血脂检测方法及临床意义1

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1、血脂检测方法及临床意义n n血脂概述 血脂是血浆中的中性脂肪(甘油三酯和胆固醇)和类脂(磷脂、糖脂、固醇、类固醇)的总称,广泛存在于人体中。它们是生命细胞的基础代谢必需物质。一般说来,血脂中的主要成份是甘油三酯和胆固醇,其中甘油三酯参与人体内能量代谢,而胆固醇则主要用于合成细胞浆膜、类固醇激素和胆汁酸。2024/8/22024/8/21 1血浆脂蛋白的分类n n超速离心法n n1、乳糜微粒(CM)n n2、极低密度脂蛋白(VLDL)n n3、中间密度脂蛋白(IDL)n n4、低密度脂蛋白(LDL)n n5、脂蛋白(a)LP(a)n n6、高密度脂蛋白(HDL)2024/8/22024/8/22

2、 2血浆脂蛋白的分类n n电泳法分为乳糜微粒,前脂蛋白,脂蛋白和脂蛋白 四条脂蛋白区带2024/8/22024/8/23 3血浆脂蛋白的组成与结构2024/8/22024/8/24 4血浆脂蛋白的组成与结构n n大致为球形颗粒,由两大部分组成,即疏水性的内核和亲水性的外壳。内核由不同量的CE和TG组成,表层由载脂蛋白、PL和FC组成,FC及PL的极性基团向外暴露在血浆中,载脂蛋白是兼性化合物,它的疏水部分掩蔽在脂蛋白中,而亲水部分突出于脂蛋白颗粒的表面。2024/8/22024/8/25 5载脂蛋白n n血浆脂蛋白中的蛋白质部分称为载脂蛋白,主要血浆脂蛋白中的蛋白质部分称为载脂蛋白,主要分分A

3、 A、B B、C C、DD、E E五类,主要在肝五类,主要在肝( (部分在小肠部分在小肠) )合成,载脂蛋白是构成血浆脂蛋白的重要组分。合成,载脂蛋白是构成血浆脂蛋白的重要组分。基本功能是运载脂类物质及稳定脂蛋白的结构,基本功能是运载脂类物质及稳定脂蛋白的结构,某些载脂蛋白还有激活脂蛋白代谢酶、识别受体某些载脂蛋白还有激活脂蛋白代谢酶、识别受体等功能。主要在肝等功能。主要在肝( (部分在小肠部分在小肠) )合成,按合成,按ABCABC系系统命名,各类又可细分几个亚类,以罗马数字表统命名,各类又可细分几个亚类,以罗马数字表示。示。2024/8/22024/8/26 6高脂蛋白血症WHO分型202

4、4/8/22024/8/27 7引起继发性高脂血症的病因n n1 、糖尿病 常表现为常表现为IVIV型高脂蛋白血症。(胰岛素型高脂蛋白血症。(胰岛素的缺乏,不仅促使肝脏生成的缺乏,不仅促使肝脏生成VLDLVLDL增加,而且因增加,而且因LPLLPL活性活性降低,导致降低,导致VLDLVLDL清除减少,主要表现为血清清除减少,主要表现为血清TGTG、VLDLVLDL水平升高,水平升高,TGTG严重升高者有发生急性胰腺炎的危险性。)严重升高者有发生急性胰腺炎的危险性。)n n2、甲减 常表现为IIa或IIb型高脂蛋白血症患者血TC水平升高可同时血TG水平升高(LPLLPL活力降低,活力降低,IDL

5、IDL代谢障碍、代谢障碍、LDLLDL受体功能下降、血受体功能下降、血浆浆LDLLDL清除减慢等)清除减慢等)n n3、肾脏疾病 肾病综合征时的高脂蛋白血症由脂蛋肾病综合征时的高脂蛋白血症由脂蛋白降解障碍和合成过多双重机制引起。白降解障碍和合成过多双重机制引起。2024/8/22024/8/28 8高脂蛋白血症的因素n n4、药物:降压药,利尿剂,受体阻滞剂可TG 和HDL 长期应用糖皮质激素治疗可使TG、TC升高n n5、其他:肝胆系统疾病、胰腺炎、长期过量饮酒2024/8/22024/8/29 9低脂蛋白血症表现n n1、家族性低-脂蛋白血症 (肝脏(肝脏LDLLDL受体上调,受体上调,伴

