二十章病原真菌学习教案

《二十章病原真菌学习教案》由会员分享，可在线阅读，更多相关《二十章病原真菌学习教案（80页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、会计学1二十章病原二十章病原(bngyun)真菌真菌第一页，共80页。一、表面一、表面(biomin)感染真菌感染真菌 主主要要寄寄居居于于人人体体皮皮肤肤和和毛毛干干的的最最表表层层( ( b b i io o c c n n g g ) )，在在我我国国主主要要是是糠糠秕秕马马拉拉色色菌菌，为为条条件件致致病病菌菌，是是一一种种嗜嗜脂脂性性酵酵母母样样菌菌。它它侵侵犯犯皮皮肤肤角角质质层层引引起起一一种种慢慢性性、无无症症状状的的浅浅部部真真菌菌病病，即即汗汗斑斑，无无明明显显炎炎症症反反应应。主主要要是是色色素素异异常常性性改改变变，由由淡淡变变深深，而而老老斑斑疹疹色色素素由由深深转转

2、浅浅，成成为为白白斑斑。还还可可引引起起毛毛囊囊炎炎、脂脂溢溢性性皮皮炎炎等等。第1页/共79页第二页，共80页。微生物检验微生物检验(jinyn)(jinyn) 1直直接接显显微微镜镜检检查查 可可采采用用(ciyng)透透明明胶胶带带粘粘贴贴取取材材法法，将将透透明明胶胶带带直直接接贴贴于于皮皮肤肤表表面面，数数分分钟钟后后揭揭下下，直直接接贴贴于于载载玻玻片片上上镜镜检检或或经经棉棉蓝蓝染染色色或或革革兰兰染染色色后后镜镜检检。可可见见孢孢子子和和菌菌丝丝。孢孢子子为为圆圆形形或或卵卵形形，厚厚壁壁，芽芽颈颈较较宽宽，常常成成簇簇分分布布；菌丝粗短，呈腊肠样。菌丝粗短，呈腊肠样。第2页/

3、共79页第三页，共80页。2分分离离培培养养与与鉴鉴定定 将将鳞鳞屑屑接接种种于于含含菜菜籽籽油油的的培培养养基基，37孵孵育育3d后后，在在培培养养基基上上开开始始生生长长，20d左左右右菌菌落落约约lOmm乳乳酪酪色色酵酵母母型型菌菌落落，表表面面光光滑滑。取取菌菌落落作作涂涂片片(t pin)染染色色镜镜检检，观观察真菌形态。察真菌形态。第3页/共79页第四页，共80页。二、皮肤癣真菌二、皮肤癣真菌(zhnjn)(zhnjn)n n寄寄生生于于皮皮肤肤角角蛋蛋白白组组织织的的浅浅部部真真菌菌称称为为皮皮肤肤癣癣菌菌，又又称称皮皮肤肤丝丝状状菌菌。约约有有4545种种，一一部部分分仅仅感感

4、染染动动物物，对对人人致致病病的的约约有有2020余种。余种。n n无无性性阶阶段段(jidun)(jidun)属属于于半半知知菌菌门，而有性型则属于子囊菌门。门，而有性型则属于子囊菌门。n n分分为为毛毛癣癣菌菌属属、表表皮皮癣癣菌菌属属和和小孢子癣菌属等三个菌属。小孢子癣菌属等三个菌属。第4页/共79页第五页，共80页。(一一)临床意义临床意义皮皮肤肤癣癣菌菌易易侵侵犯犯人人体体皮皮肤肤、指指甲、毛发的甲、毛发的角角蛋蛋白白组组织织并并生生长长繁繁殖殖致致病病，是因为其能是因为其能产产生生角角质质溶溶解解酶酶。皮皮肤肤癣癣菌菌是是接触传染，接触传染，只只要要反反复复接接触触患患者者均均有有

5、可可能能被被感染。在同感染。在同一一病病人人有有不不同同(b (b tn)tn)的的临临床床表现，如毛癣菌属可表现，如毛癣菌属可引引起起发发癣癣、体体癣癣、甲甲癣癣；而而相相同部位的病同部位的病可可由由不不同同(b (b tn)tn)皮皮肤肤癣癣菌菌引引起，如甲癣起，如甲癣( (俗称灰指俗称灰指甲甲) )可可由由毛毛癣癣菌菌属属和和表表皮皮癣癣菌菌属属引起引起 。第5页/共79页第六页，共80页。1毛癣菌属毛癣菌属有有20种，其中有种，其中有13种对人致病。种对人致病。常见的有红常见的有红色毛癣菌、紫色毛癣菌、须毛癣色毛癣菌、紫色毛癣菌、须毛癣菌、断发毛菌、断发毛癣菌和许兰毛癣菌等。毛癣菌感癣

6、菌和许兰毛癣菌等。毛癣菌感染染(gnrn)的皮屑、的皮屑、甲屑或病发甲屑或病发10KOH溶液消化后溶液消化后镜检，可见镜检，可见有菌丝，病发内、外可见菌丝或有菌丝，病发内、外可见菌丝或孢子。在沙孢子。在沙氏培养基上可白、红、橙或棕色，氏培养基上可白、红、橙或棕色，表面呈绒表面呈绒毛状、粉末状或蜡状菌落。镜下毛状、粉末状或蜡状菌落。镜下可见梳状、可见梳状、球拍、螺旋或鹿角菌丝；葡萄状球拍、螺旋或鹿角菌丝；葡萄状或梨状小分或梨状小分生孢子，细长薄壁大分生孢子。生孢子，细长薄壁大分生孢子。 第6页/共79页第七页，共80页。2. 表皮表皮(biop)癣菌属癣菌属n n对人致病的只有絮状表皮癣菌对人致

7、病的只有絮状表皮癣菌, , 感染的皮屑和甲屑经感染的皮屑和甲屑经1010KOHKOH液液消化后镜检，可见分枝断裂的消化后镜检，可见分枝断裂的有隔菌丝，少见孢子。有隔菌丝，少见孢子。n n在沙氏培养基上培养后，菌落在沙氏培养基上培养后，菌落初为白色鹅毛状，以后转变为初为白色鹅毛状，以后转变为黄色粉末状。镜下可见球拍黄色粉末状。镜下可见球拍(qipi)(qipi)状菌丝、卵圆形或巨状菌丝、卵圆形或巨大棒状薄壁大分生孢子，无小大棒状薄壁大分生孢子，无小分生孢子，在陈旧培养物中可分生孢子，在陈旧培养物中可见厚膜孢子。见厚膜孢子。第7页/共79页第八页，共80页。3小孢子小孢子(boz)癣菌癣菌属属有有

8、15种，对人致病的有种，对人致病的有8种，常见种，常见的有铁锈色的有铁锈色小孢子小孢子(boz)菌、石膏样小孢子菌、石膏样小孢子(boz)菌和狗小孢子菌和狗小孢子(boz)菌等。菌等。小孢子小孢子(boz)菌感染的皮屑和毛菌感染的皮屑和毛发经发经10KOH处理处理后镜检，皮屑中有分枝断裂菌丝，后镜检，皮屑中有分枝断裂菌丝，在毛发中在毛发中呈现小孢子呈现小孢子(boz)镶嵌的鞘包裹镶嵌的鞘包裹着发干。在沙氏培着发干。在沙氏培养基中可见白色、棕黄色或黄褐养基中可见白色、棕黄色或黄褐色、粉末或色、粉末或绒毛状菌落。镜下可见梳状、球绒毛状菌落。镜下可见梳状、球拍状或结节拍状或结节状菌丝，卵圆形小分生孢

