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1、干扰试验干扰试验葡萄糖氧化酶法测定血糖（葡萄糖氧化酶法测定血糖（葡萄糖氧化酶法测定血糖（葡萄糖氧化酶法测定血糖（GluGlu） 一、原理一、原理 二、样品准备二、样品准备 三、测定方法三、测定方法 四、计算与数据处理四、计算与数据处理 一、干扰原理一、干扰原理干扰试验用于测定某物质加到样品中产生干扰试验用于测定某物质加到样品中产生 的系统误差。干扰物浓度一定时，产生的的系统误差。干扰物浓度一定时，产生的误差是恒定系统误差，误差的实际大小随误差是恒定系统误差，误差的实际大小随干扰物的浓度而变化。干扰试验即用于检干扰物的浓度而变化。干扰试验即用于检验某方法的特异性，也用于检测干扰物质验某方法的特异
2、性，也用于检测干扰物质对方法的干扰作用，以评价分析方法的准对方法的干扰作用，以评价分析方法的准确性。确性。-D-葡萄糖+O2+H2O GOD D-葡萄糖酸+H2O2 （GOD：葡萄糖氧化酶）H2O2+4-AAP+酚 POD 2H2+红色醌类化合物 （4-AAP： 4氨基氨替比林） （POD：过氧化物酶）当干扰物的浓度达到一定量时，将对相应的实验当干扰物的浓度达到一定量时，将对相应的实验产生干扰，由于产生干扰，由于vitC、尿酸等物质对血糖测定、尿酸等物质对血糖测定GOD-POD法具有干扰作用，本实验选用法具有干扰作用，本实验选用vitC做做GOD-POD法测血糖的干扰试验，法测血糖的干扰试验，
3、 vitC与与GOD反反应生成的应生成的H2O2发生反应，使部分发生反应，使部分H2O2不能参与第不能参与第二步二步POD的偶联反应，从而降低显色强度，产生的偶联反应，从而降低显色强度，产生负的测定误差。负的测定误差。二、样品制备二、样品制备干扰样品干扰样品血清血清30mmol/L 30mmol/L VitCVitC标准液标准液生理盐水生理盐水基础血清基础血清（mlml）0.09-0.01样品样品(ml)(ml)0.090.01- 样品样品(ml)(ml)0.090.0070.003样品样品（mlml）0.090.0050.005三、测定方法三、测定方法1 1、加样、加样 2 2 2 2、分光
4、光度计测定方法：、分光光度计测定方法：、分光光度计测定方法：、分光光度计测定方法：波长波长波长波长505nm505nm505nm505nm，以空白管调零，以空白管调零，以空白管调零，以空白管调零，测定标准管和各样品管吸光度值，按公式计算测定结果。测定标准管和各样品管吸光度值，按公式计算测定结果。测定标准管和各样品管吸光度值，按公式计算测定结果。测定标准管和各样品管吸光度值，按公式计算测定结果。 试剂试剂试剂试剂 校准（校准（校准（校准（S S）空白（）空白（）空白（）空白（B B） 基础样品基础样品基础样品基础样品 干扰管干扰管干扰管干扰管1 2 31 2 3 校校 准准 液液 （mlml）
5、0.02 0.02 样样 品品 （mlml） 蒸蒸 馏馏 水水（mlml） 0.02 0.02 基础样品基础样品 （mlml） 0.02 0.02 干扰样品干扰样品1 1（mlml） 0.02 0.02 干扰样品干扰样品2 2（mlml） 0.02 0.02 干扰样品干扰样品3 3（mlml） 0.02 0.02工作试剂工作试剂 （mlml） 2.0 2.0 2.0 2.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 各管充分混匀置各管充分混匀置3737水浴水浴1010分钟后室温冷却。分钟后室温冷却。四、计算与数据处理四、计算与数据处理计算公式：计算公式： Glu含量（含量（mmo
6、l/L）= Cs 其中：其中：Cs=5.55 mmol/L 干扰物加入量干扰物加入量 = 干扰物浓度：干扰物浓度：30 mmol/L 干扰值（干扰值（mmol/L）= 干扰样品测定值干扰样品测定值-基础样品测定值基础样品测定值 干扰率（干扰率（%）= 干扰值干扰值/基础值基础值100 干扰试验的数据处理干扰试验的数据处理: 样品样品 GLU测得值（测得值（mmol/L） 加入加入US值（值（mmol/L）干扰值（）干扰值（mmol/L）干扰率（）干扰率（%）基础样品基础样品 （ml） 干扰样品干扰样品1（ml） 干扰样品干扰样品2（ml）干扰样品干扰样品3（ml） 五、参考区间五、参考区间干扰
7、值即偏差，当偏差干扰值即偏差，当偏差允许误差，则表明干扰物允许误差，则表明干扰物引起的偏差不会影响测定结果的临床应用价值。引起的偏差不会影响测定结果的临床应用价值。对于血糖测定而言，当干扰物引起的偏差小于对于血糖测定而言，当干扰物引起的偏差小于1/4TEaCLIA88（临床实验室修正法规（临床实验室修正法规1988）能）能力对比试验的质量要求规定，血糖的力对比试验的质量要求规定，血糖的TEa为为0.33mmol/L或或10%，则不会影响测定结果的临，则不会影响测定结果的临床应用价值，可以近似地认为当干扰物浓度低于床应用价值，可以近似地认为当干扰物浓度低于该浓度时不会对血糖测定产生影响。该浓度时不会对血糖测定产生影响。六、评价与思考当干扰物引起的偏差小于1/4TEa时，则不会影响测定结果的临床应用价值，可近似地认为当干扰物浓度低于该浓度时不影响测定结果。干扰物对测定的影响与被分析物浓度无关，而与干扰物本身的浓度有关，所以产生的误差属恒定系统误差。进行干扰实验时，首先需要确定被试可疑物质是否可引起误差；若能引起误差，还需进一步探讨其误差的来源是因为方法特异性差还是干扰，若加入的物质本身和分析试剂反应并产生读书，说明方法特异性差；若加入物质并不与分析试剂反应，但它改变了分析物和分析试剂间的反应，说明存在干扰。
