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1、乙型肝炎的病原学诊断乙型肝炎的病原学诊断 1要点要点n简介简介n抗原组成抗原组成n传染源传染源n传播途径传播途径n病原学诊断病原学诊断n血清学模式及临床意义血清学模式及临床意义End2A病毒性肝炎病毒性肝炎Hepatitis Virus肠道传播肠道传播肠道外传播肠道外传播F, TTV? 其它其它ENANBNANBBDC病毒性肝炎病毒性肝炎- 背景背景3传染源粪便血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液粪便传播途径粪-口经皮肤/经粘膜经皮肤/经粘膜经皮肤/经粘膜粪-口慢性感染否是是是否病毒性肝炎类型病毒性肝炎类型ABCDE基因组类型 ssRNA dsDNA ssRNA
2、ssRNA ssRNA4Hepatitis B Virusn乙型肝炎的病原体乙型肝炎的病原体n在全世界广泛流行，估计全球半数以上在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被人口已被HBV感染过，感染过，5%的人口为的人口为HBV慢性感染慢性感染n中国：乙肝高发区，人群中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出的检出率达率达9.8%5Hepatitis B Virus6HBV virionThe infectious virion is called the DANE particle.7Both comprised of HBsAg8HBV nomenclaturenHBV: hepatitis B
3、 virusnHBsAg: hepatitis B virus surface antigennHBsAb: hepatitis B virus surface antibodynHBcAg: hepatitis B virus core antigennHBcAb: hepatitis B virus core antibodynHBeAg: hepatitis B virus e antigennHBeAb: hepatitis B virus e antibody9抗原组成抗原组成( (一一)-)-HBsAgn位于病毒表面，是一种糖蛋白位于病毒表面，是一种糖蛋白n4种亚型种亚型(adr,
4、adw,ayr,ayw)n欧美国家欧美国家: adwn我国汉族我国汉族: adrn我国少数民族我国少数民族: aywn判断判断HBV感染的指标之一感染的指标之一n刺激机体产生保护性抗体即抗刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs10抗原组成抗原组成( (二二)- )- HBcAgn位于位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内，颗粒核心部分和肝细胞核内，在血清中不易检出游离的在血清中不易检出游离的HBcAgn主要成分是蛋白质主要成分是蛋白质n刺激机体产生抗刺激机体产生抗-HBc( (非保护性抗体非保护性抗体) )n在乙肝急性期、恢复期和在乙肝急性期、恢复期和HBsAg携带者携带者中常可检出抗中常可检出抗-
5、HBcn抗抗-HBc IgM常提示病毒处于复制状态常提示病毒处于复制状态11抗原组成抗原组成( (三三)- )- HBeAgn位于位于HBV的核心的核心,是一种可溶性蛋白抗原是一种可溶性蛋白抗原nHBeAg和和Dane颗粒出现相平行，且与颗粒出现相平行，且与DNA多多聚酶在血中的消长动态相符合聚酶在血中的消长动态相符合n血中血中HBeAg的出现可作为的出现可作为HBV复制及血清有复制及血清有感染性的指标感染性的指标n刺激机体产生抗刺激机体产生抗-HBen抗抗-HBe能与受染肝细胞表面的能与受染肝细胞表面的e抗原结合抗原结合,通通过补体介导破坏受染的肝细胞过补体介导破坏受染的肝细胞,抗抗-HBe
6、的出现的出现是预后良好的征象是预后良好的征象12抗原组成抗原组成( (四四)- Pre-S)- Pre-S抗原抗原n位于位于HBV的外衣壳上，有两种的外衣壳上，有两种n刺激机体产生抗刺激机体产生抗Pre-SPre-S1 1和抗和抗Pre-SPre-S2 2，能阻能阻断断HBV与肝细胞受体结合，从而起到抵与肝细胞受体结合，从而起到抵抗病毒抗病毒的作用的作用n抗抗Pre-SPre-S1 1和抗和抗Pre-SPre-S2 2的出现，表示病情好的出现，表示病情好转，趋向痊愈转，趋向痊愈13传染源传染源n患者患者n潜伏期潜伏期n急性期急性期n慢性期慢性期n无症状无症状HBsAg携带者携带者14高高中等中
