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1、知识回顾知识回顾植物细胞工程植物细胞工程植物细胞工程技术植物细胞工程技术植物细胞工程应用植物细胞工程应用植植物物组组织织培培养养植植物物体体细细胞胞杂杂交交植植物物繁繁殖殖的的新新途途径径作作物物新新品品种种的的培培育育细细胞胞产产物物的的工工厂厂化化生生产产动物细胞工程动物细胞工程动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合单克隆抗体技术单克隆抗体技术核移植核移植动物动物细胞细胞工程工程常用常用技术技术动动物物细细胞胞工工程程纵纵览览20032003年月日下午，年月日下午，1212岁的四川简阳少年小林放岁的四川简阳少年小林放学路上捡了些鞭炮，并把里学路上捡了些鞭炮，并把里面的火药抖出来，
2、蹲在地上面的火药抖出来，蹲在地上将其点燃，导致面部、四肢将其点燃，导致面部、四肢不幸被严重烧伤并感染，在不幸被严重烧伤并感染，在当地医院治疗半月后，于当地医院治疗半月后，于4 4月月2222日转入武警四川消防总队医院烧伤整形科。日转入武警四川消防总队医院烧伤整形科。为了挽救儿子的生命，小林的爸爸、妈妈向医生恳求：为了挽救儿子的生命，小林的爸爸、妈妈向医生恳求：“割割我们的皮给儿子吧！我们的皮给儿子吧！”烧伤整形科主任魏平经不起这份亲情的重烧伤整形科主任魏平经不起这份亲情的重托，最终托，最终“妥协妥协”了：同意进行这种国内极其罕见的亲体皮肤移了：同意进行这种国内极其罕见的亲体皮肤移植手术。植手术
3、。 阅读资料阅读资料儿子捡鞭炮严重烧伤感染，父割千块皮肤儿子捡鞭炮严重烧伤感染，父割千块皮肤主刀的魏平主任把李小明整个右侧大腿皮全部被主刀的魏平主任把李小明整个右侧大腿皮全部被剥下并用纱布紧紧包裹。为了完全覆盖孩子身体上被剥下并用纱布紧紧包裹。为了完全覆盖孩子身体上被深度烧伤并发生感染的创面，医生决定把取自父子俩深度烧伤并发生感染的创面，医生决定把取自父子俩的皮肤全部剪成指甲盖大小的小皮块，儿子的剪成正的皮肤全部剪成指甲盖大小的小皮块，儿子的剪成正方形，爸爸的剪成三角形，往需要植皮的创面上放时，方形，爸爸的剪成三角形，往需要植皮的创面上放时，儿子和爸爸的皮相隔相嵌。盛满亲情和父爱的上千块儿子和
4、爸爸的皮相隔相嵌。盛满亲情和父爱的上千块小小的三角形、正方形的皮肤一点点地铺在了被火烧小小的三角形、正方形的皮肤一点点地铺在了被火烧得惨不忍睹的儿子的躯干上。得惨不忍睹的儿子的躯干上。1212时许，植皮手术成功时许，植皮手术成功完成。估计父亲的皮肤至少能在其儿子身上存活完成。估计父亲的皮肤至少能在其儿子身上存活半年甚至更长时间，这就给儿子自身皮肤半年甚至更长时间，这就给儿子自身皮肤的生长带来生机，孩子的痊愈指日可待。的生长带来生机，孩子的痊愈指日可待。阅读资料阅读资料 儿子捡鞭炮严重烧伤感染，父割千块皮肤儿子捡鞭炮严重烧伤感染，父割千块皮肤思考一下！思考一下！1 1、小林在皮肤烧伤之后，很容易
5、得病，为什么？、小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？2 2、皮肤在我们人体当中是第几道防线，其他几道防线、皮肤在我们人体当中是第几道防线，其他几道防线是什么？是什么？3 3、选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？、选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？4 4、自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径、自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身获得自身 的皮肤？的皮肤？. .1.1.试说大致过程试说大致过程2.2.为什么要把组织剪碎、用酶分解开？为什么要把组织剪碎、用酶分解开？3.3.用什么酶？为什么？用胃蛋白酶行不用什么酶？为什么？用胃蛋白酶行不行？行？4.4.这两种