9、子状菌丝，卵圆形小分生孢子(boz)、厚壁梭形、厚壁梭形(纺锤纺锤形形)大分生孢子大分生孢子(boz)。 第8页/共79页第九页，共80页。( (三三) )微生物检验微生物检验(jinyn)(jinyn)1标标本本采采集集 采采集集新新发发生生的的皮皮肤肤损损害害边边缘缘皮皮屑屑；指指甲甲近近尖尖端端下下面面甲甲屑屑；拔拔取取无无光光泽泽病病发发，黄黄癣癣采采集集黄黄癣癣痂痂。将将标标本本盛盛于于清清洁洁(qngji)纸纸袋袋，鳞鳞屑屑要要用黑纸包好。用黑纸包好。第9页/共79页第十页，共80页。2直直接接显显微微镜镜检检查查 皮皮屑屑标标本本用用10KOH液液制制成成湿湿片片，指指甲甲用用2

10、5KOH或或25NaOH含含 5甘甘油油处处理理。镜镜检检可可见见透透明明、有有隔隔，常常有有分分支支的的菌菌丝丝及及成成链链的的关关节节孢孢子子，三三个个癣癣菌菌属属难难以以鉴鉴别别。毛毛癣癣菌菌属属感感染染(gnrn)病病发发有有发发外外型型和和发发内内型型孢孢子子，而小孢子菌属只有发外型孢子。而小孢子菌属只有发外型孢子。第10页/共79页第十一页，共80页。3分离分离(fnl)培养与鉴定培养与鉴定 皮屑、甲屑和病发标本，先用皮屑、甲屑和病发标本，先用70乙醇或在青、链霉素混合乙醇或在青、链霉素混合液内处理液内处理 5min，再用生理盐水，再用生理盐水洗洗3次，然后接种沙氏琼脂斜次，然后接

11、种沙氏琼脂斜面，面，25培养，每周观察菌落培养，每周观察菌落形态及颜色，直至形态及颜色，直至(zhzh)第第四周。挑取菌落镜检菌丝和孢四周。挑取菌落镜检菌丝和孢子，也可作棉兰染色后镜检或子，也可作棉兰染色后镜检或作小培养后镜检。必要时作其作小培养后镜检。必要时作其他鉴定如毛发穿孔试验、脲酶他鉴定如毛发穿孔试验、脲酶试验和特殊营养需要试验等来试验和特殊营养需要试验等来鉴定皮肤癣菌。鉴定皮肤癣菌。第11页/共79页第十二页，共80页。毛发毛发(mof)穿孔试验穿孔试验是将头发发剪成是将头发发剪成lcm长，置于已长，置于已加入加入25ml蒸馏水和蒸馏水和23滴滴10酵母浸膏酵母浸膏液的平皿内，液的平

12、皿内，高压灭菌。将待检皮肤真菌接高压灭菌。将待检皮肤真菌接种于平皿内，种于平皿内，置置25孵育四周孵育四周(szhu)，每，每周检查一次，每次取周检查一次，每次取数根毛发置载玻片上，经乳酚数根毛发置载玻片上，经乳酚棉蓝染色后，棉蓝染色后，置低倍镜下观察。若毛发有裂置低倍镜下观察。若毛发有裂口或陷凹者口或陷凹者为阳性，否则为阴性。为阳性，否则为阴性。 第12页/共79页第十三页，共80页。4 4药物药物(yow)(yow)敏感试验敏感试验皮肤癣菌对灰黄霉素、伊曲康皮肤癣菌对灰黄霉素、伊曲康唑等唑等药物药物(yow)(yow)敏感。敏感。 第13页/共79页第十四页，共80页。三、皮下组织感染三、

13、皮下组织感染(gnrn)(gnrn)真菌真菌主主要要有有着着色色真真菌菌和和孢孢子子丝丝菌菌。一般经外伤一般经外伤感感 染染 后后 ， 在在 局局 部部 皮皮 下下 组组 织织(pxizzh)(pxizzh)繁殖，并缓慢向繁殖，并缓慢向周周围围组组织织扩扩散散，还还可可经经淋淋巴巴、血液向全身血液向全身扩散。扩散。第14页/共79页第十五页，共80页。(一一)着色着色(zhu s)真菌真菌是是自自然然界界的的腐腐生生菌菌，经经破破损损皮皮肤肤(p f)(p f)而感染，而感染，引引起起病病损损皮皮肤肤(p (p f)f)变变黑黑，引引起着色真菌病。主起着色真菌病。主要要真真菌菌有有卡卡氏氏枝枝

14、孢孢霉霉、裴裴氏氏着着色真菌、紧色真菌、紧密着色真菌和疣状瓶霉。密着色真菌和疣状瓶霉。 第15页/共79页第十六页，共80页。1临床意义临床意义常常在在患患者者外外伤伤后后感感染染，多多发发生生四四肢暴露部肢暴露部位位，开开始始为为小小丘丘疹疹，表表面面干干燥燥或或湿润，有湿润，有鳞鳞屑屑或或鳞鳞痂痂，逐逐渐渐形形成成斑斑块块结结节节，呈疣状呈疣状增增殖殖。皮皮损损反反复复发发生生，且且长长期期不不愈，可致愈，可致畸畸致致残残。免免疫疫功功能能(gngnng)(gngnng)低低下时可侵犯中枢神经下时可侵犯中枢神经系系统统或或经经血血流流扩扩散散。病病理理变变化化主主要为角化要为角化过度及角化

15、不全。过度及角化不全。第16页/共79页第十七页，共80页。2微生物特性微生物特性(txng) 着色真菌菌丝短粗分隔着色真菌菌丝短粗分隔(fng)(fng)，呈棕色，有三型分生，呈棕色，有三型分生孢子：孢子：树枝型：菌丝末端有树枝型：菌丝末端有分生孢子柄，柄端分叉长出孢分生孢子柄，柄端分叉长出孢子；子；剑顶型：围绕菌丝末端剑顶型：围绕菌丝末端或菌丝横隔处长有一圈分生孢或菌丝横隔处长有一圈分生孢子；子；花瓶型：在菌丝分隔花瓶型：在菌丝分隔(fng)(fng)处长出花瓶状的分生孢处长出花瓶状的分生孢子柄，在瓶口长出成丛的小分子柄，在瓶口长出成丛的小分生孢子。在葡萄糖蛋白胨琼脂生孢子。在葡萄糖蛋白胨

16、琼脂培养基上培养培养基上培养1 1周，出现灰黑色周，出现灰黑色菌落，随之菌落表面出现绒毛菌落，随之菌落表面出现绒毛状或天鹅绒状气生菌丝，菌落状或天鹅绒状气生菌丝，菌落色素加深。色素加深。 第17页/共79页第十八页，共80页。3. 微生物检验微生物检验(jinyn)(1)直接显微镜检查直接显微镜检查 皮屑用皮屑用1020KOH溶液加溶液加热处理后镜检，可见单个或成群热处理后镜检，可见单个或成群厚壁孢子，有横隔厚壁孢子，有横隔(hn )或或中间十字分隔。取乳头状增殖的中间十字分隔。取乳头状增殖的病损挤压出的分泌物镜检阳性率病损挤压出的分泌物镜检阳性率最高。脓汁、脑脊液或活组织也最高。脓汁、脑脊液

