《病毒感染的检查方法与防治原则课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《病毒感染的检查方法与防治原则课件（32页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、病毒感染的检查方法与防治原则1学习交流PPT目的与要求目的与要求了解病毒的诊断，抗病毒治疗，病毒感染的预防。2学习交流PPT 第一节第一节 病毒感染的检查方法病毒感染的检查方法3学习交流PPT病毒感染的检查病毒感染的检查检测内容检测内容查病毒查病毒查特异性抗体查特异性抗体 病毒颗粒病毒颗粒 病毒抗原病毒抗原 病毒核酸病毒核酸 病毒酶类：如逆转录酶病毒酶类：如逆转录酶 电镜直接观察电镜直接观察 光镜检查包涵体光镜检查包涵体 分离培养分离培养4学习交流PPT一、标本的采集与送检一、标本的采集与送检原则基本与细菌相似，但应注意：原则基本与细菌相似，但应注意： 1.1.标本用标本用“双抗双抗”或两性霉
2、素或两性霉素B B处理处理 2.2.低温保存，尽快送检低温保存，尽快送检 3.3.血清学诊断采双份血清血清学诊断采双份血清5学习交流PPT二、病毒的分离与鉴定二、病毒的分离与鉴定（一）病毒的分离培养（一）病毒的分离培养 细胞培养细胞培养细胞培养细胞培养（cellcell cultureculture） 鸡胚接种鸡胚接种鸡胚接种鸡胚接种（egg inoculationegg inoculation） 动物接种动物接种动物接种动物接种（animal inoculationanimal inoculation）6学习交流PPT1 1. .鸡胚培养鸡胚培养 采用孵化采用孵化采用孵化采用孵化9 9141
3、4天的鸡胚天的鸡胚天的鸡胚天的鸡胚 绒毛尿囊膜绒毛尿囊膜绒毛尿囊膜绒毛尿囊膜 痘苗病毒、人类疱疹病毒痘苗病毒、人类疱疹病毒痘苗病毒、人类疱疹病毒痘苗病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔尿囊腔尿囊腔尿囊腔接种部位接种部位接种部位接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒流感病毒、腮腺炎病毒流感病毒、腮腺炎病毒流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔羊膜腔羊膜腔羊膜腔 流感病毒的初次分离流感病毒的初次分离流感病毒的初次分离流感病毒的初次分离 卵黄囊卵黄囊卵黄囊卵黄囊 嗜神经病毒嗜神经病毒嗜神经病毒嗜神经病毒 7学习交流PPT8学习交流PPT1 1、鸡胚培养、鸡胚培养优点：优点：易管理，不带微生物，成本较低易管理，不带微生物，成本较
4、低缺点：缺点：操作程序复杂操作程序复杂9学习交流PPT10学习交流PPT2 2. .动物接种动物接种 应用：应用：应用：应用：尚无敏感细胞的病毒培养尚无敏感细胞的病毒培养尚无敏感细胞的病毒培养尚无敏感细胞的病毒培养 动物：动物：动物：动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等兔、鼠、黑猩猩、猴等兔、鼠、黑猩猩、猴等兔、鼠、黑猩猩、猴等 优点：优点：优点：优点：结果易观察，可建立动物模型结果易观察，可建立动物模型结果易观察，可建立动物模型结果易观察，可建立动物模型 缺点：缺点：缺点：缺点：有饲养条件要求，费用高，动物有饲养条件要求，费用高，动物有饲养条件要求，费用高，动物有饲养条件要求，费用高，动物 体内常带有