6、酶会不会这两种酶会不会把细胞消化掉？把细胞消化掉？（教材（教材P44P44问题）问题）5.5.为什么要再分装？为什么要再分装？6.6.原代培养、传代培养？次数？原代培养、传代培养？次数？7.7.培养得到的细胞，如果暂培养得到的细胞，如果暂时不用时，怎么保存？时不用时，怎么保存？2 2动物细胞培养过程动物细胞培养过程 阅读阅读P44P44页回答问题页回答问题胰蛋白酶胰蛋白酶胶原蛋白酶胶原蛋白酶.培养条件动物动物组织组织分散成分散成单个细胞单个细胞细胞细胞悬液悬液培养培养胰蛋白酶胰蛋白酶胶原蛋白酶胶原蛋白酶原理：原理：细胞增殖（有丝分裂）细胞增殖（有丝分裂）结果：结果：细胞群，细胞产物细胞群，细胞
7、产物原代原代培养培养传代传代培养培养动物细胞培养过程动物细胞培养过程胚胎的细胞或刚出生不久动物的组织胚胎的细胞或刚出生不久动物的组织相互接触相互接触接触抑制接触抑制单层单层胰蛋白酶胰蛋白酶衰老或死亡衰老或死亡不死性不死性降低降低减少减少活细胞的膜具有活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入细胞，故不染色。选择透过性，大分子染料不能进入细胞，故不染色。中中低温低温新陈代谢新陈代谢酶酶抗原抗原.动物细胞培养归纳动物细胞培养归纳动物细胞培养动物细胞培养： 从动物机体中取出从动物机体中取出相关的组相关的组织织，将它分散成，将它分散成单个细胞单个细胞，然后，放在适宜的，然后，放在适宜的培培养基养基中
8、，让这些细胞生长和繁殖。中，让这些细胞生长和繁殖。回答以下问题：回答以下问题：1 1、培养基一般采用液体培养基还是固体培养基？、培养基一般采用液体培养基还是固体培养基？2 2、植物组织培养需不需要把组织分散成单个细胞？、植物组织培养需不需要把组织分散成单个细胞？3 3、植物组织培养的成果是什么？、植物组织培养的成果是什么？4 4、动物细胞培养需不需要把组织分散成单个细胞？、动物细胞培养需不需要把组织分散成单个细胞？5 5、动物细胞培养的成果是什么？、动物细胞培养的成果是什么？1 1、无菌、无毒、无菌、无毒消毒、消毒、灭菌灭菌 抗生素抗生素定期更换培养液（清除代谢废物）定期更换培养液（清除代谢废
9、物）2 2、营养、营养合成培养基：糖、氨基酸、生长因子、无机盐、合成培养基：糖、氨基酸、生长因子、无机盐、微量元素微量元素（血清、血浆）血清、血浆）3 3、温度和、温度和pHpH36.536.50.50.5，7.2-7.47.2-7.44 4、气体、气体95%95%空气，空气，5%CO5%CO2 2植物组织培养的植物组织培养的条件；应用条件；应用培养条件培养条件无菌、无毒无菌、无毒消毒、灭菌、消毒、灭菌、抗生素、抗生素、定期更换培养液（定期更换培养液（清除代谢废物清除代谢废物）营养营养合成培养基合成培养基（血清、血浆血清、血浆）温度和温度和pHpH36.536.50.50.5，7.2-7.47
10、.2-7.4气体气体95%95%空气，空气，5%CO5%CO2 2知识回顾知识回顾动物动物组织组织分散成分散成单个细胞单个细胞细胞细胞悬液悬液培养培养胰蛋白酶胰蛋白酶胶原蛋白酶胶原蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胶原蛋白酶胶原蛋白酶原代原代培养培养传代传代培养培养动物细胞培养的结果：动物细胞培养的结果：细胞群细胞群或或细胞产物细胞产物.动物细胞培养技术的实际应用动物细胞培养技术的实际应用1 1、大量生产细胞或产物。、大量生产细胞或产物。 如：病毒疫苗如：病毒疫苗 干扰素干扰素 单克隆抗体单克隆抗体 胰岛素胰岛素2 2、给基因工程提供受体细胞。、给基因工程提供受体细胞。3 3、检测有毒物质及毒性。、检测有
