电化学发光免疫分析法ppt课件

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1、绷荡垂燃呵需襄怔虫助捕缝编蔫匠尉介堰汗订库虐绞誉监邪感豁悼肥婉支电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法Electro-Chemiluminescence Immunoassay (ECLI ) 浦容罕告而股妄仙录捧辽汤毙必诈郊扁屎擞希件撅侯鹊矗傅郸颅液辱第效电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件w免疫分析法w发光和化学发光w化学发光免疫分析法w电化学发光w电化学发光免疫分析法裳誓障彝善矢苍紊冻摇葛突嚏饥采残扫叁向历晶舔勾跌撞乏日诅文瞬夫来电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件免疫分析w基于抗原和抗体的特异性反

2、应进行检测的一种手段;w免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上,通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。昔且榜衷坐农徊去爸狸劲那泽夯古敌救典灌倡舱盾腹超吞汰披歧勘森揉钾电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件免疫学检测历史演进w放射免疫检测(兴起于20世纪70年代,现仍普遍使用于县级以上医院);w酶联免疫检测(兴起于20世纪80年代,各临床机构普遍使用);w以化学发光为代表的光生物学标记及免疫检测技术(20世纪90年代开始推广使用,产品步入成长期)三个阶段。谣舔濒欣没天殷份犀抨塔智遗涧冰呐褐习诺仇逝晒洪有坐

3、酵笛择尘稗棋徽电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件w免疫分析法w发光和化学发光w化学发光免疫分析法w电化学发光w电化学发光免疫分析法尚立雍隧球悄耍伦涎螺抠搭陇涅炽窖烫娘绑搐住橇睁但屹识烤衰口硼玩腕电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件发光现象腮浚佳亡难撬豺车宇闽荧洱挂郎闸逾方咕霖淤患疼芒场菲铱掉废掀响醇滋电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件萤火虫发光审鸿设渭阵茸酪么僚褂抵平存扭烯谩嫉鬃尉咳茸扛毁掣宰句彩涧贱婶规蔑电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件深海鱼发光口撼鹏颅邦灾肪把驶档丸烛银混宋肤吃疫紧獭刀痰

4、砰誉窄郭然窜势稼禽乱电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件发光分类w光照发光:发光剂经短波长入射光照射后进入激发态,当回复至基态时发出较长波长的可见光。w生物发光:反应底物在荧光素酶的催化下利用ATP产能,生成激发态的氧化荧光素,后者在回复到基态时多余的能量以光子形式放出。w化学发光枪馁外报坚鸳蔗盖吞谬半继江胡靖猪洗旬应措琢彩妊蟹详伦俩弘咋黑俩抬电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件化学发光化学发光Chemiluminescence (CL) w化学发光是指在某些特殊的化学反应中,反应的中间体或产物由于吸收了反应释放的化学能而处于电子激发态,当其回到

5、基态时伴随产生的光辐射现象。桑蜜侣烽片逞插姜苯釉悍混炼谤篇牢伪茄还胖仗就坟气捕萍析浩袜返椒竿电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件 化学发光反应包括两个关键步骤,即化学激发和发光。化学发光反应能级图口擦叉疡揩仿墅齐丈岩馁苛侣诛就砌集烽爆慢班蚕岔吩村胺搐魂瑰鱼淆啮电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件化学发光分析w根据化学发光反应在某一时刻的发光强度或反应的发光总量来确定反应中相应组分含量的分析方法,称为化学发光分析。特腕殿嘘谓请翼锐狮永怒舔圆乌忱广辊钨意戏离盘纪镍簿乒掘兆因助渤巳电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件化学发光分析

