实验七逆境对植物细胞膜的伤害电导法

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1、实验七实验七 逆境对植物细逆境对植物细胞膜透性的影响胞膜透性的影响 (电导法电导法)原理:原理:v植物细胞膜对维持细胞的微环境和植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下,细胞膜对物质具有选择常情况下,细胞膜对物质具有选择透性能力。透性能力。如高温或低温,干旱、盐渍、病原菌侵如高温或低温,干旱、盐渍、病原菌侵染后,细胞膜遭到破坏,染后,细胞膜遭到破坏,膜透性增大膜透性增大,从而使细胞内的从而使细胞内的电解质外渗电解质外渗,以致植物,以致植物细胞浸提液的电导率增大。细胞浸提液的电导率增大。膜透性增大膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关的程度与

2、逆境胁迫强度有关,也与植物,也与植物抗逆性的强弱有关。抗逆性的强弱有关。 比较不同植物或同一植物不同品种比较不同植物或同一植物不同品种在相同胁在相同胁迫温度迫温度下膜透性的增大程度,即可比较植物下膜透性的增大程度,即可比较植物间或品种间的抗逆性强弱。间或品种间的抗逆性强弱。v用电导仪测定可以比较植物组织中的外用电导仪测定可以比较植物组织中的外渗电解质的含量,从而间接了解细胞透渗电解质的含量,从而间接了解细胞透性的大小。性的大小。因此,电导法目前已成为植物抗性栽因此,电导法目前已成为植物抗性栽培、育种上培、育种上快速鉴定快速鉴定植物抗逆性强弱植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。的一个精确而实用

3、的方法。电导仪的原理电导仪的原理电导率是电导率是物质传送电流的能力物质传送电流的能力,是,是电阻率的倒数电阻率的倒数。在液体中常以电阻的倒数在液体中常以电阻的倒数电导来衡量其导电电导来衡量其导电能力的大小。能力的大小。电导率电导率-电阻率的倒数即称之为电阻率的倒数即称之为电导率电导率L L。电导电导L L的计算式如下式所示:的计算式如下式所示: L=l/R=S/lL=l/R=S/l电导的单位用电导的单位用姆欧又称西门子姆欧又称西门子。用。用S S表示,表示,由于由于S S单位太大。常采用毫西门子,微西门子单单位太大。常采用毫西门子,微西门子单位位1S=101S=103 3mS=10mS=106

4、 6SS。一般用当量电导来表示电导率。电导率一般用当量电导来表示电导率。电导率L L的单位是的单位是 ( (S/cm)S/cm)电导仪的用法电导仪的用法材料与设备:材料与设备: 植物材料:植物材料: 女贞叶片;女贞叶片; 实验器具:实验器具: 电导仪;电导仪; 温箱;恒温水浴锅温箱;恒温水浴锅; 小烧杯,量筒小烧杯,量筒 操作步骤:操作步骤:1.1.选取低温选取低温( (高温)处理的女贞叶片高温)处理的女贞叶片5 5片,先用片,先用纱布拭净,再用打孔器打取纱布拭净,再用打孔器打取2020片小圆叶,放片小圆叶,放入小烧杯中,加入入小烧杯中,加入20ml 20ml 蒸馏水作为处理组。蒸馏水作为处理

5、组。再用相同的方法打取再用相同的方法打取2020片未经处理的小叶放片未经处理的小叶放入小烧杯中,加入入小烧杯中,加入20ml 20ml 蒸馏水作为对照组。蒸馏水作为对照组。 操作步骤:操作步骤:2.2.将小烧杯放入将小烧杯放入35水浴锅水浴锅中静置中静置20min20min,期,期间用玻棒轻轻搅动叶片,到时间后用,电导间用玻棒轻轻搅动叶片,到时间后用,电导仪测定溶液电导率。仪测定溶液电导率。 3. 3. 测过电导率之后,再放入测过电导率之后,再放入100100沸水浴沸水浴中中10min10min,以杀死植物组织,取出放入自,以杀死植物组织,取出放入自来水来水冷却冷却,测其煮沸电导率。,测其煮沸

6、电导率。 注意事项注意事项 1. 1. 整个过程中,叶片接触的用具必须整个过程中,叶片接触的用具必须绝对洁净(全部器皿要洗净),也不要绝对洁净(全部器皿要洗净),也不要用手直接接触叶片,以免污染。用手直接接触叶片,以免污染。 2. 2. 测定后电极要清洗干净。测定后电极要清洗干净。 4计算计算按下式计算相对电导度:按下式计算相对电导度:相对电导度(相对电导度(L)=(S1-空白电导率)空白电导率)/(S2-空白电导率)空白电导率) S1:煮前的电导率煮前的电导率 S2:煮后的电导率煮后的电导率空白电导率空白电导率: :蒸馏水的电导率蒸馏水的电导率相对电导度的大小表示细胞膜受伤害的程度相对电导度

