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1、例例1： 高度分化的植物细胞、组织和器官进行组高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织。下列叙述错误的是织培养可以形成愈伤组织。下列叙述错误的是A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B.该愈伤组织的细胞没有全能性该愈伤组织的细胞没有全能性C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的 胚状体胚状体典例精析典例精析例例2：右图为植物体细胞杂交过程：右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答：示意图。据图回答：1 1）步骤）步骤）步骤）
2、步骤是是是是_最常用的方法是最常用的方法是最常用的方法是最常用的方法是_._.2 2）步骤）步骤）步骤）步骤一般常用的化学试剂是一般常用的化学试剂是一般常用的化学试剂是一般常用的化学试剂是_目的是目的是目的是目的是_._.3 3）在利用杂种细胞培育成为杂种）在利用杂种细胞培育成为杂种）在利用杂种细胞培育成为杂种）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段植株的过程中，运用的技术手段植株的过程中，运用的技术手段植株的过程中，运用的技术手段是是是是_ _ ，其中步骤，其中步骤，其中步骤，其中步骤相相相相当于当于当于当于_，步骤，步骤，步骤，步骤相当于相当于相当于相当于_ 去掉细胞壁，分
3、离出有去掉细胞壁，分离出有去掉细胞壁，分离出有去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体活力的原生质体活力的原生质体活力的原生质体 酶解法酶解法酶解法酶解法 聚乙二醇（聚乙二醇（聚乙二醇（聚乙二醇（PEGPEGPEGPEG） 诱导原生质体融合诱导原生质体融合诱导原生质体融合诱导原生质体融合植物组织培养植物组织培养植物组织培养植物组织培养脱分化脱分化脱分化脱分化再分化再分化再分化再分化例例2：右图为植物体细胞杂交过程：右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答：示意图。据图回答： 4 4）植物体细胞杂交的目的是获得）植物体细胞杂交的目的是获得）植物体细胞杂交的目的是获得）植物体细胞杂交的目的是获得 新的杂
4、种植株。使新的杂种植株。使新的杂种植株。使新的杂种植株。使_ 能够在新的植物体上有所表现，能够在新的植物体上有所表现，能够在新的植物体上有所表现，能够在新的植物体上有所表现， 其根本原因其根本原因其根本原因其根本原因: : 5 5）若）若）若）若A A和和和和B B均是二倍体，杂种植株的育性均是二倍体，杂种植株的育性均是二倍体，杂种植株的育性均是二倍体，杂种植株的育性_。若运用传统有性杂交方法。若运用传统有性杂交方法。若运用传统有性杂交方法。若运用传统有性杂交方法 能否实现？能否实现？能否实现？能否实现？_。并说明理由：。并说明理由：。并说明理由：。并说明理由： 因此，这项研究对于培养作物新品
5、因此，这项研究对于培养作物新品因此，这项研究对于培养作物新品因此，这项研究对于培养作物新品 种方面的重大意义在于：种方面的重大意义在于：种方面的重大意义在于：种方面的重大意义在于：两个亲本的遗传性状两个亲本的遗传性状两个亲本的遗传性状两个亲本的遗传性状 杂种植株获得了双亲的遗传物质杂种植株获得了双亲的遗传物质杂种植株获得了双亲的遗传物质杂种植株获得了双亲的遗传物质 可育可育可育可育不能不能不能不能因为不同种生物之间存在生殖隔离因为不同种生物之间存在生殖隔离因为不同种生物之间存在生殖隔离因为不同种生物之间存在生殖隔离克服远缘杂交不亲和的障碍。克服远缘杂交不亲和的障碍。克服远缘杂交不亲和的障碍。克
6、服远缘杂交不亲和的障碍。 利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？不遵循，植物体细胞杂交属于无性生殖。不遵循，植物体细胞杂交属于无性生殖。例例3.3.为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。水稻新品系。（1 1）获得耐盐基因后，构建重组）获得耐盐基因后，构建重组DNA
7、DNA分子所用的限制性内切酶分子所用的限制性内切酶作用于图中的作用于图中的 处，处，DNADNA连接酶作用于连接酶作用于 处。（填处。（填“a a”或或“b b”）（2 2） 将重组将重组DNADNA分子导入水稻受体分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和细胞的常用方法有农杆菌转化法和_法。法。基因枪法（花粉管通道法）基因枪法（花粉管通道法）植物组织培养植物组织培养脱分化和再分化脱分化和再分化耐盐基因耐盐基因一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 _技术。该技术的核心
