仿制药质量研究与标准建立课件

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1、江苏弘惠医药有限公司研发中心江苏弘惠医药有限公司研发中心周自桂周自桂仿制药质量研究与标准建立l一、药品质量与质量标准的含义一、药品质量与质量标准的含义l二、原料药及制剂产品质量标准的建立二、原料药及制剂产品质量标准的建立l三、原料药及制剂产品分析方法的研发三、原料药及制剂产品分析方法的研发l四、原料药及制剂产品分析方法的验证四、原料药及制剂产品分析方法的验证l五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求一、药品质量与质量标准1、药品质量（drug quality）： 药品能满足规定要求和需要的特征总和。l药品的质量特征药品的质量特征：l（1）有效性(effi

2、cacy)：在规定的适应症、用法和用量的条件下，能满足预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能的要求。l（2）安全性（safety）：按规定的适应症和用法、用量使用药品后，人体产生毒副反应的程度。l（3）稳定性(stability )：在规定的条件下保持其有效性和安全性的能力。l（4）均一性(uniformity)：药品的每一单位产品都符合有效性、安全性的规定要求。l（5）经济性(economic property)：药品生产、流通过程形成的价格水平一、药品质量与质量标准 2、药品质量标准药品质量标准 为保证药品质量而对各种检查项目、指标、限度、范围等所做为保证药品质量而对各种检查项

3、目、指标、限度、范围等所做的规定。的规定。 药品质量标准是药品的纯度、成分含量、组分、生物有效性、药品质量标准是药品的纯度、成分含量、组分、生物有效性、疗效、毒副作用、热原度、无菌度、物理化学性质以及杂质的综疗效、毒副作用、热原度、无菌度、物理化学性质以及杂质的综合表现。合表现。 药品质量标准分为法定标准和企业标准两种。法定标准又分药品质量标准分为法定标准和企业标准两种。法定标准又分为国家药典、行业标准和地方标准。药品生产一律以药典为准，为国家药典、行业标准和地方标准。药品生产一律以药典为准，未收入药典的药品以行业标准为准，未收入行业标准的以地方标未收入药典的药品以行业标准为准，未收入行业标准

4、的以地方标准为准。无法定标准和达不到法定标准的药品不准生产、销售和准为准。无法定标准和达不到法定标准的药品不准生产、销售和使用。使用。 一、药品质量与质量标准 3、质量研究的目的质量研究的目的： 通过对药物理化性质的科学分析和研究，确定药物通过对药物理化性质的科学分析和研究，确定药物的定量和定性分析方法，建立科学完善的质量控制体的定量和定性分析方法，建立科学完善的质量控制体系，保证系，保证药物的质量，确保人民用药安全。 一、药品质量与质量标准 4、质量研究的意义质量研究的意义： 对我国的医药科学技术、生产管理、经济效益和社会效对我国的医药科学技术、生产管理、经济效益和社会效益产生良好的影响与促

5、进作用。有利于促进药品国际技术益产生良好的影响与促进作用。有利于促进药品国际技术交流和推动进出口贸易的发展与新药的研制密切相关。交流和推动进出口贸易的发展与新药的研制密切相关。二、质量标准的建立u原料药的质量标准原料药的质量标准 （1）品名（中文名、英文名和汉语拼音）品名（中文名、英文名和汉语拼音）（2）有机物的结构式）有机物的结构式 （3）分子式与分子量）分子式与分子量（4）来源或有机药物的化学名称）来源或有机药物的化学名称（5）含量或效价规定（）含量或效价规定（6）处方）处方 （7）制法）制法 （8）性状 （9）鉴别 （10）检查 （11）含量或效价测定 （12）类别）类别 （13）规格（

6、）规格（14）贮藏）贮藏 （15）制剂）制剂原料药的质量标准 原料药的质量研究应在原料药的质量研究应在确证化学结构或组份确证化学结构或组份的基础上进行。原料药的一般研究项目包括进行。原料药的一般研究项目包括性状、鉴别、检查和含量测定等几个方面。等几个方面。原料药用于稳定性研究的质量标准 考察项目应选择在原料药保存期间易于发生变化，考察项目应选择在原料药保存期间易于发生变化，并可能会影响到药品的质量、安全性与有效性的测试并可能会影响到药品的质量、安全性与有效性的测试项目，以便客观、全面、灵敏地反映药品质量。项目，以便客观、全面、灵敏地反映药品质量。n性状性状n水分水分/干燥失重干燥失重n含量测定

7、含量测定*n有关物质有关物质*n晶型（如不是稳定的晶型）晶型（如不是稳定的晶型） *使用具有稳定性指示能力的方法使用具有稳定性指示能力的方法Eg:原料药质量标准 项目项目标准限度标准限度分析方法分析方法结果结果性状性状目视目视鉴别鉴别A IRB HPLC-RTC特定离子特定离子Chp二部附录二部附录IV CMet-R003AChp二部附录二部附录III重金属重金属Chp二部附录二部附录VIII H第二法第二法干燥失重干燥失重Chp二部附录二部附录VII L灼炽残渣灼炽残渣Chp二部附录二部附录VII N残留溶剂残留溶剂Met-R003R有关物质有关物质已知杂质已知杂质未知杂质未知杂质总杂总杂M