6、胆汁酸过度合成,使血浆中伴胆汁酸过度合成,使血浆中VLDLVLDL在转化为在转化为LDLLDL前已被前已被肝脏分解代谢。)肝脏分解代谢。)n n2、-脂蛋白缺乏血症 (ApoB合成分泌缺陷,使含ApoB的脂蛋白如CM、VLDL、LDL合成代谢障碍,伴随脂肪吸收和代谢紊乱,血浆TC也非常低)2024/8/22024/8/21010血脂检测方法及临床意义n n总胆固醇(TC)n n甘油三酯(TG)n n高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)n n低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)n n载脂蛋白A1(ApoA1)n n载脂蛋白B(ApoB)2024/8/22024/8/21111 总胆固醇(TC)测定测定化

7、学法酶法酶法 化学测定法化学测定法 化学测定法通常需化学测定法通常需抽提纯化抽提纯化。显色剂主要有两类:。显色剂主要有两类:醋酸醋酸- -醋酐醋酐- -硫酸硫酸高铁硫酸。高铁硫酸。 这些显色反应须用强酸试剂,干扰因素多,准确这些显色反应须用强酸试剂,干扰因素多,准确测定有赖于从标本中抽提、皂化、纯化过程,因而操测定有赖于从标本中抽提、皂化、纯化过程,因而操作较繁,不适于分析大批量标本,且不适于自动分析。作较繁,不适于分析大批量标本,且不适于自动分析。 n特点:特点: 1 1Liberman-BurchardLiberman-Burchard反应反应 18851885年年LibermanLibe

8、rman发现胆固醇在硫酸、醋酐溶液中显色,发现胆固醇在硫酸、醋酐溶液中显色,18901890年年BurchardBurchard用此反应测定胆固醇称为用此反应测定胆固醇称为L-BL-B反应。反应。 1953 1953年年ZakZak提出用硫酸、醋酸和提出用硫酸、醋酸和Fe3+Fe3+等与胆固醇作用生等与胆固醇作用生成紫红色化合物来测定胆固醇,称为成紫红色化合物来测定胆固醇,称为ZakZak反应。反应。 2 2ZakZak反应反应 酶测定法酶测定法n特点:特点: 常规测定中现已广泛应用酶法,酶法具有特异性好,精密常规测定中现已广泛应用酶法,酶法具有特异性好,精密度和灵敏度都能很好地满足临床实验室

9、的要求,既可以手工操度和灵敏度都能很好地满足临床实验室的要求,既可以手工操作,也适合自动分析,但酶法测定中出现了不同程度的作,也适合自动分析,但酶法测定中出现了不同程度的基质效基质效应。应。 采用酶反应原理的干化学法颇为实用,其缺点是价格高,采用酶反应原理的干化学法颇为实用,其缺点是价格高,精密度差。胆固醇的酶测定法始于精密度差。胆固醇的酶测定法始于7070年代。由于操作简便,试年代。由于操作简便,试剂无腐蚀性,特别适用于自动生化分析,剂无腐蚀性,特别适用于自动生化分析,目前已成为测定胆固目前已成为测定胆固醇的主要方法。醇的主要方法。 CHE-CHO-PAP法原理n n用胆固醇酯酶水解胆固醇酯

10、生成脂肪酸和胆固醇,胆固醇被胆固醇氧化酶氧化生成4-胆淄烯酮和过氧化氢,然后在过氧化物酶催化下,H2O2与4-氨基安替比林及酚结合,生成红色醌亚胺。醌亚胺的最大吸收峰在500nm左右,吸光度与标本中的胆固醇含量成正比。反应方程式如下:n n胆固醇酯+H2O 胆固醇+游离脂肪酸n n胆固醇+O24-胆甾烯酮+H2O2n n2H2O2+4-氨基安替比林+酚醌亚胺CHECHOPODn评价:评价:主要缺点是:主要缺点是:优点优点:本法灵敏度高、准确度高、精密度好,线性范围宽。:本法灵敏度高、准确度高、精密度好,线性范围宽。某些胆固醇酯酶对胆固醇酯的水解不完全,不能用纯胆固醇结晶以有机某些胆固醇酯酶对胆

