前实验研究认为:一般细菌内毒素在体目前实验研究认为:一般细菌内毒素在体目前实验研究认为:一般细菌内毒素在体目前实验研究认为:一般细菌内毒素在体内内内内1-1.51-1.5小时达到最高峰值,小时达到最高峰值,小时达到最高峰值,小时达到最高峰值,5-
30、65-6小时逐渐小时逐渐小时逐渐小时逐渐衰减下来。衰减下来。衰减下来。衰减下来。体内内毒素的来源菌体死亡或人工裂解菌体死亡或人工裂解菌体死亡或人工裂解菌体死亡或人工裂解革兰氏阴性菌的释放革兰氏阴性菌的释放革兰氏阴性菌的释放革兰氏阴性菌的释放肠道内毒素的吸收肠道内毒素的吸收肠道内毒素的吸收肠道内毒素的吸收败血症时血中细菌的释放败血症时血中细菌的释放败血症时血中细菌的释放败血症时血中细菌的释放外源性输入外源性输入外源性输入外源性输入体内内体内内体内内体内内毒素的毒素的毒素的毒素的来源来源来源来源检测物质检测物质检测物质检测物质: :脂多糖脂多糖脂多糖脂多糖( (内毒素主要成分内毒素主要成分内毒素主
31、要成分内毒素主要成分) )脂多糖可特异性激活鲎(脂多糖可特异性激活鲎(脂多糖可特异性激活鲎(脂多糖可特异性激活鲎(LimulusLimulus)变变变变形细胞裂解物中的形细胞裂解物中的形细胞裂解物中的形细胞裂解物中的C C因子,再激活因子,再激活因子,再激活因子,再激活B B因因因因子,经过一系列反应,最终引起裂解子,经过一系列反应,最终引起裂解子,经过一系列反应,最终引起裂解子,经过一系列反应,最终引起裂解物凝固的过程。物凝固的过程。物凝固的过程。物凝固的过程。实验原理:实验原理图实验原理图: 细菌内毒素细菌内毒素细菌内毒素细菌内毒素 因子因子因子因子C C C C 活化因子活化因子活化因子
32、活化因子C C C C 因子因子因子因子B B B B 活化因子活化因子活化因子活化因子B B B B 凝固酶原凝固酶原凝固酶原凝固酶原 凝固酶凝固酶凝固酶凝固酶 凝固蛋白原凝固蛋白原凝固蛋白原凝固蛋白原 凝固蛋白(凝胶)凝固蛋白(凝胶)凝固蛋白(凝胶)凝固蛋白(凝胶)传统热原检测方法与MB-80方法比较传统方法传统方法 MB-80MB-80方法方法 实验方法实验方法凝胶法凝胶法动态比浊法动态比浊法性质性质 定性定性 定量定量 结果判读结果判读肉眼观察肉眼观察准确数值,打印检测报告准确数值,打印检测报告使用试剂使用试剂鲎试剂鲎试剂革兰氏阴性菌脂多糖检测试剂革兰氏阴性菌脂多糖检测试剂盒盒(具有(
33、具有SFDASFDA颁发的注册证颁发的注册证) )内毒素检测的临床应用内毒素检测内毒素检测内毒素检测内毒素检测的临床应用的临床应用的临床应用的临床应用革兰阴性菌败血症的诊断革兰阴性菌败血症的诊断革兰阴性菌败血症的诊断革兰阴性菌败血症的诊断呼吸道感染呼吸道感染呼吸道感染呼吸道感染肝脏感染及肝硬化肝脏感染及肝硬化肝脏感染及肝硬化肝脏感染及肝硬化胆道疾病胆道疾病胆道疾病胆道疾病急性胰腺炎急性胰腺炎急性胰腺炎急性胰腺炎溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎细菌性感染的辅助性诊细菌性感染的辅助性诊细菌性感染的辅助性诊细菌性感染的辅助性诊断、治疗和预后判断断、治疗和预后判断断、治疗和预后判断断、
34、治疗和预后判断原因不明的发热原因不明的发热原因不明的发热原因不明的发热外源性输注的内毒素血症外源性输注的内毒素血症外源性输注的内毒素血症外源性输注的内毒素血症的诊断的诊断的诊断的诊断体液内毒素水平是严重细菌性炎症的一个重要体液内毒素水平是严重细菌性炎症的一个重要体液内毒素水平是严重细菌性炎症的一个重要体液内毒素水平是严重细菌性炎症的一个重要的特异性指标,而且也是脓毒症和多脏器衰竭的可的特异性指标,而且也是脓毒症和多脏器衰竭的可的特异性指标,而且也是脓毒症和多脏器衰竭的可的特异性指标,而且也是脓毒症和多脏器衰竭的可靠指标。不仅可用于感染类别的鉴别诊断,也可用靠指标。不仅可用于感染类别的鉴别诊断,