8、技术。该技术的核心_。（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的素标记的_作探针进行分子杂交检测，又要用作探针进行分子杂交检测，又要用_方法方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。动物细胞培养和核移植技术植物组织培养植物组织培养(最基本）最基本）植物体细胞杂交植物体细胞杂交1.1.动物细胞培养（最基本）动物细胞培养（最基本）2.2.核移植核移植3.3.动物细胞融合动物细胞融合4.4.单克隆抗体制备单克隆抗体制备. .5 5. .胚胎移植胚胎移植. .回顾：回顾：v动物细胞工程常用的技术手段
9、：动物细胞工程常用的技术手段：v植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物细胞工程常用的技术手段有哪些？从动物机体中取出从动物机体中取出相关相关组织组织，将它分散成，将它分散成单个单个 细胞细胞，然后，然后,放在放在适宜的适宜的培养基培养基中，让这些细胞中，让这些细胞生长和繁殖生长和繁殖。1、动物细胞培养、动物细胞培养概念概念： 原理是：（原理是：（ ）细胞增殖细胞增殖动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动动物的组织、器官物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞加培养液加培养液制成制成细胞细胞悬浮悬浮液液10代代细胞细胞部分细胞部分细胞“癌变癌变”，无限传代，无限传代动物细胞培养不能动物细胞
10、培养不能最终培养成动物体最终培养成动物体50代细胞代细胞原原代代培培养养传代培养传代培养细细胞胞贴贴壁壁剥离、分瓶剥离、分瓶细胞株细胞株细胞细胞细胞系细胞系2.动物细胞培养过程：动物细胞培养过程：分裂能力强，代谢旺盛，分化分裂能力强，代谢旺盛，分化程度低，容易培养程度低，容易培养去掉组织间去掉组织间蛋白蛋白3 3、动物细胞培养条件：、动物细胞培养条件：1 1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境 2 2、营养、营养3 3、温度和、温度和PHPH 4 4、气体环境：、气体环境：补充合成培养基补充合成培养基中缺乏的物质中缺乏的物质（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（添加一定量的抗生素，定期更换培
11、养液）36.5 + 0.536.5 + 0.5度度 ；PHPH为为7.2-7.47.2-7.4。（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清动物血清、血浆等。）、血浆等。）有氧有氧 O O2 2 和和 COCO2 2（95%95%空气和空气和5% CO2 5% CO2 ） O O2 2作用：作用：进行进行 呼吸，提供能量呼吸，提供能量 COCO2 2作用：作用：维持培养液的维持培养液的PHPH值值4 4、动物细胞培养技术的应用、动物细胞培养技术的应用（1 1）生产蛋白生物制品：）生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体单克隆抗体等。等
12、。（3 3）用于）用于检测有毒物检测有毒物质质（2 2）获得大量自身的）获得大量自身的皮肤细胞皮肤细胞，用于植皮。，用于植皮。（4 4）用于生理、病理、药理等方面的研究，）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据为治疗和预防疾病提供理论依据（5 5）作为基因工程的受体细胞）作为基因工程的受体细胞获得细胞获得细胞细胞的全能性细胞的全能性细胞群体（细胞株、细胞群体（细胞株、细胞系）细胞系）植物体植物体培养结果培养结果或细胞分泌蛋白或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、葡萄糖、动物血清动物血清蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素培养基
13、特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目5 5、植物细胞和动物细胞培养的比较、植物细胞和动物细胞培养的比较 1. 概念：概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的一个已经去掉细胞核的卵母细胞卵母细胞中，使其重中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。终发育成动物个体。核移植核移植（难度高）（难度高）原理：原理：（二）、动物（二）、动物细胞核移植细胞核移植技术技术