11、固醇酯的水解不完全,不能用纯胆固醇结晶以有机溶剂配制的溶液作为溶剂配制的溶液作为TCTC分析的校准液,而应以准确定值的血清作为标准,分析的校准液,而应以准确定值的血清作为标准,此校准液(品)相当于三级标准。此校准液(品)相当于三级标准。 表面活性剂,如吐温表面活性剂,如吐温-40-40可以干扰胆固醇酯酶的作用,而聚乙烯醇可以干扰胆固醇酯酶的作用,而聚乙烯醇60006000可使结果提高可使结果提高1 12 2; 本法具有氧化酶反应途径的共同缺陷,易受到一些还原性物质如尿酸、本法具有氧化酶反应途径的共同缺陷,易受到一些还原性物质如尿酸、胆红素、维生素胆红素、维生素C C和谷胱甘肽等的干扰。和谷胱甘

12、肽等的干扰。 【参考值【参考值】 血清总胆固醇合适范围:血清总胆固醇合适范围:5.22mmol/L (200mg/dl)5.22mmol/L (200mg/dl),边缘升高:边缘升高:5.235.235.69mmol/L(2015.69mmol/L(201219mg/dl)219mg/dl),升高:升高:5.72mmol/L (220mg/dl)5.72mmol/L (220mg/dl)。u影响影响TC水平的因素水平的因素 年龄与性别;年龄与性别;长期的高胆固醇、高饱和脂肪酸和高热量饮食可使长期的高胆固醇、高饱和脂肪酸和高热量饮食可使TCTC增高;增高;遗传因素;遗传因素; 其它:如缺少运动、

13、脑力劳动、精神紧张等可能使其它:如缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可能使TCTC升高。升高。 TC TC除了作为高胆固醇血症的诊断指标之外,不能作为其它任何疾病的诊除了作为高胆固醇血症的诊断指标之外,不能作为其它任何疾病的诊断指标,对于动脉粥样硬化和冠心病而言,断指标,对于动脉粥样硬化和冠心病而言,TCTC是一个明确的危险因子,与冠是一个明确的危险因子,与冠心病的发病率呈正相关。心病的发病率呈正相关。【临床意义【临床意义】u高高TCTC血症:血症:原发和继发原发和继发 u低低TCTC血症:血症:原发和继发原发和继发 相关疾病n n高TC血症有原发和继发两类,原发的如家族性高胆固醇血症,家族性ap

14、oB缺陷症,多源性高TC,混合性高脂蛋白血症等,继发的见于肾病综合征,甲减,糖尿病,妊娠等。n n低TC血症原发和继发,原发如家族性无或低脂蛋白血症,继发如甲亢,营养不良,慢性消耗性疾病等。2024/8/22024/8/22020 血清(浆)甘油三酯测定血清(浆)甘油三酯测定化学法化学法酶法酶法n基本操作:基本操作: 化学测定法化学测定法1 1、抽提抽提:关键是选用合适的抽提剂,既要使甘油三酯提取完全,又要消除磷关键是选用合适的抽提剂,既要使甘油三酯提取完全,又要消除磷脂、游离甘油和葡萄糖等干扰物质的影响。脂、游离甘油和葡萄糖等干扰物质的影响。 2 2、皂化皂化:甘油三酯水解生成甘油,这一步大

15、都采用甘油三酯水解生成甘油,这一步大都采用KOHKOH作皂化剂作皂化剂 3 3、氧化氧化:过碘酸在酸性溶液中将甘油氧化成甲醛和甲酸过碘酸在酸性溶液中将甘油氧化成甲醛和甲酸 4 4、显色显色:甲醛的定量主要有两种方法:甲醛的定量主要有两种方法:甲醛与变色酸甲醛与变色酸(4,5-二羟二羟-2,7-萘二磺酸萘二磺酸)在硫酸溶液中加热生成紫色化合物在硫酸溶液中加热生成紫色化合物 甲醛与乙酰丙酮在铵离子甲醛与乙酰丙酮在铵离子(NH4+)存在下生成黄色的二乙酰二氢二甲基吡啶存在下生成黄色的二乙酰二氢二甲基吡啶 磷酸甘油氧化酶法原理n n用脂蛋白酯酶(用脂蛋白酯酶(LPLLPL)使血清中)使血清中TGTG水