35、也可用靠指标。不仅可用于感染类别的鉴别诊断,也可用靠指标。不仅可用于感染类别的鉴别诊断,也可用于感染控制和病情转归的判定。于感染控制和病情转归的判定。于感染控制和病情转归的判定。于感染控制和病情转归的判定。内毒素检测的临床意义内毒素检测的临床意义1.1.1.1.系统组成:系统组成:系统组成:系统组成: 1 1 1 1)仪器)仪器)仪器)仪器 MB-80MB-80MB-80MB-80主机主机主机主机(MB-80(E)MB-80(E)、MB-80(D)MB-80(D)、MB-80(S)MB-80(S)、MB-80(V)MB-80(V)、MB-80(M)MB-80(M)) 2 2 2 2)MB-80
36、MB-80MB-80MB-80软件系统软件系统软件系统软件系统 3 3 3 3)试剂)试剂)试剂)试剂 ( ( ( (配套真菌、内毒素试剂盒)配套真菌、内毒素试剂盒)配套真菌、内毒素试剂盒)配套真菌、内毒素试剂盒) 4 4 4 4)配套无热原耗材)配套无热原耗材)配套无热原耗材)配套无热原耗材2.2.2.2.系统功能:系统功能:系统功能:系统功能: 快速定量检测快速定量检测快速定量检测快速定量检测深部真菌和内毒素深部真菌和内毒素深部真菌和内毒素深部真菌和内毒素,帮助临床医生早期诊断目前常,帮助临床医生早期诊断目前常,帮助临床医生早期诊断目前常,帮助临床医生早期诊断目前常规方法难以确诊的侵袭性真
37、菌感染、革兰氏阴性菌感染,便于临规方法难以确诊的侵袭性真菌感染、革兰氏阴性菌感染,便于临规方法难以确诊的侵袭性真菌感染、革兰氏阴性菌感染,便于临规方法难以确诊的侵袭性真菌感染、革兰氏阴性菌感染,便于临床医生的早期诊断、床医生的早期诊断、床医生的早期诊断、床医生的早期诊断、早期治疗及对治疗的疗效进行判定。早期治疗及对治疗的疗效进行判定。早期治疗及对治疗的疗效进行判定。早期治疗及对治疗的疗效进行判定。3.3.可检测标本可检测标本可检测标本可检测标本 :血液血液血液血液、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等。
38、血液透析液,透析用水血液透析液,透析用水血液透析液,透析用水血液透析液,透析用水-(内毒素检测)(内毒素检测)(内毒素检测)(内毒素检测)MB-80系统MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验MB-80优势快速快速快速快速 -1-1-1-1个小时完成检测个小时完成检测个小时完成检测个小时完成检测动态动态动态动态 -动态检测动态检测动态检测动态检测定量定量定量定量 -定量检测定量检测定量检测定量检测灵敏灵敏灵敏灵敏 -真菌真菌真菌真菌(1-31-31-31-3)- - - -D-D-D-D葡聚糖葡聚糖葡聚糖葡聚糖最低检测量最低检测量最低检测量最低检测量5pg/ml 5pg/ml 5
