组织学与胚胎学

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1、 主讲主讲:蒲小燕蒲小燕单位单位:青海大学医学院青海大学医学院组织学组织学(histology):):研究机体微细结构研究机体微细结构 及其相关功能的科及其相关功能的科 学学 胚胎学(胚胎学(embryologyembryology):):研究人体发生、研究人体发生、 生长及其发育机生长及其发育机 制的一门科学制的一门科学 组织学绪论组织学绪论 Histology Introduction 三、组织学技术三、组织学技术 一、一、 组织学的概念组织学的概念 二、显微镜的应用二、显微镜的应用四四 、组织学的学习方法、组织学的学习方法一、组织学的概念一、组织学的概念 机体的机体的微细结构微细结构是用

2、显微镜是用显微镜及其相关功能的及其相关功能的科学科学 。(细胞、组织、器官、系统)研究研究 红红细胞细胞 白细胞白细胞 肌细胞肌细胞 精子精子 神经细胞神经细胞 组织组织器官器官系统系统 细胞细胞 细胞间质细胞间质 (细胞外基质(细胞外基质)+上皮组织上皮组织结缔组织结缔组织肌组织肌组织神经组织神经组织(cellcell)(tissuetissue)(organorgan)(systemsystem)成人有11015个细胞,约210种. 细胞膜细胞膜 细胞质细胞质 细胞核细胞核细胞提出细胞提出组组织织建建立立形成形成21种 透射电镜透射电镜 -观察细胞内部结构观察细胞内部结构 扫描电镜扫描电镜

3、 -观察组织或细胞表面的立体结构观察组织或细胞表面的立体结构电子显微镜电子显微镜光学显微镜光学显微镜解剖解剖光学显微镜(放大镜)光学显微镜(放大镜)组织组织光学显微镜光学显微镜1、显微镜的分类、显微镜的分类二、显微镜的应用二、显微镜的应用0.2um物体放大物体放大1000倍倍 镜下结构简称镜下结构简称 LM 结构发明于结构发明于16世纪世纪0.2nm物体放大物体放大1000倍倍 镜下结构简称镜下结构简称 EM 结构发明于结构发明于1932年年2、显微镜的特点、显微镜的特点三、组织学技术三、组织学技术 石蜡切片法(用于教学)石蜡切片法(用于教学) 冷冻切片法(冷冻切片法(用于临床检验)用于临床检

4、验) (肝、肾、淋巴结等)(肝、肾、淋巴结等)非切片法非切片法(牙齿、血液、疏松结缔组织等)(牙齿、血液、疏松结缔组织等)切片法切片法涂片铺片(撕片)铺片(撕片) 磨磨 片片 取材取材(一)、石蜡切片法(一)、石蜡切片法1、快速杀死动物取材。、快速杀死动物取材。2、组织愈新鲜愈好。、组织愈新鲜愈好。 3、材料大小一般不超过、材料大小一般不超过 0.5cm3。固定固定1、动物的组织在离体后便很快地进行解体、动物的组织在离体后便很快地进行解体 , 这些变化这些变化可能是由于细菌或是由于其可能是由于细菌或是由于其 本身所含酶的作用。本身所含酶的作用。2、在动物死后应立即将其固定起来、在动物死后应立即

5、将其固定起来,停止其分解作用停止其分解作用 , 尽可能保存其结构及成分尽可能保存其结构及成分,并能抵抗各个步骤处理时并能抵抗各个步骤处理时所产生的损坏作用。所产生的损坏作用。 3、常用的固定液有、常用的固定液有 10% 福尔马林福尔马林 , Bouin 液液 , 苦味酸苦味酸、乙醇。、乙醇。4、固定时间为、固定时间为24小时小时-很长。很长。冲洗冲洗1、用水将固定液置换。、用水将固定液置换。2、时间为、时间为24小时。小时。脱水脱水1、组织必须先脱去水分、组织必须先脱去水分 , 才能包埋于蜡中。才能包埋于蜡中。2、脱水的步骤是陆续经、脱水的步骤是陆续经 70% 、 80% 、 90% 、 95

6、% 、 100 % 各级酒精各级酒精 , 以去净组织块内的水以去净组织块内的水分分 , 并完全由酒精所代替并完全由酒精所代替 。3、时间为、时间为3-6小时小时 透明透明1、因石蜡不溶于、因石蜡不溶于 酒精而溶于二甲苯酒精而溶于二甲苯 , 因而因而再用二甲苯替代酒精再用二甲苯替代酒精 , 同时因组织浸于油质同时因组织浸于油质二甲苯二甲苯 中也就变得透明了。中也就变得透明了。2、时间为、时间为24小时。小时。 浸蜡浸蜡1、将透明好的组织快放入溶化、将透明好的组织快放入溶化 的石蜡中,置的石蜡中,置于保温箱。于保温箱。2、时间为、时间为35小时。小时。包埋包埋最后把组织放在保持于最后把组织放在保持

