《绪论医学细胞生物学》由会员分享，可在线阅读，更多相关《绪论医学细胞生物学（63页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1延边大学医学院细胞生物学与医学遗传学教研室张子波2教教 材：医学细胞生物学材：医学细胞生物学 主主 编：杨康鹃编：杨康鹃 郑立红郑立红出版出版 社：人民军医出版社社：人民军医出版社 3参考书：参考书：1.1.医学细胞生物学医学细胞生物学 主主 编：胡以平编：胡以平 出版社：高等教育出版社，出版社：高等教育出版社，200920092.2.医学细胞与分子学基础医学细胞与分子学基础 主主 编：陈仁彪编：陈仁彪 出版社：上海科学出版社，出版社：上海科学出版社，20032003第1章 绪 论5细胞生物学细胞生物学(cell biology)： 从细胞水平（整体、亚微结构、分子）探讨生命活动从细胞水平（
2、整体、亚微结构、分子）探讨生命活动规律的科学。规律的科学。第一节第一节 细胞生物学研究内容、细胞生物学研究内容、发展及其分科发展及其分科医学细胞生物学医学细胞生物学(medical cell biology)： 运用细胞生物学的理论和方法，研究运用细胞生物学的理论和方法，研究人体人体的细胞的形态的细胞的形态结构和功能等生命活动规律和人类疾病发生、发展及其防结构和功能等生命活动规律和人类疾病发生、发展及其防治的科学。治的科学。6对象：对象：细胞细胞（cell，生命活动的基本单位），生命活动的基本单位）构成生物有机体构成生物有机体代谢与功能代谢与功能生物有机体生长发育生物有机体生长发育遗传（遗传全
3、能性）遗传（遗传全能性）细胞是细胞是基本单位基本单位一、细胞生物学研究的内容一、细胞生物学研究的内容研究水平：研究水平： 细胞整体、亚微结构、分子水平细胞整体、亚微结构、分子水平利用光镜描述细胞的结构利用光镜描述细胞的结构利用电镜或扫描探针探清利用电镜或扫描探针探清细胞的亚微或分子结构细胞的亚微或分子结构 形态方面形态方面研究任务：研究任务：8 8化学组成化学组成新陈代谢规律新陈代谢规律相互关系和相互作用相互关系和相互作用生命活动的基本规律生命活动的基本规律人类疾病产生机制人类疾病产生机制防治疾病的方法和技术防治疾病的方法和技术功能方面91.1.组织工程：组织工程：又称又称“再生医学再生医学”
4、，指利用生物活性物，指利用生物活性物 质，通过体外培养或构建的方法，再造质，通过体外培养或构建的方法，再造 或修复器官及组织的技术。或修复器官及组织的技术。 可再造：骨、软骨、皮肤、肾、肝、消化道、角膜、可再造：骨、软骨、皮肤、肾、肝、消化道、角膜、 肌肉、乳腺肌肉、乳腺2.2.干细胞干细胞(stem cell)(stem cell)：是来源于胚胎、胎儿或成体内是来源于胚胎、胎儿或成体内 具有在一定条件下无限制自我更新与增殖分化能力的具有在一定条件下无限制自我更新与增殖分化能力的 一类细胞，能够产生表现型与基因型和自己完全相同一类细胞，能够产生表现型与基因型和自己完全相同 的子细胞，也能产生组
5、成机体组织、器官的已特化的的子细胞，也能产生组成机体组织、器官的已特化的 细胞，同时还能分化为祖细胞。细胞，同时还能分化为祖细胞。3.3.治疗性复制人类胚胎（治疗性人类克隆胚胎）：治疗性复制人类胚胎（治疗性人类克隆胚胎）： 利用成年人的皮肤细胞制造胚胎材料，移植入利用成年人的皮肤细胞制造胚胎材料，移植入 人体，代替人体的损坏或患病部分。人体，代替人体的损坏或患病部分。治疗：糖尿病、帕金森病、阿尔茨海默病治疗：糖尿病、帕金森病、阿尔茨海默病( (老年痴呆症）老年痴呆症）20042004年年8 8月月1111日英国人类受精和胚胎技术管理局给英国纽日英国人类受精和胚胎技术管理局给英国纽卡斯尔大学的研