8、et-R003I含量测定（含量测定（Assay)Met-R003A粒径分布粒径分布Met-R003P晶型晶型Met-R003JEg:原料药稳定性质量标准 项目项目标准限度标准限度分析方法分析方法是否测定是否测定性状性状目视目视Yes鉴别鉴别A IRB HPLC-RTC特定离子特定离子Chp二部附录二部附录IV CMet-R003AChp二部附录二部附录IIINo重金属重金属Chp二部附录二部附录VIII H第二法第二法No干燥失重干燥失重Chp二部附录二部附录VII LYes灼炽残渣灼炽残渣Chp二部附录二部附录VII NNo残留溶剂残留溶剂Met-R003RNo有关物质有关物质已知杂质已知杂

9、质未知杂质未知杂质总杂总杂Met-R003IYes含量测定（含量测定（Assay)Met-R003AYes粒径分布粒径分布Met-R003PNo晶型晶型Met-R003JYes/ No原料的质量标准 粒径分布：粒径分布：水溶性差的原料，并对下列因素有显著水溶性差的原料，并对下列因素有显著影响，需订入质量标准的。影响，需订入质量标准的。n制剂工艺及含量均匀度制剂工艺及含量均匀度n溶出速率溶出速率n生物利用度生物利用度n药物稳定性及外观药物稳定性及外观 原料的质量标准 粒径分布：粒径分布：符合下列条件之一，无需订入质量标准符合下列条件之一，无需订入质量标准n在生产过程中原料药需溶解在生产过程中原料

10、药需溶解n制剂为溶液剂型制剂为溶液剂型n对药物可生产性、含量均匀度、溶出度以及稳定性对药物可生产性、含量均匀度、溶出度以及稳定性不起关键作用不起关键作用 原料的质量标准 多晶形药物：多晶形药物： 研究查明是否存在不同晶形？研究查明是否存在不同晶形？ 如存在，有多少种晶形？如存在，有多少种晶形？n结晶形式结晶形式n无定型形式无定型形式n溶剂化物或水合物形式溶剂化物或水合物形式 你需要哪种晶型的原料药？你需要哪种晶型的原料药？ 原料的质量标准 多晶型药物：多晶型药物：水溶性差的原料，并对下列药物的水溶性差的原料，并对下列药物的质量及行为有显著影响，需订入质量标准与稳定性质质量及行为有显著影响，需订

11、入质量标准与稳定性质量标准。量标准。n制剂工艺制剂工艺n溶解度及溶出速率溶解度及溶出速率n生物利用度生物利用度/生物等效性生物等效性n药物稳定性药物稳定性 二、质量标准的建立u制剂产品的质量标准制剂产品的质量标准 （1）品名（中文名、英文名和汉语拼音）品名（中文名、英文名和汉语拼音）（2）来源及含量规定（）来源及含量规定（3）处方）处方 （4）制法）制法 （5）性状 （6）鉴别 （7）检查 （8）含量或效价测定 （9）类别）类别 （10）规格（）规格（14）贮藏）贮藏制剂产品用于稳定性研究的质量标准 考察项目应选择在药品保存期间易于发生变化，考察项目应选择在药品保存期间易于发生变化，并可能会影

12、响到药品的质量、安全性与有效性的测试并可能会影响到药品的质量、安全性与有效性的测试项目，以便客观、全面、灵敏地反映药品的稳定性。项目，以便客观、全面、灵敏地反映药品的稳定性。n性状性状n水分水分/干燥失重干燥失重n含量测定含量测定*n有关物质有关物质*n溶出度溶出度/释放度释放度 *使用具有稳定性指示能力的方法使用具有稳定性指示能力的方法制剂产品质量标准 Eg:制剂产品质量标准 项目项目标准限度标准限度分析方法分析方法结果结果外观外观目视目视鉴别鉴别A IRB HPLC-RTChp二部附录二部附录IV CMet-T002A溶出度溶出度Met-T002D含量均匀度含量均匀度Met-T002C水分

13、水分Chp二部附录二部附录VII N有关物质有关物质已知杂质已知杂质未知杂质未知杂质总杂总杂Met-T002I含量测定（含量测定（Assay)Met-T002AMet-T002A残留溶剂残留溶剂用到时订入，不订说明理由用到时订入，不订说明理由包装和贮存包装和贮存Eg:制剂产品稳定性质量标准 项目项目标准限度标准限度分析方法分析方法是否测定是否测定性状性状目视目视Yes鉴别鉴别A IRB HPLC-RTChp二部附录二部附录IV CMet-T002ANo溶出度溶出度Met-T002DYes含量均匀度含量均匀度Met-T002CNo水分水分Chp二部附录二部附录VII NYes有关物质有关物质已知

14、杂质已知杂质未知杂质未知杂质总杂总杂Met-T002IYes含量测定（含量测定（Assay)Met-T002AMet-T002AYes残留溶剂残留溶剂包装和贮存包装和贮存二、质量标准的建立u对于手性药物对于手性药物n 鉴别：区分另一光学异构体鉴别：区分另一光学异构体手性含量测定方法手性含量测定方法手性杂质检测方法手性杂质检测方法n含量测定：含量测定：手性含量测定方法手性含量测定方法或用非手性含量测定方法结合手性杂质检测方法或用非手性含量测定方法结合手性杂质检测方法n手性杂质：手性杂质：定量检测原料药中手性杂质的含量定量检测原料药中手性杂质的含量如手性杂质也是降解产物，定量检测在制剂中的含量如手