7、于 52 58C 的已溶解的石蜡中,置于的已溶解的石蜡中,置于常温下。常温下。 切片切片待冷却后就变成坚硬的待冷却后就变成坚硬的组织蜡块组织蜡块 , 便可以进行便可以进行切片了。切片了。 贴片贴片染色染色(二)染色方法(二)染色方法 苏木精苏木精(Hematoxylin)伊红伊红(Eosin)碱性染料碱性染料将将嗜碱性物质嗜碱性物质(本身酸性本身酸性)染成蓝色染成蓝色酸性染料酸性染料将将嗜酸性物质嗜酸性物质(本身碱性本身碱性)染成红色染成红色细胞核中的细胞核中的DNA、RNA,细胞细胞质中质中的的RNA细胞质细胞质、膜性结构膜性结构(线粒体线粒体、溶酶体溶酶体、滑面内质网滑面内质网)(嗜碱性嗜

8、碱性)(嗜酸性嗜酸性) Giemsa染色染色 、银染色、银染色特殊染色特殊染色:HE染色:染色: 嗜中性嗜中性巨噬细胞巨噬细胞 消化分解消化分解1、形态结构和功能的关系、形态结构和功能的关系3、立体和断面的关系、立体和断面的关系5、前后联系、前后联系,对比总结对比总结功能功能(有溶酶体有溶酶体)四、组织学的学习方法四、组织学的学习方法2、理论和实践的关系、理论和实践的关系4、静态与动态、静态与动态 组织学研究技术、细胞组织学研究技术、细胞自学自学!多糖多糖PA氧化氧化醛醛Schiff试剂试剂紫红色沉淀紫红色沉淀五、五、 Histochemistry and Cytochemistry 组织化学

9、与细胞化学组织化学与细胞化学 试剂试剂 + 组织中待检物质组织中待检物质 有色沉淀有色沉淀 (多糖、酶、脂类、核酸)多糖、酶、脂类、核酸) ( periodic acid Schiff reaction): 是确定组织或细胞中有无多糖的方法。是确定组织或细胞中有无多糖的方法。 原理:原理:PAS反应反应PASPAS染色染色单柱上皮不同方位的切片图结构与功能舒张状态舒张状态收缩状态收缩状态静态与动态综合与比较六、细胞 一 细胞膜细胞膜 cell membrane 二二 细胞质细胞质 cytoplasm 三三 细胞核细胞核 nucleus细胞膜(一)、(一)、 cytoplasm 基质基质 核糖体

10、核糖体 ribosome 细胞器细胞器 内质网内质网 ERER 高尔基复合体高尔基复合体 Golgi 溶酶体溶酶体 LysLys 线粒体线粒体 MitMit 过氧化物酶体过氧化物酶体 peroxisome 中心体中心体 centrosome 细胞骨架细胞骨架 cytoskeleton 包含物包含物: :糖原、脂滴、分泌颗粒糖原、脂滴、分泌颗粒细胞器细胞器 organelle核糖体核糖体 ribosome attached ribosome attached ribosome 附着核糖体附着核糖体附着核糖体附着核糖体: : : :合成分泌蛋白合成分泌蛋白合成分泌蛋白合成分泌蛋白 freefree

11、 ribosome ribosome 游离核糖体游离核糖体游离核糖体游离核糖体: : : :合成结构蛋白合成结构蛋白合成结构蛋白合成结构蛋白核糖体丰富的细胞核糖体丰富的细胞核糖体丰富的细胞核糖体丰富的细胞LMLMLMLM下胞质下胞质下胞质下胞质嗜碱性嗜碱性嗜碱性嗜碱性 内质网内质网内质网内质网 ER ER ER ER 粗面内质网(粗面内质网(粗面内质网(粗面内质网(RERRERRERRER): : : :合成分泌型蛋白质合成分泌型蛋白质合成分泌型蛋白质合成分泌型蛋白质 嗜碱性嗜碱性嗜碱性嗜碱性 滑面内质网(滑面内质网(滑面内质网(滑面内质网(SERSERSERSER):):):):嗜酸性嗜酸性

