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1、任务八任务八 实验动物技术实验动物技术2021/3/111（1 1）普通级动物：又称常规动物、古典动物）普通级动物：又称常规动物、古典动物 标准是不带有任何人兽共患病的微生物。标准是不带有任何人兽共患病的微生物。（2 2）清洁级动物：最低限度疾病动物，来自）清洁级动物：最低限度疾病动物，来自剖腹产的剖腹产的SPFSPF动物，饲养在一般实验室内清洁动物，饲养在一般实验室内清洁的环境中。的环境中。1. 实验动物分类实验动物分类2021/3/112（3 3）无特定病原动物（）无特定病原动物（SPFSPF） 不存在某些特定的病原微生物和寄生虫的不存在某些特定的病原微生物和寄生虫的动物。动物。（4 4）
2、无菌动物和悉生动物）无菌动物和悉生动物无菌动物：体表、体内或现有的检测无菌动物：体表、体内或现有的检测技术查不出微生物、寄生虫的动物。技术查不出微生物、寄生虫的动物。 悉生动物：机体内带有已知微生物的悉生动物：机体内带有已知微生物的动物。动物。2021/3/1132. 动物实验技术动物实验技术2.1 实验动物的捕捉与保定实验动物的捕捉与保定2021/3/114u 小鼠的捕捉与保定小鼠的捕捉与保定 先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上，在其向先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上，在其向先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上，在其向先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上，在其向前爬行时，用左手的拇指和食指抓住
3、小鼠的两耳和头前爬行时，用左手的拇指和食指抓住小鼠的两耳和头前爬行时，用左手的拇指和食指抓住小鼠的两耳和头前爬行时，用左手的拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤颈部皮肤颈部皮肤颈部皮肤( ( ( (图图图图7-1)7-1)7-1)7-1)，然后将鼠置于左手手心中，把后，然后将鼠置于左手手心中，把后，然后将鼠置于左手手心中，把后，然后将鼠置于左手手心中，把后肢拉直，用左手的无名指及小指按住尾巴和后肢，前肢拉直，用左手的无名指及小指按住尾巴和后肢，前肢拉直，用左手的无名指及小指按住尾巴和后肢，前肢拉直，用左手的无名指及小指按住尾巴和后肢，前肢可用中指固定，完全固定好后松开右手。肢可用中指固定，完全
4、固定好后松开右手。肢可用中指固定，完全固定好后松开右手。肢可用中指固定，完全固定好后松开右手。2021/3/115小白鼠的捕捉2021/3/1162021/3/1172021/3/118u 大鼠的捕捉与保定大鼠的捕捉与保定 大鼠的牙齿很尖锐，初次抓取大鼠者可戴厚帆大鼠的牙齿很尖锐，初次抓取大鼠者可戴厚帆布手套，不要突然袭击式地去抓大鼠，抓取时右布手套，不要突然袭击式地去抓大鼠，抓取时右手慢慢伸向大鼠尾巴，尽量向尾根部靠近，抓住手慢慢伸向大鼠尾巴，尽量向尾根部靠近，抓住其尾巴后提起，置于实验台上，右手轻轻抓住尾其尾巴后提起，置于实验台上，右手轻轻抓住尾巴向后拉，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并巴
