《磺胺嘧啶在不同病理生理状态的药代动力学研究及生物利用度测定》由会员分享，可在线阅读，更多相关《磺胺嘧啶在不同病理生理状态的药代动力学研究及生物利用度测定（25页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、磺胺嘧啶在不同病理、生理状态的药代动力学磺胺嘧啶在不同病理、生理状态的药代动力学研究及生物利用度测定研究及生物利用度测定 教学目的及实验内容教学目的及实验内容 n n1 1了解血药浓度测定的基本技术及程序。了解血药浓度测定的基本技术及程序。n n2 2掌握药代动力学重要参数意义及测定方法，了解药代掌握药代动力学重要参数意义及测定方法，了解药代动力学研究在新药研究中的作用与意义。动力学研究在新药研究中的作用与意义。n n3 3学习动物试验基本技术学习动物试验基本技术家兔不同给药途径的给药方家兔不同给药途径的给药方法及采血方法法及采血方法n n4 4通过观察不同病理情况下，磺胺嘧啶药物代谢动力学通
2、过观察不同病理情况下，磺胺嘧啶药物代谢动力学的变化，进一步理解影响药物体内过程的因素。的变化，进一步理解影响药物体内过程的因素。n n5 5通过观察通过观察NaHCONaHCO3 3对磺胺嘧啶体内过程的影响，进一步对磺胺嘧啶体内过程的影响，进一步理解药物相互作用在临床合理用药中的重要性。理解药物相互作用在临床合理用药中的重要性。n n实验内容：家兔血药浓度测定及药代动力学参数计算。实验内容：家兔血药浓度测定及药代动力学参数计算。 药代动力研究的基本内容n n药代动力学药代动力学药代动力学药代动力学（PharmacokeneticsPharmacokenetics）是用数学方式）是用数学方式定量
3、地研究药物在体内的吸收（定量地研究药物在体内的吸收（AbsorptionAbsorption）、）、分布分布(Distribution)(Distribution)、代谢、代谢(Metabolism)(Metabolism)、排泄、排泄(Excrection)(Excrection)的动态过程，尤其是按照血药浓度的的动态过程，尤其是按照血药浓度的变化规律，将机体模拟为数学模型，以药代动力变化规律，将机体模拟为数学模型，以药代动力学参数反映机体对药物的处置（学参数反映机体对药物的处置（DispositionDisposition）。）。药代动力学研究不仅可以描绘药物在动物及人体药代动力学研究不仅
4、可以描绘药物在动物及人体内的变化规律，同时可指导新药研究过程中先导内的变化规律，同时可指导新药研究过程中先导化合物的设计与筛选、优化给药途径、指导改进化合物的设计与筛选、优化给药途径、指导改进药物剂型。药物剂型。 药代动力学重要参数n n（一）半衰期（一）半衰期（一）半衰期（一）半衰期（half life, T1/2half life, T1/2）：）：）：）：药物在体内消除一半所需的时间。可通过测定药物在血浆或血清中浓度的衰变药物在体内消除一半所需的时间。可通过测定药物在血浆或血清中浓度的衰变求出。半衰期反映药物自体内消除（代谢、排泄）的快慢速度，是临床确定给药次数和间隔的重要依据之一。求出
5、。半衰期反映药物自体内消除（代谢、排泄）的快慢速度，是临床确定给药次数和间隔的重要依据之一。n nT1/2=0.693/keT1/2=0.693/ken n（二）表观分布容积（二）表观分布容积（二）表观分布容积（二）表观分布容积（apparent volume of distribution,Vdapparent volume of distribution,Vd）：）：）：）：体内药量和血药浓度的比值，此参数的意体内药量和血药浓度的比值，此参数的意义在于表示药物在组织中的分布范围广不广，结合程度高不高。义在于表示药物在组织中的分布范围广不广，结合程度高不高。C C越高，越高，VdVd就越低。