16、解成脂肪酸水解成脂肪酸和甘油,甘油激酶(和甘油,甘油激酶(GKGK)及三磷酸腺苷()及三磷酸腺苷(ATPATP)将甘油磷酸化,以磷酸甘油氧化酶(将甘油磷酸化,以磷酸甘油氧化酶(GPOGPO)氧化)氧化3-3-磷酸甘油(磷酸甘油(G-3-PG-3-P)产生)产生H H2 2OO2 2,最后以,最后以TrinderTrinder反应显色,反应显色,A500nmA500nm的值与的值与TGTG浓度成正浓度成正比比。n nTG+H2O甘油+脂肪酸n n甘油+ATPG-3-P+ADPn nG-3-P+O2磷酸二羟丙酮+H2O2n nH H2 20 02 2+4-AAP+4-+4-AAP+4-氯酚氯酚苯醌

17、亚胺非那腙苯醌亚胺非那腙+H+H2 2OO2 22024/8/22024/8/22323n去除去除FGFG干扰可用下列方法:干扰可用下列方法:1 1、外空白法:同时用不含、外空白法:同时用不含LPLLPL的酶试剂测定的酶试剂测定FG FG 作空白。作空白。2 2、内空白法:又称两步法或双试剂法、内空白法:又称两步法或双试剂法将将LPLLPL和和4-AAP4-AAP组成试剂组成试剂2 2,其余部分为试剂,其余部分为试剂1 1。 乳酸脱氢酶法乳酸脱氢酶法 原理:原理: TG + 3H2O LPL Glycerol + 3RCOOH Glycerol + ATP GK+Mg2+ G-3-P + AD

18、P ADP + 磷酸烯醇式丙酮酸磷酸烯醇式丙酮酸 丙酮酸激酶丙酮酸激酶 丙酮酸丙酮酸 + ATP丙酮酸丙酮酸+NADH LDH NAD+ + 乳酸乳酸 由于反应消耗由于反应消耗NADHNADH,故可利用,故可利用NADHNADH在在340nm340nm吸光度降低来吸光度降低来测定甘油三脂的浓度测定甘油三脂的浓度。n评价:评价: 本法结果准确,但灵敏度较低,试剂本法结果准确,但灵敏度较低,试剂也不太稳定。由于血清本身存在游离甘油也不太稳定。由于血清本身存在游离甘油和丙酮酸等干扰物质,所以测定时除了要和丙酮酸等干扰物质,所以测定时除了要做试剂空白外,还要做标本空白做试剂空白外,还要做标本空白 甘油

19、氧化酶法甘油氧化酶法 第一步:第一步: FG + OFG + O2 2 甘油氧化酶甘油氧化酶 甘油醛甘油醛+ H+ H2 2O O2 2 H H2 2O O2 2 + EMAE + EMAE PODPOD 无色物质无色物质消除游离甘油的影响,消除游离甘油的影响,3-5min3-5min后进行第二步反应:后进行第二步反应:TG + 3HTG + 3H2 2O O LPLLPL Glycerol + 3RCOOH Glycerol + 3RCOOHFG + OFG + O2 2 甘油氧化酶甘油氧化酶 甘油醛甘油醛+ H+ H2 2O O2 2H H2 2O O2 2 +4-AAP+ EMAE +4

20、-AAP+ EMAE PODPOD 有色化合物有色化合物注:注:EMAEEMAE作用与酚相似,是还原剂,但灵敏度比酚高。作用与酚相似,是还原剂,但灵敏度比酚高。n原理原理:该法分两步完成。该法分两步完成。甘油三酯临床意义n n原发性高TG血症多有遗传因素,包括家族性高TG血症与家族性型高脂蛋白血症等。继发性高TG血症见于糖尿病,糖原累积病,甲减,肾病综合征,妊娠,口服避孕药,酗酒等。富含TG的脂蛋白是冠心病的独立的危险因子,TG增加表明患者存在代谢综合征,需进行治疗。甘油三酯降低很少见,甲亢,肾上腺皮质功能减退和肝功能严重损伤时可以见到甘油三酯降低。2024/8/22024/8/22828甘油