6、究人员发放了卡斯尔大学的研究人员发放了“治疗性复制人类胚胎治疗性复制人类胚胎”的执照的执照成为欧洲首家允许治疗性复制人类胚胎的国成为欧洲首家允许治疗性复制人类胚胎的国家。家。4.4.生物制药与医用生物学产品：生物制药与医用生物学产品：应用生物体活细胞应用生物体活细胞 产生从简单分子到复杂蛋白质等一系列生物制产生从简单分子到复杂蛋白质等一系列生物制 药与医用生物学产品。药与医用生物学产品。 例如：干扰素、白介素、胰岛素等例如：干扰素、白介素、胰岛素等11二、细胞生物学的发展历史( (一一) )细胞的发现和细胞学说的创立细胞的发现和细胞学说的创立( (四四) )分子生物学的发展分子生物学的发展(
7、(二二) )经典细胞学的发展经典细胞学的发展( (三三) )实验细胞学的发展实验细胞学的发展12细胞学说细胞学说细胞学说（cell theory） ：细胞是一切生物体构造和功能上的基本单位，整个机体是由细胞和细胞的产物所组成。1314 Watson J D Crick FHC DNA双螺旋结构双螺旋结构A-TG-CC-GA-TT-AC-G15163 5 Phe苯丙苯丙Leu亮亮Iso异亮异亮起始密码起始密码甲硫氨酸甲硫氨酸Val缬缬Ser丝丝Pro脯脯cThr苏苏Ala丙丙Arg精精Tyr酪酪His组组Glu谷氨谷氨酰氨酰氨终止密码终止密码终止密码终止密码Try色色Cys半光半光Ser丝丝Ar
8、g精精Asp天冬天冬酰氨酰氨Lys赖赖Asp天冬天冬氨酸氨酸Glu谷谷Gly甘甘 密码子的中英文缩写对照表密码子的中英文缩写对照表1718基因突变的表型效应镰状细胞性贫血（AR）产生机制：珠蛋白基因第一外显子第6密码子突变异常血红蛋白分子（HbS）GAG GTG 谷氨酸 缬氨酸正常血红蛋白分子（HbA）19基因诊断：PCR-RFLP诊断镰状细胞贫血父 母患儿 正常儿 胎儿13kb7.6kb5.4kb基因型 HbAHbS HbSHbS HbAHbA ?HbSHbS2021线粒体线粒体乳腺细胞核乳腺细胞核未受精卵细胞未受精卵细胞去核去核卵细胞卵细胞细胞融合细胞融合培养培养妊娠妊娠148天天22三、
9、细胞生物学的主要分支学科三、细胞生物学的主要分支学科 细胞形态学（形态和功能）细胞形态学（形态和功能） 细胞化学细胞化学（化学成分定位、分布及生理功能）化学成分定位、分布及生理功能） 细胞生理学（生命活动规律）细胞生理学（生命活动规律） 细胞遗传学（染色体的结构功能）细胞遗传学（染色体的结构功能） 分子细胞学（基因组的结构和功能）分子细胞学（基因组的结构和功能） 细胞社会学（细胞识别、通讯及相互作用）细胞社会学（细胞识别、通讯及相互作用）23一、细胞形态结构研究技术一、细胞形态结构研究技术 （一）细胞显微结构研究的技术与方法（一）细胞显微结构研究的技术与方法第二节第二节 细胞生物学研究方法概述
10、细胞生物学研究方法概述光学放大系统光学放大系统照明系统照明系统机械和支架系统机械和支架系统显微结构显微结构24尼康E-600显微镜1.1.复式显微镜复式显微镜 ： 单筒目镜、双瞳目镜单筒目镜、双瞳目镜 最常用最常用2.2.暗视野显微镜：暗视野显微镜： 利用被检物所反射利用被检物所反射或衍射的光线来观察标或衍射的光线来观察标本本 观察细菌、原生动观察细菌、原生动物或提纯的细胞器等颗物或提纯的细胞器等颗粒物质。粒物质。26 细胞中有些物质，如叶细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧虽不能发荧光，但