12、嗜酸性嗜酸性 合成类固醇激素合成类固醇激素合成类固醇激素合成类固醇激素肾上腺皮质细胞肾上腺皮质细胞肾上腺皮质细胞肾上腺皮质细胞 参与脂类代谢参与脂类代谢参与脂类代谢参与脂类代谢( ( ( (小肠吸收细胞小肠吸收细胞小肠吸收细胞小肠吸收细胞, , , ,肝细胞肝细胞肝细胞肝细胞) ) ) ) 解毒作用解毒作用解毒作用解毒作用-(肝细胞)(肝细胞)(肝细胞)(肝细胞) 离子贮存、调节(横纹肌离子贮存、调节(横纹肌离子贮存、调节(横纹肌离子贮存、调节(横纹肌CaCaCaCa2+2+2+2+)高尔基复合体高尔基复合体 Golgi complexGolgi complex 功能功能功能功能: : : :

13、 蛋白质加工站蛋白质加工站蛋白质加工站蛋白质加工站 ( ( ( ( 酶原颗粒酶原颗粒酶原颗粒酶原颗粒 、粘原颗粒、粘原颗粒、粘原颗粒、粘原颗粒 、初级溶酶体、初级溶酶体、初级溶酶体、初级溶酶体 ) ) ) )蛋白质分泌旺盛细胞蛋白质分泌旺盛细胞蛋白质分泌旺盛细胞蛋白质分泌旺盛细胞GolgiGolgiGolgiGolgi发达发达发达发达溶酶体溶酶体 lysosome 嗜酸性嗜酸性嗜酸性嗜酸性 初级初级初级初级lyslyslyslys 次级次级次级次级lyslyslyslys 吞噬体吞噬体吞噬体吞噬体功能功能功能功能: : : : 含酸性水解酶含酸性水解酶含酸性水解酶含酸性水解酶, , , , 细

14、胞内消化器细胞内消化器细胞内消化器细胞内消化器-清除外来异物与内源性残余物。清除外来异物与内源性残余物。清除外来异物与内源性残余物。清除外来异物与内源性残余物。 线粒体线粒体 MitMit : 能量供应站能量供应站 细胞骨架细胞骨架 cytoskeleton: : 细胞特定形状细胞特定形状, ,运动有关运动有关 微管微管: : 微丝微丝: : 肌细胞肌细胞肌细胞肌细胞( ( ( ( 粗丝粗丝粗丝粗丝+ + + +细丝细丝细丝细丝 ) ) ) ) 中间丝中间丝: : 神经神经神经神经丝丝- -神经元神经元神经元神经元 角质蛋白丝角质蛋白丝- -复层扁平上皮复层扁平上皮 神经角质丝神经角质丝- -

15、星形胶质细胞星形胶质细胞 结蛋白丝结蛋白丝 波形蛋白丝波形蛋白丝(二)(二) 细胞核细胞核 nucleusnucleus 1 1 1 1 核膜核膜核膜核膜 nuclear envelop nuclear envelop : : : :核孔核孔核孔核孔 nuclear porenuclear pore 功能活跃功能活跃功能活跃功能活跃强嗜碱性强嗜碱性强嗜碱性强嗜碱性 + 2 2 2 2 核仁核仁核仁核仁 功能静止(功能静止(功能静止(功能静止() 形成核糖体前身的部位形成核糖体前身的部位形成核糖体前身的部位形成核糖体前身的部位 3 3 3 3 核基质核基质核基质核基质: : : : 核液核液核液

16、核液 + + + + 核骨架核骨架核骨架核骨架 4 4 4 4 染色质染色质染色质染色质: : : : 常染色质常染色质常染色质常染色质功能活跃功能活跃功能活跃功能活跃浅浅浅浅 异染色质异染色质异染色质异染色质功能静止功能静止功能静止功能静止深深深深 成纤维细胞成纤维细胞线粒体粗面内质网细胞的微细结构细胞的微细结构n nLM:LM: n n 1 1 细胞的形态细胞的形态细胞的形态细胞的形态n n 2 2 细胞质(酸碱性、特殊物质)细胞质(酸碱性、特殊物质)细胞质(酸碱性、特殊物质)细胞质(酸碱性、特殊物质)n n 3 3 细胞核(位置、大小、数量、形态、深浅)细胞核(位置、大小、数量、形态、深浅)细胞核(位置、大小、数量、形态、深浅)细胞核(位置、大小、数量、形态、深浅) EMEM:n n 1 1 细胞外形细胞外形细胞外形细胞外形n n 2 2 细胞器细胞器细胞器细胞器 Function: Function: 思考题思考题n n组织学的主要研究内容是什么?组织学的主要研究内容是什么?n n组织和器官分别是如何构成的?人体有哪几种组织和器官分别是如何构成的?人体有哪几种基本组织?基本组织?n n何谓嗜碱性、嗜酸性、中性、何谓嗜碱性、嗜酸性、中性、PAS反应?反应?n n组织学有哪些常用方法和技术?组织学有哪些常用方法和技术?

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