21、三酯的参考范围n nTG 0.56-1.70mmol/Ln n升高:1.70mmol/L2024/8/22024/8/22929 高密度脂蛋白测定高密度脂蛋白测定 常以测定常以测定HDL-CHDL-C含量代表含量代表HDLHDL水平。水平。 n参考方法参考方法: : 超速离心分离超速离心分离HDLHDL,然后用化学法(,然后用化学法(ALKBALKB法)或法)或酶法测定其胆固醇含量,此法需特殊设备,而且不易酶法测定其胆固醇含量,此法需特殊设备,而且不易常握。常握。 n常规方法常规方法: : 1磷钨酸磷钨酸-镁法镁法 2HDL直接测定法直接测定法 HDLHDL直接测定法大致分三类,分别是直接测定

22、法大致分三类,分别是: :聚乙二醇聚乙二醇/ /抗体包裹法抗体包裹法酶修饰法酶修饰法选择性抑制法,又称掩蔽法,选择性抑制法,又称掩蔽法, 选择性抑制法原理n n分两步:第一试剂用聚阴离子及分散型表面活性剂(反应抑制剂),后者与LDL、VLDL、CM表面的疏水基团有高度亲和力,吸附在这些脂蛋白表面形成掩蔽层,但不发生沉淀,能抑制这类脂蛋白中的胆固醇与酶试剂反应。第二试剂含胆固醇测定酶及具有对HDL表面的亲水基团有亲和力的表面活性剂(反应促进剂),使酶与HDL中的胆固醇起反应2024/8/22024/8/23232HDL-C合适范围:合适范围:1.04mmol/L (40mg/dl), 0.91m

23、mol/L (35mg/dl)为减低。为减低。【参考值【参考值】【临床意义【临床意义】 流行病学与临床研究证明,流行病学与临床研究证明,HDL-CHDL-C与冠心病发病呈负相关,与冠心病发病呈负相关,HDL-CHDL-C低于低于0.9 0.9 mmolmmol/L /L 是冠心病危险因素。是冠心病危险因素。HDL-CHDL-C大于大于1.55mmol/L1.55mmol/L被认为是冠心病的被认为是冠心病的“负负”危险因素。危险因素。 HDL-CHDL-C下降还下降还多见于脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化病人。高多见于脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化病人。高TGTG血症往往血症往往伴以低伴以低HDL

24、-CHDL-C,肥胖者的,肥胖者的HDL-CHDL-C也多偏低。吸烟可使也多偏低。吸烟可使HDL-CHDL-C下降,下降,适量饮酒、长期体力劳动和运动会使适量饮酒、长期体力劳动和运动会使HDL-CHDL-C升高。升高。 低密度脂蛋白测定低密度脂蛋白测定1 1FriedewaldFriedewald公式法公式法 LDL-CLDL-CTCTCHDL-CHDL-CTG/5TG/5(以(以mg/dlmg/dl为单位时),或为单位时),或LDL-CLDL-CTCTCHDL-CHDL-CTG/2.2TG/2.2(以(以mmolmmol/L/L为单为单位时)。位时)。 2 2聚乙烯硫酸盐沉淀法聚乙烯硫酸盐沉

25、淀法 本法并非对本法并非对LDL-CLDL-C作直接测定,而作直接测定,而是用聚乙烯硫酸(是用聚乙烯硫酸(PVSPVS)选择性沉淀血清中)选择性沉淀血清中LDLLDL,再以血清,再以血清TCTC减去上清液(含减去上清液(含HDLHDL与与VLDLVLDL)胆固醇即得)胆固醇即得LDL-CLDL-C值。值。 3 3直接测定法直接测定法: :两类两类目前各类方法测定的目前各类方法测定的LDL-CLDL-C值都包括值都包括IDLIDL和和LP(aLP(a) )的的cholchol在内在内 LDL-C LDL-C合适范围:合适范围:3.12mmol/L (120mg/dl)3.12mmol/L (12