17、或活组织也可做镜检。镜检结果结合临床可可做镜检。镜检结果结合临床可确定诊断。确定诊断。 第18页/共79页第十九页，共80页。(2)分离培养分离培养(piyng)与鉴定与鉴定1)1)将将标标本本接接种种沙沙氏氏培培养养基基，生生长长缓缓慢慢，菌菌落落从从灰灰黑黑色色至至黑黑色色，有有气气生生菌菌丝丝。菌菌落落涂涂片片镜镜检检可可见见三三种种类类型型的的分分生生孢孢子子，有有鉴鉴定价值。定价值。2)2)明明胶胶液液化化试试验验：致致病病性性菌菌株株均均不液化明胶。不液化明胶。3)3)其其他他生生化化反反应应(fnyng)(fnyng)：不不能能水水解解淀淀粉粉，不不凝凝固固牛牛奶奶，能能同同化硝

18、酸盐，需维生素化硝酸盐，需维生素B1B1。第19页/共79页第二十页，共80页。4 4药物药物(yow)(yow)敏感试验敏感试验对对5-FC5-FC、伊曲康唑、氟康唑敏、伊曲康唑、氟康唑敏感感(mngn)(mngn)， 但易产生耐药性。但易产生耐药性。 第20页/共79页第二十一页，共80页。( (二二) )孢子孢子(boz)(boz)丝菌丝菌n n孢孢子子丝丝菌菌属属于于腐腐生生性性真真菌菌，广广泛泛(gungfn)(gungfn)分分布布于于土土壤壤、尘尘埃埃、木木材材上上。主主要要病病原原真真菌是申克孢子丝菌。菌是申克孢子丝菌。第21页/共79页第二十二页，共80页。n n孢孢子子丝丝

19、菌菌病病是是人人兽兽共共患患性性疾疾病病，传传染染源源是是人人和和动动物物，传传播播途途径径主主 要要 经经 破破 损损 皮皮 肤肤 接接 触触 感感 染染(gnrn)(gnrn)。经经微微小小创创口口侵侵入入皮皮肤肤后后，创创口口局局部部出出现现炎炎症症性性小小结结，增增大大形形成成炎炎症症性性斑斑块块或或增增生生性性糜糜烂烂。可可沿沿淋淋巴巴管管分分布布，引引起起亚亚急急性性和和慢慢性性肉肉芽芽肿肿，称称为为孢孢子子丝丝菌菌性性下下疳疳。经经呼呼吸吸道道引引起起肺肺孢孢子子丝丝菌菌病病，并并可可沿沿血血行播散至其他器官如骨、眼等。行播散至其他器官如骨、眼等。第22页/共79页第二十三页，共

20、80页。 申克孢子丝菌是二相性真菌。在自然环境中或沙氏培养基上2528培养时呈霉菌型(菌丝相)，而在组织内或在营养丰富的培养基上培养时为酵母型(组织相)。菌丝相可见菌丝两侧伸出细长分生孢子柄，末端长出成群梨状小分生孢子。组织相则可见卵圆形小体，形似雪茄烟状，常位于中性(zhngxng)粒细胞或单核细胞内。在沙氏培养基上形成黑褐皱褶薄膜菌落，而在胱氨酸葡萄糖血琼脂培养基上则形成灰黄色柔软的类酵母型菌落。 第23页/共79页第二十四页，共80页。3微生物检验微生物检验(jinyn)(1)直直接接昆昆微微镜镜检检查查：取取患患者者脓脓、痰痰、血血、痂痂皮皮或或病病理理组组织织块块等等作作涂涂片片或或

21、切切片片，革革兰兰或或 PAS染染色色(rns)，在在巨巨噬噬细细胞胞或或中中性性粒粒细细胞胞内内、外外，可可见见G+或或PAS阳阳性性(紫紫红红色色)卵卵圆圆形形的的孢孢子。子。第24页/共79页第二十五页，共80页。(2)分分离离培培养养与与鉴鉴定定：将将标标本本接接种种(jizhng)于于 沙沙 氏氏 培培 养养 基基 上上25培培养养，2-3d开开始始生生长长，初初为为白白色色湿湿润润的的酵酵母母型型菌菌落落，以以后后变变为为淡淡咖咖啡啡色色至至深深褐褐色色。涂涂片片染染色色镜镜检检，可可见见典典型型的的菌菌丝丝相相 的的 申申 克克 孢孢 子子 丝丝 菌菌 。 接接 种种(jizhn

22、g)于于胱胱氨氨酸酸葡葡萄萄糖糖血血琼琼脂脂培培养养基基上上，37培培养养2-3d，可可形形成成乳乳白白色色或或淡淡褐褐色色酵酵母母型型菌菌落落。镜镜下下可可见见G+卵卵圆圆形形的的孢子。孢子。第25页/共79页第二十六页，共80页。(3)药药物物敏敏感感试试验验：对对碘碘化化钾钾、伊伊曲曲康唑、特比康唑、特比 萘芬等药物敏感。萘芬等药物敏感。(4)抗抗体体检检测测：取取患患者者血血清清做做凝凝集集试试验，若抗体验，若抗体 效价大于效价大于l：320有诊断意义。有诊断意义。(5)动动物物接接种种：将将标标本本接接种种小小白白鼠鼠腹腹腔内，腔内，2周内周内 引引起起腹腹腔腔炎炎，取取脓脓汁汁作作

23、涂涂片片(t pin)染色镜枪，可见染色镜枪，可见 革兰阳性、卵圆形或梭形小体。革兰阳性、卵圆形或梭形小体。第26页/共79页第二十七页，共80页。第二节第二节 深部感染深部感染(gnrn)(gnrn)真菌真菌 深深部部感感染染真真菌菌是是指指能能侵侵袭袭深深部部组组织织和和内内脏脏及及全全身身的的真真菌菌，主主要要有有假假丝丝酵酵母母菌菌、隐隐球球菌菌(qijn)(qijn)、曲曲霉霉、毛毛霉霉、组组织织胞胞浆浆菌菌和和卡卡氏氏肺肺 孢孢 菌菌 等等 ， 其其 中中 以以 隐隐 球球 菌菌(qijn)(qijn)感染较常见。感染较常见。 组组织织胞胞浆浆菌菌为为二二相相性性真真菌菌，假假丝丝

24、酵酵母母菌菌、曲曲霉霉、毛毛霉霉和和卡卡氏氏肺肺孢孢菌菌等等为为条条件件致致病病性性真真菌菌，只只有有在在一定的条件下才引起机体致病。一定的条件下才引起机体致病。第27页/共79页第二十八页，共80页。一、假丝酵母菌一、假丝酵母菌俗称念珠菌，有俗称念珠菌，有8181个种，其中个种，其中有有1111种对人种对人有致病性：白假丝酵母菌、为有致病性：白假丝酵母菌、为最常见的致最常见的致病菌。此外，热带假丝酵母菌、病菌。此外，热带假丝酵母菌、克柔假丝克柔假丝酵母菌和光滑酵母菌和光滑(gung hu)(gung hu)假丝假丝酵母菌也较多引起疾病。酵母菌也较多引起疾病。 第28页/共79页第二十九页，共

25、80页。( (一一) )白假丝酵母菌白假丝酵母菌 通通 常常 存存 在在 于于 人人 的的 口口 腔腔(kuqing)(kuqing)、上上呼呼吸吸道道、肠肠道道和和阴阴道道粘粘膜膜上上，当当机机体体发发生生菌菌群群失失调调或或抵抵抗抗力力降降低低时时，可可引引起起念念珠珠菌菌病病。如如婴婴儿儿的的鹅鹅口口疮疮、假假丝丝酵酵母母菌菌性性阴阴道道炎炎、龟龟头头炎炎、肠肠炎炎、肺肺炎炎、膀膀胱胱炎炎、肾肾孟孟肾肾炎炎和和中中枢枢神神经经系系统统白白假假丝丝酵酵母母菌菌病病，如如脑脑膜膜炎炎、脑脑膜膜脑脑炎炎、脑脑脓脓肿肿等等。此此外外，因因心心瓣瓣膜膜手手术术而而引引发发心心内内膜膜炎炎、长长期期