14、胚胎细胞核移植：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，细胞分化程度低，恢复全能性容易恢复全能性容易用核移植的方法得到的动物用核移植的方法得到的动物称为称为克隆动物克隆动物动物体细胞核的全能性动物体细胞核的全能性卵母细胞卵母细胞黑面母绵羊黑面母绵羊白面母绵羊白面母绵羊乳腺细胞乳腺细胞细胞质细胞质细胞核细胞核细胞核移植细胞核移植早期（重组）胚胎早期（重组）胚胎卵裂卵裂C母绵羊母绵羊子宫子宫胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠融合后的卵母细胞（融合后的卵母细胞（重组细胞）重组细胞）2.体细胞核移植过程体细胞核移植过程电脉冲刺激电脉冲刺激供体细胞供体细胞（供核）（供核）细
15、胞培养细胞培养体细胞体细胞卵巢卵母细胞卵巢卵母细胞（M中期：供质）中期：供质）去核去核去核卵母细胞去核卵母细胞注入注入细胞融合细胞融合重重组组细细胞胞构建重组构建重组胚胎胚胎胚胎移植胚胎移植代孕母体代孕母体克隆牛克隆牛1.共分成两大阶段：共分成两大阶段：2.取卵母细胞作受体细胞的取卵母细胞作受体细胞的原因原因是是:3.严格来说新个体有严格来说新个体有 （ ）个亲本的性状（个亲本的性状（为什么？为什么？）体细胞核移植具体过程体细胞核移植具体过程归纳归纳:两两核移植和胚胎移植核移植和胚胎移植含有激发细胞核全能性的物质（主要原因）；含有激发细胞核全能性的物质（主要原因）；体积大体积大,易操作易操作,
16、营养营养丰富（次要原因）；丰富（次要原因）；3、体细胞核移植技术的应用前景、体细胞核移植技术的应用前景 1、加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育、加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育2、保护濒危物种，增加存活数量、保护濒危物种，增加存活数量3、克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白、克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白4、可以作为异种移植的供体，可以用于组织、可以作为异种移植的供体，可以用于组织器官的移植器官的移植 1 1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞（）、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞（） A A细胞系细胞系 B B细胞株细胞株 C C原代细胞原代细胞 D D传代
17、细胞传代细胞 2 2、动物细胞工程技术的基础是、动物细胞工程技术的基础是 - - （ ） A.A.动物细胞融合动物细胞融合 B.B.单克隆抗体单克隆抗体 C.C.胚胎移植胚胎移植 D.D.动物细胞培养动物细胞培养AD 3.3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于-（ ） A.A.培养基不同；培养基不同； B.B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能
18、培 养成植株。养成植株。A教学反馈教学反馈3.3.请分析回答问题。请分析回答问题。 (1) (1) 在小鼠细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂在小鼠细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面生长到细胞表面_时，细胞会停止分时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的裂增殖，这种现象称为细胞的_。此时，瓶壁上形成细胞层数是此时，瓶壁上形成细胞层数是_。 (2) (2) 动物细胞培养时为达到无菌无毒的环境条动物细胞培养时为达到无菌无毒的环境条件，需要对培养液和所有培养用具进行无菌处理，件，需要对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常在培养液中添加一定量的通常在培养液中添加一定量的_，此，此外应外应_。用
19、于核移植的细胞通。用于核移植的细胞通常为常为1010代以内，原因是代以内，原因是1010代以内的细胞代以内的细胞_。 相互接触相互接触接触抑制接触抑制单层（或一层）单层（或一层）抗生素抗生素定期更换培养液定期更换培养液 保持细胞正常的二倍体核型保持细胞正常的二倍体核型4、世界上第一只克隆绵羊、世界上第一只克隆绵羊“多利多利”的培育的培育程序如图所示，程序如图所示，请据图回答：请据图回答：（1）写出图中）写出图中a、b所指的细胞工程名称：所指的细胞工程名称： a_ b_ （2）实施细胞工程）实施细胞工程a时，所需的受体细胞大时，所需的受体细胞大多采用动物卵母细胞的原因是多采用动物卵母细胞的原因是: （3）“多利多利”面部的毛色是面部的毛色是 。请根据。请根据遗传学原理说明遗传学原理说明判断依据：判断依据： （4）继植物组织培养之后，克隆绵羊的培）继植物组织培养之后，克隆绵羊的培育成功，证明动物育成功，证明动物 也具有也具有 。 全能性全能性 细胞核核移植细胞核核移植胚胎移植胚胎移植白色白色“多利多利”的全部细胞核来自白面绵羊的全部细胞核来自白面绵羊细胞核细胞核含有激发细胞核全能性的物质（主要原含有激发细胞核全能性的物质（主要原因）；因）；体积大，易操作，营养丰富（次体积大，易操作，营养丰富（次要原因）；要原因）；
