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1、本章小结本章小结葡萄球菌葡萄球菌化脓性球菌化脓性球菌G+金黄金黄 表葡（白）腐生葡（柠檬）表葡（白）腐生葡（柠檬）SPA凝固酶葡萄球菌溶血素杀白细胞素肠毒素表皮剥脱毒素毒性休克综合征毒素局部局部/全身性感染：化脓全身性感染：化脓中毒中毒烫伤样皮肤综合征烫伤样皮肤综合征毒性休克综合征毒性休克综合征菌群失调菌群失调凝固酶凝固酶链球菌链球菌三种（溶血）脂磷壁酸脂磷壁酸M蛋白蛋白红疹毒素红疹毒素溶素：溶素：SLO, SLS酶：透明质酸酶，酶：透明质酸酶， 链激酶，链道酶链激酶，链道酶脓脓中毒性疾病：猩红热中毒性疾病：猩红热超敏超敏其它其它ASO（抗（抗O)肺炎链球菌n n不完全溶血，胆汁溶菌（+）n
2、n大叶肺炎脑膜炎双球菌、淋球菌 G- 脑膜炎、淋病肠杆菌科肠杆菌科肠杆菌科中与医学有关的常见菌族和菌属肠杆菌科中与医学有关的常见菌族和菌属埃希菌族 埃希菌属 大肠杆菌 志贺菌属 痢疾志贺菌爱德华菌族 爱德华菌属 迟钝爱德华菌沙门菌族 沙门菌属 伤寒沙门菌 枸橼酸菌属 佛劳第枸橼酸菌克雷伯菌族 克雷伯菌属 肺炎克氏菌 肠杆菌属 产气肠杆菌 哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌 沙雷菌属 粘质沙雷菌变形杆菌族 变形杆菌属 普通变形杆菌 摩根菌属 摩氏摩根菌属 普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌耶尔森菌族 耶尔森菌属 鼠疫耶尔菌欧文菌族 欧文菌属 草原居民欧文菌菌族 菌属（菌种数） 代表种n n致病性大肠杆菌
3、的种类及致病机理致病性大肠杆菌的种类及致病机理n n伤寒沙门菌的主要致病因素及伤寒发病过程。伤寒沙门菌的主要致病因素及伤寒发病过程。n n何谓肥达反应？如何观察分析肥达反应结果？何谓肥达反应？如何观察分析肥达反应结果？本 章 要 点肠杆菌科概述一、概念 是一大群寄居于人类和动物肠道中的生物学性状相近的革兰阴性杆菌。 多为正常菌群 埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属 二、肠道杆菌的共同特征：大肠杆菌1000大多有菌毛、鞭毛无芽胞1.形态与结构相似G-杆菌（染色镜检无意义）（染色镜检无意义）2. 培养特性 营养要求不高 3. 生化反应 十分活泼，是鉴定肠道菌的重要依据。 致病菌不分解乳糖n n4. 抗原
4、构造复杂n n 肠道杆菌抗原构造十分复杂肠道杆菌抗原构造十分复杂 菌体抗原“0”抗原 细菌细胞壁中脂多糖LPS，为群特异性抗原。 具有“0”抗原 细菌菌落呈光滑型(S);丢失多糖侧链的细菌菌落呈粗糙型(R).R型菌的致病性明显降低. 核心多糖核心多糖 鞭毛抗原“H”抗原 荚膜抗原 位于 0 抗原 外侧,常可阻遏 0 抗原与相应抗体的结合.如大肠杆菌中K抗原伤寒杆菌伤寒杆菌中的Vi抗原。5、抵抗力、抵抗力6、较易发生变异性、较易发生变异性溶源性转换生化反应性变异通过引起耐药性变异毒力性变异转导接合不强，加热60经30分钟即死亡。胆盐、煌绿等对大肠杆菌等非致病菌有选择性作用，可制备肠道杆菌选择性培
5、养基以分离肠道致病菌第一节 埃希菌n n埃希菌属(Escherichia)包括5个种，众多型别。n n大肠埃希菌（大肠杆菌, E.coli ）一般为肠道内正常菌群，少数血清型有致病性（致病性大肠杆菌）一、生物学性状n n形态与染色 大肠埃希菌 1000革兰阴性短杆状不规则排列n n生化反应发酵多种糖类，产酸产气最重要的生化反应：乳糖发酵试验 肠道菌鉴定中常利用乳糖发酵试验作为区别大肠埃希菌大肠埃希菌与肠道致病菌肠道致病菌的主要指标n n其它生化反应IMViC IMViC 试验 （与产气杆菌区别） IMViC试验结果吲哚试验（I） + 大肠杆菌 产气杆菌甲基红试验（M） + VP试验（Vi） +