6、就越低。VdVd在在0.140.140.29L/kg0.29L/kg，表明药物主，表明药物主要在细胞外分布，如磺胺类药物。要在细胞外分布，如磺胺类药物。VdVd在在0.30.30.4L/kg0.4L/kg，表明药物主要在细胞内分布。，表明药物主要在细胞内分布。n nVd=Dose/CVd=Dose/Cn n（三）血药浓度（三）血药浓度（三）血药浓度（三）血药浓度- -时间曲线下面积（时间曲线下面积（时间曲线下面积（时间曲线下面积（AUCAUC）：）：）：）：指血药浓度对时间做图后所的曲线下面积，可用梯形法和样条函数指血药浓度对时间做图后所的曲线下面积，可用梯形法和样条函数法计算。该参数是计算生
7、物利用度和其他动力学参数重要的基础。法计算。该参数是计算生物利用度和其他动力学参数重要的基础。n n（四）生物利用度（四）生物利用度（四）生物利用度（四）生物利用度（bioavailabilitybioavailability，F F）：）：）：）：药物吸收入体循环的速度及程度的量度。目前均采用血药浓度作为药物吸收入体循环的速度及程度的量度。目前均采用血药浓度作为生物利用度指标，分为绝对生物利用度和相对生物利用度：生物利用度指标，分为绝对生物利用度和相对生物利用度：n n绝对生物利用度绝对生物利用度 F = AUCF = AUC血管外血管外/AUC/AUC静脉静脉n n相对生物利用度相对生物利
8、用度 F = AUCF = AUC受试制剂受试制剂/AUC/AUC标准制剂标准制剂n n（五）清除率（五）清除率（五）清除率（五）清除率（clearance,CLclearance,CL）：）：）：）：单位时间内从体内清除的药量单位时间内从体内清除的药量n nCL = Vdke CL = Vdke 或或 0.693Vd/ T1/20.693Vd/ T1/2n n（六）平均稳态血药浓度（六）平均稳态血药浓度（六）平均稳态血药浓度（六）平均稳态血药浓度（steady state, SSsteady state, SS）：）：）：）：临床常用药物大部分是多次给药，并固定给药间隔和剂量，临床常用药物大
9、部分是多次给药，并固定给药间隔和剂量，使得体内药物与血中浓度达到稳态，使得体内药物与血中浓度达到稳态，n nCss=AUC/T(Css=AUC/T(间隔时间间隔时间) )n n（七）首过效应（七）首过效应（七）首过效应（七）首过效应（first pass effectfirst pass effect）：）：）：）：口服给药时，药物首先通过门静脉进入肝脏，在肝脏被代谢掉一部分，口服给药时，药物首先通过门静脉进入肝脏，在肝脏被代谢掉一部分，使进入体循环的药量减少，称为使进入体循环的药量减少，称为“ “首过效应首过效应” ”。首过效应的程度可以用。首过效应的程度可以用GibaldiGibaldi等
10、公式表示：等公式表示：动物试验基本技术 家兔不同给药途径的给药方法及采血方法家兔不同给药途径的给药方法及采血方法1、2、3均为不正确的抓取方法（1可损伤两肾，2可造成皮下出血，3可伤两耳） 4、5为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓，并用手托兔体。静脉注射静脉注射n n兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动物，耳外缘为静脉。内缘静脉深动物，耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定，故不用。外缘静脉表浅不易固定，故不用。外缘静脉表浅易固定，常用。先拔去注射部位的易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，使被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静