39、pg/ml 5pg/ml 内毒素最低检测量内毒素最低检测量内毒素最低检测量内毒素最低检测量1pg/ml1pg/ml1pg/ml1pg/mlMB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验适合服务临床科室 呼吸科呼吸科呼吸科呼吸科 血液科血液科血液科血液科 肿瘤科肿瘤科肿瘤科肿瘤科 烧伤科烧伤科烧伤科烧伤科 感染科感染科感染科感染科 ICU ICU ICU ICU病房病房病房病房 器官移植部门等器官移植部门等器官移植部门等器官移植部门等MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验仪器检测原理仪器检测原理 动态比浊法:动态比浊法:动态比浊法:动态比浊法: 动态定量检测真菌可溶性抗原
40、(动态定量检测真菌可溶性抗原(动态定量检测真菌可溶性抗原(动态定量检测真菌可溶性抗原(1-31-31-31-3)- - - -D-D-D-D葡聚糖,革兰葡聚糖,革兰葡聚糖,革兰葡聚糖,革兰阴性菌可溶性抗原(脂多糖),系统通过测定生物试剂与检阴性菌可溶性抗原(脂多糖),系统通过测定生物试剂与检阴性菌可溶性抗原(脂多糖),系统通过测定生物试剂与检阴性菌可溶性抗原(脂多糖),系统通过测定生物试剂与检测样品中抗原抗体反应生成浊度,采用动态比浊法,连续检测样品中抗原抗体反应生成浊度,采用动态比浊法,连续检测样品中抗原抗体反应生成浊度,采用动态比浊法,连续检测样品中抗原抗体反应生成浊度,采用动态比浊法,连
41、续检测浊度的变化测浊度的变化测浊度的变化测浊度的变化, , , ,建立时间(建立时间(建立时间(建立时间(T T T T)与微生物含量()与微生物含量()与微生物含量()与微生物含量(C C C C)关系的标准)关系的标准)关系的标准)关系的标准曲线,通过光电转换原理,经软件系统分析得出具体检测值,曲线,通过光电转换原理,经软件系统分析得出具体检测值,曲线,通过光电转换原理,经软件系统分析得出具体检测值,曲线,通过光电转换原理,经软件系统分析得出具体检测值,得出检测样品中含真菌或内毒素含量得出检测样品中含真菌或内毒素含量得出检测样品中含真菌或内毒素含量得出检测样品中含真菌或内毒素含量。 MB-
42、80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验临床阈值Cut-offCut-off:阴性:阴性:阴性:阴性10 pg/ml10 pg/ml中介中介中介中介1020 pg/ml1020 pg/ml阳性阳性阳性阳性20 pg/ml20 pg/ml儿童阳性儿童阳性儿童阳性儿童阳性50pg/ml50pg/ml(真菌检测)(真菌检测)(真菌检测)(真菌检测)MB-80系统定量测定(1-3)-D-葡聚糖的临床意义深部真菌感染增多且复杂,早期症状无特异性,往往深部真菌感染增多且复杂,早期症状无特异性,往往深部真菌感染增多且复杂,早期症状无特异性,往往深部真菌感染增多且复杂,早期症状无特异性,往往被原发病掩
43、盖,病程长,发现较晚,死亡率高。因此被原发病掩盖,病程长,发现较晚,死亡率高。因此被原发病掩盖,病程长,发现较晚,死亡率高。因此被原发病掩盖,病程长,发现较晚,死亡率高。因此对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断。对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断。对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断。对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断。vv早期诊断早期诊断早期诊断早期诊断vv快速诊断快速诊断快速诊断快速诊断vv指导用药指导用药指导用药指导用药vv评价效果评价效果评价效果评价效果真菌感染就医的患者,往往病情严重,传统的微生物真菌感染就医的患者,往往病情严重,传统的微生物真菌感染就医的患者,往