26、用用静静脉脉内内导导管管而而引引起起全全身身性性假假丝丝酵酵母菌病，病死率极高。母菌病，病死率极高。 第29页/共79页第三十页，共80页。1微生物特性微生物特性(txng) 白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径直径3-6m3-6m。革兰阳性，着色不。革兰阳性，着色不均匀。出芽方式繁殖，在组织内均匀。出芽方式繁殖，在组织内可见可见(kjin)(kjin)芽生孢子、假菌丝，芽生孢子、假菌丝，在玉米粉培养基中可产生假菌丝在玉米粉培养基中可产生假菌丝和厚膜孢子。和厚膜孢子。第30页/共79页第三十一页，共80页。2 2微生物检验微生物检验(jinyn) (jinyn) 1)直

27、直接接显显微微镜镜检检查查(jinch)：取取脓脓汁汁、痰痰和和局局部部炎炎症症性性分分泌泌物物直直接接涂涂片片，革革兰兰染染色色后后镜镜检检，显显微微镜镜见见到到革革兰兰阳阳性性(着着色色不不均均匀匀)、圆圆形形或或卵卵圆圆形形菌菌体体或或孢孢子子及及假假菌菌丝丝，可可确确认认为为假假丝丝酵酵母母菌感染。菌感染。2)抗抗 原原 检检 测测 ： 取取 病病 人人 血血 清清 作作ELISA、免免疫疫印印迹迹法法等等检检测测白白假丝酵母菌抗原。假丝酵母菌抗原。3)核核酸酸检检测测：用用PCR法法将将白白假假丝丝酵酵母母菌菌DNA分分子子扩扩增增后后以以分分子子探探针针检检测测，具具有有较较好好的

28、的敏敏性性和和特异性。特异性。 第31页/共79页第三十二页，共80页。4)分离分离(fnl)培养培养将标本接种将标本接种(jizhng)(jizhng)在沙氏培在沙氏培养基上，养基上，2525或或3737培养培养1 1d d后，可出现奶油色后，可出现奶油色类酵母型菌类酵母型菌落。镜检可见假菌丝和芽生孢落。镜检可见假菌丝和芽生孢子。子。第32页/共79页第三十三页，共80页。鉴定鉴定(jindng)(jindng)1)m|血血清清中中，37孵孵育育(f y)1.5h观观察察有有无无芽芽管管形形成成。白白假假丝丝酵酵母母菌菌可可形形成成芽芽管管，其其他他假假丝丝酵母菌不形成芽管。酵母菌不形成芽管

29、。2)厚厚膜膜孢孢子子形形成成试试验验：将将假假丝丝酵酵母母菌菌接接种种于于玉玉米米粉粉培培养养基基25孵孵育育(f y)1-2d后后，白白假假丝丝酵酵母母菌菌在在菌菌丝丝顶顶端端、侧侧缘缘或或中中间间形形成成厚厚膜膜孢子。孢子。 第33页/共79页第三十四页，共80页。3)3)糖同化糖同化(tnghu)(tnghu)或发酵试验或发酵试验凡发酵某种糖一定能同化该糖，凡发酵某种糖一定能同化该糖，故只需做故只需做那些那些(nxi)不发酵糖的同化试不发酵糖的同化试验。将假丝酵母菌验。将假丝酵母菌接种糖发酵管，接种糖发酵管，25孵育，一孵育，一般观察般观察23d，对不发酵或弱发酵管可延长至对不发酵或弱

30、发酵管可延长至10d或或24周。周。观察有无酵母生长或液体培养观察有无酵母生长或液体培养基是否变混基是否变混浊。现在商品化的产色培养基浊。现在商品化的产色培养基可快速鉴定可快速鉴定白假丝酵母菌和其他假丝酵母白假丝酵母菌和其他假丝酵母菌。菌。第34页/共79页第三十五页，共80页。(3)药药物物敏敏感感试试验验：对对二二性性霉霉素素B、5-FC等药等药 物物敏敏感感，但但对对5-FC极极易易产产生生耐耐药性。药性。(4)抗抗 体体 检检 测测 ： 早早 期期 诊诊 断断 可可 用用ELlSA夹心法、夹心法、 免免疫疫(miny)酶酶斑斑点点试试验验，方方法简便。也可用乳胶法简便。也可用乳胶 凝凝

31、集集试试验验和和对对流流免免疫疫(miny)电泳试验等检测血清电泳试验等检测血清 中抗白假丝酵母菌抗体。中抗白假丝酵母菌抗体。(5)动动物物试试验验：将将假假丝丝酵酵母母菌菌悬悬液液注射注射1ml于家于家ml于小白鼠尾静脉，假于小白鼠尾静脉，假 丝酵母菌对动物无致病性。丝酵母菌对动物无致病性。第35页/共79页第三十六页，共80页。( (二二) )热带热带(rdi)(rdi)假丝酵母菌假丝酵母菌 广泛分布于自然界，在人体广泛分布于自然界，在人体表和外界相通的腔道中也存在。表和外界相通的腔道中也存在。热带假丝酵母菌可引起热带假丝酵母菌可引起(ynq)(ynq)皮肤、粘膜和内脏假皮肤、粘膜和内脏假

32、丝酵母菌病。它除可在粘膜细丝酵母菌病。它除可在粘膜细胞上增殖引起胞上增殖引起(ynq)(ynq)感染外，感染外，其产生的毒素可引起其产生的毒素可引起(ynq)(ynq)过敏反应及产生的水解酶类引过敏反应及产生的水解酶类引起起(ynq)(ynq)组织损伤。组织损伤。 第36页/共79页第三十七页，共80页。微生物检验微生物检验(jinyn)(jinyn)(1)直直接接显显微微镜镜检检查查：将将标标本本作作涂片革兰涂片革兰 染染色色后后镜镜检检，观观察察+假假丝丝酵酵母菌。母菌。(2)分分离离(fnl)培培养养与与鉴鉴定定：将标本接种在沙氏将标本接种在沙氏 培培养养基基上上形形成成色色暗暗而而干干

33、燥燥的的菌落菌落, 取取 菌落作菌落作TZC反应。反应。 第37页/共79页第三十八页，共80页。TZC反应反应(fnyng)即在葡萄糖蛋白胨琼脂内加入即在葡萄糖蛋白胨琼脂内加入0 005g05gL L氯化氯化三苯基四氮唑三苯基四氮唑(TZC)(TZC)，热带假丝酵，热带假丝酵母菌在此培母菌在此培养基上生长后使培养基变为深红养基上生长后使培养基变为深红色或紫色，色或紫色，而白假丝酵母菌不使培养基变色而白假丝酵母菌不使培养基变色( (淡红淡红) )，其，其他假丝酵母菌使培养基变为红色。他假丝酵母菌使培养基变为红色。再取菌落再取菌落做糖发酵或同化试验、芽管形成做糖发酵或同化试验、芽管形成较迟较迟(