15、性杂质也是降解产物，定量检测在制剂中的含量二、质量标准的建立u溶出度或释放度溶出度或释放度n 对于速释药物对于速释药物如有药典法定标准：方法与限度同标准，并与原研对照药做溶如有药典法定标准：方法与限度同标准，并与原研对照药做溶出对比曲线出对比曲线没有药典法定方法，但有公开发表的原研药溶出度方法，可按没有药典法定方法，但有公开发表的原研药溶出度方法，可按发表的限度与方法，并与原研药做溶出对比曲线发表的限度与方法，并与原研药做溶出对比曲线没有药典方法，也没有公开发表，按下列条件与原研药进行溶没有药典方法，也没有公开发表，按下列条件与原研药进行溶出对比曲线出对比曲线不同的溶出介质（不同的溶出介质（p

16、H16.8)，对难溶性药物添加表面活性，对难溶性药物添加表面活性剂剂用转篮法与浆法用不同的转速用转篮法与浆法用不同的转速基于已有的生物等效性和其他数据来设置溶出度质量标准基于已有的生物等效性和其他数据来设置溶出度质量标准二、质量标准的建立u溶出度或释放度溶出度或释放度n 对于缓控释制剂对于缓控释制剂对于缓释制剂，设置多点溶出限度对于缓释制剂，设置多点溶出限度对于延迟释放制剂，设置多点溶出限度对于延迟释放制剂，设置多点溶出限度二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 含量含量原料药：原料药：EP：99.0101.0%；USP：98.0102.0%自拟：自拟：99.0101.0%制剂成品：制剂成

17、品：90.0110.0%95.0105.0%93.0107.0%二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 残留溶剂残留溶剂原料药：原料药：合成路线中各步反应及纯化用到的溶剂；合成路线中各步反应及纯化用到的溶剂；挥发性起始原料及试剂挥发性起始原料及试剂最后一步原料药重结晶用到的溶剂最后一步原料药重结晶用到的溶剂制剂成品：制剂成品：生产过程中用到的溶剂生产过程中用到的溶剂基于原料药基于原料药/辅料报告进行计算，产品应符合残留溶剂限度辅料报告进行计算，产品应符合残留溶剂限度标准标准二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 第一类溶剂：禁用第一类溶剂：禁用n第二类溶剂：应限量，其限度见药典附录第二

18、类溶剂：应限量，其限度见药典附录VIII P第第63页页n第三类溶剂：对人类潜在毒性较低，如仅有第三类溶剂，可用第三类溶剂：对人类潜在毒性较低，如仅有第三类溶剂，可用干燥失重法测定不得过干燥失重法测定不得过0.5%。 设置第二类的限度有两种选择：设置第二类的限度有两种选择：法一：按药典附录法一：按药典附录63页表格中的限度；页表格中的限度；法二：药物所含的每个成分的残留溶剂相加，其每天的摄法二：药物所含的每个成分的残留溶剂相加，其每天的摄入总量应小于可允许的日摄入量（入总量应小于可允许的日摄入量（PDE）二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准例：法一或法二乙腈：PDE=4.1mg/天法一限度

19、：410ppm,不合格；法二：3.64mg/天4.1mg/天，合格组分组分用量用量乙腈含量乙腈含量日摄入量日摄入量主药主药0.3g800ppm0.24mg辅料辅料10.9400ppm0.36mg辅料辅料23.8800ppm3.04mg成品成品5.0728ppm3.64mg二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 原料药的原料药的有关物质有关物质从原料药合成产生的：从原料药合成产生的：未反应完全的起始原料、试剂及混入的杂质未反应完全的起始原料、试剂及混入的杂质反应中间体、副产物反应中间体、副产物立体异构体、手性对映体（原料药为单一光学活性）立体异构体、手性对映体（原料药为单一光学活性）降解产物

20、：降解产物：原料药生产过程中降解产生原料药生产过程中降解产生强力降解试验：高温、光照、氧化、酸强力降解试验：高温、光照、氧化、酸/碱水解碱水解原料药贮存过程中（稳定性考察期间）产生原料药贮存过程中（稳定性考察期间）产生二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 原料药的原料药的有关物质有关物质对于仿制药：对于仿制药：可与原研药进行杂质谱对比可与原研药进行杂质谱对比对药典或文献所列的杂质进行评估对药典或文献所列的杂质进行评估供应商提供的质量标准供应商提供的质量标准ICH Q3A（R）及化学药物杂质指导原则）及化学药物杂质指导原则二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 制剂的制剂的有关物质有关

21、物质/降解产物降解产物降解产物由原料药生产及贮存过程中产生降解产物由原料药生产及贮存过程中产生降解产物由制剂生产过程中产生降解产物由制剂生产过程中产生强力降解试验：高温、高湿、光照、氧化、酸强力降解试验：高温、高湿、光照、氧化、酸/碱水解碱水解制剂贮存过程中（稳定性考察期间）产生制剂贮存过程中（稳定性考察期间）产生*不包括原料药合成的工艺杂质（如果不是降解产物）不包括原料药合成的工艺杂质（如果不是降解产物）二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 制剂的制剂的有关物质有关物质/降解产物降解产物对于仿制药：对于仿制药：可与原研药进行杂质谱对比可与原研药进行杂质谱对比对药典或文献所列的杂质进行评