11、如果用荧光染料或荧光抗体染色后，光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具进行定性和定量研究的工具之一。之一。3.3.荧光显微镜荧光显微镜尼康E800荧光DIC显微镜 27线粒体干细胞皮肤微管4.4.相差显微镜：相差显微镜： 利用光线通过不利用光线通过不同物质所形成的反差同物质所形成的反差来观察标本来观察标本观察活细胞的细微结观察活细胞的细微结构和变化。构和变化。链球菌形态链球菌形态30莱卡倒置显微镜 组组成成和和普普通通显显微微镜镜一一样样，只只不不过过物物镜镜与与照照明明系系统统颠颠倒倒，
12、前前者者在在载载物物台台之之下下，后后者者在在载载物物台台之之上上，用用于于观观察察培培养养的的活活细细胞胞，具有相差物镜。具有相差物镜。5.5.倒置显微镜倒置显微镜316.6.共聚焦显微镜共聚焦显微镜 无法用眼睛直无法用眼睛直接观察，只能用探接观察，只能用探测器收集每个像素测器收集每个像素点的信号，再通过点的信号，再通过软件重构图像。软件重构图像。 分辨率比普通显分辨率比普通显微镜有少量提高。微镜有少量提高。3232 电电子子显显微微镜镜与与光光学学显显微微镜镜的的成成像像原原理理基基本本一一样样，所所不不同同的的是是前前者者用用电电子子束束作作光光源源，用用电电磁磁场场作作透透镜镜。另另外
13、外，由由于于电电子子束束的的穿穿透透力力很很弱弱，因因此此用用于于电电镜镜的的标标本本须须制制成成厚厚度度约约50nm50nm左左右右的的超超薄薄切切片片。这这种种切切片片需需要要用用超超薄薄切切片片机机制制作作。电电子子显显微微镜镜的的放放大大倍倍数数最最高高可可达达近近百百万万倍倍，由由电电子子照照明明系系统统、电电磁磁透透镜镜成成像像系系统统、真真空空系系统统、记记录录系系统、电源系统等统、电源系统等5 5部分构成。部分构成。（二）细胞超微结构研究的技术与方法（二）细胞超微结构研究的技术与方法常用电子显微镜和常用电子显微镜和X X射线衍射仪。射线衍射仪。33JEM-1011透射电子显微镜
14、 在光学显微镜下无法看清在光学显微镜下无法看清小于小于0.20.2m m的细微结构，这些结的细微结构，这些结构称为亚显微结构或超微结构。构称为亚显微结构或超微结构。要想看清这些结构，就必须选要想看清这些结构，就必须选择波长更短的光源，以提高显择波长更短的光源，以提高显微镜的分辨率。微镜的分辨率。19321932年年RuskaRuska发发明了以电子束为光源的透射电明了以电子束为光源的透射电子显微镜，电子束的波长要比子显微镜，电子束的波长要比可见光和紫外光短得多，并且可见光和紫外光短得多，并且电子束的波长与发射电子束的电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比，也就是说电压平方根成反比，也就是说
15、电压越高波长越短。目前电压越高波长越短。目前TEMTEM的的分辨力可达分辨力可达0.2nm0.2nm。1.1.透射电子显微镜透射电子显微镜内质网透射电镜图内质网透射电镜图3535 于于2020世世纪纪6060年年代代问问世世，用用来来观观察察标标本本的的表表面面结结构构。其其工工作作原原理理是是用用一一束束极极细细的的电电子子束束扫扫描描样样品品，在在样样品品表表面面激激发发出出次次级级电电子子，次次级级电电子子的的多多少少与与电电子子束束入入射射角角有有关关，也也就就是是说说与与样样品品的的表表面面结结构构有有关关，次次级级电电子子由由探探测测体体收收集集，并并在在那那里里被被闪闪烁烁器器转
