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1、 概念：概念：将动物的一个细胞的将动物的一个细胞的细胞核细胞核，移入一，移入一个已经个已经去掉细胞核去掉细胞核的的卵母卵母细胞中，使其重组细胞中，使其重组并发育成一个新的并发育成一个新的胚胎胚胎，这个新的胚胎最终，这个新的胚胎最终发育成动物个体。发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物用核移植的方法得到的动物称为克隆动物称为克隆动物核移植核移植（难度高）（难度高）受体细胞：受体细胞：M期的期的卵母细胞卵母细胞二、动物体细胞核移植技术和克隆动物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物胚胎细胞核移植：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，细胞分化程度低，恢复全能性容易恢复全能性容
2、易1卵细胞卵细胞母绵羊母绵羊母绵羊母绵羊乳腺细胞乳腺细胞细胞质细胞质细胞核细胞核细胞核移植细胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C母绵羊子宫母绵羊子宫胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多多莉莉羊羊的的培培育育过过程程融合后的卵细胞融合后的卵细胞2、动物的克隆与植物克隆一样吗？、动物的克隆与植物克隆一样吗？、用动物体细胞进行克隆的过程、用动物体细胞进行克隆的过程,其实其实际操作过程是什么？际操作过程是什么？动物克隆过程的实际是动物克隆过程的实际是细胞核移植细胞核移植不不思考题思考题3卵母卵母细胞细胞去核去核体细体细胞取胞取核核电电刺刺激激使使两两细细胞胞融融合合重组细胞重组细胞重组胚胎重组
3、胚胎新个体新个体4、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用价值的动物提供的细胞。价值的动物提供的细胞。、用于核移植的供体细胞一般都选用传代、用于核移植的供体细胞一般都选用传代1010代以内的细胞，为什么？代以内的细胞，为什么？1010代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型，代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型，未发生突变未发生突变思考题思考题53 3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细、体细胞核移植方法生产
4、的克隆动物是对体细胞供体动物进行了胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？的复制吗？为什么？不是，克隆动物绝大部分不是，克隆动物绝大部分DNADNA来自供体细胞核，来自供体细胞核，但核外还有少部分但核外还有少部分DNADNA（如线粒体（如线粒体DNADNA）来自）来自受体卵母细胞受体卵母细胞思考题思考题64.4.动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？在在19971997年年2 2月英国罗斯林研究所维尔穆特博月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组公布体细胞克隆羊士科研组公布体细胞克隆羊“多莉多莉”培育成功培育成功之前，胚胎细胞核移植技术已经有了很大的发之
5、前，胚胎细胞核移植技术已经有了很大的发展。实际上，展。实际上，“多莉多莉”的克隆在核移植技术上的克隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程，但这并不沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程，但这并不能减低能减低“多莉多莉”的重大意义，因为它是世界上的重大意义，因为它是世界上第一例第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研究的巨大突破。这一巨大进展意味着：术领域研究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，同植物细胞一样，分化了的在理论上证明了，同植物细胞一样，分化了的动物动物细胞核细胞核也具有全能性也具有全能性 思考题思考题75、对比对比多莉羊和课本高
6、产奶牛的克隆过程，找多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？出操作过程的不同点？多莉克隆过程的受体细胞是多莉克隆过程的受体细胞是去核去核卵卵细胞细胞，而高产，而高产奶牛的克隆过程的受体细胞是奶牛的克隆过程的受体细胞是去核去核卵母卵母细胞细胞；多；多莉克隆过程是将供体莉克隆过程是将供体细胞核细胞核注入受体细胞，而高注入受体细胞，而高产奶牛的克隆过程是将供体产奶牛的克隆过程是将供体细胞细胞注入受体细胞。注入受体细胞。6 6、讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明、讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明理由？理由？ 卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵细
7、胞高，用它作受体更容易成功活性比卵细胞高，用它作受体更容易成功将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像供体动物，操作也方便供体动物，操作也方便思考题思考题8胚胎移植技术胚胎移植技术试管动物（婴儿）培养过程试管动物（婴儿）培养过程卵细胞卵细胞精子精子体外受精体外受精受精卵受精卵胚胎胚胎新个体新个体母体子宫内母体子宫内孕育、产出孕育、产出9体细胞核移植技术的应用前景体细胞核移植技术的应用前景 1、加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育、加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育2、保护濒危物种，增加存活数量、保护濒危物种，增加存活数量3、克隆动物作为生物反应器，生产