6、枸橼酸利用（C） +IMViC + + + +n n抗原性n n抗原结构: O抗原 H抗原 K抗原n n鉴定后大肠杆菌血清型命名法： O：K：H 如 O157：K58（B1）：H7二、 致病性致病物质n n1、定植因子（colonization factor) 现认为为菌体表面结构（菌毛） 2、肠毒素 二种不耐热肠毒素 LT加热6530分钟失活耐热肠毒素 ST加热100分钟不失活肠毒素作用机制n nLT化学结构与致病机理n n大肠杆菌大肠杆菌LTLT与霍与霍乱弧菌肠毒素有乱弧菌肠毒素有80%80%同源性同源性 A1B亚单位A2受体GM1细胞膜腺苷环化酶ATPcAMPH2O CI- Na+大量分
7、泌腹泻腹泻腹泻n nST 组成及作用机理n nSTST与霍乱弧菌肠与霍乱弧菌肠毒素间无同源性毒素间无同源性STaSTb毒性中心鸟苷酸环化酶cGMP腹泻腹泻腹泻水电解质平衡率乱其他其他 内毒素作用：内毒素作用：内毒素作用：内毒素作用：胞壁脂多糖的类脂胞壁脂多糖的类脂A A具有毒性，具有毒性，OO特异多糖有抵抗宿主防御屏障的作用。特异多糖有抵抗宿主防御屏障的作用。 K K抗原抗原抗原抗原有抗吞噬作用有抗吞噬作用所致疾病1.肠道处感染：败血症败血症新生儿脑膜炎新生儿脑膜炎泌尿道感染泌尿道感染2.肠道感染（急性腹泻）：肠产毒性大肠埃希菌肠产毒性大肠埃希菌ETECETEC肠侵袭性大肠埃希菌肠侵袭性大肠埃
8、希菌EIECEIEC肠致病性大肠埃希菌肠致病性大肠埃希菌EPECEPEC肠出血性大肠埃希菌肠出血性大肠埃希菌EHECEHEC肠集聚性大肠埃希菌肠集聚性大肠埃希菌EAECEAEC致病性大肠杆菌的致腹泻机理 肠产毒性大肠埃希菌 enterotoxigenic E.coli; ETEC临床表现- 旅游者腹泻、婴幼儿腹泻 致病机理-定居因子、肠毒素 肠侵袭性大肠埃希菌enteroinvasive E.coli, EIEC临床疾病-痢疾样腹泻 主要侵犯较大儿童与成人 脓血便、里急后重脓血便、里急后重主要致病因素-破坏结肠粘膜上皮细胞侵犯部位-结肠 肠致病性大肠埃希菌 enteropathogenic E
9、.cole; EPEC所致疾病- 婴儿腹泻（严重者可致死）致病因素- 菌毛粘附（小肠） 刷状缘破坏、 绒毛萎缩 上皮细胞功能受损 腹泻 肠出血性大肠埃希菌 enterohemorrhagic E.coli; EHEC主要疾病- 出血性结肠炎 剧烈腹痛及血便 常可造成流行致病因子- 菌毛 志贺样毒素主要O血清型- O157：H7 肠集聚型大肠埃希菌 enteroaggregativeE.coli; EAEC主要疾病-引起婴儿持续性腹泻 致病因子- 集聚粘附上皮细胞-“砖状”排列，阻止液体吸收三、微生物学检查n n 肠道菌分离鉴定步骤标本肠道鉴别选择培养基（SS）注肠道鉴别选择培养基成分基础培养基
10、乳糖+指示剂抑制杂菌生长、有利于肠道致病菌生长的药物细菌分离n n挑选可疑菌落进行下一步生化反应鉴定SS培养基发酵乳糖菌落不发酵乳糖菌落肠道致病菌未接种管大肠杆菌生长管葡萄糖 +乳糖 +动力 +H2S n n 生化反应生化反应n n 血清学鉴定n n如疑为致病性大肠杆菌需作血清学鉴定。已知分型Ab分离菌直接法玻片凝集试验直接法玻片凝集试验+在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标 3个大肠菌群/1L饮水 100个细菌总数/1ml饮水卫生学指标卫生学指标大肠菌群指数每1000ml水中大肠菌群数我国的卫生标准：细菌总数每1ml或1g样品中细菌总数大肠菌群：指在大肠菌群：指在37，24小时内
