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1、1概述 葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌， 包括金黄色葡萄球菌、 表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等 35 个种，17 个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。 2.标本类型 血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3.鉴定 3.1 形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。 3.2 培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色， 周围有明显的?溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，多数不溶血。 3.3 生化反应金黄色葡萄球菌触酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、蔗
2、糖和甘露醇，不分解棉子糖和水杨苷，明胶、血浆凝固酶和 DNA 酶试验阳性，七叶苷试验阴性。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，触酶试验阳性。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄色或白色，DNA 酶和血浆凝固酶试验均阳性，发酵苷露醇。 3.4.2 与微球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖 O/F 试验为发酵型， 镜下以葡萄状排列为主， 菌体较小，而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，且菌体较大。 3.4.3 与链球菌属的鉴别葡萄球菌属 O/F 试验为发酵型， 触酶试验阳性， 链球菌属葡萄糖O/F 试验为氧化型，触酶试验阴性。 3.4.4 凝固酶试验阳性葡萄球
3、菌的鉴别见下表 1。 表 1 凝固酶阳性葡萄球菌鉴别的关键性试验 菌名 凝固触溶硝酸海藻半乳酶 酶 血 盐 糖 糖苷酶 金黄色葡萄球菌金黄色亚种 + + + + + - 金黄色葡萄球菌厌氧亚种 + - + - - - 施氏葡萄球菌聚集亚种 + + + + - ND 中间葡萄球菌 + + d + + + 海豚葡萄球菌 + + + + - ND S.lutrae + + + + + + 猪葡萄球菌 d + - + + - 注： “+”为 90%以上菌株为阳性， “-”为 90%以上菌株为阴性， “d”为 11%-89%阳性， “ND”为无资料。 3.5 操作步骤 3.5.1 涂片、染色观察菌落特征
4、，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色镜检。 3.5.2 触酶试验参见触酶试验标准操作规程 。 3.5.3 凝固酶试验参见凝固酶试验标准操作规程 。 3.5.4 鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4.药敏 参见药物敏感性试验标准操作规程及 CLSIM100-S20 最新版本文件。 5.质量控制 参见质量管理程序 。 6.检验结果解释与分析 6.1 由于葡萄球菌分布广泛，从临床标本中分离到金黄色葡萄球菌时，将其定为致病菌时应慎重。应根据凝固酶试验进一步确认。对可疑菌株的鉴定，最好利用商品化的鉴定系统根据生化图谱进行确定。表皮葡萄球菌分离自导管相关血流感染时，通
5、常视为致病菌。溶血性葡萄球菌从泌尿感染病人分离得到时，尤其是细菌量较大或作为优势菌时，通常被视为致病菌。 6.2 甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）对多种广谱强效抗菌药物呈多重耐药性。如果检测出耐甲氧西林的葡萄球菌菌株则报告耐所有青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类和?-内酰胺药/?-内酰胺酶抑制剂类抗生素，对氨基糖苷类和大环内酯类抗生素常协同耐药。若葡萄球菌属对四环素敏感，则对多西环素和米诺环素敏感。某些菌对四环素中介或耐药，而对多西环素和米诺环素敏感。临床感染葡萄球菌的病人用喹诺酮类治疗 3-4 日后，原来敏感的葡萄球菌易产生耐药。所以对这类葡萄球菌需多次反复进行药敏试验。大环内酯类耐药葡萄
6、球菌包括固有耐药和诱导耐药。所以临床试验室须进行“D”试验以检测克林霉素诱导性耐药，根据“D”试验结果来报告克林霉素的耐药性。 7.临床意义 葡萄球菌属在自然界分布很广。存在于空气、水、尘埃及皮肤上的葡萄球菌大多数无致病性。金黄色葡萄球菌主要引起局部组织的化脓性感染（疖、痈和创伤感染） 、菌血症、心内膜炎等全身感染等，也可引起骨髓炎、化脓性关节炎、肺炎和深部脓肿等。腐生葡萄球菌引起尿道感染、前列腺炎、外伤和菌血症等。溶血葡萄球菌引起心内膜炎、菌血症、腹膜炎、尿道感染、外伤、骨折和关节炎等。 MRSA 的治疗：轻度感染可选用 SMZ-TMP 和喹诺酮类，严重全身感染选用万古霉素或其他糖肽类药物。
7、 8.鉴定流程 参考文献 1中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23:2008 医学实验室质量和能力认可准则在临床菌落观察：金黄色、黄色或白色，涂片染色：G+球菌，单个、成双，以触 酶 试 验+ 凝 固 酶微生物学检验领域的指南.2008 2周庭银编着.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007 3叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第 3 版.南京：东南大学出版社，2006 4MurrayPR.ManualofCinicalMicrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,2007 5ISO15189：2007 医学实验室-质量和能力认可准则.2007