11、静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持注无名指及小指垫在下面，右手持注射器连射器连6 6号针头尽量从静脉的远端号针头尽量从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以固定针刺入，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入头，放开食指和中指，将药液注入（图（图1010），然后拔出针头，用手压），然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。迫针眼片刻。动物实验内容动物实验内容-磺胺嘧啶在不同病理、生理状态磺胺嘧啶在不同病理、生理状态的药代动力学研究及生物利用度测定的药代动力学研究及生物利用度测定磺胺嘧啶磺胺嘧啶n n【剂量与用法
12、剂量与用法】口服，成人口服，成人1g/1g/次，次，2 2次次/ /日，首日，首次次2g2g；儿童每日；儿童每日150mg/kg150mg/kg。n n治疗流脑，口服，成人每日治疗流脑，口服，成人每日0.1g/kg0.1g/kg，分，分4 4次服用；儿童每次服用；儿童每日日0.1g0.1g0.2g/kg0.2g/kg；肌注，成人；肌注，成人1g1g2g/2g/次，次，3 34 4次次/ /日；儿童日；儿童每日每日0.1g0.1g0.2g/kg0.2g/kg，分，分3 34 4次。次。n n静注用量与肌注相当，每日静注用量与肌注相当，每日1 1次。次。 【作用于用途】 本品为治疗全身感染的中效磺
13、胺，抗菌谱广，对大多数革兰氏阳性菌和阴性菌均有抑制作用，对脑膜炎双球菌、肺炎链球菌淋球菌、溶血性链球菌的抑制作用较强，能通过血脑屏障渗入脑脊液。 临床主要用于流脑，为治疗流脑的首选药，也可治疗上述敏感菌所致其他感染。 不同病理，生理状态的动物模型不同病理，生理状态的动物模型n n家兔肝损伤制备方法：取家兔，以0.8ml/kg体重皮下注射50%的四氯化碳（用大豆油稀释），正常饲养24h即成。n n家兔肾损伤制备方法：取家兔，以1.5ml/kg体重剂量皮下分点注射1%氯化汞，正常饲养24h即成。教学试验安排及内容教学试验安排及内容 （一）教学分组（一）教学分组n n在一个教学单元内，根据学生人数，
14、将学生分为4组或8组，每组25人。取健康家兔4只或8只，如果分为4组，最好选用同一性别家兔，以避免性别对药代动力学的影响，如果分为8组，可分为上下半班，4个组为一个组合，家兔则雌雄各半，上班选雌性，下班选雄性，可探讨性别对动力学参数的影响。（二）试验方案（二）试验方案n n1 1第第1 1组的组的1 1号健康家兔，静脉注射磺胺嘧啶注射号健康家兔，静脉注射磺胺嘧啶注射液；液；n n2 2第第2 2组的组的2 2号健康家兔，经口给予同等剂量的磺号健康家兔，经口给予同等剂量的磺胺嘧啶；胺嘧啶；n n3 3第第3 3组的组的3 3号健康家兔，静脉注射磺胺嘧啶注射号健康家兔，静脉注射磺胺嘧啶注射液，同时
15、给予等量的液，同时给予等量的NaHCO3NaHCO3；n n4 4第第4 4组组4 4号肝损伤或肾损伤家兔，静脉注射磺胺号肝损伤或肾损伤家兔，静脉注射磺胺嘧啶注射液；各组均按设计的时间点采血，计算嘧啶注射液；各组均按设计的时间点采血，计算药代动力学参数。药代动力学参数。（三）学生试验报告结果处理（三）学生试验报告结果处理n n根据4个组，4只家兔的数据进行统一的综合处理与分析。根据1号、2号家兔的试验数据，计算生物利用度；根据1号、3号的数据，分析机体在病理条件下，对药物代谢的影响；根据1号、4号家兔的数据，药物是否产生相互作用。n n如果有8个试验组，还可以统一上下班的数据，分析性别对药物体