44、往病情严重,传统的微生物真菌感染就医的患者,往往病情严重,传统的微生物分离、培养与鉴定需要时间较长,患者在等待期间有分离、培养与鉴定需要时间较长,患者在等待期间有分离、培养与鉴定需要时间较长,患者在等待期间有分离、培养与鉴定需要时间较长,患者在等待期间有可能病情加重,甚至死亡。可能病情加重,甚至死亡。可能病情加重,甚至死亡。可能病情加重,甚至死亡。快速确定真菌感染后,选择好治疗方案快速确定真菌感染后,选择好治疗方案快速确定真菌感染后,选择好治疗方案快速确定真菌感染后,选择好治疗方案, ,有针对性使有针对性使有针对性使有针对性使用抗真菌类药物。为临床选用副作用小,疗效高,价用抗真菌类药物。为临床
45、选用副作用小,疗效高,价用抗真菌类药物。为临床选用副作用小,疗效高,价用抗真菌类药物。为临床选用副作用小,疗效高,价格适宜的药物提供准确的依据。格适宜的药物提供准确的依据。格适宜的药物提供准确的依据。格适宜的药物提供准确的依据。应用抗真菌药物后,定期检测血浆中葡聚糖浓度变化,应用抗真菌药物后,定期检测血浆中葡聚糖浓度变化,应用抗真菌药物后,定期检测血浆中葡聚糖浓度变化,应用抗真菌药物后,定期检测血浆中葡聚糖浓度变化,评价选用药物的有效性。评价选用药物的有效性。评价选用药物的有效性。评价选用药物的有效性。MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验临床评价临床评价例1-徐英春北京协和医
46、院检验科肝炎,右肺实变,右胸腔积液肝炎,右肺实变,右胸腔积液肝炎,右肺实变,右胸腔积液肝炎,右肺实变,右胸腔积液支气管镜做细菌,支气管镜做细菌,支气管镜做细菌,支气管镜做细菌,TBTB、真菌,血培养结果均阴、真菌,血培养结果均阴、真菌,血培养结果均阴、真菌,血培养结果均阴性性性性8-19:ICU:8-19:ICU: 经验治疗:拜复乐经验治疗:拜复乐经验治疗:拜复乐经验治疗:拜复乐+ +万古霉素万古霉素万古霉素万古霉素8-208-20 痰涂片:在中性粒细胞内可见革兰阳性球菌少量痰涂片:在中性粒细胞内可见革兰阳性球菌少量痰涂片:在中性粒细胞内可见革兰阳性球菌少量痰涂片:在中性粒细胞内可见革兰阳性球
47、菌少量 PCT:7.9ng/mlPCT:7.9ng/ml 治疗:特治星治疗:特治星治疗:特治星治疗:特治星+ +万古霉素万古霉素万古霉素万古霉素 8-268-26 T T:38C38C,不能脱呼吸机,不能脱呼吸机,不能脱呼吸机,不能脱呼吸机 WBC:15.0x109/LWBC:15.0x109/L 8-27:8-27:会诊会诊会诊会诊 COPDCOPD? 非典病原体?非典病原体?非典病原体?非典病原体? PCPPCP? 真菌?真菌?真菌?真菌? 抗菌药物?检查:抗菌药物?检查:抗菌药物?检查:抗菌药物?检查:G G试验试验试验试验GG试验:试验:试验:试验: 80.16pg/ml 80.16p
48、g/ml 泰能+斯沃+两性BG试验(pg/ml)变化情况GG试验:试验:试验:试验:9.319.31体温的变化情况 泰能+斯沃+两性B WBC(109/L)的变化情况泰能+斯沃+两性B总结分析前:无热原采血管、清洁的检测环境分析前:无热原采血管、清洁的检测环境连续连续2次次G试验阳性,可提高敏感性和试验阳性,可提高敏感性和PPV临床可能出现假阳性情况,请结合其它检测结果和临床情况进临床可能出现假阳性情况,请结合其它检测结果和临床情况进行分析行分析动态监测:反映感染、疗效、有助于分析假阳性动态监测:反映感染、疗效、有助于分析假阳性重视涂片、培养、药敏重视涂片、培养、药敏基础基础检测结果一定要结合
