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1、实验二实验二 油镜的使用和细菌形态的观察油镜的使用和细菌形态的观察u 实验目的实验目的 u 实验原理实验原理u 实验材料实验材料u 实验步骤实验步骤u 实验报告实验报告1;.一、实验目的一、实验目的1. 学习并掌握油浸系物镜的使用方法学习并掌握油浸系物镜的使用方法 2. 利用油镜观察细菌的形态和特殊构造利用油镜观察细菌的形态和特殊构造2;.二、实验原理二、实验原理 人眼观察物体的能力是有限的。一般的情况下,人眼只能分辨相距人眼观察物体的能力是有限的。一般的情况下,人眼只能分辨相距0.1-0.2mm的两个的两个物体。也就是说,当两个物体相距不到物体。也就是说,当两个物体相距不到0.1mm的时候,
2、人眼就会把它们看成是一个物体的时候,人眼就会把它们看成是一个物体了。这个极限便称为人眼的分辨本领。了。这个极限便称为人眼的分辨本领。3;.二、实验原理二、实验原理4;. 物物 镜镜低倍镜低倍镜高倍镜高倍镜油镜(油镜(OI)镜头和玻片间以香柏油镜头和玻片间以香柏油代替空气代替空气5;.u 用香柏油取代空气的作用:用香柏油取代空气的作用: 增加视野照明度,增加视野照明度,改善观察效果改善观察效果空气空气 n=1.0玻璃玻璃 n=1.50香柏油香柏油 n=1.52l 当光线从其它介质射当光线从其它介质射入空气时,折射角大于入空气时,折射角大于入射角入射角 物物 镜镜6;.u 用香柏油取代空气的作用:
3、用香柏油取代空气的作用: 显微镜分辨率示意显微镜分辨率示意图图 物物 镜镜7;. 0.5 能分辨的最小距离(能分辨的最小距离(D)= n sin 物物 镜镜8;. 0.5 能分辨的最小距离(能分辨的最小距离(D)= n sin 数值孔径(数值孔径(NA)n:玻片与物镜间介质的折射率玻片与物镜间介质的折射率:为物镜镜口角的半数,它取决于物镜的直径和工作距离为物镜镜口角的半数,它取决于物镜的直径和工作距离低倍镜低倍镜高倍镜高倍镜油镜(油镜(OI) 物物 镜镜9;.u 用香柏油取代空气的作用:用香柏油取代空气的作用: 提高显微镜的分辨率提高显微镜的分辨率 物物 镜镜10;.u 肉眼分辨率一般只有肉眼
4、分辨率一般只有 0.2mmu 光学显微镜分辨率光学显微镜分辨率 0.2mu 电子显微镜可达电子显微镜可达 0.2nm11;.u显微镜、香柏油、镜头清洁液(二甲苯)、擦镜纸等。显微镜、香柏油、镜头清洁液(二甲苯)、擦镜纸等。u 变形杆菌、枯草杆菌、破伤风梭菌、园褐固氮菌、肺炎球菌等固定装片变形杆菌、枯草杆菌、破伤风梭菌、园褐固氮菌、肺炎球菌等固定装片三、实验材料三、实验材料12;.四、实验步骤四、实验步骤(一)观察前的准备(一)观察前的准备 将显微镜平稳置于实验台上,镜座距离实验台边约将显微镜平稳置于实验台上,镜座距离实验台边约4厘米,坐正,练习用双眼观察。厘米,坐正,练习用双眼观察。(二)低倍
5、镜观察染色装片(二)低倍镜观察染色装片 转动调节器至视野中出现清楚的物象为止。移动装片,将合适的观察部位移至视转动调节器至视野中出现清楚的物象为止。移动装片,将合适的观察部位移至视野中央。野中央。13;.四、实验步骤四、实验步骤(三)高倍镜观察(三)高倍镜观察 用细调节螺旋校正焦距使物像清晰为止,将最适宜观察部位移至视野中心。用细调节螺旋校正焦距使物像清晰为止,将最适宜观察部位移至视野中心。14;.(四)油镜观察(四)油镜观察 1. 在玻片的标本的镜检部位(镜头的正下方)滴一滴香柏油,将油镜转至正下方,使油镜浸在玻片的标本的镜检部位(镜头的正下方)滴一滴香柏油,将油镜转至正下方,使油镜浸在油中
6、,镜头几乎与玻片接触,但不可压及玻片,以免损坏玻片和镜头;在油中,镜头几乎与玻片接触,但不可压及玻片,以免损坏玻片和镜头; 2. 将聚光器升至最高并开足光圈,用细调节螺旋调节至物像清晰为止;将聚光器升至最高并开足光圈,用细调节螺旋调节至物像清晰为止; 3. 如果镜台下降太快未找到物象,需从侧面注视,小心缓慢上升镜台,重新使镜头浸在油中,如果镜台下降太快未找到物象,需从侧面注视,小心缓慢上升镜台,重新使镜头浸在油中,用粗调节螺旋将镜台下降(切忌反转调节器),当视野中出现物象时,再用细调节螺旋调节到用粗调节螺旋将镜台下降(切忌反转调节器),当视野中出现物象时,再用细调节螺旋调节到物象清楚为止。物象
7、清楚为止。15;.变形杆菌(示周生鞭毛)变形杆菌(示周生鞭毛)鞭毛鞭毛16;.肺炎球菌肺炎球菌荚膜荚膜菌体菌体17;.破伤风梭菌破伤风梭菌枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌芽芽孢孢苏云金杆菌苏云金杆菌18;.(五)镜检完毕后的工作(五)镜检完毕后的工作 1. 上升镜筒,取下载玻片;上升镜筒,取下载玻片; 2. 用擦镜纸拭去镜头上的香柏油,然后用擦镜纸蘸少许镜头清洁液(或二甲苯)擦去镜头用擦镜纸拭去镜头上的香柏油,然后用擦镜纸蘸少许镜头清洁液(或二甲苯)擦去镜头上残留的油迹,最后再用干净的擦镜纸擦去残留的清洁液;上残留的油迹,最后再用干净的擦镜纸擦去残留的清洁液; 3. 将显微镜各部分还原,物镜呈将显微镜各部分还原,物镜呈“八八”字形降下,放入显微镜厨。字形降下,放入显微镜厨。四、实验步骤四、实验步骤19;.五、实验报告五、实验报告 绘图表示在油镜下观察到的细菌形态和特殊结构。绘图表示在油镜下观察到的细菌形态和特殊结构。20;.