16、内过程的影响。（四）试验药品（四）试验药品n n肝素，磺胺嘧啶（su1fadiazine，SD）片，磺胺嘧啶钠注射液，75%酒精，稀释液（0.5%NaCl+0.4%NaOH），生理盐水用于冲洗灌胃管，磺胺嘧啶贮备液为100g/ml，0.1%SD标准液，7.5%三氯醋酸，0.5%亚硝酸钠，0.5%麝香草酚（用20%NaOH配制），1000U/ml肝素生理盐水，蒸馏水。（五）试验器材（五）试验器材n n兔盒、手术刀片、抗凝离心管、5ml离心管7个/组、试管、50ml容量瓶5个/组、10ml试管架、2ml吸管、1ml微量加样器、5ml注射器、6号针头、7号针头、手术灯、动脉夹，吸耳球、擦镜纸、棉球、
17、台式离心机、石英比色皿、紫外分光光度计。（六）试验步骤（六）试验步骤1 1动物及血样处理方法：动物及血样处理方法：动物及血样处理方法：动物及血样处理方法：n n取血取血取血取血：取家兔，称重，放入兔盒内。从一侧耳缘静脉注射给取家兔，称重，放入兔盒内。从一侧耳缘静脉注射给1000U/ml1000U/ml肝素肝素0.5ml/kg0.5ml/kg。5min5min后从一侧耳缘静脉取空白血样后从一侧耳缘静脉取空白血样0.4m10.4m1，分别放入，分别放入1 1号管（对照管）号管（对照管）和和2 2号管（标准管）各号管（标准管）各0.2m10.2m1，摇匀静置。然后，摇匀静置。然后1 1、3 3、4
18、4组从同侧耳缘静脉注射给组从同侧耳缘静脉注射给药磺胺嘧啶钠注射液（药磺胺嘧啶钠注射液（10%10%，2ml/kg2ml/kg），），2 2组通过灌胃途径给药磺胺嘧啶悬浊液组通过灌胃途径给药磺胺嘧啶悬浊液（10%10%，2ml/kg2ml/kg）。给药后）。给药后5 5、1515、3030、6060、9090、150min150min时分别从另一侧耳缘时分别从另一侧耳缘静脉取血静脉取血0.4ml0.4ml。准确取血。准确取血0.2ml0.2ml加到含有加到含有7.5%7.5%三氯醋酸三氯醋酸2.7ml2.7ml的试管中，摇匀。的试管中，摇匀。标准管中加入标准管中加入0.10.1SDSD标准液标准
19、液0.1ml0.1ml，其余各管加蒸馏水，其余各管加蒸馏水0.1ml0.1ml，摇匀。，摇匀。n n显色显色显色显色：将上述各管离心将上述各管离心5min5min（150015003000rpm3000rpm），取上清液），取上清液1.5m11.5m1，加入，加入0.5%0.5%亚硝酸钠亚硝酸钠0.5ml0.5ml，摇匀，再加入，摇匀，再加入0.5%0.5%麝香草酚麝香草酚1ml1ml，摇匀后为橙色。，摇匀后为橙色。n n测定测定测定测定：于分光光度计上在于分光光度计上在525nm525nm波长下测定各样品管的光密度值。波长下测定各样品管的光密度值。n n计算血中药物浓度计算血中药物浓度计算血
20、中药物浓度计算血中药物浓度：根据同一种溶液浓度与光密度成正比的原理，可用空白血根据同一种溶液浓度与光密度成正比的原理，可用空白血样标准管浓度及其光密度值求算出其他样品管的磺胺药物浓度。公式如下：样标准管浓度及其光密度值求算出其他样品管的磺胺药物浓度。公式如下：n n样品管浓度样品管浓度 样品管光密度（样品管光密度（ODOD）/ /标准管光密度（标准管光密度（ODOD）/ / 标准管浓度标准管浓度磺胺类药物血药浓度测定的步骤试试 管管 编编 号号标标准管准管对对照照 管管测测定管定管7.5%7.5%三三氯氯醋酸醋酸mlml）2.72.72.72.72.72.7抗凝全血血抗凝全血血样样（mlml）
21、0.20.20.20.20.20.2蒸蒸馏馏水（水（mlml）0.10.10.10.1标标准液（准液（mlml）0.10.1充分充分摇摇匀匀 离心离心5min 5min 取上清夜取上清夜1.5ml1.5ml0.5%0.5%亚亚硝酸硝酸钠钠mlml）0.50.50.50.50.50.50.5%0.5%麝香草酚麝香草酚mlml）1.01.01.01.01.01.0（五）（五）试验结果的原始果的原始记录表表2 2 不同不同时间点磺胺点磺胺嘧啶血血浆浓度度测定的原始数据定的原始数据编编号号性性别别不同不同时间时间血血药浓药浓度度ODOD值值5mi5min n15min15min30min30min60