11、毒物质及毒性。4 4、用于生理、病理、药理等方面的研究，、用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据。为治疗和预防疾病提供理论依据。众所周知，治疗烧伤需要做皮肤移植手术，这对烧伤病人来说可谓雪上加众所周知，治疗烧伤需要做皮肤移植手术，这对烧伤病人来说可谓雪上加霜。他们本身已经够痛苦的了，还要进行皮肤移植，这意味着将从他们所剩无霜。他们本身已经够痛苦的了，还要进行皮肤移植，这意味着将从他们所剩无多的好皮肤上再移走一块。也就是说，这些已经受伤的患者，身上还要平添一多的好皮肤上再移走一块。也就是说，这些已经受伤的患者，身上还要平添一处新的伤痕。处新的伤痕。 如今，英国一家公司在实
12、验室中培育出人造皮肤，有望结束烧伤患者的皮如今，英国一家公司在实验室中培育出人造皮肤，有望结束烧伤患者的皮肤移植之痛。肤移植之痛。 据英国据英国每日邮报每日邮报报道，小块的皮肤移植已经进入临床实验阶段。医生报道，小块的皮肤移植已经进入临床实验阶段。医生在在6 6名志愿者的手臂上分别取下不足名志愿者的手臂上分别取下不足7 7平方厘米的皮肤，然后种上人造皮肤，用平方厘米的皮肤，然后种上人造皮肤，用无菌的绷带包扎好。无菌的绷带包扎好。2828天后，志愿者们的皮肤伤口全部愈合，几乎没留下什么天后，志愿者们的皮肤伤口全部愈合，几乎没留下什么疤痕，而且这些志愿者也没有任何排异反应，预后比较理想。疤痕，而且
13、这些志愿者也没有任何排异反应，预后比较理想。 人造皮肤的厚度与真正的皮肤也是一致的，皮肤由纤维蛋白原、血凝酶和人造皮肤的厚度与真正的皮肤也是一致的，皮肤由纤维蛋白原、血凝酶和纤维原细胞等所合成的基质组成。在显微镜下，它们几乎无异于自然生长的皮纤维原细胞等所合成的基质组成。在显微镜下，它们几乎无异于自然生长的皮肤，甚至可以清晰地看到纵横密布的血管。肤，甚至可以清晰地看到纵横密布的血管。英国计划生产人造皮肤英国计划生产人造皮肤对比：动物细胞培养、植物组织培养对比：动物细胞培养、植物组织培养植物组织培养技术植物组织培养技术动物细胞培养技术动物细胞培养技术原理原理培养基培养基结果结果分散处理分散处理脱
14、分化脱分化. . .细胞全能性细胞全能性细胞有丝分裂细胞有丝分裂固体固体, ,营养物质营养物质, ,激素激素液体液体, ,营养物质营养物质, ,血清血清等等完整植株完整植株细胞群或细胞产物细胞群或细胞产物无无有有有有无无植物植物组织组织培养技术是植物细胞工程技术的基础。培养技术是植物细胞工程技术的基础。动物动物细胞细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础。培养技术是动物细胞工程技术的基础。复习复习植物细胞工程植物细胞工程和和动物细胞工程的部分内容动物细胞工程的部分内容。动物细胞培养动物细胞培养核移植技术核移植技术将动物的一个细胞的，移入一个已经将动物的一个细胞的，移入一个已经去去掉掉 的的 细胞中
15、，使其细胞中，使其并并发育成一发育成一个新个新的，的，这个新的胚胎最终发育为动物个体。这个新的胚胎最终发育为动物个体。分类分类: :胚胎细胞核移植、体细胞核移植胚胎细胞核移植、体细胞核移植细胞核细胞核细胞核细胞核卵母卵母重组重组胚胎胚胎核移植技术核移植技术母绵羊母绵羊A A 乳腺细胞乳腺细胞（体细胞）（体细胞） 母绵羊母绵羊B B未受精的未受精的卵细胞卵细胞 母绵羊母绵羊C C“多莉多莉” 新的卵细胞发育成早期胚胎新的卵细胞发育成早期胚胎去核卵细胞去核卵细胞提取细胞核提取细胞核核移植核移植胚胎移植胚胎移植体细胞核移植技术体细胞核移植技术克克隆隆羊羊说出与克隆说出与克隆“多莉多莉”的不同之处。的
16、不同之处。为什么要进行动物细胞培养？为什么要进行动物细胞培养？为什么没有取出细胞核？为什么没有取出细胞核？为什么要去掉卵母细胞的核？为什么要去掉卵母细胞的核？体细胞核移植技术体细胞核移植技术克克隆隆牛牛阅读教材阅读教材P48P48页克隆牛页克隆牛的生产过程，回答问的生产过程，回答问题。题。体细胞核移植技术体细胞核移植技术整个过程用了哪些技术？整个过程用了哪些技术？细胞培养、核移植、胚胎移植细胞培养、核移植、胚胎移植新生牛的性别、基因？新生牛的性别、基因？与供体相同与供体相同繁殖方式？繁殖方式？无性繁殖无性繁殖原理？原理？动物细胞动物细胞核核的全能性的全能性体细胞核移植技术体细胞核移植技术胚胎移
