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1、体液细胞学及检验规范化1内 容o尿液细胞学检测o脑脊液、浆膜腔积液细胞学检测o粪便、前列腺、精液细胞学检测2尿液细胞学检测-尿液沉渣检查标准化尿液沉渣检查标准化一、材料与器材一、材料与器材（一）留置标本的容器1.收集和运送尿液容器2.用于离心尿液的离心管3.用于尿沉渣分析的玻片3一、材料与器材一、材料与器材（二）尿沉渣检测尿沉渣的量（三）离心机：水平式离心机相对离心力（RCF）应在400g左右。离心机转速与RCF的换算公式为：r/min=1000G/(11.18半径1/24不同直径不同转数离心半径为20cm时,1338r/min(1350r/min）离心半径为16cm时,1495r/min(1
2、500r/min)离心半径为10cm时,1892r/min(1900r/min)5一、材料与器材一、材料与器材（四）显微镜尿沉渣检查（五）自动化设备（六）计算机数据处理系统6二、标本的收集及运送（一）标本的收集（二）标本的运送（三）标本的标记（四）标本的接收7三、尿沉渣检验的操作步骤（一）离心（二）镜检沉渣取1滴充液到专用尿沉渣检测板里，计数1l计算区内的管型或细胞数报告。尿结晶、细菌、寄生虫等以每一高倍视野-、+、+、+报告。89显微镜观察尿结晶、细菌、寄生虫等报告方式显微镜观察尿结晶、细菌、寄生虫等报告方式-+结晶01-4个/HP5-9个/HP10个/HP寄生虫卵01个/HP5-9个/HP
3、10个/HP细菌真菌0数个视野散在各个视野可见数量多或聚集成团无数10三、尿沉渣检验的操作步骤（三）尿沉渣的检查内容应包括：1.细胞：红细胞、白细胞、吞噬细胞、上皮细胞、肿瘤细胞2.管型：透明管型、细胞管型、颗粒管型、蜡样管型、细菌管型、脂肪管型、混合管型、宽形管型3.结晶：磷酸盐、草酸钙、尿酸结晶和药物结晶4.细菌、寄生虫（或卵）、酵母菌、精子、粘液。5.临床医生特殊要求的其他成分。11三、尿沉渣检验的操作步骤（四）有条件的实验应开展各种尿液有形成分的染色检查，以便于有形成分的进一步鉴别；具备多种类显微镜进行尿沉渣分析的实验室，建议配置相差显微镜、暗视野显微镜，提高尿沉渣的鉴别能力。1213
4、1415161718192021222324标准流程o新鲜尿液混匀，取10ml放在离心试管内，以400g的速度离心5分o离心后将上清弃去，沉渣量约0.2ml，轻摇使沉渣混合均匀。o取一滴置于载物片上，用1818mm盖玻片覆盖标本。o显微镜下观察。先以10倍物镜观察全片，注意有无管型等较大成分存在，再换40倍物镜观察有形成分的种类和数量。观察10个视野并记录所见倒的细胞和管型数量，以最低值至最高值的方式报告。结晶等有价值的病理发现应如实报告。25脑脊液细胞学检测26标本采集标本采集o一般由腰穿刺术取得oCSF分别收集于3-4只无菌试管内，每管12ml，第一管作细菌学检查，第二管作化学或免疫学检查
5、，第三管作常规检查.o标本采集后应立即送检。27显微镜检查显微镜检查细胞总数计数方法细胞总数计数方法: 取混匀的CSF滴入计数池,沉淀片刻,低倍镜计数10个大方格内的红、白细胞数,总和106即得每升CSF的细胞总数细胞总数。如果细胞数较多,可计数1个大方格的细胞数乘以10,再乘106。28白细胞计数及直接分类方法白细胞计数及直接分类方法:非血性CSF:1.取小试管1只，内放冰醋酸1-2滴，转动后倾去，滴入混匀的CSF3-4滴，3-5分钟后混匀充入计数池，同上计数。29白细胞计数及直接分类方法白细胞计数及直接分类方法:2.计数后直接换成高倍镜根据细胞核的形态分别计数单个核细胞和多核细胞共100个