34、 (血清中血清中6h6h以上以上) )，不形成厚膜孢子，不形成厚膜孢子(boz)(boz)、动物试验阴性。、动物试验阴性。 第38页/共79页第三十九页，共80页。二、隐球菌二、隐球菌(qijn)属属 包括包括1717个种和个种和7 7个变种，广泛个变种，广泛分布于自然界，人体分布于自然界，人体(rnt)(rnt)体表、口腔和肠道中。外源性体表、口腔和肠道中。外源性感染感染, , 经呼吸道侵入，由肺经经呼吸道侵入，由肺经血行播散血行播散, ,可侵犯肺、脑及脑可侵犯肺、脑及脑膜、皮肤、骨和关节。好发于膜、皮肤、骨和关节。好发于细胞免疫功能低下者，如细胞免疫功能低下者，如AIDSAIDS、恶性肿瘤

35、、糖尿病、器官移植恶性肿瘤、糖尿病、器官移植及大剂量使用糖皮质激素者。及大剂量使用糖皮质激素者。现已发现新生隐球菌、浅白隐现已发现新生隐球菌、浅白隐球菌和罗伦隐球菌有致病性。球菌和罗伦隐球菌有致病性。第39页/共79页第四十页，共80页。()微生物特性微生物特性(txng) 在在组组织织中中呈呈圆圆形形或或卵卵圆圆形形，直直径径一一般般在在4 46m6m，外外周周有有宽宽厚厚荚荚膜膜，荚荚膜膜较较菌菌大大1 13 3倍倍，折折光光性性强强，一一般般染染色色法法不不易易着着色色而而难难以以发发现现而而得得名名。常常采采用用(ciyng)(ciyng)墨墨汁汁负负染染色色法法，在在黑黑色色景景下下

36、可可镜镜检检到到透透亮亮菌菌体体和和宽宽厚厚荚荚膜膜。非非致致病性隐球菌无荚膜。病性隐球菌无荚膜。第40页/共79页第四十一页，共80页。（）生物学多态性（）生物学多态性n n有有A A、B B、C C、D D等等4 4个血清型，个血清型，归入两个归入两个(lin )(lin )变种组：变种组：新生隐球菌新生变种，有性新生隐球菌新生变种，有性阶段为新生线黑粉菌，血清型阶段为新生线黑粉菌，血清型为为A A、D D；新生隐球菌格特变新生隐球菌格特变种，有性阶段为棒杆孢线黑粉种，有性阶段为棒杆孢线黑粉菌，血清型为菌，血清型为B B、C C。n n用含刀豆氨酸、甘氨酸、溴麝用含刀豆氨酸、甘氨酸、溴麝香

37、草酚蓝培养基可区分两个香草酚蓝培养基可区分两个(lin )(lin )种，种，B B、C C型可使培型可使培养基由黄色变蓝色，而养基由黄色变蓝色，而A A、D D型型则无此作用。在沙氏培养基上则无此作用。在沙氏培养基上形成白色粘稠菌落。形成白色粘稠菌落。 第41页/共79页第四十二页，共80页。()微生物检验微生物检验(jinyn)(1) 标标本本直直接接镜镜检检：用用病病人人脑脑脊脊液液作作墨墨汁汁负负染染色色检检查查是是诊诊断断隐隐球球菌菌脑脑膜膜炎炎最最简简便便(jinbin)、快快速速方方法法。常常规规细细胞胞染染色色可可发发现现隐隐球球菌菌，但但易易误误诊诊和和漏漏诊诊。如如用用PA

38、S染染色色后后新新生生隐隐球球菌菌呈呈红色。红色。第42页/共79页第四十三页，共80页。(2)抗原抗原(kngyun)检测检测用乳胶凝集试验、用乳胶凝集试验、ELISAELISA、和单克隆抗体法等免、和单克隆抗体法等免疫学方法检测隐球菌荚膜多糖特异性抗原，已疫学方法检测隐球菌荚膜多糖特异性抗原，已成为临床上的常规诊断方法，其中以乳胶凝集成为临床上的常规诊断方法，其中以乳胶凝集试验最为常用，此法简便、快速。特别对直接试验最为常用，此法简便、快速。特别对直接镜检和分离鉴定阴性者更有诊断价值镜检和分离鉴定阴性者更有诊断价值(jizh)(jizh)。ELISAELISA敏感性和特异性都较高。单克隆抗

39、体法敏感性和特异性都较高。单克隆抗体法除有较高敏感性和特异性外，标本无须稀释和除有较高敏感性和特异性外，标本无须稀释和预先处理的优点。预先处理的优点。第43页/共79页第四十四页，共80页。(3)核酸核酸(h sun)检测检测n n可用痰液、支气管吸出物等标可用痰液、支气管吸出物等标本核酸检测方法有本核酸检测方法有DNADNA探针法、探针法、PCRPCR探针法等，用于检测的探探针法等，用于检测的探针、引物主要选自保守区的重针、引物主要选自保守区的重复序列。复序列。n n可检出新生隐球菌，并可区别可检出新生隐球菌，并可区别类型，是新生变种还是格特变类型，是新生变种还是格特变种。非致病性隐球菌不被

40、检出。种。非致病性隐球菌不被检出。n n此方法不受药物治疗的影响，此方法不受药物治疗的影响，还能正确评价临床还能正确评价临床(ln (ln chun)chun)疗效和预后等。疗效和预后等。 第44页/共79页第四十五页，共80页。（）分离（）分离(fnl)培养培养n n将标本接种在沙氏培养基上，病原性隐球菌在25和37生长(shngzhng)，而非病原性隐 球 菌 在 37时 不 生 长(shngzhng)。培养25d后观察菌落形态特点，并取菌落作印度墨汁负染色镜检。第45页/共79页第四十六页，共80页。()鉴定鉴定(jindng)1）酚酚氧氧化化酶酶试试验验(shyn)：接接种种L-多巴枸

41、橼酸铁和咖多巴枸橼酸铁和咖 啡啡酸酸培培养养基基中中，经经25d培培养养，呈棕黑色呈棕黑色 菌落。菌落。2）脲脲酶酶试试验验(shyn)：能能产产生生脲脲酶分解尿素琼脂培养酶分解尿素琼脂培养 基基中中的的尿尿素素形形成成NH4和和CO2，使使pH升高，升高， 培培养养基基可可由由黄黄色色变变粉粉红红色色，而而白假丝酵母白假丝酵母 菌为阴性。菌为阴性。第46页/共79页第四十七页，共80页。3 3）糖同化及发酵试验）糖同化及发酵试验）糖同化及发酵试验）糖同化及发酵试验(shyn)(shyn)：能同化葡萄：能同化葡萄：能同化葡萄：能同化葡萄糖、糖、糖、糖、 半乳糖、蔗糖和肌醇，但不能发酵糖半乳糖、

42、蔗糖和肌醇，但不能发酵糖半乳糖、蔗糖和肌醇，但不能发酵糖半乳糖、蔗糖和肌醇，但不能发酵糖 类，不能同化硝酸盐。非致病性隐球类，不能同化硝酸盐。非致病性隐球类，不能同化硝酸盐。非致病性隐球类，不能同化硝酸盐。非致病性隐球 菌不能同化肌醇。菌不能同化肌醇。菌不能同化肌醇。菌不能同化肌醇。第47页/共79页第四十八页，共80页。三、曲霉三、曲霉(qmi)(qmi)广广泛泛分分布布于于自自然然界界，达达广广泛泛分分布布于于自自然然界界，达达900900余余种种，分分为为余余种种，分分为为1818个个群群，对对工工个个群群，对对工工业业和和医医药药的的用用途途很很大大。酿酿酒酒造造酱酱。生生产产业业和和