17、植胚胎移植胚胎发育胚胎发育供体体细胞供体体细胞细胞培养细胞培养体细胞群体细胞群细胞融合细胞融合细胞细胞胚胎胚胎代孕母体代孕母体生出克隆个体生出克隆个体卵巢卵母细胞卵巢卵母细胞( (减减) )去核去核无核卵母细胞无核卵母细胞体细胞核移植技术过程体细胞核移植技术过程.体细胞核移植技术的应用体细胞核移植技术的应用阅读教材阅读教材P49 P49 页关页关于体细胞核移植技于体细胞核移植技术的应用，归纳其术的应用，归纳其应用领域。应用领域。1 1、畜牧业。、畜牧业。2 2、保护濒危物种。、保护濒危物种。3 3、医药卫生。、医药卫生。.体细胞核移植技术体细胞核移植技术存在的问题存在的问题.1.1.动物细胞培
18、养与植物组织培养的重要区别在于动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于 A A、培养基不同、培养基不同 B B、动物细胞培养不需要在无菌条件下进行、动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C C、动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能、动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D D、动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能、动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能 培养成植株培养成植株巩固练习巩固练习A A2.2.动物细胞工程技术的基础是动物细胞工程技术的基础是 A A、动物细胞融合、动物细胞融合 B B、胚胎移植、胚胎移植 C C、动物细胞培养、动物细胞培养 D D、核移植、核移植巩固练习巩固练习3.3.在
19、动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是是 A A、细胞系、细胞系 B B、细胞株、细胞株 C C、原代细胞、原代细胞 D D、传代细胞、传代细胞C CA A4.4.下列不属于克隆的是下列不属于克隆的是 A A、生物体通过体细胞进行的无性繁殖、生物体通过体细胞进行的无性繁殖 B B、将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系、将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系 C C、扦插和嫁接、扦插和嫁接 D D、将鸡的某个、将鸡的某个DNADNA片段整合到小鼠的片段整合到小鼠的DNADNA中中巩固练习巩固练习D D5.5.植物体细胞杂交的植物体细胞杂交的结果结果
20、是是 A A、产生杂种植株、产生杂种植株 B B、产生杂交细胞、产生杂交细胞 C C、原生质体的融合、原生质体的融合 D D、形成愈伤组织、形成愈伤组织巩固练习巩固练习A A6.6.植物体细胞杂交的植物体细胞杂交的目的目的是是 A A、产生杂种植株、产生杂种植株 B B、产生杂交细胞、产生杂交细胞 C C、原生质体的融合、原生质体的融合 D D、形成愈伤组织、形成愈伤组织A A7.7.植物体细胞杂交可以解决不同生物之间植物体细胞杂交可以解决不同生物之间 的问题的问题 A A、亲缘关系远、亲缘关系远 B B、地理隔离、地理隔离 C C、生殖隔离、生殖隔离 D D、组织分化、组织分化巩固练习巩固练习8.8.下列细胞中，不具有细胞全能性特点的细胞是下列细胞中，不具有细胞全能性特点的细胞是 A A、心肌细胞、心肌细胞 B B、神经细胞、神经细胞 C C、根的皮层细胞、根的皮层细胞 D D、木质部导管细胞、木质部导管细胞B BD D