26、0mg/dl), 边缘升高:边缘升高:3.153.153.61mmol/L(1213.61mmol/L(121139mg/dl)139mg/dl) 升高:升高:3.64mmol/L (140mg/dl)3.64mmol/L (140mg/dl)。 【参考值【参考值】【临床意义【临床意义】 LDL-C LDL-C增高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险因增高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险因素。由于素。由于TCTC水平同时也受水平同时也受HDL-CHDL-C水平的影响,所以最好以水平的影响,所以最好以LDL-CLDL-C代替代替TCTC作为冠心病危险因素指标。美国国家胆固醇教作为冠心病危险因

27、素指标。美国国家胆固醇教育计划成人治疗专业组规定以育计划成人治疗专业组规定以LDL-CLDL-C水平作高脂蛋白血症的水平作高脂蛋白血症的治疗决策及其需要达到的治疗目标。治疗决策及其需要达到的治疗目标。 脂蛋白脂蛋白(a)(a)测定测定 nLp(aLp(a) )测定有两类方法测定有两类方法 一是以免疫化学原理测定其所含一是以免疫化学原理测定其所含Apo(aApo(a) ),结果以,结果以Lp(aLp(a) )质量质量表示,也有以表示,也有以Lp(aLp(a) )颗粒数颗粒数mmolmmol/L/L表示的。表示的。 另一类方法测定其所含的胆固醇,结果以另一类方法测定其所含的胆固醇,结果以 Lp(a

28、Lp(a)-C)-C表示。表示。目前大都用免疫学方法测定。目前大都用免疫学方法测定。 正正常常人人群群的的Lp(aLp(a) )水水平平呈呈明明显显的的正正偏偏态态分分布布,大大多多在在200mg/L200mg/L以以下下,平平均均数数在在120120180 180 mg/Lmg/L,中中位位数数约约100mg/L100mg/L。Lp(aLp(a) )水水平平高高于于医医学学决决定定水水平平(300mg/L300mg/L),冠冠心心病病危危险险性性明明显增高。显增高。【参考值【参考值】【临床意义【临床意义】 血血清清Lp(aLp(a) )水水平平是是动动脉脉粥粥样样硬硬化化性性疾疾病病的的独独

29、立立危危险险因因素素, ,与与动脉粥样硬化成正相关。动脉粥样硬化成正相关。 血清载脂蛋白测定血清载脂蛋白测定n免疫化学法:免疫化学法: 单向免疫扩散(单向免疫扩散(RIDRID)电免疫分析(如火箭电泳法)电免疫分析(如火箭电泳法)放射免疫分析(放射免疫分析(RIARIA)酶联免疫吸附分析(酶联免疫吸附分析(ELISAELISA)等)等 早期早期目前:目前: 目前比较适合于临床实验室的是目前比较适合于临床实验室的是免疫浊度法免疫浊度法,包括,包括免疫散射比浊法(免疫散射比浊法(INAINA)和免疫透射比浊法()和免疫透射比浊法(ITAITA)。)。 【参考值】:【参考值】:ApoApo AI A

30、I:1.001.001.60g/L1.60g/L,ApoApo B B:0.600.601.10g/L1.10g/L。【临床意义【临床意义】 ApoAIApoAI是是HDLHDL的主要结构蛋白,的主要结构蛋白, ApoBApoB是是LDLLDL的主要结构蛋白,因此,的主要结构蛋白,因此,ApoAIApoAI和和ApoBApoB可直接反映可直接反映HDLHDL和和LDLLDL的含量。在某些病理情况下,的含量。在某些病理情况下,ApoAIApoAI与与HDLHDL和和ApoBApoB与与LDLLDL并非成正相关,因此,同时测定载脂蛋白及脂蛋白并非成正相关,因此,同时测定载脂蛋白及脂蛋白HDLHDL