22、估对药典或文献所列的杂质进行评估ICH Q3B（R）及化学药物杂质指导原则）及化学药物杂质指导原则二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 原料药原料药最大日剂量最大日剂量报告限度报告限度鉴定限度鉴定限度质控限度质控限度2g0.05%0.10%或或1mg（取最小（取最小值）值）0.15%或或1.0mg（取最小（取最小值值)2g0.03%0.05%0.05%二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 例：例：*注：报告时，注：报告时，1.0保留保留1位小数位小数日剂日剂量量限度限度实测值实测值（%）报告值报告值（%）日服杂质日服杂质量量(mg)鉴别限鉴别限是否超是否超质控限质控限是否超是否超0

23、.5g鉴别限鉴别限=?0.09630.100.5质控限质控限=?0.0440.20.120.120.60.16490.160.81.2g鉴别限鉴别限=?0.0440.5质控限质控限=?0.08860.091.10.1140.111.3二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 例：例：*注：报告时，注：报告时，1.0保留保留1位小数位小数日剂量限度实测值（%）报告值（%）日服杂质量(mg)鉴别限是否超质控限是否超0.5g 鉴别限=0.1%0.09630.100.5质控限=0.15%0.0440.20.120.120.6+0.16490.160.8+1.2g鉴别限=1.0mg0.0440.5质控

24、限=1.0mg0.08860.091.1+0.1140.111.3+制定药典收载原料药的杂质标准制定药典收载原料药的杂质标准名称名称ICH Q3A（%）药典限度药典限度%制定限度制定限度%依据依据杂质杂质A？NMT0.15？杂质杂质B？杂质杂质C？NMT0.15？杂质杂质D？NMT0.15？杂质杂质E？杂质杂质G？NMT0.15？杂质杂质H？NMT0.15？最大单杂最大单杂？0.1？总杂总杂NMT0.75？l最大日剂量：最大日剂量：80mg/天，鉴别限天，鉴别限=0.10%,质控限质控限=0.15%制定药典收载原料药的杂质标准制定药典收载原料药的杂质标准名称名称ICH Q3A(%)药典限度药典

25、限度%制定限度制定限度%依据依据杂质杂质A0.15NMT0.150.15USP/ICHQ3A杂质杂质B0.15 0.15ICHQ3A杂质杂质C0.15NMT0.15 0.15USP/ICHQ3A杂质杂质D0.15NMT0.15 0.15 USP/ICHQ3A杂质杂质E0.15 0.15ICHQ3A杂质杂质G0.15NMT0.15 0.15USP/ICHQ3A杂质杂质H0.15NMT0.15 0.15USP/ICHQ3A最大单杂最大单杂0.100.10.10ICHQ3A总杂总杂NMT0.75 0.75 USP/l最大日剂量：最大日剂量：80mg/天，鉴别限天，鉴别限=0.10%,质控限质控限=0

26、.15%二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 制剂制剂二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 例：例：日剂日剂量量限度限度实测值实测值（%）报告值报告值（%）日服杂日服杂质量质量(mg)鉴别限鉴别限是否超是否超质控限质控限是否超是否超1.9g报告限报告限=?0.0440.84=1鉴别限鉴别限=?0.0790.081.52=2质控限质控限=?0.1830.183.42=30.1920.193.61=4二、质量标准的建立u可接受标准可接受标准n 例：鉴别限例：鉴别限=2mg(1.9*0.2%=3.8mg2mg)； 3mg)；0.15%日剂日剂量量限度限度实测值实测值（%）报告值报告值（%

27、）日服杂日服杂质量质量(mg)鉴别限鉴别限是否超是否超质控限质控限是否超是否超1.9g报告限报告限=0.05%0.0440.84=1鉴别限鉴别限=2mg0.0790.081.52=2质控限质控限=3mg0.1830.183.42=3+0.1920.193.61=4+制定药典收载制剂的杂质标准制定药典收载制剂的杂质标准名称名称ICH Q3B（%）药典限度药典限度%制定限度制定限度%依据依据杂质杂质A？NMT0.2杂质杂质B？NMT0.25杂质杂质C？NMT0.25杂质杂质E？NMT0.1最大单杂最大单杂？NMT0.2总杂总杂NMT0.8l最大日剂量：最大日剂量：80mg/天，天， 报告限报告限=

28、？ 鉴别限鉴别限=？ 质控限质控限=？制定药典收载制剂的杂质标准制定药典收载制剂的杂质标准名称名称ICH Q3B（%） 药典限度药典限度% 制定限度制定限度%依据依据杂质杂质A0.25NMT0.20.2USP杂质杂质B0.25NMT0.250.25USP/ICHQ3B杂质杂质C0.25NMT0.250.25USP/ICHQ3B杂质杂质E0.25NMT0.10.1USP最大单杂最大单杂0.2NMT0.20.2USP/ICHQ3B总杂总杂NMT0.80.8USPl最大日剂量：最大日剂量：80mg/天，天， 报告限报告限=0.1%;鉴别限鉴别限=0.2%;质控限质控限=0.25%二、质量标准的建立u