16、转变变为为光光信信号号，再再经经光光电电倍倍增增管管和和放放大大器器转转变变为为电电信信号号来来控控制制荧荧光光屏屏上上电电子子束束的的强强度度，显显示示出出与与电电子子束束同同步步的的扫扫描描图图像像。图图像像为为立立体体形形象象，反反映映了了标标本本的的表表面面结结构构。为为了了使使标标本本表表面面发发射射出出次次级级电电子子，标标本本在在固固定定、脱脱水水后后，要要喷喷涂涂上上一一层层重重金金属属微微粒粒，重金属在电子束的轰击下发出次级电子信号。重金属在电子束的轰击下发出次级电子信号。 2.2.扫描电子显微镜扫描电子显微镜（scanning electron microscopescan
17、ning electron microscope，SEMSEM）36JEOL扫描电子显微镜人类血细胞人类血细胞SEM照片照片（1 1）组织分离法）组织分离法（2 2）细胞培养法）细胞培养法（3 3）超薄切片法）超薄切片法（4 4）悬滴）悬滴- -复染法与喷镀法复染法与喷镀法（5 5）冷冻蚀刻复型法）冷冻蚀刻复型法（6 6）放射性核素电竞自显影技术）放射性核素电竞自显影技术3.3.电镜样品的制备电镜样品的制备二、细胞培养及相关技术二、细胞培养及相关技术（一）体外细胞培养技术（一）体外细胞培养技术（二）细胞融合技术（二）细胞融合技术（三）细胞显微操作技术（三）细胞显微操作技术40三、细胞及亚细胞组
18、分的分离和纯化技术三、细胞及亚细胞组分的分离和纯化技术 （一）细胞化学免疫荧光技术（一）细胞化学免疫荧光技术细胞化学细胞化学: : 在保持细胞结构的基础上，利用某些化学物质可与在保持细胞结构的基础上，利用某些化学物质可与细胞内某些成分发生化学反应，在局部形成有色沉淀物细胞内某些成分发生化学反应，在局部形成有色沉淀物的原理，以示待查物质存在于细胞中的部位。的原理，以示待查物质存在于细胞中的部位。例如：例如：FeulgenFeulgen法法显示显示DNADNA4141免疫细胞化学（免疫细胞化学（immunocytochemistryimmunocytochemistry）: : 根据免疫学原理，利
19、用抗体同特定抗原专一结合，根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术。对抗原进行定位测定的技术。抗原：大分子或与大分子相结合的小分子。抗原：大分子或与大分子相结合的小分子。抗体：由浆细胞针对特定的抗原分泌的抗体：由浆细胞针对特定的抗原分泌的球蛋白。球蛋白。 如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位。的部位。4242（二）细胞显微分光光度测定技术（二）细胞显微分光光度测定技术 根据细胞内某些物质对光谱吸收的原理，用以测定根
20、据细胞内某些物质对光谱吸收的原理，用以测定这些物质如核酸和蛋白质等生物大分子在细胞内的含量。这些物质如核酸和蛋白质等生物大分子在细胞内的含量。吸收光谱的波长：吸收光谱的波长： 230 230 700nm 700nmFeulgenFeulgen染色后的染色后的DNADNA吸收的波长：吸收的波长：546nm546nm细胞显微分光光度测定技术：定位和定量细胞显微分光光度测定技术：定位和定量4343（三）流式细胞计量术（三）流式细胞计量术（FCM） 用用氩氩离离子子激激光光发发出出的的激激光光束束为为激激发发光光，通通过过调调节节液液压压，迫迫使使悬悬浮浮的的细细胞胞排排成成单单列列，按按重重力力方方