43、医医药药的的用用途途很很大大。酿酿酒酒造造酱酱。生生产产(shngchn)(shngchn)有有机机有有机机酸酸及及酶酶酸酸及及酶酶制制剂剂，抗抗生生素素等等。人人体体对对曲曲霉霉有有极极强强免免疫疫力力，只只有有制制剂剂，抗抗生生素素等等。人人体体对对曲曲霉霉有有极极强强免免疫疫力力，只只有有在在 免免 疫疫 功功 能能 降降 低低 时时 才才 能能 致致 病病 ， 如如 使使 用用 免免 疫疫 抑抑 制制 剂剂 、在在 免免 疫疫 功功 能能 降降 低低 时时 才才 能能 致致 病病 ， 如如 使使 用用 免免 疫疫 抑抑 制制 剂剂 、肾肾上上腺腺皮皮质质激激素素，放放疗疗化化疗疗，各各

44、种种恶恶性性肿肿瘤瘤、糖糖尿尿肾肾上上腺腺皮皮质质激激素素，放放疗疗化化疗疗，各各种种恶恶性性肿肿瘤瘤、糖糖尿尿病病 、病病 、AIDSAIDS等等可可诱诱发发曲曲霉霉病病。曲曲霉霉可可侵侵犯犯许许多多部部位位，等等可可诱诱发发曲曲霉霉病病。曲曲霉霉可可侵侵犯犯许许多多部部位位，呼呼吸吸系系统统曲曲霉霉病病主主要要有有三三种种：过过敏敏型型、曲曲霉霉球球和和肺肺呼呼吸吸系系统统曲曲霉霉病病主主要要有有三三种种：过过敏敏型型、曲曲霉霉球球和和肺肺炎炎。全全身身性性曲曲霉霉病病多多发发生生败败血血症症，危危及及生生命命。曲曲霉霉炎炎。全全身身性性曲曲霉霉病病多多发发生生败败血血症症，危危及及生生命

45、命。曲曲霉霉产产生生黄黄曲曲霉霉毒毒素素、杂杂色色曲曲霉霉毒毒素素与与原原发发性性肝肝癌癌有有关关。产产生生黄黄曲曲霉霉毒毒素素、杂杂色色曲曲霉霉毒毒素素与与原原发发性性肝肝癌癌有有关关。第48页/共79页第四十九页，共80页。微生物特性微生物特性(txng)(txng) 由由分分生生孢孢子子(boz)(boz)头头和和足足细细胞胞两两部部分分组组成成特特征征性性结结构构。分分子子孢孢子子(boz)(boz)头头包包括括分分生生孢孢梗梗茎茎、顶顶囊囊、瓶瓶梗梗、梗梗基基和和分分生生孢孢子子(boz)(boz)链链。足足细细胞胞为为特特化化的的厚厚壁壁膨膨大大的的菌菌丝丝细细胞胞。向上形成孢梗茎

46、。向上形成孢梗茎。第49页/共79页第五十页，共80页。微生物检验微生物检验(jinyn)(jinyn)(1)直直接接显显微微镜镜检检查查：取取痰痰液液等等被检材料涂被检材料涂 于于载载玻玻片片上上，在在镜镜下下可可见见(kjin)分枝的菌丝、分枝的菌丝、 较较粗粗的的分分生生孢孢子子头头，顶顶端端膨膨大形成顶囊，大形成顶囊， 顶顶囊囊上上有有小小梗梗，小小梗梗上上有有许许多小分生孢多小分生孢 子。子。第50页/共79页第五十一页，共80页。(2)抗抗原原检检测测：用用竞竞争争性性ELISA测测定病人血定病人血 清中曲霉抗原。清中曲霉抗原。(3)分分 离离 培培 养养 与与 鉴鉴 定定 标标

47、本本(biobn)接种沙氏琼脂，接种沙氏琼脂， 室室温温培培养养后后菌菌落落形形成成快快，呈呈毛毛状，一般状，一般 为为黄黄绿绿色色。将将菌菌落落涂涂片片镜镜检检可可见特征性见特征性 的分子孢子头和足细胞。的分子孢子头和足细胞。 第51页/共79页第五十二页，共80页。(4)药药物物敏敏感感试试验验 对对制制霉霉菌菌素素和和两两性霉素性霉素B 敏感。敏感。(5)抗抗体体检检测测 检检测测病病人人血血清清中中抗抗曲曲霉抗体。霉抗体。 常常用用免免疫疫扩扩散散检检测测，其其敏敏感感性性和和特异性特异性 较较高高，也也可可用用对对流流免免疫疫电电泳泳、ELISA、 生生物物素素亲亲和和素素联联免免疫

48、疫吸吸附附测测定定(BALISA)、 放放射射免免疫疫测测定定(R1A)及及间间接接(jin ji)免疫荧光法等。免疫荧光法等。 菌丝和培养滤液可作菌丝和培养滤液可作ELISA抗原。抗原。 第52页/共79页第五十三页，共80页。(6)皮皮肤肤试试验验(shyn) 对对过过敏敏性性支支气管肺炎病人可气管肺炎病人可 用曲霉抗原提取液作皮试。用曲霉抗原提取液作皮试。 型型超超敏敏反反应应在在 15-20min发发生生阳阳性反应。性反应。 型型超超敏敏反反应应在在4-10h出出现现阳阳性性反反应。应。 型型超超敏敏反反应应可可出出现现于于超超敏敏反反应应型肺炎病人。型肺炎病人。第53页/共79页第五

49、十四页，共80页。四、毛霉四、毛霉n n引引起起毛毛霉霉病病的的病病原原菌菌，以以根根霉霉属属最最为为常常见见(chn(chnjin)jin)，尤尤其其是是少根根霉和米根霉两种最多见。少根根霉和米根霉两种最多见。第54页/共79页第五十五页，共80页。n n毛毛霉霉病病是是一一种种发发病病急急，进进展展快快、病病死死率率极极高高的的系系统统性性条条件件致致病病性性真真菌菌感感染染。尤尤其其是是慢慢性性消消耗耗性性疾疾病病如如糖糖尿尿病病、白白血血病病、长长期期(chngq)(chngq)应应用用化化疗疗、皮皮质质类类固固醇醇激激素素的的患患者者。临临床床上上常常见见的的是是眼眼眶眶及及中中枢枢

50、神神经经系系统统的的毛毛霉霉病病。起起初初多多发发于于鼻鼻粘粘膜膜或或鼻鼻窦窦，继继则则眼眼眶眶软软组组织织及及脑脑，也也可可全全身身性性播播散散，预预后后较较为为严严重重。常在病死后尸检才明确。常在病死后尸检才明确。第55页/共79页第五十六页，共80页。微生物特性微生物特性(txng)(txng)n n有有无无隔隔菌菌丝丝，在在一一些些陈陈旧旧培培养养基基中中偶偶见见有有隔隔菌菌丝丝。有有些些霉霉菌菌有有匍匍匐匐菌菌丝丝，在在培培养养基基表表面面横横向向生生长长，其其产产生生(chnshng)(chnshng)的的假假根根伸伸入入培培养养基基内内，孢孢囊囊梗梗与与假假根根对对生生，在在孢孢

51、囊囊梗梗顶顶端端形形成孢子囊，内生孢子囊孢子。成孢子囊，内生孢子囊孢子。 第56页/共79页第五十七页，共80页。微生物检验微生物检验(jinyn)(jinyn)（1）直接镜检）直接镜检 取皮屑、脓液、血取皮屑、脓液、血液、痰、鼻液、痰、鼻 窦抽取物等标本，用窦抽取物等标本，用20%KOH制成湿片，制成湿片， 直接镜检可见折光性强的粗直接镜检可见折光性强的粗大大(cd)菌丝，直菌丝，直 径径615m，无隔或少数分，无隔或少数分隔、壁薄、隔、壁薄、 偶见孢子囊及孢子囊梗。偶见孢子囊及孢子囊梗。 第57页/共79页第五十八页，共80页。()分离分离(fnl)培养培养将临床标本接种于不含放线菌酮将临