8、医用蛋白、克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白4、可以作为异种移植的供体，可以用于组织、可以作为异种移植的供体，可以用于组织器官的移植器官的移植10体细胞核移植技术存在的问题：体细胞核移植技术存在的问题：许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。器缺陷，免疫失调等。11v1、细胞的衰老与动物机体的衰老有着、细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖能力与供体的密切的关系，细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛
9、，老龄动物则相反。所以，有丝分裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼年动物的组织细胞比老年动一般来说幼年动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分化程度越低，则增殖能力越强，胞的分化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。所以更容易培养。122、脱分化又称去分化，是指分化细胞失、脱分化又称去分化，是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。植物的任何一部分，甚胞特性的过程。植物的任何一部分，甚至单个细胞都具有长成完整植株的能力。至单个细胞都具有长成完整植株的能力。但要发育成完整植株，必
10、须先脱分化，但要发育成完整植株，必须先脱分化，脱分化的细胞具有发育成任何组织的能脱分化的细胞具有发育成任何组织的能力，然后进行再分化，形成完整植株。力，然后进行再分化，形成完整植株。植物细胞培养主要用于农林生产中的作植物细胞培养主要用于农林生产中的作物、苗木育种，快速繁育种苗、培育无物、苗木育种，快速繁育种苗、培育无病毒植株等，这就要求植物的组织或细病毒植株等，这就要求植物的组织或细胞先进行脱分化。胞先进行脱分化。13动物细胞的培养有各种用途，一般而言，动物细胞的培养有各种用途，一般而言，动物细胞培养不需经过脱分化过程。因动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失高度
11、分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以，动去了发育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。要想使培养的动养时的脱分化过程了。要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。器官。14v3（1）可以用体细胞核移植技术克隆）可以用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达。卢辛达的产奶量很高，高产奶牛卢辛达。卢辛达的产奶量很高，说明它有高产奶的遗传基础，利用卢辛说明它有高产奶的遗传基础，利用卢辛达的体细胞
12、克隆的奶牛其遗传物质基本达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上全部来自该奶牛，其克隆牛具有高产上全部来自该奶牛，其克隆牛具有高产的遗传基础，如果精心培育和饲养，有的遗传基础，如果精心培育和饲养，有可能在世界范围内推广，克隆牛再与高可能在世界范围内推广，克隆牛再与高产的公牛自然繁殖，可得到很多高产的产的公牛自然繁殖，可得到很多高产的后代，从而加快奶牛改良进程。后代，从而加快奶牛改良进程。15v但同时需注意，该克隆牛不能无限制但同时需注意，该克隆牛不能无限制地推广，其数量不宜过多，尤其是在小地推广，其数量不宜过多，尤其是在小范围内不能无限的繁殖，以避免奶牛群范围内不能无限的繁殖，以避免奶牛群出现近亲
13、繁殖而引起种质衰退。出现近亲繁殖而引起种质衰退。16v3（2）首先从卢辛达耳朵（也可用别的组）首先从卢辛达耳朵（也可用别的组织、器官，耳朵在活体上容易取）上剪取一织、器官，耳朵在活体上容易取）上剪取一小块组织，在体外培养获得该组织（如软骨小块组织，在体外培养获得该组织（如软骨组织）的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢，组织）的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢，抽取卵母细胞体外培养成熟。用显微针去除抽取卵母细胞体外培养成熟。用显微针去除卵母细胞的核，再将耳细胞注入卵母细胞，卵母细胞的核，再将耳细胞注入卵母细胞，用电刺激方法使卵母细胞与体细胞融合，这用电刺激方法使卵母细胞与体细胞融合，这时供体核就进入了受体
14、卵母细胞，再用电刺时供体核就进入了受体卵母细胞，再用电刺激或化学物质激活注入了体细胞核的卵母细激或化学物质激活注入了体细胞核的卵母细胞，使其完成减数分裂和发育过程。核移植胞，使其完成减数分裂和发育过程。核移植胚胎在体外短时间培养后，挑选正常卵裂的胚胎在体外短时间培养后，挑选正常卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体母牛体内。胚胎植入经同期发情处理的受体母牛体内。17v4在研究方面，克隆动物基因组重新编在研究方面，克隆动物基因组重新编程的机制尚不清楚，克隆技术效率低，程的机制尚不清楚，克隆技术效率低，克隆动物畸形率高、死亡率高、易出现克隆动物畸形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。这些问题尚在研究中。早衰等问题。这些问题尚在研究中。v在应用上，生产克隆动物费用昂贵，在应用上，生产克隆动物费用昂贵，距大规模应用还有一定距离。距大规模应用还有一定距离。18