11、发酵乳糖产小时内发酵乳糖产酸产气需氧和兼性厌氧的肠道杆菌，包括埃希酸产气需氧和兼性厌氧的肠道杆菌，包括埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属等。等。第二节 志贺菌属n n志贺菌属（Shigella) n n通称痢疾杆菌（dysentery bacteria)n n引起疾病 细菌性痢疾细菌性痢疾一、 生物学性状n n形态染色形态染色 - 同大肠杆菌同大肠杆菌 无鞭毛无鞭毛n n生化反应生化反应 - 葡萄糖葡萄糖 + + （产酸不产气）（产酸不产气） 乳乳 糖糖 （宋内氏迟缓发酵）（宋内氏迟缓发酵）动力 动力动力+一、 生物学性状n分类A群：痢疾志贺菌
12、B群：福氏志贺菌C群：鲍氏志贺菌D群：宋内志贺菌各类中又分为不同型、亚型我国以福氏、宋内氏流行多见二、致病性n n致病物质 主要致病物质为菌毛侵袭力、内毒素，少数菌株产生外毒素。1、侵袭力-菌毛粘附并穿入回肠未端、结肠粘膜上皮细胞粘膜固有层上皮细胞增殖、炎症菌毛粘附及穿入是致病的首要因素！志贺菌侵袭肠粘膜上皮细胞过程志贺菌侵袭肠粘膜上皮细胞过程1：侵入：侵入M细胞；细胞；2：诱导吞噬；：诱导吞噬；34：逃逸；：逃逸；57：从粘膜上皮细胞基：从粘膜上皮细胞基底部侵入胞浆中并增殖；底部侵入胞浆中并增殖；810：侵入邻近粘膜上皮细胞胞浆中，并生长繁：侵入邻近粘膜上皮细胞胞浆中，并生长繁殖。殖。 2、
13、内毒素志贺菌仅在肠道内增殖，一般不侵入血流各菌株均可产生强烈内毒素，引起典型痢疾症状内毒素肠粘膜通透性 大量内毒素吸收全身表现：内毒素血症、发烧、神志障碍、严重者中毒性休克破坏局部粘膜，加重坏死及溃疡形成刺激肠壁植物神经-肠功能紊乱典型痢疾症状脓血粘液便、腹痛、里急后重等 内毒素是志贺菌致病的主要因素内毒素是志贺菌致病的主要因素内毒素是志贺菌致病的主要因素内毒素是志贺菌致病的主要因素！3、外毒素 A群志贺菌I型和II型产生，称志贺毒素 机制：与EHEC类似n n所致疾病 细菌性痢疾 -夏秋季节肠道传染病传染病流行三环节传染源- 病人、带菌者（尤为重要！）传播途径- 粪口途径易感者- 人类普遍易
14、感,且敏感性较高，少 量菌体即可致病n n病程表现：急性菌痢 症状典型，预后较好。慢性菌痢 治疗不彻底者易转成慢性（病程2个月以上），症状不典型，慢性带菌者是重要传染源。中毒性菌痢 小儿多见，可无消化道症状，表现为中毒性休克，死亡率高。三、微生物学检查n n标本采取注意事项 脓血粘液部分，及时送检细菌分离培养与鉴定 1. SS 快速诊断-免疫标记技术（荧光、协同凝集试验） 2. 已知抗血清+菌种 直接凝集反应 （最终鉴定）n n挑选可疑菌落进行下一步生化反应鉴定SS培养基发酵乳糖菌落大肠杆菌不发酵乳糖菌落肠道致病菌第三节 沙门菌n n 沙门菌属 Salmonella 沙门菌属为一大群寄生于人、
15、动物肠道中，生 化反应和抗原构造相似的革兰阴性杆菌。n n主要致病菌- 伤寒杆菌、副伤寒甲、乙杆菌引起伤寒病伤寒病 一、 生物学性状一、形态与染色同其它肠道杆菌有鞭毛 动力+沙门菌 1000 二、生化反应不发酵乳糖不发酵乳糖三、抗原结构 1、沙门菌“O”抗原- 菌体抗原 2、沙门菌“H”抗原- 鞭毛抗原 3、沙门菌“Vi”抗原- 表面抗原n n伤寒、副伤寒甲、副伤寒乙沙门菌 O抗原中均有共同组分12，因此为共同抗原。n nO抗原化学本质为细胞壁中脂多糖产生早、消退早-早期诊断共同抗原刺激产生-无特异性O抗原刺激机体产生抗体- IgM（特点） 2、沙门菌“H”抗原- 不耐热鞭毛抗原 H抗原分为第
16、 1 相、第 2 相 特异性抗原。出现较晚，维持时间较长特 异 性 强易受非特异性刺激产生回忆反应H抗原刺激机体产生抗体-IgG（特点）3、沙门菌“Vi”抗原- 表面抗原 Vi抗原可刺激机体产生低效价抗体，随细菌清除，此抗体消失，故测定Vi抗体有利于检出带菌者。 二、致病性1、侵袭力沙门菌侵袭力较强，经口感染 穿过小肠粘膜上皮细胞 上皮下淋巴组织 被吞噬具抗吞噬作用，可在吞噬细胞内增殖（不完全吞噬） 致病物质n n目前证明-沙门菌侵袭细胞的能力与染色体中某些基因位点有关n n沙门菌侵入细胞及在细胞内存活对细菌的全身扩散及局部炎症形成均十分重要 n nVi抗原存在于O抗原表面，可保护O抗原免受相