52、床标本接种于不含放线菌酮的麦芽糖的麦芽糖培养基、马铃薯培养基及沙氏琼培养基、马铃薯培养基及沙氏琼脂培养基，脂培养基，2525或或3737培养，毛霉生长较快，培养，毛霉生长较快，初起菌落初起菌落表面呈棉花样、白色，渐变为灰表面呈棉花样、白色，渐变为灰褐色，顶端褐色，顶端(dngdun)(dngdun)有黑色小点。镜检菌丝无隔或极有黑色小点。镜检菌丝无隔或极少分隔，孢少分隔，孢囊梗直接由菌丝长出，常单生，囊梗直接由菌丝长出，常单生，分枝或极少分枝或极少不分枝。因毛霉常污染环境，故不分枝。因毛霉常污染环境，故直接镜检较直接镜检较培养更有意义。培养更有意义。第58页/共79页第五十九页，共80页。鉴定

53、鉴定(jindng) 依据是菌落形态依据是菌落形态(xngti)(xngti)、色、色泽。分枝状态：有无结合孢子及泽。分枝状态：有无结合孢子及结合孢子的特点。孢子囊的形态结合孢子的特点。孢子囊的形态(xngti)(xngti)，有无囊轴、囊领和，有无囊轴、囊领和囊托。生长温度，有无厚壁孢子囊托。生长温度，有无厚壁孢子等等 。第59页/共79页第六十页，共80页。1)少少根根根根霉霉：生生长长快快，在在3740能能生生长长。菌菌落落初初为为白白色色，后后变变为为灰灰褐褐色色。镜镜检检见见匍匍匐匐(p f)菌菌丝丝和和假假根根。孢孢囊囊梗梗单单生生或或分分枝枝，淡淡褐褐色色或或黄黄褐褐色色，常常从

54、从菌菌丝丝膨膨胀胀处处生生出出。囊囊轴轴卵卵圆圆形形或或球球形形，无无色色或或淡淡黄黄色色。孢孢囊囊孢孢子子圆圆形形，表表面面有有棘棘刺刺。偶有厚壁孢子。偶有厚壁孢子。第60页/共79页第六十一页，共80页。2)米米根根霉霉：菌菌落落同同少少根根根根霉霉。镜镜检检见见孢孢囊囊梗梗单单生生或或分分枝枝，孢孢子子(boz)囊囊孢孢子子(boz)淡淡褐褐色色有有条条纹纹，形形态态不不规规则则。假假根根发发达达。厚厚壁壁孢孢子子(boz)极极多多。在室温及在室温及40均可生长。均可生长。 第61页/共79页第六十二页，共80页。3)总总状状毛毛霉霉：生生长长迅迅速速，菌菌落落呈呈毛毛 状状 ， 高高

55、可可 达达 1cm， 灰灰 色色(hus)疏疏松松。镜镜检检见见孢孢囊囊梗梗最最初初不不分分枝枝，以以后后不不规规则则分分枝枝。孢孢子子囊囊球球形形，淡淡黄黄色色。成成熟熟时时孢孢囊囊壁壁消消解解，囊囊轴轴球球形形。孢孢囊囊孢子卵形。孢子卵形。第62页/共79页第六十三页，共80页。4)伞伞梨梨头头霉霉：异异名名为为伞伞状状毛毛霉霉。菌菌落落呈呈毛毛状状、生生长长快快，数数日日可可长长满满斜斜面面和和琼琼脂脂平平板板。菌菌落落粗粗糙糙(cco)，初初为为白白色色，后后变变为为淡淡蓝蓝灰灰色色，背背面面深深灰灰至至黄黄绿绿色色。孢孢囊囊梗梗长长并并呈呈伞伞形形分分枝枝，孢孢子子囊囊灰灰色色，囊囊

56、轴轴圆圆形形光光滑滑，有有囊囊托托。孢孢囊囊孢孢子子近近球球形形，表表面面光光滑。无厚壁孢子。滑。无厚壁孢子。第63页/共79页第六十四页，共80页。3药药物物敏敏感感试试验验 对对两两性性霉霉素素B敏感，静敏感，静 脉滴注疗效较好。脉滴注疗效较好。4抗抗体体检检测测(jin c) 用用琼琼脂脂双扩散、双扩散、ELISA法检法检 测测病病人人体体内内特特异异性性抗抗体体。即即用匀浆抗原用匀浆抗原 检检测测(jin c)毛毛霉霉抗抗体体的的敏敏感性和特异性都较高。感性和特异性都较高。 也也可可用用免免疫疫荧荧光光技技术术在在组组织织切片中检测切片中检测(jin c) 和鉴定毛霉。和鉴定毛霉。 第

57、64页/共79页第六十五页，共80页。五、组织五、组织(zzh)(zzh)胞浆胞浆菌菌有荚膜组织胞浆菌和杜波组织胞浆有荚膜组织胞浆菌和杜波组织胞浆菌两个种。菌两个种。 主要主要(zhyo)侵犯网状内皮系统，侵犯网状内皮系统，荚膜组织胞浆菌引起：荚膜组织胞浆菌引起：原发急性型组织胞浆菌病，仅皮原发急性型组织胞浆菌病，仅皮肤试验阳性。肤试验阳性。慢性空洞型，引起肺损害，常被慢性空洞型，引起肺损害，常被误诊为肺结误诊为肺结 核。核。严重播散型，全身器官均可损伤，严重播散型，全身器官均可损伤，预后严重。预后严重。 淋巴瘤、白血病、霍奇金病、淋巴瘤、白血病、霍奇金病、AIDS或用肾上或用肾上 腺皮质激素

58、治疗者常可感染本菌。腺皮质激素治疗者常可感染本菌。第65页/共79页第六十六页，共80页。微生物特性微生物特性(txng)(txng)组组织织胞胞浆浆菌菌是是一一种种双双相相型型真真菌菌，在在25培养时培养时呈呈 典典 型型 (dinxng)菌菌 丝丝 体体 ， 在在37培养时为酵母型，位于培养时为酵母型，位于细细胞胞内内或或外外。卵卵圆圆形形，直直径径为为24m、芽生、芽生孢孢子子，一一端端较较尖尖，一一端端较较圆圆，自自细细，有荚膜。有荚膜。杜杜波波组组织织胞胞浆浆菌菌圆圆形形，直直径径为为1215m、薄、薄壁的芽生孢子。壁的芽生孢子。第66页/共79页第六十七页，共80页。微生物检验微生

59、物检验(jinyn)(jinyn)(1)标本直接显微镜检查标本直接显微镜检查痰痰液液标标本本涂涂片片后后先先用用甲甲醇醇固固定定10 min，再用，再用 姬姬姆姆萨萨染染色色镜镜检检，如如巨巨噬噬细细胞胞(xbo)发现卵圆形，发现卵圆形， 直直径径24m的的较较小小，一一端端有有出出芽，可疑为芽，可疑为 荚膜组织胞浆菌。荚膜组织胞浆菌。皮皮损损、脓脓液液标标本本，用用20KOH涂涂片后镜检，片后镜检， 可可见见12-15m直直径径的的厚厚壁壁酵酵母母细细胞胞(xbo)，细胞，细胞(xbo)内内 可可见见脂脂肪肪小小滴滴，可可疑疑为为杜杜波波组组织织胞浆菌。胞浆菌。第67页/共79页第六十八页，