49、临床进行分析,不可孤立!检测结果一定要结合临床进行分析,不可孤立!结 论 MB-80MB-80微生物快速动态检测系统通过临床微生物快速动态检测系统通过临床微生物快速动态检测系统通过临床微生物快速动态检测系统通过临床对比试验,证明该仪器可敏感、特异、快对比试验,证明该仪器可敏感、特异、快对比试验,证明该仪器可敏感、特异、快对比试验,证明该仪器可敏感、特异、快速检测出人体血液中的速检测出人体血液中的速检测出人体血液中的速检测出人体血液中的1-3-D1-3-D葡聚糖、脂葡聚糖、脂葡聚糖、脂葡聚糖、脂多糖含量,结果准确可靠,多糖含量,结果准确可靠,多糖含量,结果准确可靠,多糖含量,结果准确可靠,能为临
50、床医生能为临床医生能为临床医生能为临床医生早期确诊深部真菌感染及革兰氏阴性菌感早期确诊深部真菌感染及革兰氏阴性菌感早期确诊深部真菌感染及革兰氏阴性菌感早期确诊深部真菌感染及革兰氏阴性菌感染提供有价值的诊治参考依据。染提供有价值的诊治参考依据。染提供有价值的诊治参考依据。染提供有价值的诊治参考依据。 -中华医院感染学杂志中华医院感染学杂志中华医院感染学杂志中华医院感染学杂志, 2005, 15(3): 354-355, 2005, 15(3): 354-355 MB-80系系统简介介侵侵袭性真菌感染性真菌感染G试验MB-80MB-80微生物快速定量检测系统微生物快速定量检测系统 部分医院客户名单
51、部分医院客户名单联系我们 总公司总公司总公司总公司: : : :北京金山川科技发展有北京金山川科技发展有北京金山川科技发展有北京金山川科技发展有限公司限公司限公司限公司 地址地址地址地址: : : :北京海淀区白石桥路北京海淀区白石桥路北京海淀区白石桥路北京海淀区白石桥路30303030号号号号 邮政编码邮政编码邮政编码邮政编码:100083:100083:100083:100083 传真传真传真传真: : : : 电话电话电话电话: : : : 网页网页网页网页:mount-:mount-:mount-:mount-vv分公司分公司分公司分公司: : : :天津市一瑞生物工程天津市一瑞生物工
52、程天津市一瑞生物工程天津市一瑞生物工程有限公司有限公司有限公司有限公司vv地址地址地址地址: : : :天津开发区天大科技园天津开发区天大科技园天津开发区天大科技园天津开发区天大科技园C8C8C8C8楼三层楼三层楼三层楼三层vv邮政编码邮政编码邮政编码邮政编码:300457:300457:300457:300457vv传真传真传真传真: : : :vv电话电话电话电话:/82:/82:/82:/82vv邮箱:邮箱:邮箱:邮箱:xinxiangmount -xinxiangmount -xinxiangmount -xinxiangmount -上海办事处:上海办事处:上海办事处:上海办事处:免费售后服务电话:免费售后服务电话:免费售后服务电话:免费售后服务电话:400-811-9958400-811-9958400-811-9958400-811-9958谢谢各位专家谢谢各位专家欢迎指导!欢迎指导!北京金山川科技发展有限公司北京金山川科技发展有限公司北京金山川科技发展有限公司北京金山川科技发展有限公司天津市一瑞生物工程有限公司天津市一瑞生物工程有限公司天津市一瑞生物工程有限公司天津市一瑞生物工程有限公司