5、向后拉，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将鼠固定在左手中将鼠固定在左手中( (图图7-2)7-2)。也可将大鼠固定在。也可将大鼠固定在大鼠固定器或大鼠固定板上。大鼠固定器或大鼠固定板上。2021/3/119u 豚鼠和兔豚鼠和兔的捕捉与保定的捕捉与保定 豚鼠和兔不会咬人，抓取时应注意采用正确豚鼠和兔不会咬人，抓取时应注意采用正确的方法，防止对动物的损伤或被兔抓伤。图的方法，防止对动物的损伤或被兔抓伤。图7-3 7-3 是豚鼠抓取和保定方法，图是豚鼠抓取和保定方法，图7-47-4是兔的抓取和保是兔的抓取和保定方法。定方法。2021/3/11102.2 实验动物的注射方法实验动物的注射方法2021/
6、3/1111小白鼠注射途径小白鼠注射途径腹腔（腹腔（IPIP）注射）注射2021/3/1112肌肉（肌肉（IMIM）注射）注射2021/3/11132021/3/1114皮下（SC）注射2021/3/1115静脉（IV）注射2021/3/11162021/3/1117 剪尾采血剪尾采血 将动物固定，显露尾部，将尾尘剪去约将动物固定，显露尾部，将尾尘剪去约将动物固定，显露尾部，将尾尘剪去约将动物固定，显露尾部，将尾尘剪去约5mm5mm5mm5mm，从尾，从尾，从尾，从尾根部向尾端部按摩，血即从断端流出。若用二甲苯棉根部向尾端部按摩，血即从断端流出。若用二甲苯棉根部向尾端部按摩，血即从断端流出。若
7、用二甲苯棉根部向尾端部按摩，血即从断端流出。若用二甲苯棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45454545水中数分钟，使尾水中数分钟，使尾水中数分钟，使尾水中数分钟，使尾部血管充盈，可采到较多的血。也可用锋利刀片割破部血管充盈，可采到较多的血。也可用锋利刀片割破部血管充盈，可采到较多的血。也可用锋利刀片割破部血管充盈，可采到较多的血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出，采血后，消毒，尾动脉或尾静脉，让血液自行流出，采血后，消毒，尾动脉或尾静脉，让血液自行流出，采血后，消毒，尾动脉或尾静脉，让血液自行流出，采血后
8、，消毒，止血。如将动物麻醉取血量可更多些。小鼠每次采血止血。如将动物麻醉取血量可更多些。小鼠每次采血止血。如将动物麻醉取血量可更多些。小鼠每次采血止血。如将动物麻醉取血量可更多些。小鼠每次采血约约约约0.1ml0.1ml0.1ml0.1ml，大鼠约，大鼠约，大鼠约，大鼠约0.4 ml0.4 ml0.4 ml0.4 ml。为了多次反复取血应尽量。为了多次反复取血应尽量。为了多次反复取血应尽量。为了多次反复取血应尽量从鼠尾末端开始。从鼠尾末端开始。从鼠尾末端开始。从鼠尾末端开始。2.3 大、小鼠的采血技术大、小鼠的采血技术2021/3/1118 摘眼球采血摘眼球采血 此法常用于鼠类大量采血。用左手
9、固定此法常用于鼠类大量采血。用左手固定动物，压迫眼球，尽量使眼球突出，右手用动物，压迫眼球，尽量使眼球突出，右手用无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球，立即无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球，立即将鼠倒置，头朝下，眼眶内很快流出血液。将鼠倒置，头朝下，眼眶内很快流出血液。一般只适用于一次采血。大部动物采血后可一般只适用于一次采血。大部动物采血后可以存活，可采另一侧眼球取血。以存活，可采另一侧眼球取血。2021/3/1119眼窝采血2021/3/11202021/3/1121剪尾采血2021/3/1122尾动脉采血2021/3/1123心脏采血2021/3/1124麻醉的方法麻醉的方法（1 1 1 1