17、应抗体及体内其它免疫因素作用，是伤寒沙门菌重要侵袭力 2、内毒素 导致体温升高、白细胞数变化等 3、肠毒素 个别沙门菌由伤寒沙门菌，副伤寒甲、乙等沙门菌引起。肠道传染病所致疾病1、肠热症血流（菌血症、内毒素）全身淋巴组织中大量增殖（肝、脾、肠系膜）伤寒、副伤寒沙门菌胃 小肠粘膜上皮细胞肠粘膜局部淋巴组织中增殖局部炎症、症状加重局部炎症溃疡、穿孔全身症状发热、不适、全身疼痛加重局部炎症溃疡、穿孔加重局部炎症溃疡、穿孔 高热、缓脉、肝脾肿大、中毒症状、玫瑰疹临床表现：消化道症状-肠粘膜局部炎症、水肿全身表现- 中毒症状（持续性高热、相对缓脉、肝脾肿大、皮疹）由内毒素血症、二次菌血症引起肝、胆损伤-
18、细菌在组织中繁殖后，经胆囊进入肠道 迟发性变态反应 加重肠道病变（严重者致坏死、溃疡、肠穿孔）整个病期约一个月左右少数患者病后带菌（肠道内、胆囊带菌）成为重要的传染源感染后体内有抗体产生，但对胞内菌无免疫作用，常用抗体测定作为伤寒病的辅助诊断肥达反应。 细胞免疫逐渐增强，细胞内细菌被清除逐步痊愈病后免疫以细胞免疫为主，终身免疫2、胃肠炎（食物中毒）多见小儿及免疫功能低下者3、败血症4、无症状带菌者伤寒玛丽三、微生物学检查 标本 伤寒病人按病程不同取不同标本第一周 血第二周 尿、粪便病程全程 骨髓食物中毒者取排泄物、呕吐物、可疑食物败血症患者取血液细菌的分离鉴定细菌分离鉴定步骤粪便、尿增菌培养S
19、S挑取不发酵乳糖菌落血清学鉴定：直接玻片凝集血液骨髓标本伤寒杆菌表现葡萄糖 +乳糖 动力 +H2S +/双糖管n n用已知用已知的伤寒杆菌“O” 、“H”抗原及副伤寒甲、乙的“H”抗原与不同稀释度的病人血清作试管凝集试验试管凝集试验。根据血清中抗体效价及动态变化，可作为伤寒、副伤寒病人的辅助诊断试验。 血清学试验 肥达反应（Widal test)概念1:25601:401:801:1601:3201:6401:1280O抗原伤寒H抗原副甲H抗原1:25601:401:801:1601:3201:6401:12801:25601:401:801:1601:3201:6401:12801:2560
20、1:401:801:1601:3201:6401:1280副乙H抗原 + + n n1、正常效价 O抗体 1：80n n H抗体 1：160n n2、病程中动态观察n n 二份血清，第二次效价增长四倍四倍以上有意义分析肥达反应结果 O O、H H均增高均增高伤寒、副伤寒可能性大伤寒、副伤寒可能性大 O O、H H均不增高均不增高伤寒、副伤寒可能性小伤寒、副伤寒可能性小 O O增高、增高、H H不增高不增高感染早期、其它沙门菌感染早期、其它沙门菌感染感染 O O不增高、不增高、H H增高增高预防接种后、非特异性预防接种后、非特异性回忆反应回忆反应4、抗体始终不升高的可能因素 早期使用抗生素、免疫
21、功能低下等伤寒病人微生物检查阳性率系列1-尿液中细菌培养；系列2-血液中细菌培养；系列3-粪便中细菌培养；系列4-肥达反应抗体效价阳性率病程：发 病 后 周 次n n细菌培养（按前面步骤进行）n nVi抗体效价测定 Vi抗体 1：10 有意义。四、防治原则 预防接种： 彻底治疗病人及带菌者 注意饮食卫生，防止病从口入 伤寒带菌者检查变形杆菌属（简述）n n变形杆菌属肠杆菌科n n有周身鞭毛，运动活泼，培养基中迁徒生长变形杆菌的迁徒生长现象n n 变形杆菌某些菌株的菌体抗原，与部分立克次体间有共同抗原成分。因此可用变形杆菌作为抗原与立克次体感染者血清做交叉凝集反应，称外裴试验外裴试验（Weil-Felix test)辅助诊断斑疹伤寒等疾病外裴试验