6、，以百分率表示。细胞数少于100时直接写出单核、多核细胞的具体个数。30白细胞计数及直接分类方法白细胞计数及直接分类方法:血性CSF：用1%冰醋酸稀释CSF后进行计数，结果乘以稀释倍数。细胞总数-白细胞数=红细胞数31注意事项（1）脑脊液细胞计数应及时进行，一般应在1小时内进行。（2）细胞计数时，须注意把红细胞或淋巴细胞与新型隐球菌相区别3233临床意义临床意义:1.正常正常脑脊液中无红细胞,白细胞:成人(0-8)106/L,儿童(0-15)106/L新生儿(0-30)106/L主要是淋巴及大单核细胞,两者7:334临床意义临床意义2.化脑化脑白细胞数明显增加,通常1000106/L,以多核为
7、主;3.结脑结脑白细胞数中度增加,一般500106/L,以早期以多核为主,很快过渡到后期则以单个核细胞为主.35临床意义临床意义:4.病脑病脑白细胞数仅轻度增加,以淋巴细胞为主.5.脑寄生虫病：细胞数可增加，以E为主。6.出血性疾病：多为红细胞7.肿瘤：细胞数正常或轻度增加，以L为主.3637浆膜腔脊基液细胞学检测38浆膜腔积液分类和发生机理 漏出液（exudate）：为非炎症性积液，大分子物质及有形成分少 渗出液（transudate）：为炎症性积液血管通透性增加，大分子物质及有形成分多 39 渗出液与漏出液的鉴别诊断40浆膜腔穿刺液的采集和保存浆膜腔穿刺液的采集和保存标本由临床医师采集标本
8、由临床医师采集送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管常规及细胞学检查约留取常规及细胞学检查约留取2 2毫升毫升生化检验留生化检验留2 2毫升毫升厌氧菌培养留厌氧菌培养留1 1毫升毫升如查结核杆菌则约需如查结核杆菌则约需1010毫升毫升。41浆膜腔穿刺液的采集和保存浆膜腔穿刺液的采集和保存o为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自溶等，应即时送检及检验。溶等，应即时送检及检验。o常规及细胞学检查可用常规及细胞学检查可用EDTAEDTAK K2 2抗凝。抗凝。o生化检查标本可用肝素抗凝。生化检查标本可用肝素抗凝。o加留加留1 1
9、管不加任何抗凝剂用以观察有无凝管不加任何抗凝剂用以观察有无凝固现象。固现象。42浆膜腔积液细胞学检查-显显 微微 镜镜 检检 查查 431. 细胞计数及分类：细胞总数计数方法细胞总数计数方法:低倍镜计数10个大方格内的红、白细胞数总和106即得每升浆膜腔积液的细胞总数细胞总数如果细胞数较多,可计数1个大方格的细胞数乘以10,再乘以10644451. 细胞计数及分类：白细胞计数白细胞计数o漏出液500106/L461. 细胞计数及分类：(1)直接分类法a.非血性胸腹水:高倍镜根据细胞核的形态分别计数单个核细胞和多核细胞共100个，以百分率表示。细胞数少于100时，直接写出单核、多核细胞的具体个数
10、。471. 细胞计数及分类：b.血性胸腹水：用1%冰醋酸稀释后进行计数，结果乘以稀释倍数细胞总数白细胞数=红细胞数胸腹水白细胞校正数胸腹水白细胞测定值出血增加的白细胞数出血增加的白细胞数外周血白细胞数*脑脊液红细胞数外周血红细胞数481. 细胞计数及分类： (2)染色分类法离心沉淀，瑞氏染色,油镜分类漏出液：主要为淋巴和间皮细胞渗出液：各种细胞增多的临床意义不同49502.细胞分类的临床意义正常浆膜腔积液无红细胞白细胞:(0-8)106/L,主要是淋巴细胞512.细胞分类的临床意义(1)(1)红细胞：红细胞： 多见于恶性肿瘤、结核或穿刺出血多见于恶性肿瘤、结核或穿刺出血(2)(2)中性分叶核粒
11、细胞：中性分叶核粒细胞： 常见于化脓性渗出液和早期浆膜结核常见于化脓性渗出液和早期浆膜结核(3)(3)淋巴细胞：淋巴细胞： 主要提示慢性疾病，如结核、梅毒、肿瘤等主要提示慢性疾病，如结核、梅毒、肿瘤等522.细胞分类的临床意义(4)(4)嗜酸性粒细胞：嗜酸性粒细胞： 见于变态反应、寄生虫病、多次穿见于变态反应、寄生虫病、多次穿刺刺激等所致的渗出液。刺刺激等所致的渗出液。(5)(5)间皮细胞：表示浆膜刺激或受损。间皮细胞：表示浆膜刺激或受损。532.细胞分类的临床意义(6)(6)狼疮细胞：偶见于狼疮细胞：偶见于SLESLE患者的浆膜液。患者的浆膜液。(7)(7)癌细胞：大量形态不规则、胞体大小不