21、向向流流动动，当当细细胞胞通通过过激激光光束束检检测测区区时时，细细胞胞被被激激光光束束照照射射而而向向各各个个方方向向发发出出散散射射光光，若若经经荧荧光光染染色色的的细细胞胞，就就会会发发出出一一定定强强度度的的荧荧光光，仪仪器器的的检检测测系系统统，就就可可逐逐个个对对细细胞胞的的散散射射光光和和荧荧光光强强度度进进行行测测定定，并并将将光光信信号号转转变变成成电信号，由电子控制台放大和显示。电信号，由电子控制台放大和显示。44测量速度：5 000个细胞/s 8个相关参数分选出细胞纯度：9099%检测的参数：细胞大小、体积、DNA、RNA、总蛋白含量、表面抗原、受体、染色体等应用：细胞动
22、力学、免疫学、体细胞学、肿瘤的诊断和治疗等。流式细胞仪特点流式细胞仪特点45464748（四）放射自显影术（四）放射自显影术（五）细胞器的分离与提纯技术（五）细胞器的分离与提纯技术4949四、细胞分子生物学技术四、细胞分子生物学技术（一）细胞原位分子杂交技术（一）细胞原位分子杂交技术分子杂交的基本原理：碱基的互补配对分子杂交的基本原理：碱基的互补配对原位杂交（原位杂交（in situ hybridizationin situ hybridization）：）： 将细胞或组织切片固定在载玻片上，保持细胞中的将细胞或组织切片固定在载玻片上，保持细胞中的 DNADNA和和RNARNA在原位置条件下，
23、与标记的在原位置条件下，与标记的 DNA DNA或或RNARNA分子探针分子探针进行原位杂交，通过放射性自显影或显微镜可探测到待进行原位杂交，通过放射性自显影或显微镜可探测到待查材料中被杂交的分子。直接进行基因定位、定量分析。查材料中被杂交的分子。直接进行基因定位、定量分析。50原原位位杂杂交交的的特特点点: :杂杂交交在在显显微微镜镜载载玻玻片片上上中中期期染染色色体体标标本本上上进进行行。所所谓谓原原位位即即指指标标本本上上DNADNA原原位位变变性性，在在利利用用放放射射性性或或非非放放射射性性标标记记的的已已知知核核酸酸探探针针杂杂交交后后，通通过过放放射射自自显显影影或或非非放放射射
24、性性检检测测体体系系来来检检测测染染色色体体上上特特异异DNADNA或或RNARNA顺顺序序，可可用用放放射射性性颗颗粒粒在在某某条条染染色色体体的的区区带带出出现现的的最最高高频频率率或或荧荧光光的的强强弱弱来来确确定定探探针针的位置，从而进行准确的基因定位。的位置，从而进行准确的基因定位。原原位位杂杂交交必必须须在在已已知知探探针针的的情情况况下下方方可可进进行行，而而在在未未知致病基因时，则无法进行基因定位。知致病基因时，则无法进行基因定位。51荧光原位杂交荧光原位杂交（florescence in situ hybridization, FISHflorescence in situ
25、hybridization, FISH） 是是一一种种非非放放射射性性原原位位杂杂交交方方法法。用用特特殊殊荧荧光光素素标标记记核核酸酸（DNADNA）探探针针，可可在在染染色色体体、细细胞胞和和组组织织切切片片标标本本上上进进行行DNADNA杂杂交交，对对检检测测细细胞胞内内DNADNA或或RNARNA的的特特定定序序列列存存在在与与否否最最为为有有效效。探探针针不不是是放放射射性性的的而而是是将将荧荧光光染染料料与与抗抗体体蛋蛋白白结结合合进进行行检检测测。它它们们具具有有高高度度亲亲和和力力，有有与与放放射射性性探探针针相相同同或或更更高高的分辩率。的分辩率。5252固定生物样本并准备显
