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1、细菌生长曲线(growth curve)1.微生物群体生长(Population Growth)生长:微生物生长包括个体体积的增加及细胞数量的增多生长速率(Growth rate)是指单位时间内细胞数量或质量增加的量 从一个细胞变成两个细胞的时间间隔称代时(generation time)2. 生长曲线(Growth) Curve)描述微生物特别是单细胞微生物生长规律的描述微生物特别是单细胞微生物生长规律的曲线曲线在液体培养中,将微生物细胞接种到新鲜培养基中在特定条件下培养细胞以二分分裂繁殖以培养时间为横坐,以细胞数量的对数为纵坐标作图所得到的曲线即是微生物生长曲线微生物生长曲线制作原理示意图
2、细菌生长曲线可分为延滞期(lag phase),对数期(log phase),稳定期(stationary phase)和死亡期(death phase)3. 生长曲线中各时期的特点:延滞期(Lag Phase)现象:没有细胞的分裂繁殖及生长实质:细胞内代谢活跃,进行DNA复制,蛋白质及酶的合成,做好细胞分裂的准备这个时期的长短与细胞的遗传特性和培养条件有关对数生长期对数生长期 (Exponential phase )微生物的生长速率最大,并且是个常数代时稳定且最短如大肠杆菌在对数期的代时是20min细胞形态一致,细胞生理和生化特征稳定适合作为生化材料适合作为“种子”细胞群体生长机制用数学方法
3、研究细菌生长的对数期用数学方法研究细菌生长的对数期代数 细胞数或分裂结果 0 1,20 1 2,21 2 4,22 3 8,23 n 2n Y=X2n lg Y=lgX+nlg2, n=lgy-lgx/lg2生长曲线计算应用举例某处于对数期的大肠杆菌培养物的细胞浓度为100个/ml,经过400分钟培养,细胞的浓度增加到10亿个/ml求大肠杆菌的代时和繁殖代数n=lgy-lgx/lg2=lg109-102/0.3010=23.1代时G=17.3结果:代时是17.3分钟,400分钟内繁殖了23.1代对数期的细胞生长,红色表示直接的细胞数量,蓝色表示细胞的对数生长作图法确定微生物代时(Generat
4、ion time) 用群体生长数据对处于对数期的时间横坐标作图群体数量加倍时间可以直接从曲线上读出.稳定期(Stationary Phase)特征:细胞总数达到最大,新增加的细胞数量和死亡的细胞数量平衡细胞能量代谢和生物合成功能正常细胞生长速率降低为零有些细胞死亡,芽孢形成,合成代谢产物原因:营养限制氧气浓度降低影响好养菌和兼性厌氧菌的生长有毒代谢产物的积累细胞达到一定数量后细胞生长停止死亡期(Death Phase)细胞死亡是细胞失去生长繁殖的能力每小时内细胞死亡速率是常数在某种情况下细胞死亡伴随着细胞的裂解4. 生长曲线的实际应用 1) 微生物生长的控制微生物生长的控制 2) 微生物生长与感染微生物生长与感染 3) 微生物生长与食品腐败变质微生物生长与食品腐败变质 4) 微生物培养技术微生物培养技术根据微生物生长曲线,如何判断杀菌、抑菌和溶菌思考题:1.研究微生物生长曲线的意义2. 对数期的细胞有何特点,在实际中的意义