12、癌细胞：大量形态不规则、胞体大小不等、核偏大并可见核仁及胞质染色较深的等、核偏大并可见核仁及胞质染色较深的细胞。细胞。545556 常规操作流程常规操作流程 观察外观观察外观混匀混匀计数计数细胞分类细胞分类57粪便检查一、直接涂片法一、直接涂片法1.用生理盐水将粪便涂成薄片2.制成涂片后，覆盖片3.虫卵报告方式未找到注明“未找到虫卵”；找到几种报告几种4.红细胞、白细胞报告方式：细胞数/HP58直接涂片镜检临床意义1细胞(1)白细胞（脓细胞）:正常粪便中不见或偶见。细菌性痢疾，可见大量白细胞5960直接涂片镜检临床意义(2)红细胞:细菌性痢疾时红细胞少于白细胞，散在分布，形态正常。阿米巴痢疾时
13、红细胞多于白细胞，多成堆存在并有残碎现象。6162直接涂片镜检临床意义(3)巨噬细胞:为一种吞噬较大异物的单核细胞;胞体较中性粒细胞为大，圆形、卵圆形或不规则形，核形多不规则，含有吞噬颗粒及细胞碎屑。见于细菌性痢疾和直肠炎症6364直接涂片镜检临床意义(4)肠粘膜上皮细胞:为柱状上皮细胞，结肠炎症、伪膜性肠炎时粪便中大量存在。(5)肿瘤细胞:乙状结肠癌、直肠癌时粪便可能发现成堆的癌细胞。6566直接涂片镜检临床意义2食物残渣正常粪便中偶见淀粉颗粒和脂肪小滴等未及充分消化的食物残渣。67直接涂片镜检临床意义(1)淀粉颗粒:腹泻者、慢性胰腺炎粪便中可在粪便中大量出现。(2)脂肪小滴:急、慢性胰腺炎
14、及胰头癌时，粪便中脂肪小滴增多6869直接涂片镜检临床意义(3)肌肉纤维:肠蠕动亢进、腹泻时可见。(4)植物细胞及植物纤维:植物细胞形态多种，有圆形、长圆形、双层细胞壁7071直接涂片镜检临床意义3寄生虫和寄生虫卵72前列腺液细胞学检查标本采集与处理 前列腺标本一般由临床医生行前列腺按摩术后获得，可直接涂于玻片上或收集在洁净的试管中，并立即送检。 73前列腺液细胞学检查检查方法：检查方法： 1. 湿片法检查，特殊情况可用涂片染色湿片法检查，特殊情况可用涂片染色检查。湿片法操作简便、快速，临床常用。检查。湿片法操作简便、快速，临床常用。 2. 涂片染色检查可清晰辨认细胞结构，涂片染色检查可清晰辨
15、认细胞结构，适合于检查炎症细胞和癌细胞，有助于前适合于检查炎症细胞和癌细胞，有助于前列腺炎和恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断。列腺炎和恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断。74前列腺液细胞学检查检查内容及报告方式检查内容及报告方式1.1.卵磷脂小体（卵磷脂小体（lecithin bodies) lecithin bodies) 高倍视野中卵磷脂小体数量（百分数）高倍视野中卵磷脂小体数量（百分数）2.RBC 2.RBC 正正常常偶偶见见RBCRBC（5/HP)5/HP)。增增多多见见于于前前列列腺腺炎、结核、结石或肿瘤、按摩用力过重。炎、结核、结石或肿瘤、按摩用力过重。3.3.白白细细胞胞 正正常常前前列列腺腺液液
16、白白细细胞胞10/HP10/HP，前前列列腺腺炎时白细胞增多并成堆分布。炎时白细胞增多并成堆分布。7576前列腺液细胞学检查77精液显微镜检查精子活力分析）精子活动率检查精子活动率（）活动精子数（活动精子数不活动精子数）*正常:精子活动率50%78）精子活动力检查A级活动良好，精子呈直线运动D级B级活动较好，精子活动，但方向不定C级活动不良，活动迟钝，原地转动D级 不活动，死精子正常:A级活动精子25 A级和B级的精子579精子密度与精子总数检查精子数个中方格的精子数稀释倍数精子总数：精子数精液量（）正常精子数:大于80.精子形态学检查81.精子形态学检查正常精子形态3824.精液检查报告内容及方式o射精量：XXml222oPH：o精子计数：XX202020o精子形态：%正常303015o精子存活率：%757550o精子活力A级%252525A级%+B级%505050o其他：圆细胞或卵磷脂小体8384