5、潜伏病毒体内常带有潜伏病毒体内常带有潜伏病毒体内常带有潜伏病毒11学习交流PPT病毒的分离培养病毒的分离培养 3.3.细胞培养细胞培养 单层细胞培养单层细胞培养单层细胞培养单层细胞培养（monolayer cell culturemonolayer cell culture） 分类分类分类分类 悬浮细胞培养悬浮细胞培养悬浮细胞培养悬浮细胞培养（suspended cell culturesuspended cell culture） 原代细胞（原代细胞（原代细胞（原代细胞（primary cellprimary cell）细胞种类细胞种类细胞种类细胞种类 二倍体细胞（二倍体细胞（二倍体细胞（二
6、倍体细胞（diploid celldiploid cell） 传代细胞系（传代细胞系（传代细胞系（传代细胞系（continuous cell linecontinuous cell line）12学习交流PPT病毒的细胞培养病毒的细胞培养细胞培养瓶细胞培养瓶细胞培养瓶细胞培养瓶单层细胞单层细胞单层细胞单层细胞13学习交流PPT1 1 1 1病毒增殖鉴定病毒增殖鉴定病毒增殖鉴定病毒增殖鉴定 (1)(1)(1)(1)细胞病变效应细胞病变效应细胞病变效应细胞病变效应（cytopathcytopathicic effect, effect, CPE CPE ） 细细细细胞胞胞胞变变变变圆圆圆圆、聚聚聚
7、聚集集集集、坏坏坏坏死死死死、溶溶溶溶解解解解或或或或脱脱脱脱落落落落等等等等（多数病毒）；（多数病毒）；（多数病毒）；（多数病毒）； 形形形形成成成成多多多多核核核核巨巨巨巨细细细细胞胞胞胞或或或或称称称称融融融融合合合合细细细细胞胞胞胞（麻麻麻麻疹疹疹疹病病病病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等）； 在在在在培培培培养养养养细细细细胞胞胞胞中中中中形形形形成成成成包包包包涵涵涵涵体体体体（狂狂狂狂犬犬犬犬病病病病病病病病毒毒毒毒、麻疹病毒等）。麻疹病毒等）。麻疹病毒等）。麻疹病毒等）。
8、 （二）病毒的鉴定（二）病毒的鉴定 14学习交流PPT细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落15学习交流PPT麻疹病毒麻疹病毒麻疹病毒麻疹病毒感染细胞感染细胞感染细胞感染细胞呼吸道合胞病呼吸道合胞病呼吸道合胞病呼吸道合胞病毒感染细胞毒感染细胞毒感染细胞毒感染细胞形成多核巨细胞或称融合细胞形成多核巨细胞或称融合细胞形成多核巨细胞或称融合细胞形成多核巨细胞或称融合细胞( (1 1) )细胞病变效应细胞病变效应( (cytopathic effect, CPE) )16学习交流PPT形成包涵体形成包涵体形成包涵
9、体形成包涵体( ( ( (inclusion bodyinclusion bodyinclusion bodyinclusion body) ) ) )( (1 1) )细胞病变效应细胞病变效应( (cytopathic effect, CPE) )17学习交流PPT腮腺炎病毒感染细胞腮腺炎病毒感染细胞腮腺炎病毒感染细胞腮腺炎病毒感染细胞( (2 2) )红细胞吸附红细胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素病毒囊膜表面血凝素病毒囊膜表面血凝素病毒囊膜表面血凝素( ( ( (HAHAHAHA) ) ) )红细胞表面红细胞表面红细胞表面红细胞表面HAHAHAHA受体受体受体受体18
10、学习交流PPT( (3 3) )干扰现象干扰现象（interference）风疹病毒风疹病毒风疹病毒风疹病毒人胚肾细胞人胚肾细胞人胚肾细胞人胚肾细胞 病毒增殖，病毒增殖，病毒增殖，病毒增殖，CPECPECPECPE( ( ( () ) ) )埃可病毒埃可病毒埃可病毒埃可病毒人胚肾细胞人胚肾细胞人胚肾细胞人胚肾细胞 病毒增殖，病毒增殖，病毒增殖，病毒增殖，CPECPECPECPE( ( ( () ) ) )人胚肾细胞人胚肾细胞人胚肾细胞人胚肾细胞风疹病毒风疹病毒风疹病毒风疹病毒？埃可病毒埃可病毒埃可病毒埃可病毒CPE(-)CPE(-)CPE(-)CPE(-)风疹病毒风疹病毒风疹病毒风疹病毒( (