29、可接受标准可接受标准n 原料药的残留溶剂原料药的残留溶剂名称名称类别类别ICH限度限度测定结果测定结果标准限度标准限度四氢呋喃四氢呋喃二类二类720ppm350ppm720ppm甲苯甲苯二类二类890ppmLOQLOQ=50ppm500ppmDMF二类二类880ppm480ppm880ppm乙醚乙醚二类二类5000ppm590ppm3000ppm三、原料药及制剂分析方法的研发u原料药的分析方法原料药的分析方法n 含量测定n有关物质n残留溶剂n粒径分布n多晶体n无机离子等三、原料药及制剂分析方法的研发u制剂产品分析方法制剂产品分析方法n 含量测定n含量均匀度n有关物质/降解产物n溶出度/释放度三

30、、原料药及制剂分析方法的研发u含量测定、杂质及残留溶剂分析方法含量测定、杂质及残留溶剂分析方法n 使用药典专论方法n原料药厂家提供的试验方法n文献报导的方法n内部研制的方法三、原料药及制剂分析方法的研发u分析方法的基本要求分析方法的基本要求n 原理及应用范围n仪器设备n试剂，化学品及对照品n溶液制备n详细操作程序，包括仪器参数的设置（流速、温度、运行时间、波长等n系统适用性试验及接受标准（拖尾因子、理论板数、分离度、RSD及RRT等）n进样序列（空白系统适用性溶液对照样品）n计算公式n结果报告n附典型图谱三、原料药及制剂分析方法的研发u高效液相色谱含量测定及杂质分析方法高效液相色谱含量测定及杂

31、质分析方法n 仪器设备n色谱柱的选择：C18、C8、Phenly、CN、Chiral 等n洗脱模式：等度、梯度n流动相组成及比例：乙腈/甲醇：水/缓冲液n是否用缓冲液或离子对试剂：极性太大，5%甲醇-水也很快出峰，且具有酸、碱性的化合物可考虑使用，同时视出峰情况选择不同的C链n缓冲剂、缓冲液pH、缓冲能力及离子强度的选择：酸性化合物的pKa值： pH pKa，离子形式存在，tR小 pH = pKa，分子离子共存，出2个峰或裂峰缓冲能力：磷酸盐pH3时最强，浓度尽可能小（0.05M/0.01M)三、原料药及制剂分析方法的研发u高效液相色谱含量测定及杂质分析方法高效液相色谱含量测定及杂质分析方法n

32、 检测器及检测波长的选择：含量：辅料无干扰，选max有关物质：PDA检测器，记录所有杂质UV图，再确定检测波长n流速、进样体积、柱温（一般高于环境温度5）n样品溶剂的选择：不得破坏样品n样品溶液的制备：三、原料药及制剂分析方法的研发uHPLC含量测定方法适用于常规放行及稳定性研究含量测定方法适用于常规放行及稳定性研究n 原料药应完全溶解或被溶剂完全萃取：n原料药峰应与杂质（包括降解产物）峰完全分离n原料药峰应是纯峰n原料药峰的响应值应在检测器线性范围内n尽可能选择原料药的max为检测波长n原料药峰保留时间通常控制在10min内n低成本、易操作、使用便捷*进行强力破坏试验来表明含量测定方法可用于

33、稳定性考察样品的测试三、原料药及制剂分析方法的研发uHPLC杂质分析方法适用于常规放行及稳定性研究杂质分析方法适用于常规放行及稳定性研究n 原料药及所含杂质应完全溶解或被溶剂完全萃取n原料药峰保留时间通常控制在10min左右n所有杂质（包括降解产物）应完全从色谱柱中洗脱n任何杂质峰应与溶剂峰分离n所有杂质峰之间应有一定的分离度并与原料药主峰完全分离（无任何杂质/降解产物的峰与主峰重叠）n所选波长应能检测所有已知杂质和未知杂质包括降解产物n应有足够的灵敏度能对报告限的所有杂质检测并定量n低成本、易操作、使用便捷*进行强力破坏试验来表明含量测定方法可用于稳定性考察样品的测试四、原料药及制剂分析方法

34、的验证u方法验证：是论证分析方方法验证：是论证分析方法适用于拟定用途的过程法适用于拟定用途的过程n 化学药物质量控制分析方法验证的技术指导原则n药典二部附录XIX A药品质量分析方法验证指导原则四、原料药及制剂分析方法的验证u方法验证：是论证分析方法适用于拟定用途的过程，包括：方法验证：是论证分析方法适用于拟定用途的过程，包括：n 已有药典专论方法的，可进行方法确认，主要包括 系统适用性、方法重现性、溶液稳定性及专属性n方法全验证药典论坛方法或其它药典专论方法原料供应商提供的方法内部研制的分析方法四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC含量测定方法全验证含量测定方法全验证n 系统适用性/精密度

35、n专属性n线性n方法准确性n方法精密度n中间精密度n耐用性n范围四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC含量测定方法全验证含量测定方法全验证n 系统适用性/精密度系统适用性溶液1针，评价：拖尾因子T、理论板数N、分离度R对照品溶液（5针），评价RSD：一般原料1.0%，制剂2.0%四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC含量测定方法全验证含量测定方法全验证n 专属性空白溶剂、辅料溶液原料药/制剂中掺入杂质强力降解试验溶液：热、酸及碱水解、氧化、光照固态：高温、光照、高湿评价（1）主峰不受溶剂、辅料及任何杂质的干扰；（2）主峰纯度合格四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC含量测定方法全验证含量