26、微镜涂片固定生物样本并准备显微镜涂片预先调节显微镜预先调节显微镜标记探针标记探针对目标对目标DNADNA进行变性进行变性进行原位杂交和杂交后洗涤进行原位杂交和杂交后洗涤免疫细胞化学染色免疫细胞化学染色显微镜观察显微镜观察荧光原位杂交（荧光原位杂交（FISHFISH）实验程序）实验程序（是一种多步骤的实验方法）（是一种多步骤的实验方法）53现已可用不同的荧光染料同时进行多重原位杂现已可用不同的荧光染料同时进行多重原位杂交，显示出不同的荧光色泽。这种多色交，显示出不同的荧光色泽。这种多色FISHFISH技技术近年来发展迅速，已成为基因定位作图和医术近年来发展迅速，已成为基因定位作图和医学诊断的重要
27、手段。学诊断的重要手段。19921992年运用这种策略已能在中期染色体和间期年运用这种策略已能在中期染色体和间期细胞同时检测细胞同时检测7 7个探针。科学家们的目标是实个探针。科学家们的目标是实现现2424种不同颜色来观察种不同颜色来观察2222条常染色体和条常染色体和X X、Y Y染染色体。色体。54912t(9q/12q)t(9p/12p)利用FISH技术检测染色体易位5556DNADNA探针技术探针技术1.1.是是以以已已知知DNADNA片片段段作作为为探探针针与与待待测测样样品品DNADNA或或其其片片段段进行核酸分子杂交，判断二者同源性程度。进行核酸分子杂交，判断二者同源性程度。2.
28、2.根根据据杂杂交交结结果果就就可可以以分分析析待待测测DNADNA中中有有无无该该基基因因或或该该基因是否发生了变化，从而作出诊断。基因是否发生了变化，从而作出诊断。3.DNA3.DNA探探针针（基基因因探探针针）是是一一段段与与目目的的基基因因相相互互补补的的核核酸酸序序列列（DNADNA或或RNARNA），其其长长度度不不一一，可可为为完完整整基基因因亦可为其一部分。亦可为其一部分。4.4.探针：单链，带有容易被追踪和检测出来的标记。探针：单链，带有容易被追踪和检测出来的标记。5.5.寡核苷酸探针：单碱基改变的检测。寡核苷酸探针：单碱基改变的检测。57目前可孕前诊断的单基因病目前可孕前诊
29、断的单基因病 Prader-WilliPrader-Willi综综合合征征(PWS)(PWS)、性性畸畸形形(SRY(SRY基基因因诊诊断断) )、X X染染色色体体连连锁锁鱼鱼鳞鳞病病、DuchenneDuchenne肌肌营营养养不不良良（DMDDMD）、脆脆性性X X染染色色体体综综合合症症、地地中中海海贫贫血血、地地中中海海贫贫血血、脊脊髓髓性性肌肌萎萎缩缩、肯肯尼尼迪迪氏氏综综合合征征及及雄雄激激素素受受体体基基因因异异常常所所致致疾疾病病、型型粘粘多多糖糖贮贮积积症症、MarfanMarfan综综合合征征、血血友友病病、视视网网膜膜母母细细胞胞瘤瘤、无无精精子子症症相相关关基基因因缺