11、 ( (+)+)+)+) 埃可病毒埃可病毒埃可病毒埃可病毒(-)(-)(-)(-)CPE(+)CPE(+)CPE(+)CPE(+)风疹病毒风疹病毒风疹病毒风疹病毒(-)(-)(-)(-) 埃可病毒埃可病毒埃可病毒埃可病毒(+)(+)(+)(+)19学习交流PPT2. 2. 病毒数量与感染性测定病毒数量与感染性测定1 1 1 1. . . .蚀斑形成试验蚀斑形成试验蚀斑形成试验蚀斑形成试验 （plaque formation testplaque formation test） 2.2.2.2.50505050组织细胞感染量组织细胞感染量组织细胞感染量组织细胞感染量 （5050 tissue c
12、ulturetissue culture infectious dose, infectious dose, TCIDTCID5050）感染性病毒量感染性病毒量20学习交流PPT2 2. .病毒形态学鉴定病毒形态学鉴定电子显微镜：设备、操作复杂，应用受限电子显微镜：设备、操作复杂，应用受限电子显微镜：设备、操作复杂，应用受限电子显微镜：设备、操作复杂，应用受限光学显微镜：可见大病毒（痘类病毒），光学显微镜：可见大病毒（痘类病毒），光学显微镜：可见大病毒（痘类病毒），光学显微镜：可见大病毒（痘类病毒）， 对一般病毒检测意义不大对一般病毒检测意义不大对一般病毒检测意义不大对一般病毒检测意义不大21
13、学习交流PPT3 3. .病毒血清学鉴定病毒血清学鉴定 用已知的抗体，鉴定病毒种、型、亚型用已知的抗体，鉴定病毒种、型、亚型用已知的抗体，鉴定病毒种、型、亚型用已知的抗体，鉴定病毒种、型、亚型 ( ( ( (1 1 1 1) ) ) )血凝抑制试验血凝抑制试验血凝抑制试验血凝抑制试验-正粘病毒型与亚型鉴定正粘病毒型与亚型鉴定正粘病毒型与亚型鉴定正粘病毒型与亚型鉴定 病毒病毒病毒病毒鸡红细胞鸡红细胞鸡红细胞鸡红细胞凝集凝集凝集凝集（血凝试验）（血凝试验）（血凝试验）（血凝试验） 病毒病毒病毒病毒特异性抗体特异性抗体特异性抗体特异性抗体鸡红细胞鸡红细胞鸡红细胞鸡红细胞不凝集不凝集不凝集不凝集 （血
14、凝抑制试验血凝抑制试验血凝抑制试验血凝抑制试验） (2)(2)(2)(2)免疫标记法（免疫标记法（免疫标记法（免疫标记法（FIAFIAFIAFIA、EIAEIAEIAEIA、RIARIARIARIA） 多种病毒鉴定多种病毒鉴定多种病毒鉴定多种病毒鉴定22学习交流PPT三、病毒分子生物学鉴定三、病毒分子生物学鉴定抗原变异病毒基因的鉴定抗原变异病毒基因的鉴定抗原变异病毒基因的鉴定抗原变异病毒基因的鉴定 核酸扩增核酸扩增核酸扩增核酸扩增 核酸杂交核酸杂交核酸杂交核酸杂交 基因芯片基因芯片基因芯片基因芯片 基因测序基因测序基因测序基因测序23学习交流PPT四、病毒感染的血清学诊断四、病毒感染的血清学诊
15、断应用：应用：应用：应用：采取标本分离病毒为时已晚采取标本分离病毒为时已晚采取标本分离病毒为时已晚采取标本分离病毒为时已晚目目目目前前前前尚尚尚尚无无无无分分分分离离离离此此此此病病病病毒毒毒毒的的的的方方方方法法法法或或或或难难难难以以以以分分分分离的病毒离的病毒离的病毒离的病毒为证实所分离的病毒的临床意义为证实所分离的病毒的临床意义为证实所分离的病毒的临床意义为证实所分离的病毒的临床意义进行血清流行病学调查等进行血清流行病学调查等进行血清流行病学调查等进行血清流行病学调查等24学习交流PPT1 1. .中和试验（中和试验（neutralizing test）病毒病毒病毒病毒中和抗体中和抗体