36、测定方法全验证n 线性对照品溶液（56个浓度）：一般l主成分含量测定：以测定浓度为100% ，50%150%之间选取5个点即可。l 溶出（释放）度测定：以释放量的10%120%间选取5个点即可线性回归方程接受标准：（1）相关系数：R2不得低于0.998（2）报告Y轴截距与斜率（3）附线性方程与线性图四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC含量测定方法全验证含量测定方法全验证n 方法准确性辅料混合物与对照品混合：三个水平（50%、100%、150%）9个样品接受标准：（1）回收率：98.0102.0%（2）RSD：四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC含量测定方法全验证含量测定方法全验证n 方

37、法精密度100%水平6个样品：接受标准：（1）RSD：原料1.0%；制剂2.0%n仪器精密度同一溶液连续进样6次：接受标准：（1）RSD：2.0%四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC含量测定方法全验证含量测定方法全验证n 中间精密度由第二个分析人员在不同天，用不同的仪器及不同批号的柱子重复方法精密度试验：接受标准：（1）RSD：原料1.0%；制剂2.0%（2）两人结果偏差：原料1.0%；制剂2.0%四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC含量测定方法全验证含量测定方法全验证n 耐用性HPLC系统参数的变化：l流动相比例：10%l缓冲盐pH： 0.2l流速： 0.2ml/minl柱温: 5样

38、品制备参数的变化：l振摇/超声时间：5minl萃取溶剂的比例： 10%l样品过滤的影响： 1、2、3、4、5mll对照品及样品溶液的稳定性: 0、12、24、48h四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC含量测定方法全验证含量测定方法全验证n 范围指测试方法适用的高低限浓度区间，并能达到一定的精密度、准确度和线性根据线性、准确度、精密度的验证结果确定：一般要求：（1）含量测定：80120%（2）含量均匀度：70130%（3）溶出度：限度的20%四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC杂质分析方法验证杂质分析方法验证n 系统适用性/精密度n专属性n线性n检测限（LOD）n定量限（LOQ）n方法准

39、确性n方法精密度n中间精密度n耐用性n范围四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC杂质分析方法验证杂质分析方法验证n 系统适用性/精密度系统适用性溶液1针：在100浓度的主成分溶液中加入1%浓度的杂质对照品，以模拟样品中有可能存在的状态评价：拖尾因子T1.5、理论板数N 2000、分离度R 1.5对照品混合溶液（6针），评价RSD：每个成分均 5.0%质量标准中的系统适用性试验如何拟定质量标准中的系统适用性试验如何拟定n柱效2500即可，没必要更高，否则作茧自缚。n采用杂质对照品验证分离度，如该杂质仅用于定位、则无需纯度很高；该杂质的选择一者可为目标降解物，分离度要求根据研究时的具体情况拟定；

40、二者选用与主成分峰最难分离杂质。n采用强破坏试验验证，通过对比破坏前产生的杂质峰与主成分峰的分离情况。n如：国家药品标准WS1-(X-350)-2004Z注射用奥美拉唑钠的质量标准中规定：取供试品溶液，加3%过氧化氢溶液3ml，放置10分钟后，再加流动相稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性验证用溶液。色谱图中与主成分峰相邻的氧化降解产物峰与主成分峰的分离度应符合规定 典典 型型 图图 谱谱 分分 析析四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC杂质分析方法验证杂质分析方法验证n 专属性空白溶剂、辅料、每个杂质原料药/制剂中掺入杂质强力降解试验溶液：热、酸及碱水解、氧化、光照固态：高温、光照、高湿评价（

41、1）所有杂质能被检测并能互相分离，而且也能与溶剂、辅料以及主峰分离；（2）主峰纯度合格（3）质量平衡评估（将破坏溶液进一步稀释测定含量，平衡=有关物质+含量，95%）（4）稳定性、降解途径及色谱图四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC杂质分析方法验证杂质分析方法验证n 线性对照品混合溶液（56个浓度）：一般LOQ 150%）每个成分的线性回归方程每个成分接受标准：（1）相关系数：R2不得低于0.99（2）报告Y轴截距与斜率（3）附线性方程与线性图四四、原料药及制剂、原料药及制剂分析方法的验证析方法的验证uHPLC杂质分析方法验证杂质分析方法验证n 检测限（LOD）：试样中被测物能可靠的被检测

42、出的最低浓度在低浓度被测物的色谱图上比较其响应信号与仪器噪音接受标准：（1）信噪比：3：1或2：1注：l信噪比的三倍信噪比的三倍 纯属纯属“纸上谈兵纸上谈兵”，实际测定中根本用不上。，实际测定中根本用不上。l是相对值，不是绝对值。是相对于供试品溶液浓度的多少分之一而言，是相对值，不是绝对值。是相对于供试品溶液浓度的多少分之一而言，一般至少要在一般至少要在5000倍以上倍以上(1)最大进样量最大进样量 (2) 有关物质测定有关物质测定供试品溶液浓度、供试品溶液浓度、(3)含量测定浓度含量测定浓度 (4)有关物质测定有关物质测定自身稀释对照溶液自身稀释对照溶液浓度浓度(5)最低检出限最低检出限 五