30、缺失失诊诊断断、成成骨骨发发育育不不全全、HuntingtonHuntington舞舞蹈蹈症症、KallmannKallmann综综合合征征、遗遗传传性性视视神神经经萎萎缩缩、软软骨骨发发育育不不全全、苯苯丙丙酮酮尿尿症症、WilsonWilson氏氏病病、结结节节性性硬硬化症等。化症等。58聚合酶链反应（聚合酶链反应（PCR）：）： 利用耐热的利用耐热的DNA聚合酶聚合酶,以一对与模板以一对与模板DNA互补的寡互补的寡核苷酸为引物，在体外模拟体内的核苷酸为引物，在体外模拟体内的DNA复制过程，即进复制过程，即进行变性、退火和延伸三个阶段（循环行变性、退火和延伸三个阶段（循环30次），使目的次
31、），使目的DNA扩增到约扩增到约106个拷贝，既个拷贝，既100百万倍。百万倍。优点：优点：快速、简便、准确、可靠、经济、特异性强等。快速、简便、准确、可靠、经济、特异性强等。 扩增倍数扩增倍数=2n（ n：扩增周期）：扩增周期）PCR模板模板DNA取材：取材：细胞、发根、精斑、血斑、已制备细胞、发根、精斑、血斑、已制备成的标本、木乃伊成的标本、木乃伊（二）聚合酶链反应技术（二）聚合酶链反应技术5959引物：能与模板引物：能与模板DNADNA两条链上的各一段序列互补的寡核苷两条链上的各一段序列互补的寡核苷酸（酸（151520bp20bp）上游序列：上游序列： 5TTTGGAGGCAAGCAAG
32、CA G 3 5TTTGGAGGCAAGCAAGCA G 3PGC-1PGC-1基因引物序列：基因引物序列：扩增的扩增的DNADNA片段长度：片段长度：508bp508bp5TATTTAGGGTTTTGCCAAGG 3 5TATTTAGGGTTTTGCCAAGG 3 下游序列：下游序列：60500bpMarker PCR产物产物508bp2%琼脂糖电泳检测琼脂糖电泳检测PGC-1基因基因PCR扩增产物扩增产物Marker：标准分子量：标准分子量61（三）反义技术与（三）反义技术与RNA干涉技术干涉技术反义核酸：反义核酸： 与有功能的与有功能的RNA（主要是（主要是mRNA）互补结合，并干）互补
33、结合，并干扰其功能的扰其功能的RNA或或DNA。反义技术：反义技术： 利用反义核酸影响相对应的利用反义核酸影响相对应的mRNA的转录、翻译，的转录、翻译，改变细胞的生物学功能的技术。改变细胞的生物学功能的技术。 反义技术的应用：反义技术的应用：基因功能研究；病毒基因组功能的基因功能研究；病毒基因组功能的研究；作为药物；反义核酸抑制癌基因研究；作为药物；反义核酸抑制癌基因62RNA干涉（干涉（RNA interference，RNAi）: 由双链由双链RNA（dsRNA）介导的、序列特异）介导的、序列特异 的转录后基因沉默机制，又称的转录后基因沉默机制，又称RNA干扰。干扰。 RNA干涉技术：干
34、涉技术： 用用RNA干涉的原理，研究基因功能与特异干涉的原理，研究基因功能与特异 地使基因沉默方法。地使基因沉默方法。RNA干涉技术的应用：干涉技术的应用： 基因功能的研究；基因敲除；基因治疗的基因功能的研究；基因敲除；基因治疗的 新策略；药物筛选新策略；药物筛选63第第1 1章章 小小 结结1.1.医学细胞生物学与医学的关系，举例说明其研究成医学细胞生物学与医学的关系，举例说明其研究成 果为临床医学解决哪些实际问题？果为临床医学解决哪些实际问题？2.2.观察细胞形态结构的主要技术方法和应用范围。观察细胞形态结构的主要技术方法和应用范围。3.3.流式细胞计量术应用原理和使用范围。流式细胞计量术应用原理和使用范围。4.PCR4.PCR技术原理和特点。技术原理和特点。5.5.概念：医学细胞生物学、细胞学说概念：医学细胞生物学、细胞学说6.6.英文缩写符号：英文缩写符号：RFLP 、FCM 、HGP、 PCR 、RNAi、dsRNA、siRNA
