维生素C含量的测定

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1、实验六 维生素C含量的测定（2, 6-D滴定法）一、目的意义人类营养中最重要的维生素之一。缺乏时引人类营养中最重要的维生素之一。缺乏时引起坏血病。起坏血病。果蔬品质的重要指标之一。果蔬品质的重要指标之一。不同栽培条件，不同成熟度都可以影响水果、不同栽培条件，不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中维生素蔬菜中维生素C C的含量。的含量。水果、蔬菜保鲜贮藏必须测定维生素水果、蔬菜保鲜贮藏必须测定维生素C C含量，含量，了解果蔬品质量的高低。了解果蔬品质量的高低。测定方法：还原型还原型抗坏血酸抗坏血酸氧化型氧化型2.6-2.6-二氯酚靛酚二氯酚靛酚 （红色）（红色）还原型还原型2.6-2.6-二氯酚靛酚二

2、氯酚靛酚 （无色）（无色）氧化型氧化型2.6-2.6-二氯酚靛酚（蓝色）二氯酚靛酚（蓝色） O =C |HO C HO C | H C |HO CH | CH2OHO O =C | O = C | O = C | H C |HO CH | CH2OHO脱氢脱氢抗坏血酸抗坏血酸=NO-Cl |O= |Cl=NOHCl |O= |ClNOHCl |HO |Cl |HH+OH-三、操作步骤三、操作步骤1. 1. 样品提取样品提取5g 5g 5g 5g 新鲜蔬菜新鲜蔬菜新鲜蔬菜新鲜蔬菜少量少量少量少量 2%2%2%2%草酸草酸草酸草酸石英砂石英砂石英砂石英砂充分研磨成匀浆充分研磨成匀浆充分研磨成匀浆充

3、分研磨成匀浆用用用用2% 2% 2% 2% 草酸草酸草酸草酸洗入容量瓶洗入容量瓶洗入容量瓶洗入容量瓶, , , ,并定容至并定容至并定容至并定容至100 mL100 mL100 mL100 mL干燥滤纸干燥滤纸过滤过滤快速匀浆？快速匀浆？快速匀浆？快速匀浆？为什么？为什么？为什么？为什么？ 2. 2.染料标定染料标定及样品中及样品中VcVc测定测定试剂（ml）空白染料标定1染料标定2样品测定1样品测定22%草酸100000标准Vc 0101000样品提取液00010102, 6-D滴定值y1Vy0 取取取取5 5 5 5个个个个50 mL50 mL50 mL50 mL干燥洁净的三角瓶，编号干燥

4、洁净的三角瓶，编号干燥洁净的三角瓶，编号干燥洁净的三角瓶，编号, , , ,按下表操作按下表操作按下表操作按下表操作: : : :l y y1 1-滴定滴定空白空白所用染料所用染料mlml数数l y y0 0-滴定滴定样品样品所用染料所用染料mlml数数l A A-1mL-1mL染料溶液相当的抗坏血酸的染料溶液相当的抗坏血酸的mgmg数数四、结果计算样品重样品重(g) 10010010抗坏血酸含量抗坏血酸含量（mg/100g mg/100g 鲜重）鲜重） = =（y0-y1）A从从上述标定求出上述标定求出五、注意事项1. Vc1. Vc不稳定，在空气中易被氧化，不稳定，在空气中易被氧化，研磨时

5、，尽可能要快，研磨时，尽可能要快，以减少以减少VcVc的氧化的氧化。2. 2% 2. 2% 草酸可以有效抑制草酸可以有效抑制VcVc氧化酶活性。若用样品含有大氧化酶活性。若用样品含有大量量FeFe2+2+，可用，可用8%8%醋酸溶液提取，因在醋酸溶液提取，因在2%2%草酸中草酸中FeFe2+2+ 仍可仍可以还原以还原2,6-D, 2,6-D, 改用改用8%8%醋酸醋酸溶液提取，溶液提取，FeFe2+2+不会很快与不会很快与染料起作用。染料起作用。3.3.维生素维生素C C提取时要提取时要避光、避免与铜铁接触避光、避免与铜铁接触，以免，以免VcVc氧化。氧化。4. 样品提取液定容时若泡沫太多，可

6、加几滴样品提取液定容时若泡沫太多，可加几滴乙醚或辛乙醚或辛酸、丁醇消除泡沫酸、丁醇消除泡沫后再定容。后再定容。5. 当样品本身带有颜色时，可以用当样品本身带有颜色时，可以用白陶土脱色白陶土脱色。6. 滴定时间滴定时间一般一般不超过不超过2分钟分钟，滴定终点以淡红色存，滴定终点以淡红色存在在30秒秒为准。因为样品中某些杂质亦能还原为准。因为样品中某些杂质亦能还原2,6-D，但速度较，但速度较Vc慢，假如滴定速度过慢，其它物质也慢，假如滴定速度过慢，其它物质也会还原会还原2,6-D。六、思考题 1、为什么在测定维生素C的同时要进行2,6-D溶液的标定？ 2、为了保证抗坏血酸含量测定准确， 应注意些什么？