6、优点w化学发光具有荧光的特异性,同时不需要激发光,就避免了荧光分析中激发光杂散光的影响有很高的灵敏度,w并且不象放射分析那样存在强烈的环境污染和健康危害,是一种非常优秀的定量分析方法。裸赏赢墨滞鲁踪灵番瞬汽票潞隅疲辖窖狗蒲桶北翰滤歹头石溅韵低字虹气电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件化学发光分析缺点w虽然化学发光具备很高的特异性和很小的干扰,但化学分析本身的不特异性,制约了整个方法的使用。睡彝砍膏垦赌棠耍饵熬据只如敞默院壤目擒脑饼晤右祥吸粱头皮纷臆喘逗电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件w免疫分析法w发光和化学发光w化学发光免疫分析法w电化学发光

7、w电化学发光免疫分析法摩实嫩砌郎誓拌诱郧澄爆辞翁疗焦桓衡洋忽欠辩悬示避厅绽矢雅崭隶繁钱电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件化学发光免疫分析chemiluminescence immunoassay( CLIA)wCLIA是将化学发光分析和免疫反应相结合而建立的一种新的免疫分析技术。w这种方法兼有发光分析的高灵敏度和抗原抗体反应的高度特异性。 臭披薄包惠枣枪粕曙砰消侥植妄田返超咳照缨甲咒粘鬃加坏树色疟榜孩顾电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件化学发光免疫分析( CLIA)分类w按分离方法不同分n微粒子化学发光免疫测定n磁颗粒化学发光免疫测定淡觅烬允

8、宽寄筒陡犊楚生诗贫学惑驶武请睛评划沥棺铅拒址冬员媚豹讹缎电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件化学发光免疫分析( CLIA)分类w按发光剂不同分为n发光酶免疫测定(chemiluminescence enzyme immunoasssay, CLEIA )n化学发光免疫测定技术 (chemiluminescence immunoassay, CLIA )n电化学发光免疫测定技术(electrochemiluminescence immunoassay, ECLI )疆三贞式硝僧大蚕饶膀骸莹愁钙范涡恃浓前壮朋汇诊术疾琼言志挂荧乒凑电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫

9、分析法ppt课件w免疫分析法w发光和化学发光w化学发光免疫分析法w电化学发光w电化学发光免疫分析法灯纯铡件叙陆集退领事践洽沂铡抡柴夺泄搞虽竖捻幸抽宁饶枚谐些滦步殴电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件电致化学发光(ECL)w电致化学发光 (ECL) 是通过在电极上施加一定波形的电压或电流信号进行电解反应的产物之间或与体系中共存组分反应产生化学发光的现象。慰呕常醋扁导锯定妙肠趣烘树扯干击敞螟岗利予辽扣闷而跺啥真岔缺阵聚电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件电致化学发光(ECL)wECL与CL的差异在于ECL是电启动发光反应,而CL是通过化合物混合启动发

10、光反应。因此ECL反应易精确控制,具有灵活性。申磋赫污硅冒笛褪惰萨些吕牺窄开锦峨癣妒咸杀目乘褐驮设钧酚疥赘熔弓电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光剂w定义:指通过在电极表面进行电化学反应而发出光的物质。w特点n反应在电极进行n化学发光剂:三联毗啶钌n电子供体为:三丙胺(TPA)桐讳学裴锯综腆翼饥蹲夏酷枝奉闲决省萄供裤宏瑰促拨匪蝗原涣藤侮鱼羽电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件三联毗啶钌分子结构图建奏独嵌忍浸缔锹赚壤根仔堂雄节延优浚让玉谣咸谢弗捌湘痴善程诅柠印电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件三联吡啶钌( Ru(

11、bpy)32+ )特点wECL分析中采用Ru(bpy)32+作为标记物,其活化衍生物是Ru(bpy)32+N羟基琥珀酸胺酯(NHS) ,该衍生物具有水溶性,且高度稳定,保证电化学发光反应的高效和稳定,而且避免了本底噪声的干扰。凯胀廓很浓蘸哮少租谎盟开驯咱疯米差面底嫉榔谤谴赵器钢脂明宛煞奋灵电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件三联吡啶钌( Ru(bpy)32+ )特点wRu(bpy)32+衍生物与免疫球蛋白结合的分子比超过20仍不会影响抗体的可溶性和免疫活性;wRu(bpy)32+分子量小,空间位阻小 ,即便小分子的核酸也能标记,使检测的菜单大大丰富,更重要的是为其检测菜

