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1、影响酶活性的因素设计性实验 影响酶活性的因素实验设计唾液淀粉酶对淀粉的消化唾液淀粉酶对淀粉的消化 影响酶活性的因素实验设计一、目的n1、了解酶的特异性。n2、了解温度、pH值、激活剂和抑制剂等因素对酶反应速度的影响。n3、掌握检查酶的特异性,酶的激活剂和抑制剂影响酶反应速度的方法及原理。影响酶活性的因素实验设计二、原理n酶是生物体中具有催化功能的蛋白质,因此也叫生物催生剂。生物体内存在多种多样的酶,从而使生物体在温和的条件下能迅速完成复杂的生物化学反应。影响酶活性的因素实验设计特异性n酶具高度的特异性。所谓特异性是指一种酶能对一种化合物或一类化合物起催化作用,而不能对别的物质发生催化反应。n淀
2、粉和蔗糖无还原性。唾液淀粉酶水解溶粉生成有还原性的麦芽糖,但不能催化蔗糖水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产生还原性的葡萄糖和果糖,但不能催化淀粉水解,用Benedict试剂检查糖的还原性。影响酶活性的因素实验设计温度和pHn温度和pH对酶的活性有显著的影响,使反应速度达最大反应值时的温度称为某种酶作用的最适温度。使反应速度达最大反应值时的温度称为某种酶作用的最适温度。大多数动物酶的最适温度为3740,植物酶的最适温度为5060n能使酶表现其活性最高时的pH值称为该酶的最适pH值,不同酶的最适pH值不同。影响酶活性的因素实验设计酶的抑制剂与激活剂 n酶的活性常受某些物质的影响,能使酶活性增加的物质称为
3、酶的激活剂,能使酶的活性降低的物质称为酶的抑制剂。n氯离子为唾液淀粉酶的激活剂,铜离子为其抑制剂。影响酶活性的因素实验设计三、材料、试剂与器具影响酶活性的因素实验设计(一)试剂n蒸馏水蒸馏水n1%淀粉液淀粉液n1%蔗糖液蔗糖液n0.1%尿素液尿素液n大豆尿素酶溶液大豆尿素酶溶液n0.1%CuSO4n0.1%HgCl2n0.1%NaCln1M NaOHn0.5M H2SO4n纳氏试剂纳氏试剂n班氏试剂班氏试剂n碘液碘液n各种各种pH缓冲液:缓冲液:5.0;6.8;8.0影响酶活性的因素实验设计(二)器具n控温水浴锅(每个实验室控温水浴锅(每个实验室3个)个)n制冰机制冰机n电磁灶电磁灶n不锈钢锅
4、不锈钢锅n白瓷板白瓷板n试管、滴管、移液管(试管、滴管、移液管(1-2ml)影响酶活性的因素实验设计四、操作步骤影响酶活性的因素实验设计(一)酶的特异性影响酶活性的因素实验设计管号1231%淀粉 (滴)10101%蔗糖 (滴)10稀释唾液(滴)55煮沸过稀释唾液(滴)5PH6.8缓冲液(滴)101010各管混匀,置37 水10minBenedicty试剂 (滴)202020n取试管3支,编号,按下表进行操作影响酶活性的因素实验设计将上述各试管放沸水中煮3-5min观察并记录现 象 解释结果 影响酶活性的因素实验设计(二)酶的激活剂及抑制剂影响酶活性的因素实验设计n取试管3支,编号,按下表进行操
5、作管号1231%淀粉 (滴)101010稀释唾液(滴)1010101%硫酸铜溶液 51%氯化钠溶液 5蒸馏水 101010各管混匀,置37 水10min碘化钾碘溶液(滴) 333影响酶活性的因素实验设计观察并记录现 象 解释结果 影响酶活性的因素实验设计(四)pH对酶活性的影响影响酶活性的因素实验设计取3支试管,按下表编号后进行实验。管号1231%淀粉 (滴) 101010PH5缓冲液10_PH6.8缓冲液_10_PH8.0缓冲液_10稀释唾液(滴)101010影响酶活性的因素实验设计(1)摇匀后,将各管置于37水浴中处理(2)每隔1min从pH6.8的试管中取出1滴, 反应液 滴于预先滴加稀碘液的白瓷板上,观察其颜色变化。(3)待颜色呈棕色时,向各管中加稀碘液1-3滴。观察各管颜色,比较各管中淀粉水解的程度,解释pH对酶活性的影响影响酶活性的因素实验设计观察并记录现 象 解释结果 影响酶活性的因素实验设计影响酶活性的因素实验设计