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1、实验五五其他其他细菌、真菌、病毒学菌、真菌、病毒学试验主要内容：主要内容：厌氧芽胞梭菌与氧芽胞梭菌与厌氧培养法氧培养法螺旋体形螺旋体形态观察察真菌的形真菌的形态与培养与培养病毒学病毒学试验分枝杆菌与抗酸染色分枝杆菌与抗酸染色一、一、厌氧芽胞梭菌与氧芽胞梭菌与厌氧培养法氧培养法1 1、形、形态观察察破破伤风梭菌梭菌产气气荚膜梭菌膜梭菌 破破伤风梭菌（芽胞）梭菌（芽胞） 破破伤风梭菌（鞭毛）梭菌（鞭毛）产气气荚膜梭菌膜梭菌2 2、厌氧培养法氧培养法用于用于专性性厌氧菌的培养氧菌的培养方法：方法：1)1)将普通培养基置于无氧将普通培养基置于无氧环境中培养境中培养如如: :焦性没食子酸法焦性没食子酸法
2、2)2)厌氧培养基氧培养基: :在培养基中加氧化在培养基中加氧化还原原剂如如: :庖肉培养基庖肉培养基a.a.原理：焦性没食子酸原理：焦性没食子酸在在碱性溶液碱性溶液中能迅速吸收氧气，中能迅速吸收氧气，生成深棕色生成深棕色焦性没食子橙焦性没食子橙，利用，利用此法可除去此法可除去试管或平皿等容器中管或平皿等容器中的氧气。的氧气。（1 1）焦性没食子酸法）焦性没食子酸法焦性没食子酸培养基焦性没食子酸培养基焦性没食子酸培养基示意焦性没食子酸培养基示意图血平板血平板纱布布石蜡b.培养培养结果果观察察产气气荚膜梭菌血平板膜梭菌血平板厌氧培养氧培养（2 2）疱肉培养基）疱肉培养基不不饱和脂和脂肪酸肪酸a.
3、a.原理原理动物物组织耗氧法耗氧法还原型氨基酸原型氨基酸谷胱甘谷胱甘肽凡士林凡士林破破伤风梭梭菌菌产气气荚膜膜梭梭菌菌正正常常对照照1 1、形、形态特点：特点：二、螺旋体二、螺旋体22、分、分类： 根根据据抗抗原原性性、螺螺旋旋的的数目、大数目、大 小小、规则程程度度、螺螺旋旋间距距分分类。原核原核细胞型微生物胞型微生物 菌菌体体细长柔柔软，弯弯曲曲呈呈螺旋状，螺旋状，运运动活活泼与疾病有关的：与疾病有关的：n疏螺旋体属疏螺旋体属如如 伯氏疏伯氏疏螺旋体螺旋体n密螺旋体属密螺旋体属如如 梅毒螺梅毒螺旋体旋体n钩端螺旋体属端螺旋体属如如 钩端螺端螺旋体旋体回回归热疏螺旋体疏螺旋体梅毒螺旋体梅毒螺
4、旋体钩端螺旋体端螺旋体钩端螺旋体（端螺旋体（镀银染染色）色） 1 1、形形态:单细胞胞 酵母菌酵母菌 如白色念如白色念 珠菌珠菌 新型新型隐球菌球菌多多细胞胞 丝状菌状菌三、真菌的形三、真菌的形态与培养与培养白色念珠菌白色念珠菌白色念珠菌白色念珠菌新型新型隐球菌（墨汁染色）球菌（墨汁染色）2 2、培养特性、培养特性: :沙保培养基沙保培养基成份：成份： 蛋白蛋白胨 1g 琼脂脂 2g 葡萄糖葡萄糖 4g 蒸蒸馏水水 100ml pH 45左右左右菌落特征菌落特征: :酵母型菌落酵母型菌落酵母酵母样菌落菌落丝状菌落状菌落单细胞胞多多细胞胞白色念珠菌白色念珠菌新型新型隐球菌球菌酵酵母母样菌菌落落酵
5、酵母母型型菌菌落落 酵酵母母型型菌菌落落酵酵母母样菌菌落落四、病毒学四、病毒学试验n1 1、病毒包涵体形、病毒包涵体形态n2 2、病毒感染的、病毒感染的细胞病胞病变（录像）像） 病病毒毒感感染染细胞胞后后，在在胞胞浆或或胞胞核核内内出出现嗜嗜酸酸或或嗜嗜碱碱性性的的圆形形、椭圆形、不形、不规则形斑形斑块结构。构。什么是包涵体？什么是包涵体？狂犬病病毒包涵体（内基小体）狂犬病病毒包涵体（内基小体）巨巨细胞病毒包涵体胞病毒包涵体五、分枝杆菌与抗酸染色五、分枝杆菌与抗酸染色n1 1、 形形态n2 2、结构特点构特点n3 3、抗酸染色、抗酸染色结核杆菌（抗酸染色）核杆菌（抗酸染色）结核杆菌（抗酸染色）核杆菌（抗酸染色）2 2、结构特点：构特点： 细胞壁含有大量胞壁含有大量脂脂质，主要是，主要是分分枝菌酸枝菌酸 ，一般不易着色，如果，一般不易着色，如果经加温加温或延或延长染色染色时间而着色后能抵抗而着色后能抵抗强脱脱色色剂盐酸酒精酸酒精的脱色，所以又称的脱色，所以又称抗酸抗酸杆菌杆菌。3 3、抗酸染色、抗酸染色 （1 1）温温染染：石石炭炭酸酸复复红溶溶液液 55minmin （2 2）脱脱色色：3%3%盐酸酸酒酒精精溶溶液液 0.5-10.5-1minmin （ 3 3）复复 染染： 碱碱 性性 美美 兰 溶溶 液液 0.5min0.5min 破破伤风梭菌梭菌