43、者间的五者间的比例关系比例关系浓浓 度度进样量进样量绝对量绝对量相当于供试品相当于供试品溶液浓度的溶液浓度的倍数关系倍数关系最大进样量最大进样量0.3mg/ml10l有关物质供试品溶液浓度有关物质供试品溶液浓度0.1mg/ml10l1g100%10000倍倍含量测定浓度含量测定浓度10g/ml10l10%1000倍倍有关物质自身稀释对照溶液浓度有关物质自身稀释对照溶液浓度1.0g/ml10l10ng1.0%100倍倍最低检出限最低检出限10ng/ml10l0.1ng0.01%“基准点基准点”四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC杂质分析方法验证杂质分析方法验证n 定量限（LOQ）：试样中被测

44、物被定量测定的最低浓度，其结果应具有一定的准确度在低浓度被测物的色谱图上比较其响应信号与仪器噪音线性试验的最低浓度，对照品混合液6针接受标准：（1）信噪比：10：1（2）每个成分的RSD10%四、原料药及制剂发析方法的验证uHPLC杂质分析方法验证杂质分析方法验证n 方法准确性原料药/制剂中掺入杂质对照品：三个水平（LOQ、100%、150%）9个样品接受标准：（1）每个杂质回收率：80120%（2）RSD：四、原料药及制剂发析方法的验证uHPLC杂质分析方法验证杂质分析方法验证n 方法精密度按照方法测试6个样品（原料/制剂）或原料/制剂中掺入杂质对照品（6100%）接受标准：（1）总杂质的R

45、SD：10%（2）或每个杂质回收率的RSD： 10%四、原料药及制剂发析方法的验证uHPLC杂质分析方法验证杂质分析方法验证n 中间精密度由第二个分析人员在不同天，用不同的仪器及不同批号的柱子重复方法精密度试验：接受标准：（1）总杂的RSD：10%（2）或每个杂质回收率的RSD： 10%（3）两人结果偏差及类似的杂质谱： 15%四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC杂质分析方法验证杂质分析方法验证n 耐用性HPLC系统参数的变化：l流动相比例：10%l缓冲盐pH： 0.2l流速： 0.2ml/minl柱温: 5接受标准：l符合系统适用性限度样品制备参数的变化：l振摇/超声时间：5minl萃取

46、溶剂的比例： 10%l样品过滤的影响： 1、2、3、4、5mll对照品及样品溶液的稳定性: 0、12、24、48h接受标准：l样品溶液总杂偏差：15%l对照品溶液每个杂质偏差： 10%l类似的杂质谱四、原料药及制剂分析方法的验证uHPLC杂质分析方法验证杂质分析方法验证n 范围指测试方法适用的高低限浓度区间，并能达到一定的精密度、准确度和线性根据线性、准确度、精密度的验证结果确定：一般要求：LOQ150%四、原料药及制剂分析方法的验证uGC残留溶剂方法验证残留溶剂方法验证n 系统适用性/精密度n专属性n线性n检测限（LOD）n定量限（LOQ）n方法准确性n方法精密度n中间精密度n耐用性n范围四

47、、原料药及制剂分析方法的验证uGC残留溶剂方法验证残留溶剂方法验证n 系统适用性/精密度系统适用性溶液1针，评价：拖尾因子T1.5、理论板数N 2000、分离度R 1.5对照品混合溶液（6针），评价RSD：每个溶剂均 5.0%四、原料药及制剂分析方法的验证uGC残留溶剂方法验证残留溶剂方法验证n 专属性空白溶剂每个残留溶剂定位残留溶剂对照品混合溶液原料/制剂溶液原料/制剂中掺入残留溶剂评价（1）所有残留溶剂能被检测到并能很好的互相分离；（2）也能与溶剂及其杂质很好分离（3）每个色谱图四、原料药及制剂分析方法的验证uGC残留溶剂方法验证残留溶剂方法验证n 线性对照品混合溶液（56个浓度）：一般L

48、OQ 150%）每个溶剂的线性回归方程每个溶剂接受标准：（1）相关系数：R2不得低于0.99（2）报告Y轴截距与斜率（3）附线性方程与线性图四、原料药及制剂分析方法的验证uGC残留溶剂方法验证残留溶剂方法验证n 检测限（LOD）：试样中被测物能可靠的被检测出的最低浓度在低浓度被测物的色谱图上比较其响应信号与仪器噪音接受标准：（1）信噪比：3：1或2：1四、原料药及制剂分析方法的验证uGC残留溶剂方法验证残留溶剂方法验证n 定量限（LOQ）：试样中被测物被定量测定的最低浓度，其结果应具有一定的准确度在低浓度被测物的色谱图上比较其响应信号与仪器噪音线性试验的最低浓度，对照品混合液6针接受标准：（1

49、）信噪比：10：1（2）每个溶剂的RSD10%四、原料药及制剂分析方法的验证uGC残留溶剂方法验证残留溶剂方法验证n 方法准确性原料药/制剂中掺入残留溶剂：三个水平（LOQ、100%、150%）9个样品接受标准：（1）每个溶剂回收率：80120%（2）RSD：四、原料药及制剂分析方法的验证uGC残留溶剂方法验证残留溶剂方法验证n 方法精密度原料/制剂中掺入残留溶剂对照品（6100%）原料/制剂样品作为空白接受标准：（1）每个溶剂回收率的RSD： 10%四、原料药及制剂分析方法的验证uGC残留溶剂方法验证残留溶剂方法验证n 中间精密度由第二个分析人员在不同天，用不同的仪器及不同批号的柱子重复方法

