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1、实验实验 放线菌的形态观察放线菌的形态观察 主讲人主讲人: :袁建赣袁建赣南昌大学生物技术系南昌大学生物技术系实验放线菌的形态观察一、目的一、目的辩认放线菌的营养菌丝、气生菌丝、孢子辩认放线菌的营养菌丝、气生菌丝、孢子丝、孢子的形态；丝、孢子的形态；学习掌握水封片法、玻璃纸法、影印法制学习掌握水封片法、玻璃纸法、影印法制作放线菌涂片。作放线菌涂片。 实验放线菌的形态观察二、原理二、原理放线菌的菌丝分化为两部分，即长入培养基内的放线菌的菌丝分化为两部分，即长入培养基内的营养菌丝（又称基内菌丝）和生长于培养基表面营养菌丝（又称基内菌丝）和生长于培养基表面的气生菌丝（又称繁殖菌丝）。的气生菌丝（又称
2、繁殖菌丝）。有些放线菌的气生菌丝分化成各种孢子丝，其有些放线菌的气生菌丝分化成各种孢子丝，其形形状和分支都不同状和分支都不同，孢子形状也不相同。这些特征，孢子形状也不相同。这些特征是是识别识别放线菌和分类的放线菌和分类的重要依据重要依据。放线菌的放线菌的菌落菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。同心圆放射状。 实验放线菌的形态观察 放线菌纲中几种带孢子结构的显微照相。放线菌纲中几种带孢子结构的显微照相。（a a）链霉菌，单轮生类型。）链霉菌，单轮生类型。（b b）链霉素，
3、螺旋形类型。菌丝体宽度均约为）链霉素，螺旋形类型。菌丝体宽度均约为0.8m0.8m。 实验放线菌的形态观察三、材料、试剂与器具三、材料、试剂与器具1 1、材料、材料 细黄链霉菌（细黄链霉菌（Streptomycs Streptomycs microflavusmicroflavus）又称）又称54065406放线菌斜面菌种，棘孢放线菌斜面菌种，棘孢小单孢菌（小单孢菌（Micromonospora echinosporaMicromonospora echinospora）斜面）斜面菌种，高氏菌种，高氏1 1号平板。号平板。0.1%0.1%美蓝染色液，石炭酸复红染色液，无菌水美蓝染色液，石炭酸复
4、红染色液，无菌水2 2、器具、器具 显微镜，载玻片，镊子，接种环，玻显微镜，载玻片，镊子，接种环，玻璃刮，玻璃纸等。璃刮，玻璃纸等。 实验放线菌的形态观察四、操作步骤四、操作步骤1 1、水封片观察、水封片观察（1 1）取一套高氏）取一套高氏1 1号平板，将菌种划线方法接种，号平板，将菌种划线方法接种，把灭菌过的盖玻片斜插在培养基中，一半露出，把灭菌过的盖玻片斜插在培养基中，一半露出，在在2828下培养下培养5 57d7d备用。备用。（2 2）取一滴美蓝染色液置于载玻片中央，将上述）取一滴美蓝染色液置于载玻片中央，将上述长有菌丝的盖玻片取出，把一面的培养基擦净。长有菌丝的盖玻片取出，把一面的培养
5、基擦净。然后把长菌丝一面朝下，盖住染色液，制成水封然后把长菌丝一面朝下，盖住染色液，制成水封片，用高倍镜观察其气生丝、孢子丝和孢子。片，用高倍镜观察其气生丝、孢子丝和孢子。实验放线菌的形态观察影印法观察：影印法观察：用涂却法或划线法培养出单个菌落，然后用涂却法或划线法培养出单个菌落，然后用小刀小心地刮一个菌落，翻过压印在载用小刀小心地刮一个菌落，翻过压印在载玻片中央，小心地移开菌落，载玻片中央玻片中央，小心地移开菌落，载玻片中央就留下菌落印痕。在火焰下固定，滴一滴就留下菌落印痕。在火焰下固定，滴一滴石碳酸复红染色石碳酸复红染色1min1min，水洗后晾干，在高，水洗后晾干，在高倍镜，或油镜下观
6、察。倍镜，或油镜下观察。实验放线菌的形态观察插片法插片法: : 倒平板倒平板插片插片接种接种培养培养镜镜检检记录绘图记录绘图 压印法压印法: : 倒平板倒平板划线接种划线接种挑取菌落挑取菌落加盖玻片加盖玻片镜检镜检记录绘图记录绘图 埋片法埋片法: : 倒琼脂倒琼脂切槽切槽接种接种培养培养镜镜检检记录绘图记录绘图 实验放线菌的形态观察五、注意事项五、注意事项1 1、放线菌生长较慢，培养时间较长，所以、放线菌生长较慢，培养时间较长，所以在接种和培养时要注意无菌操作，严防杂在接种和培养时要注意无菌操作，严防杂菌无染。菌无染。实验放线菌的形态观察六、实验报告六、实验报告1 1、绘图，比较这两种放线菌的形态特征的、绘图，比较这两种放线菌的形态特征的异同。异同。2 2、比较这两种方法的优缺点。、比较这两种方法的优缺点。实验放线菌的形态观察七、思考题1 1、在显微镜下，如何、在显微镜下，如何区别营养菌丝和气生区别营养菌丝和气生菌丝。菌丝。实验放线菌的形态观察