22、min60min90min90min150min150min1 12 23 34 45 56 67 78 8时间时间（minmin）5min5min15min15min30min30min60min60min90min90min150min150minODOD值值C C血血（g/mlg/ml）表表4 4 不同不同给药途径、不途径、不同病理状同病理状态的家兔磺胺的家兔磺胺嘧啶药代代动力学参数力学参数组别组别性性别别给药给药途途径径动动力学参数力学参数AUCAUCT T1/21/2VdVdCmaxCmaxTmaxTmax1 1健康家兔健康家兔iviv2 2健康家兔健康家兔iviv3 3健康家兔健康
23、家兔igig4 4健康家兔健康家兔igig5 5健康家兔健康家兔+NaHCO+NaHCO3 3IvIv6 6健康家兔健康家兔+NaHCO+NaHCO3 3iviv7 7肝肝损伤损伤家兔家兔IvIv8 8肝肝损伤损伤家兔家兔iviv试验报告内容及格式要求试验报告内容及格式要求（一）题目（一）题目n n根据你的理解或兴趣，可将报告题目拟定为：n n1“磺胺嘧啶生物利用度研究”或n n2“肝、肾损伤对磺胺嘧啶药代动力学的影响”或n n3“同时给予NaHCO3对磺胺嘧啶药代动力学的影响”或n n4“性别对磺胺嘧啶药代动力学的影响”或n n5自定。（二）研究背景及意义（二）研究背景及意义n n根据选择的
24、题目，说明研究意义（为什么选磺胺嘧啶进行研究，为什么要设计以上试验，目的及意义何在（临床合理用药目的、改进制剂目的等）。（三）注意事项：（三）注意事项：n n1 1取血前应尽量剔除兔耳周围的毛，以免引起凝取血前应尽量剔除兔耳周围的毛，以免引起凝血，影响采血。血，影响采血。n n2 2离心时应将血管平衡后对称置入，以免损坏离离心时应将血管平衡后对称置入，以免损坏离心机。心机。n n3 3每次取血前要先将插管中的残血放掉。每次取血前要先将插管中的残血放掉。n n4 4每吸取一个血样时，必须更换吸管，若只用一每吸取一个血样时，必须更换吸管，若只用一支吸管时，必须将其中的残液用生理盐水冲净。支吸管时，
25、必须将其中的残液用生理盐水冲净。n n5 5将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀，否则将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀，否则易出现血凝块。易出现血凝块。 附：紫外分光光度法测定附：紫外分光光度法测定SD血药浓度血药浓度1 1试验方法：动物处理及给药方法同前。准确吸取静脉血试验方法：动物处理及给药方法同前。准确吸取静脉血0.2ml0.2ml，加入到含有，加入到含有4.8ml4.8ml稀释液（生理盐水），振摇，稀释液（生理盐水），振摇，15001500转转/min/min的旋转速度离心的旋转速度离心10min10min，分别取上清液。，分别取上清液。2 2磺胺嘧啶标准曲线测定：磺胺嘧啶标准曲线测定
26、：n n配制磺胺嘧啶贮备液配制磺胺嘧啶贮备液100g/ml100g/ml，试验时稀释成，试验时稀释成1616、1212、8 8、4 4、2g/ml2g/ml、磺胺嘧啶标准溶液。、磺胺嘧啶标准溶液。256nm256nm波长比色测定吸光波长比色测定吸光度值，以浓度与光密度值做直线回归，得标准曲线直线回归度值，以浓度与光密度值做直线回归，得标准曲线直线回归方程。方程。3 3样品血药浓度测定：取上清液，样品血药浓度测定：取上清液，256nm256nm波长比色测定，利波长比色测定，利用回归方程计算血中磺胺嘧啶浓度。用回归方程计算血中磺胺嘧啶浓度。(此方法对仪器与试剂的要求小，实验室可根据自身情况选用此检测方法此方法对仪器与试剂的要求小，实验室可根据自身情况选用此检测方法)本章结束本章结束