50、精密度试验：接受标准：（1）每个溶剂回收率的RSD： 10%（3）两人结果偏差及类似的溶剂谱： 15%四、原料药及制剂分析方法的验证uGC残留溶剂方法验证残留溶剂方法验证n 耐用性GC系统参数的变化：l流速： 0.5ml/minl初始温度: 5l温度梯度速率： 5/min接受标准：l符合系统适用性限度样品制备参数的变化：l振摇平衡时间：5minl平衡温度： 5l对照品及样品溶液的稳定性: 0、12、24、48h接受标准：l偏差：15%l类似的溶剂谱四、原料药及制剂分析方法的验证uGC残留溶剂方法验证残留溶剂方法验证n 范围指测试方法适用的高低限浓度区间，并能达到一定的精密度、准确度和线性根据线

51、性、准确度、精密度的验证结果确定：一般要求：LOQ150%残留溶剂残留溶剂研究思路研究思路 研究原则：研究原则：合成过程中使用到的有机溶剂均需建合成过程中使用到的有机溶剂均需建立测定方法、并予以研究测定。立测定方法、并予以研究测定。 观测样品测定结果：观测样品测定结果：申报申报3批样品测定结果说明工批样品测定结果说明工艺稳定性。艺稳定性。 质量标准质量标准拟定原则：拟定原则：除第一类溶剂外、除第一类溶剂外、“未检出未检出的溶剂的溶剂”可以不拟定，仅拟定最后一步重结晶溶剂。可以不拟定，仅拟定最后一步重结晶溶剂。 测定方法测定方法：根据研究检测结果，质量标准方法完根据研究检测结果，质量标准方法完全

52、可以与研究时方法不同。全可以与研究时方法不同。残留溶剂残留溶剂研究思路研究思路 质量标准质量标准拟定原则：拟定原则：如仅残留有重结晶溶剂、如仅残留有重结晶溶剂、且为低沸点（如乙醇、丙酮等），完全可采用且为低沸点（如乙醇、丙酮等），完全可采用105干燥失重方法予以替代。从而省略掉气相测干燥失重方法予以替代。从而省略掉气相测定，且干燥失重限度可酌情放宽。定，且干燥失重限度可酌情放宽。 质量标准是一个不断完善的过程：质量标准是一个不断完善的过程： 气相色谱法测定时应注意事项气相色谱法测定时应注意事项将对照品溶液浓度配制为限度点。将对照品溶液浓度配制为限度点。对于二氯甲烷、三氯甲烷采用氢火焰检测器对于

53、二氯甲烷、三氯甲烷采用氢火焰检测器(FID)勉为其勉为其难、应采用电子捕获检测器难、应采用电子捕获检测器(ECD)。如要强行检测，可。如要强行检测，可采用的办法有：直接进样、加大流速，使峰形更尖锐、采用的办法有：直接进样、加大流速，使峰形更尖锐、从而提高峰面积积分精密度。从而提高峰面积积分精密度。供试品溶液一定要全部溶解。供试品溶液一定要全部溶解。对于一些高沸点和低沸点的残留溶剂，不推荐采用顶空对于一些高沸点和低沸点的残留溶剂，不推荐采用顶空法进样！法进样！尽可能建立内标法、而非外标法。尽可能建立内标法、而非外标法。色谱柱的选择一定要遵循色谱柱的选择一定要遵循“极性相似极性相似”原理。原理。直

54、接法进样样品溶液后，进样针极易堵塞。自动进样器直接法进样样品溶液后，进样针极易堵塞。自动进样器时设定几针溶剂，冲洗时多洗几次。试验结束后用乙醇时设定几针溶剂，冲洗时多洗几次。试验结束后用乙醇浸泡进样针浸泡进样针五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求u一级标准品一级标准品n 如果药典标准品（或其它官方认可的来源）已有市售使用药典标准品的现行批次作为一级标准品提供所使用的药典标准品的批号使用药典标准品，标定工作对照品（二级标准品）贮存条件：按标签上的贮存条件保存五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求u一级标准品一级

55、标准品n 如果药典标准品（或其它官方认可的来源）未市售选择具高纯度的原料来建立一级标准品，并提供其来源、批号进行完整的结构鉴别鉴定：包括IR、UV、MS、氢谱/碳谱及其光谱解析和元素分析等以确保其结果的准确性及含量与纯度建立标准品的质量标准按质量标准项目要求，进行完整的分析检验，包括性状、理化性质及纯度检测等五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求u二级标准品（工作对照品）二级标准品（工作对照品）n 使用药典标准品，标定工作对照品选择一批原料作为工作对照品，并提供其来源、批号建立工作对照品的质量标准按质量标准所列项目要求，进行完整的分析检验，（鉴别及含量项目测试与药典标准品作对比）审核、批准、放行工作对照品的分析报告单五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求u杂质对照品杂质对照品n 使用药典杂质标准品，标定内部杂质对照品n使用其它官方认可来源的化学品作为杂质对照品n通过红外、紫外、核磁共振、质谱等，鉴别杂质对照品的化学结构来源、批号及纯度建立杂质对照品的质量标准杂质对照品的分析报告单Thank You!