16、中和抗体中和抗体 病毒失去感染性病毒失去感染性病毒失去感染性病毒失去感染性 特点：特点：特点：特点：特异性高，抗体维持时间长特异性高，抗体维持时间长特异性高，抗体维持时间长特异性高，抗体维持时间长应用：应用：应用：应用：人群免疫情况的调查人群免疫情况的调查人群免疫情况的调查人群免疫情况的调查 临床诊断少用临床诊断少用临床诊断少用临床诊断少用25学习交流PPT五、病毒感染的快速诊断五、病毒感染的快速诊断数小时内出结果数小时内出结果数小时内出结果数小时内出结果病毒颗粒病毒颗粒病毒颗粒病毒颗粒病毒成分（抗原或核酸）病毒成分（抗原或核酸）病毒成分（抗原或核酸）病毒成分（抗原或核酸） 早期抗体检测早期抗
17、体检测早期抗体检测早期抗体检测（I IgMgM）26学习交流PPT病毒的快速病毒的快速诊断断光光镜-包涵体电镜免疫免疫荧光光ELISA分子生物学技分子生物学技术杂交Southern blotPCRNorthern blot27学习交流PPT第二节第二节 病毒感染的防治原则病毒感染的防治原则28学习交流PPT灭活疫苗（灭活疫苗（灭活疫苗（灭活疫苗（inactivated vaccineinactivated vaccine）活疫苗（活疫苗（活疫苗（活疫苗（living vaccineliving vaccine）重组载体疫苗（重组载体疫苗（重组载体疫苗（重组载体疫苗（recombinant ca
18、rrier vaccinerecombinant carrier vaccine）亚单位疫苗（亚单位疫苗（亚单位疫苗（亚单位疫苗（subunit vaccinesubunit vaccine） 化学提取或人工合成疫苗化学提取或人工合成疫苗化学提取或人工合成疫苗化学提取或人工合成疫苗 重组疫苗（重组疫苗（重组疫苗（重组疫苗（recombinant vaccinerecombinant vaccine）核酸疫苗（核酸疫苗（核酸疫苗（核酸疫苗（nucleic acid vaccinenucleic acid vaccine）一、人工主动免疫常用生物制品一、人工主动免疫常用生物制品29学习交流PPT二
19、、人工被动免疫常用生物制品二、人工被动免疫常用生物制品 免疫球蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白 血清丙种球蛋白血清丙种球蛋白血清丙种球蛋白血清丙种球蛋白 细胞免疫制剂细胞免疫制剂细胞免疫制剂细胞免疫制剂 IFN-IFN- 、 、 细胞因子细胞因子细胞因子细胞因子 IL-2 IL-2、IL-6IL-6、IL-12 IL-12 TNF TNF 、CSFCSF 淋巴因子激活的杀伤细胞淋巴因子激活的杀伤细胞淋巴因子激活的杀伤细胞淋巴因子激活的杀伤细胞 LAKLAK细胞细胞细胞细胞 30学习交流PPT三、病毒感染的治疗三、病毒感染的治疗核苷类药物核苷类药物 非核苷类反转录酶抑制剂非核苷类反转录酶抑制剂 蛋白酶抑制剂蛋白酶抑制剂2.2.干扰素和干扰素诱生剂干扰素和干扰素诱生剂3.3.中草药中草药 4.4.基因治疗剂基因治疗剂 5.5.治疗性疫苗治疗性疫苗 1. 1.抗病毒化学制剂抗病毒化学制剂抗病毒化学制剂抗病毒化学制剂反义寡核苷酸反义寡核苷酸反义寡核苷酸反义寡核苷酸干扰干扰RNA核核核核酶酶酶酶（ribozymeribozyme） 31学习交流PPT核苷类药物作用机制 HSV/VZV HSV/VZV 无环鸟苷无环鸟苷（NA）病毒胸苷激酶病毒胸苷激酶NA一磷酸宿主细胞激酶 NA三磷酸 （缺乏糖环3-OH基）病毒DNA聚合酶核酸链延伸被迫终止核酸链延伸被迫终止32学习交流PPT