7、的大小表示细胞膜受伤害的程度 由由于于室室温温对对照照也也有有少少量量电电解解质质外外渗渗,故故可可按按下下式式计计算算由由于于低低温温或或高高温温胁胁迫迫而而产产生生的的外外渗渗,称称为伤害度(或伤害性外渗)。为伤害度(或伤害性外渗)。 伤害度(伤害度(% %)= =式中式中 L Lt t处理叶片的相对电导度处理叶片的相对电导度; Lck对照叶片的相对电导度。对照叶片的相对电导度。 1.1.比较不同处理的叶片细胞透性的变化情况,比较不同处理的叶片细胞透性的变化情况,并加解释。并加解释。2.2.植物在逆境情况下细胞膜的透性会怎样变植物在逆境情况下细胞膜的透性会怎样变化?化?3.3.植物抗逆性与

8、细胞膜透性有何关系植物抗逆性与细胞膜透性有何关系 ? ? 作业:作业:将试验数据填入下表中并分析将试验数据填入下表中并分析植植物物 组织组织(叶盘数)(叶盘数)水水温温 浸渍浸渍 时间时间(minmin)电导率电导率(us/cmus/cm)相对电导率相对电导率(%)煮前的电导煮前的电导率率/煮后的电煮后的电导率导率100伤伤害害率率%处理处理对照对照煮煮前前煮煮后后煮煮前前煮煮后后实验八实验八 萘乙酸对根萘乙酸对根和茎生长的作用和茎生长的作用原理:原理:v 生长素对植物的不同器官有着不同的效应生长素对植物的不同器官有着不同的效应, , 一般一般来说,低浓度的生长素促进生长,高浓度时则抑制来说,

9、低浓度的生长素促进生长,高浓度时则抑制生长。不同的植物器官对生长素的反应也不同,通生长。不同的植物器官对生长素的反应也不同,通常根比芽、茎对生长素更敏感。常根比芽、茎对生长素更敏感。v本实验据此观察不同浓度的萘乙酸在种子萌发过程本实验据此观察不同浓度的萘乙酸在种子萌发过程中对植物不同器官生长的影响。中对植物不同器官生长的影响。 10-11 10-9 10-7 10-5 10-3 10-1 生长素浓度(mol/L)不同营养器官对不同浓度IAA的反应抑制 促进10-4根茎芽10-1010-81.植物材料:植物材料:萌动的绿豆种子,萌动的绿豆种子,2.实验器具:实验器具:温箱,温箱,培养皿,移液管,

10、小镊子,标签纸,培养皿,移液管,小镊子,标签纸,尺子尺子3.试试 剂:剂: 10mg/L10mg/L萘乙酸;萘乙酸;操作步骤:操作步骤: 1. 1. 取绿豆种子,用取绿豆种子,用0.1%0.1%升汞消毒升汞消毒15min15min,再,再用自来水和蒸馏水各冲洗用自来水和蒸馏水各冲洗3 3次,置于次,置于2222的的温箱中催芽温箱中催芽2d2d。操作步骤:操作步骤: 2. 2. 取取9cm9cm的洁净培养皿的洁净培养皿7 7套,编号套,编号 在在1 1号培养皿中加入号培养皿中加入10mg/L 10mg/L 萘乙酸萘乙酸10mL10mL,然后,然后从其中吸取从其中吸取1mL1mL放入放入2 2号培

11、养皿中,加号培养皿中,加9mL9mL蒸馏蒸馏水混匀后即成为水混匀后即成为1 mg/L 1 mg/L 萘乙酸溶液。萘乙酸溶液。如此依次稀释到如此依次稀释到6 6号培养皿(最后从第号培养皿(最后从第6 6号培养号培养皿中取出皿中取出1mL1mL弃去),则弃去),则1 1号至号至6 6号培养皿中的号培养皿中的萘乙酸浓度依次为萘乙酸浓度依次为10 mg/L10 mg/L、1 mg/L1 mg/L、0.1 0.1 mg/Lmg/L、0.01 mg/L0.01 mg/L、0.001 mg/L0.001 mg/L、0.0001 0.0001 mg/Lmg/L。 第第7 7号培养皿中则加入号培养皿中则加入9m

12、L9mL蒸馏水作为蒸馏水作为对照。对照。 操作步骤:操作步骤:3.3.选取已萌动的绿豆种子选取已萌动的绿豆种子6粒粒,用镊子将其整齐,用镊子将其整齐地排列在培养皿中,使胚的部位朝向同一侧,地排列在培养皿中,使胚的部位朝向同一侧,盖上皿盖后,放在盖上皿盖后,放在2525的温箱中培养的温箱中培养3d3d。 4.4.测量培养皿内绿豆幼芽及幼根的平均长度测量培养皿内绿豆幼芽及幼根的平均长度以及根的数目。以及根的数目。 记录数据并做统计分析记录数据并做统计分析 器官器官 长度长度(cm)自来自来水水(对照对照) 萘乙酸浓度萘乙酸浓度(mg/L)(mg/L)1010.10.010.0010.0001胚轴长胚轴长(cm) 根长根长(cm)根数根数(条条)作业:作业:1.1.用数理统计的显著性检验法对所测的数用数理统计的显著性检验法对所测的数据进行统计分析。据进行统计分析。2.2.指出哪一个浓度最适宜于下胚轴的生长指出哪一个浓度最适宜于下胚轴的生长? ?哪一个浓度最适合根的生长哪一个浓度最适合根的生长? ?说明各种浓度对根、茎生长的不同影响说明各种浓度对根、茎生长的不同影响. .

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