长瑞滨在大鼠中的药动学研究中快速而灵敏的LCMS方法

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1、Biomedical Chromatography生物医学色谱2009-04Tiefeng Cheng Duanyun Si et.LC-ESI-MS法是测量大鼠血浆中长春瑞滨的快速而灵敏的方法100L血浆经蛋白沉淀和Inertsil ODS-3 C18柱(2.150mm,id.5 m)4min处理长春瑞滨(V)和长春碱(IS)的选择性检测离子(SIM) M+H+分别为m/z 779 和m/z 811V标准曲线的线性范围11000ng/mL,定量下限1ng/mL长春瑞滨是从长春花类生物碱中提取出的一种半合成长春花生物碱,主要用于治疗非小细胞肺癌,乳腺癌等,与长春碱比,具有高治疗指数,低神经毒性

2、的特点以往方法:LC-MS 或 LC-MS/MS 样本量:500 L 时间: 1520min本实验: LC-ESI-MS 样本量:100 L 时间 4min此方法适用于大样本量分析HPLC:Inertsil ODS-3 C18 (2.150mm,id.5 m)色谱柱流动相:甲醇:10mmol/L醋酸铵缓冲液,含1.0%甲酸(65/35,v/v)质谱:SIM模式,电源电压:3kV;柱温:250;柱电压:32V;鞘气体,副气体为氮气,流速分别为0.5L/min和0.08L/min大鼠尾静脉注射10mg/Kg长春瑞滨血样采集:眼静脉丛;时间:给药前,给药后5,15,30,45min,1,2,4,8,

3、12,24,48,72h血浆样本+200 L IS标准溶液,涡旋0.5min,6000g离心5min,上清转移至新管,40下氮气吹干,所得残渣加100 L 流动相复溶,涡旋0.5min, 6000g离心5min,10 L进样。药动学参数经DAS2.1软件计算;房室模型:二室V和IS的M+H+峰分别为m/z 779和m/z 811V的线性回归标准曲线为y=0.00384+0.00481c (权重系数:1/c2) r2=0.995 线性范围11000ng/mL2,20,500ng/mL长春瑞滨回收率95.9%,86.8%,100.0%;IS回收率94.4%V的定量下限1ng/mL,准确度93.3+4.8% RSD=5.1%T1/2 =15.0 1.9h; AUCo-t=344.5 380.6ng*h/mLLC-ESI-MS法与LC-MS法比较更方便快捷,只需100 L样本,4min11000ng/mL浓度范围内具有特异,准确,稳定的特点,定量下限1ng/mL此法适用于临床药代动力学研究

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