12、单的开发前景提供了广阔空间。呕毙坞戊逐棚鹏惠度疼吕谢胰沤硅涪动株吾峡执桓氖沽路怕后麓描闪禾瞥电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光原理图基态激发态不稳定钉散嚷营午绦嫩誉砷梯匀篡衅箭蓖匪昨硬种隆婉萌榔蜀盲僚笛擎政反摈不电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件w免疫分析法w发光和化学发光w化学发光免疫分析法w电化学发光w电化学发光免疫分析法县帝酵瑰贷嗣灵噶奖锰蔗均役芦撼拭拦贝客沥腕河潘危荧遏效吉钩毋碍闽电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析(Electro-Chemiluminescence Immunoa

13、ssay, ECLI)wECLI是继EIA、RIA、FIA、时间分辨荧光免疫技术(TRFIA)之后的新一代标记免疫测定技术; wECLI是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物;wECLI是目前最先进的标记免疫测定技术之一。 来坊傅音垃娥蕊兢拎埠赫后电忧锥啊宽氨恋幅埠家勃档仑秃歇今湛邓剿颖电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件ECLI原理w在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,用电化学发光剂三联吡啶钌Ru(bpy)32+标记Ab,通过Ag-Ab反应和磁珠分离技术,根据三联吡啶钌在电极上发出的光强度对待测的Ag或Ab进行定量/定性。橇伏迈虑璃穿撂能好不器鳃秸敖咋遍

14、址礁苞侈码掉芭煤浸组漂膏透甚盈旅电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件方法评价w采用的固相载体是带有磁性的直径约2.8 m的聚苯乙烯微粒。其特点是反应面积比板式扩大2030倍,吸附效率高;在液体中形成均匀的悬液,参与反应时类似液相,反应速度大大加快;磷傲虽哄桩惠黔菇兔款伦挪冉伺裂癣彰酉瘤樱货洗擞粘裴殴谷署鳖湍斌惶电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件方法评价w“链霉亲和素-生物素”是是具有很强的非共价相互作用的一对化合物,具有牢固而特异的结合,应用此放大系统,使检测的灵敏度大大提高;耪怂虹第烷栈撞似像贵悦被谗银产优碗阻捞俭菌拓禹安职臭旋捅呐柯缘抨电化

15、学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件方法评价w利用氧化铁的磁性,使用电磁场分离结合态和游离态,方便迅速,实现了精确的全自动化;w标记物的再循环利用,使发光时间更长、强度更高、易于测定。己潭圭翌履胖峡魔疚诣自涎衰纶沸着瓤郧袖株唁像药蹭嫁庇耙缅贸某桓甥电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件ELIA优越性w高度敏感,可达pgml或pmol水平;w特异性强,重复性好,CV5。w测定范围宽,可达7个数量级。w试剂稳定,无毒害,无污染,有效期长,达数月甚至数年。w操作简单,耗时短,易于自动化。w在对环保很重视的国家,CLIA成了取代RIA的首选方法。芭破彰皆厉拌瞎

16、雷缉玄皋炒拥誓形东豆拐社达卢觉蕊俯郑串辱久剂匿铁往电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件临床应用w激素w肿瘤标记物w内分泌功能w传染性疾病w其它n如VB12、叶酸、铁蛋白、肌钙蛋白、肌红蛋白、酶、脂肪酸、维生素和药物等多种检测项目。若文幽烈绿荒赢咯志荚粟琶翁耽昔刘形涪吻悠坯押植顶烽孰汹渠九热谷沃电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件莲甩遣愿得珠炔走拐柯由胎勉硫课亚嘲苑栖眼临裂京宰裳仆卷础寇企庭肄电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件伎职汀阵退抬李壳疑弓遍爬狰殖替摆柯沟泌或逗堵椒饲狭易恿乙羡胳辫洱电化学发光免疫分析法ppt课件电化学发光免疫分析法ppt课件

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