10、）吸入麻醉法）吸入麻醉法）吸入麻醉法）吸入麻醉法 适用的动物：大鼠、豚鼠等。适用的动物：大鼠、豚鼠等。适用的动物：大鼠、豚鼠等。适用的动物：大鼠、豚鼠等。 麻醉药物：乙醚、三氯甲烷（氯仿）。麻醉药物：乙醚、三氯甲烷（氯仿）。麻醉药物：乙醚、三氯甲烷（氯仿）。麻醉药物：乙醚、三氯甲烷（氯仿）。（2 2 2 2）注射麻醉法）注射麻醉法）注射麻醉法）注射麻醉法 适宜的动物：大鼠、豚鼠、兔、猫、犬、猴等。适宜的动物：大鼠、豚鼠、兔、猫、犬、猴等。适宜的动物：大鼠、豚鼠、兔、猫、犬、猴等。适宜的动物：大鼠、豚鼠、兔、猫、犬、猴等。 麻醉药物：麻醉药物：麻醉药物：麻醉药物：4 4 4 4戊巴比妥、戊巴比妥
11、、戊巴比妥、戊巴比妥、20202020氨基甲酸乙氨基甲酸乙氨基甲酸乙氨基甲酸乙酯、酯、酯、酯、 1 1 1 1水合氯醛，按照动物的每公斤体重给予药量。水合氯醛，按照动物的每公斤体重给予药量。水合氯醛，按照动物的每公斤体重给予药量。水合氯醛，按照动物的每公斤体重给予药量。 注射途经：肌肉注射、静脉注射、腹腔注射途经：肌肉注射、静脉注射、腹腔注射途经：肌肉注射、静脉注射、腹腔注射途经：肌肉注射、静脉注射、腹腔注射。注射。注射。注射。2.1 实验动物的处死方法实验动物的处死方法2021/3/1125空气栓塞方法空气栓塞方法 通过向动物静脉内注射一定量的空气，通过向动物静脉内注射一定量的空气，使其心脏
12、在短暂的时间内发生急性空气栓塞，使其心脏在短暂的时间内发生急性空气栓塞，从而造成机体血液循环障碍，导致动物痉挛从而造成机体血液循环障碍，导致动物痉挛而死亡。而死亡。 适用的动物：家兔、犬等。适用的动物：家兔、犬等。2021/3/1126注射空气的量视动物大小而不同，注射空气的量视动物大小而不同，家兔：家兔：202060ml60ml；犬：犬：8080150ml150ml。注意：利用空气栓塞方式处死动物虽然迅速注意：利用空气栓塞方式处死动物虽然迅速方便，但此方法可使动物机体内各脏器或多方便，但此方法可使动物机体内各脏器或多或少地出现淤血的现象，如心内膜下淤血。或少地出现淤血的现象，如心内膜下淤血。
13、2021/3/1127 断头法断头法 动物在极短的时间内死亡，避免处于濒动物在极短的时间内死亡，避免处于濒临死亡的痛苦，有利于组织或细胞结构的保临死亡的痛苦，有利于组织或细胞结构的保存，其次放掉动物的血液可减少了取材过程存，其次放掉动物的血液可减少了取材过程中不必要的过多出血现象。中不必要的过多出血现象。 适用的动物：小鼠、大鼠、豚鼠、青蛙适用的动物：小鼠、大鼠、豚鼠、青蛙或蟾蜍等。或蟾蜍等。2021/3/1128 其它方法其它方法（1 1 1 1）脱臼（断髓）法：适用动物）脱臼（断髓）法：适用动物）脱臼（断髓）法：适用动物）脱臼（断髓）法：适用动物小鼠小鼠小鼠小鼠（2 2 2 2）股动脉放血
14、法：适用动物）股动脉放血法：适用动物）股动脉放血法：适用动物）股动脉放血法：适用动物犬、猴犬、猴犬、猴犬、猴小鼠断髓（脱臼）法的具体操作小鼠断髓（脱臼）法的具体操作小鼠断髓（脱臼）法的具体操作小鼠断髓（脱臼）法的具体操作 左手拇指和食指捏住小鼠尾巴根部。左手拇指和食指捏住小鼠尾巴根部。左手拇指和食指捏住小鼠尾巴根部。左手拇指和食指捏住小鼠尾巴根部。 右手拇指和食指从小鼠背部摁住其耳后且固定右手拇指和食指从小鼠背部摁住其耳后且固定右手拇指和食指从小鼠背部摁住其耳后且固定右手拇指和食指从小鼠背部摁住其耳后且固定不动。不动。不动。不动。 左手水平向后拉小鼠的尾巴，当手指感应到左手水平向后拉小鼠的尾巴，当手指感应到左手水平向后拉小鼠的尾巴，当手指感应到左手水平向后拉小鼠的尾巴，当手指感应到“线断线断线断线断”的感觉即可。的感觉即可。的感觉即可。的感觉即可。2021/3/1129