7、等低低/不能检出不能检出血液血液精液精液尿尿血清血清阴道分泌物阴道分泌物粪便粪便伤口渗出物伤口渗出物唾液唾液汗液汗液泪液泪液乳汁乳汁各种体液中各种体液中HBV的浓度的浓度15血源性传播血源性传播输血、注射、外科和牙科手术、针刺等输血、注射、外科和牙科手术、针刺等剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等母婴垂直传播母婴垂直传播宫内传播宫内传播分娩时微小皮损处传播分娩时微小皮损处传播产后母婴密切接触产后母婴密切接触性传播性传播HBV 传播途径传播途径16n高高 (8%): 占占45%n一生感染的危险一生感染的危险 60%n婴幼儿感染常见婴幼儿感染常见n中等中等 (2%-7%): 占占43% n
8、一生感染的危险是一生感染的危险是 20%-60%n感染存在于所有年龄组感染存在于所有年龄组n低低 (2%): 占占12%n一生感染的危险一生感染的危险 20%n许多感染发生在成人危险组许多感染发生在成人危险组Global Patterns of Chronic HBV Infection17病原学诊断病原学诊断( (一一) )-抗原抗体检测抗原抗体检测n项目：项目：HBsAg、抗抗-HBs、HBeAg、抗抗-HBe、抗抗-HBc以及抗以及抗-HBc IgMn方法方法nELISA(enzyme-linked immunosorbent assay，最常用，定性最常用，定性)n发光免疫分析发光免疫
9、分析(定量定量)n反相间接血凝试验反相间接血凝试验(少用少用)18ELISA的基本原理的基本原理n利用抗原和抗体特异性结合利用抗原和抗体特异性结合n主要的试剂主要的试剂n固相抗原或抗体固相抗原或抗体n酶标记的抗原或抗体酶标记的抗原或抗体n酶的底物酶的底物19ELISA的主要方法的主要方法n间接法间接法: 测定抗测定抗-HBsn夹心法：测定夹心法：测定HBsAg和和HBeAgn竞争法：测定抗竞争法：测定抗-HBcn中和法：测定抗中和法：测定抗-HBen捕捉法：测定抗捕捉法：测定抗-HBc IgM图20病原学诊断病原学诊断( (二二) )核酸检测核酸检测n核酸杂交核酸杂交n探针探针nPCRn引物引
10、物21nHBsAg 感染的标志感染的标志nAnti-HBs 既往感染既往感染/接种疫苗接种疫苗nAnti-HBc IgM 急性感染标志急性感染标志nAnti-HBc IgG 既往或慢性感染既往或慢性感染nHBeAg 急性病毒复制，有传染性急性病毒复制，有传染性n Anti-HBe 病毒不再复制病毒不再复制nHBV-DNA 急急性性病病毒毒复复制制，比比HBeAg更更准准确确；主要用于监测治疗反应主要用于监测治疗反应22血清学检测的临床意义血清学检测的临床意义HBsAg 抗抗-HBs HBeAg 抗抗-HBe 抗抗-HBc 临床意义临床意义 急性或慢性感染急性或慢性感染(大三阳大三阳)+-+-+
11、乙肝后期或慢性感染乙肝后期或慢性感染(小三阳小三阳)-+-潜伏期或急性乙肝早期潜伏期或急性乙肝早期-+痊愈或恢复期痊愈或恢复期,有免疫力有免疫力-+-痊愈痊愈,有免疫力有免疫力疫苗接种或曾经感染过疫苗接种或曾经感染过,有免疫力有免疫力23SymptomsHBeAganti-HBeTotal anti-HBcIgM anti-HBcanti-HBsHBsAg0481216202428323652100Acute HBV Infection with RecoveryTypical Serologic CourseWeeks after ExposureTitre2425IgM anti-HBcTotal anti-HBcHBsAgAcute(6 months)HBeAgChronic(Years)anti-HBe048 12 16 20 24 28 32 3652YearsWeeks after ExposureTitreProgression to Chronic HBV InfectionTypical Serologic Course小结26返回27谢谢28