31、和和LDLLDL对病理发生状态对病理发生状态的分析很有帮助。冠心病、肾病综合征和糖尿病等都有的分析很有帮助。冠心病、肾病综合征和糖尿病等都有ApoAIApoAI下降和下降和ApoBApoB升高。升高。临床上常将临床上常将ApoAIApoAI和和ApoBApoB比值作为冠心病的危险指标。比值作为冠心病的危险指标。载脂蛋白参考值n nApoA1:1.001.5g/Ln nApoB :0.81.00g/L2024/8/22024/8/24040糖的来源与去路2024/8/22024/8/24141葡萄糖的测定n n葡萄糖氧化酶法(首选方法)n n己糖激酶法n n葡萄糖脱氢酶法2024/8/22024

32、/8/24242葡萄糖氧化酶法原理n n葡萄糖氧化酶(GOD)将葡萄糖水解为葡萄糖酸和过氧化氢,后者在过氧化物酶(POD)和色素原性氧受体存在下,将过氧化氢分解为水和氧,同时使色素原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物,即Trider反应。其色泽深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。n n葡萄糖葡萄糖+O2+H2O+O2+H2O葡萄糖酸内酯葡萄糖酸内酯+H2O2+H2O2n n2H2O2+4-2H2O2+4-氨基安替比林氨基安替比林+酚酚红色醌类化合物红色醌类化合物2024/8/22024/8/24343血糖的临床意义n n生理性或暂时性增高:餐后,摄入高糖饮食,情绪激动等n n

33、病理性高血糖:糖尿病甲亢,肾上腺皮质功能亢进等应激性高血糖,如颅脑损伤,颅内压增高等脱水引起的血液浓缩,如呕吐、腹泻、高热等严重的肝硬化不能使糖转化为肝糖原储存胰腺病变2024/8/22024/8/24444血糖的临床意义n n生理性或暂时性低血糖 饥饿和剧烈运动等n n病理性低血糖 可见于胰岛细胞增生或肿瘤引起的胰岛素分泌过多、严重肝病不能调节血糖。n n药物的影响血糖升高的药物:口服避孕药,儿茶酚胺,咖啡因,甲状腺素,肾上腺素等血糖降低的药物:降糖药,酒精,普萘洛尔等2024/8/22024/8/24545血糖参考值n n成人:3.96.11mmol/L2024/8/22024/8/246

34、46糖耐量实验n n口服葡萄糖耐量试验口服葡萄糖耐量试验n n适应症:适应症:n n空腹血糖水平在临界值(空腹血糖水平在临界值(67mmol/L67mmol/L)而又疑)而又疑为糖尿病患者为糖尿病患者n n空腹或餐后血糖正常,但有发展为糖尿病可能的空腹或餐后血糖正常,但有发展为糖尿病可能的人群人群n n以前耐量试验异常的人群以前耐量试验异常的人群n n妊娠性糖尿病的诊断妊娠性糖尿病的诊断n n临床上出现肾病,神经病变,视网膜病无法给出临床上出现肾病,神经病变,视网膜病无法给出解释的解释的2024/8/22024/8/24747WHO标准化的OGTTn n1.1.实验前三天,受试者每日食物中糖含

35、量应不低实验前三天,受试者每日食物中糖含量应不低于于150g150g,且维持正常活动。,且维持正常活动。n n2.2.影响药物应在三天前停用,空腹影响药物应在三天前停用,空腹10-1610-16小时。小时。n n3.3.坐位去血后坐位去血后5 5分钟内饮入分钟内饮入250ml250ml含含75g75g无水葡萄无水葡萄糖的糖水。(妊娠妇女为糖的糖水。(妊娠妇女为100g100g,儿童按,儿童按1.75g/kg1.75g/kg体重给予,最大不超过体重给予,最大不超过75g75g)n n4.4.服糖后,半小时取血一次,共四次服糖后,半小时取血一次,共四次n n5.5.试验中不能吸烟,喝酒,喝茶或进食。试验中不能吸烟,喝酒,喝茶或进食。n n6.6.于采血同时,每隔一小时留取尿液作尿糖试验于采血同时,每隔一小时留取尿液作尿糖试验2024/8/22024/8/24848参考值n n1.空腹血糖6.11mmol/Ln n2.服糖后30-60分钟升高达峰值10mmol/Ln n3.服糖后2小时内恢复至空腹血糖水平n n4.各时间的尿糖均为阴性。2024/8/22024/8/24949 谢谢大家!

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