60、共80页。(2)抗原抗原(kngyun)检测检测取取患患者者痰痰液液作作免免疫疫荧荧光光法法染染色色后镜检，可后镜检，可快快速速检检测测其其抗抗原原(kngyun)(kngyun)，但特异性差，仅作组织但特异性差，仅作组织胞浆菌初筛试验。胞浆菌初筛试验。第68页/共79页第六十九页，共80页。(3)分离分离(fnl)培养培养将将临临床床标标本本接接种种于于含含抗抗生生素素的的沙氏培养基沙氏培养基上上，25培培养养，生生长长缓缓慢慢，46周才开始周才开始生生长长，逐逐渐渐形形成成白白色色至至棕棕色色绒绒毛状菌落。毛状菌落。当当转转种种于于血血琼琼脂脂(qingzh)培培养基上，养基上，37 很快

61、形成很快形成酵母型菌落。酵母型菌落。第69页/共79页第七十页，共80页。(4)鉴定鉴定(jindng)取可疑菌落涂片染色镜检，并作脲取可疑菌落涂片染色镜检，并作脲酶试验和明酶试验和明胶液化胶液化(yhu)(yhu)试验。荚膜组织胞试验。荚膜组织胞浆菌分解尿素；而杜浆菌分解尿素；而杜波组织胞浆菌不分解尿素，在波组织胞浆菌不分解尿素，在242496h96h内可液内可液化明胶，而荚膜组织胞浆菌则否。化明胶，而荚膜组织胞浆菌则否。 第70页/共79页第七十一页，共80页。(5)药药物物敏敏感感试试验验 组组织织(zzh)胞胞浆菌对两性霉素浆菌对两性霉素B、酮、酮 康唑、伊曲康唑敏感。康唑、伊曲康唑敏

62、感。(6)抗抗体体检检测测血血清清中中组组织织(zzh)胞胞浆菌抗体，以补体结浆菌抗体，以补体结 合合试试验验的的敏敏感感性性和和特特异异性性最最高高，发病发病2-3周阳周阳 性率可达性率可达90，有判定顶后价值。，有判定顶后价值。补补体体结结合合试试验验的的抗抗体体效效价价在在：32以上为阳性，以上为阳性， 抗抗体体效效价价4倍倍增增长长，可可有有助助于于确确诊。诊。乳乳胶胶凝凝集集试试验验时时，抗抗体体效效价价为为1：32时可确诊。时可确诊。 第71页/共79页第七十二页，共80页。六、卡氏肺孢菌六、卡氏肺孢菌n n曾曾称称为为卡卡氏氏肺肺孢孢子子虫虫。分分类类还还存存在在一一些些争争议议

63、。已已往往大大多多数数学学者者依依据据抗抗原原虫虫药药有有效效和和具具有有孢孢囊囊、滋滋养体两种形态，认为应属于原虫。养体两种形态，认为应属于原虫。n n近近来来分分子子生生物物学学研研究究发发现现，卡卡氏氏肺肺孢孢子子虫虫线线粒粒体体的的16s16s和和5s5s核核糖糖体体RNARNA的的核核苷苷酸酸序序列列(xli)(xli)与与真真菌菌有有更更多多的的同同源源性性，染染色色特特性性也也类似真菌，应归属于真菌。类似真菌，应归属于真菌。第72页/共79页第七十三页，共80页。n n卡氏肺孢菌广泛分布于自然界，卡氏肺孢菌广泛分布于自然界，主要是空气传播，在健康人体内，主要是空气传播，在健康人体

64、内，多为无症状的隐性感染。当宿主多为无症状的隐性感染。当宿主免疫力下降，潜伏的卡氏肺孢菌免疫力下降，潜伏的卡氏肺孢菌在病人肺内大量繁殖扩散，使肺在病人肺内大量繁殖扩散，使肺泡泡(fipo)(fipo)上皮细胞受损，导致上皮细胞受损，导致间质性浆细胞肺炎，又称卡氏肺间质性浆细胞肺炎，又称卡氏肺孢菌性肺炎孢菌性肺炎, , 是是AIDSAIDS最常见、最最常见、最严重的机会感染性疾病，病死率严重的机会感染性疾病，病死率高达高达7070100100。第73页/共79页第七十四页，共80页。微生物特性微生物特性(txng)(txng)n n生生活活史史有有包包囊囊和和滋滋养养体体两两种种形态。形态。n

65、n滋滋养养体体壁壁较较薄薄，单单个个核核，形形态态不不规规则则，直直径径25m，姬姬氏氏染染色色(rns)后后胞胞质质呈呈蓝色，核呈紫红色。蓝色，核呈紫红色。n n包包囊囊为为感感染染型型，滋滋养养体体为为繁繁殖型，呈二分裂法繁殖。殖型，呈二分裂法繁殖。第74页/共79页第七十五页，共80页。n n包囊分为成熟包囊和未成熟包囊分为成熟包囊和未成熟包囊，前者壁较厚，直径包囊，前者壁较厚，直径68m，m，呈球形排列规则，呈球形排列规则(guz)或不规则或不规则(guz)单单个核；后者一般呈椭圆形，个核；后者一般呈椭圆形，35m，囊内核，囊内核 18个。个。第75页/共79页第七十六页，共80页。微

66、生物检验微生物检验(jinyn) (1) 标本直接标本直接(zhji)显微镜检显微镜检查查 收集病人痰液和纤维支气管收集病人痰液和纤维支气管镜取材，涂镜取材，涂 片姬氏染色后镜检，可见包片姬氏染色后镜检，可见包囊内的囊内的8个个 囊内小体，胞质呈浅蓝色，囊内小体，胞质呈浅蓝色，核核1个呈紫个呈紫 红色。红色。第76页/共79页第七十七页，共80页。(2)抗抗原原(kngyun)检检测测：用用单单克隆抗体来检测病人血克隆抗体来检测病人血 清清 中中 卡卡 氏氏 肺肺 孢孢 菌菌 抗抗 原原(kngyun)，有较好的敏感性，有较好的敏感性 和特异性。和特异性。(3)核核酸酸检检测测：现现已已将将卡

67、卡氏氏肺肺孢孢菌线粒体中菌线粒体中 的的5srDNA和和16srDNA扩扩增增成成功。基因探功。基因探 针针可可用用于于标标本本检检测测，其其敏敏感感性和特异性性和特异性 都可以，但技术难度高。都可以，但技术难度高。第77页/共79页第七十八页，共80页。(4)抗体检测抗体检测 用用IFA、ELISA、CFT检测人检测人 群血清中卡氏肺孢菌抗体，群血清中卡氏肺孢菌抗体，可用于流行可用于流行(lixng) 病学调查临床诊断价值不大。病学调查临床诊断价值不大。第78页/共79页第七十九页，共80页。内容(nirng)总结会计学。无性阶段属于半知菌门，而有性型则属于子囊菌门。凡发酵某种糖一定能同化该糖，故只需做。对不发酵或弱发酵管可延长至10d或24周。2）脲酶试验：能产生脲酶分解尿素琼脂培养。3）糖同化及发酵试验：能同化葡萄糖、。在免疫功能降低(jingd)时才能致病，如使用免疫抑制剂、。产生黄曲霉毒素、杂色曲霉毒素与原发性肝癌有关。康唑、伊曲康唑敏感。乳胶凝集试验时，抗体效价为1：32时可确诊。病学调查临床诊断价值不大第八十页，共80页。