高速逆流色谱法

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1、第第9章章高速逆流色谱法高速逆流色谱法HighSpeedCountercurrentChromatographyHSCCC2021/8/141一、概述一、概述lIto，70年代提出，年代提出，80年代提出年代提出CCC，一种液液，一种液液色谱分离技术色谱分离技术逆流分配逆流分配液滴逆流色液滴逆流色谱高速逆流色高速逆流色谱l参考参考书1.逆流色逆流色谱技技术张天佑，北京科学技天佑，北京科学技术出版社，出版社，1991年年2.高速逆流色高速逆流色谱分离技分离技术与与应用用曹学曹学丽，化学工，化学工业出版社，出版社，2009年年2021/8/142二、分离原理二、分离原理l连续液液萃取过程，固定相和

2、流动相均为液体连续液液萃取过程，固定相和流动相均为液体l问题是：如何在流动相流动时使固定相不动？问题是：如何在流动相流动时使固定相不动？两种基本模式两种基本模式流体静力学平衡系统流体静力学平衡系统洗脱速度太慢，一般需要两天或更长时间。洗脱速度太慢，一般需要两天或更长时间。流体动力学平衡系统流体动力学平衡系统2021/8/1432021/8/1442021/8/145高速逆流色谱的仪器流程高速逆流色谱的仪器流程三、仪器结构三、仪器结构2021/8/1462021/8/147柱：柱：长的软管长的软管(如聚四氟乙烯管如聚四氟乙烯管)绕制成绕制成载体：载体：无无固定相：固定相：液体。用某一种有机水两相

3、溶剂体系或双水液体。用某一种有机水两相溶剂体系或双水和溶剂体系的上层或下层作为色谱过程的固定相，用离和溶剂体系的上层或下层作为色谱过程的固定相，用离心力场来支撑住柱内的液态相。心力场来支撑住柱内的液态相。流动相：流动相：若用溶剂体系中的另一层作为流动相，带着混若用溶剂体系中的另一层作为流动相，带着混合样品由泵的压力推入分离管柱，样品就会穿过两个液合样品由泵的压力推入分离管柱，样品就会穿过两个液相对流的整个管柱空间。相对流的整个管柱空间。分离：分离：溶剂萃取过程成千上万次地、高效地、自动连续溶剂萃取过程成千上万次地、高效地、自动连续地予以完成。各个组分也就会按其在两相中的分配系数地予以完成。各个

4、组分也就会按其在两相中的分配系数分离开来分离开来。2021/8/148四、方法特点四、方法特点1固定相、流动相均为液体，完全排除了载体对样品组分的吸固定相、流动相均为液体，完全排除了载体对样品组分的吸附、玷染、变性、失活等不良影响，能避免不可逆吸附造成的色附、玷染、变性、失活等不良影响，能避免不可逆吸附造成的色谱峰拖尾现象，谱峰拖尾现象，实现高回收实现高回收。2分离柱容积可大，分离柱容积可大，没有填料，柱内空间均为有效空间。因此，没有填料，柱内空间均为有效空间。因此，样品负载量较大样品负载量较大，制备量可从毫克到克量级。制备量可从毫克到克量级。3逆流色谱不用填料，分离过程不是淋洗或洗脱过程，而

5、是对逆流色谱不用填料，分离过程不是淋洗或洗脱过程，而是对流穿透过程。溶剂用量少，流穿透过程。溶剂用量少，成本低。成本低。4.逆流色谱的分离效率比不上气相色谱和高效液相色谱等技术，逆流色谱的分离效率比不上气相色谱和高效液相色谱等技术，不宜进行复杂混合物的全分析不宜进行复杂混合物的全分析。5.适合用于分离纯化适合用于分离纯化，预处理条件宽松，回收率高，制备量大，预处理条件宽松，回收率高，制备量大。2021/8/149四、高速逆流色谱的溶剂选择四、高速逆流色谱的溶剂选择l溶剂体系的选择原则溶剂体系的选择原则不造成样品的分解或变性不造成样品的分解或变性足够高的样品溶解度足够高的样品溶解度样品在系统中有

6、合适的分配系数样品在系统中有合适的分配系数固定相能实现足够高的保留固定相能实现足够高的保留l溶剂应该进行分层实验，实验结果决定流速和洗溶剂应该进行分层实验，实验结果决定流速和洗脱方式脱方式l样品要溶解于流动相或固定相之中样品要溶解于流动相或固定相之中2021/8/1410五、高速逆流色谱的应用五、高速逆流色谱的应用l天然药物的分离和分析天然药物的分离和分析l氨基酸、激素、嘌呤、抗生素等分离分析氨基酸、激素、嘌呤、抗生素等分离分析l蛋白质、细胞至微生物的分离等蛋白质、细胞至微生物的分离等2021/8/14112021/8/1412黄连生物碱的分离2021/8/1413部分资料从网络收集整理而来，供大家参考，感谢您的关注！