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1、第三节第三节 植物离体培育体系的建立植物离体培育体系的建立一、植物组织培育的阶段划分：一、植物组织培育的阶段划分： 通常将组织培育过程划分为四个阶段通常将组织培育过程划分为四个阶段 1、起始培育阶段诱导阶段、起始培育阶段诱导阶段 2、增殖培育阶段、增殖培育阶段 3、生根培育阶段、生根培育阶段 4、驯化移栽、驯化移栽Stage0Selection&preparationofthemotherplantsterilizationoftheplanttissuetakesplaceStageI-InitiationofcultureexplantplacedintogrowthmediaStageI
2、I-Multiplicationexplanttransferredtoshootmedia;shootscanbeconstantlydividedStageIII-RootingexplanttransferredtorootmediaStageIV-Transfertosoilexplantreturnedtosoil;hardenedoff Steps of Micropropagation二、外植体起始培育无菌体系建立二、外植体起始培育无菌体系建立 起始培育阶段是指无菌体系的诱导和起始培育阶段是指无菌体系的诱导和建立过程。主要受外植体、培育基、环建立过程。主要受外植体、培育基、环境条
3、件等要素的影响。境条件等要素的影响。一外植体的起始培育过程一外植体的起始培育过程 1、 起始培育的普经过程：起始培育的普经过程： A、选取适宜的基因型种类；、选取适宜的基因型种类； B、选取适宜的外植体；常用外植体有、选取适宜的外植体；常用外植体有茎尖、茎段、节间、叶片、叶柄等。茎尖、茎段、节间、叶片、叶柄等。 C、流水冲洗外植体；、流水冲洗外植体； D、外植体切割、分别及灭菌处置；、外植体切割、分别及灭菌处置； E、外植体接种于诱导培育基。、外植体接种于诱导培育基。 F、环境条件控制促进外植体的生长。、环境条件控制促进外植体的生长。2、接种外植体的生长过程：、接种外植体的生长过程： A 细胞
4、分裂的启动；细胞分裂的启动； B 细胞增殖；细胞增殖； C 组织和器官的构成。组织和器官的构成。 二影响外植体起始培育的要素：二影响外植体起始培育的要素： 1、影响外植体起始的要素、影响外植体起始的要素 A 外植体的遗传根底及生理影响外植体的遗传根底及生理影响 B 培育基组成成分：矿物盐类、微量有机培育基组成成分：矿物盐类、微量有机成分、生长调理物质、碳源、琼脂、活性炭、成分、生长调理物质、碳源、琼脂、活性炭、酚类化合物、多胺等。酚类化合物、多胺等。 C 培育条件：光照、温度、湿度培育条件：光照、温度、湿度 A 外植体外植体 (1) 外植体种类及基因型外植体种类及基因型 (2) 外植体供体植株
5、和外植体的来源与生理形状外植体供体植株和外植体的来源与生理形状 (3) 外植体大小外植体大小 (4) 外植体的极性外植体的极性外植体种类及基因型外植体种类及基因型a.单子叶植物不易诱导器官发生。单子叶植物不易诱导器官发生。b.b. 木本植物较难诱导。木本植物较难诱导。c.c. 存在基因型差别如番茄存在基因型差别如番茄29%63%d.d. 开场生长季节取材容易诱导。开场生长季节取材容易诱导。外植体形状：外植体形状：外植体大小：外植体大小： 外植体越小成苗才干越弱，较大的外植体外植体越小成苗才干越弱，较大的外植体增殖较快。增殖较快。外植体极性：外植体极性： 当外植体以形状学的基部接种于培育基上当外
6、植体以形状学的基部接种于培育基上时，从远离基部的外表诱导出芽、苗数目较时，从远离基部的外表诱导出芽、苗数目较多。多。B、培育基、培育基 a 培育基类型培育基类型: b 碳碳 源的影响源的影响: C、植物生长调理物质、植物生长调理物质 a 细胞分裂素和生长素类细胞分裂素和生长素类 b 赤霉素类赤霉素类 c 乙烯及其生物合成抑制剂乙烯及其生物合成抑制剂 d 其他有机化合物其他有机化合物细胞分裂素和生长素：细胞分裂素和生长素：a.部分植物单独运用细胞分裂素部分植物单独运用细胞分裂素CTK可以构成可以构成 无无根苗根苗b.部分植物无根苗的构成需求细胞分裂素和生长素配部分植物无根苗的构成需求细胞分裂素和
7、生长素配合运用。合运用。c. 外源外源CTK与生长素必需维持适当比例以改动内源激与生长素必需维持适当比例以改动内源激素平衡，促进器官发生。素平衡，促进器官发生。d. 不同细胞分裂素对分化的作用效果不同不同细胞分裂素对分化的作用效果不同e. 苯基脲衍生物具有较高的细胞分裂素活性苯基脲衍生物具有较高的细胞分裂素活性 4PU、CPPU 、TDZ赤霉素类：赤霉素类： 赤霉素与促进细胞伸长和开花反响，组织培赤霉素与促进细胞伸长和开花反响，组织培育条件下只在少数植物上对芽的诱导有促进作育条件下只在少数植物上对芽的诱导有促进作用。用。 如马铃薯、甜菜、樱桃等。如马铃薯、甜菜、樱桃等。乙烯及其生物合成抑制剂：
8、乙烯及其生物合成抑制剂： 具有促进和抑制两方面的影响，但抑制造用具有促进和抑制两方面的影响，但抑制造用多于促进作用。因此在某些植物种类，乙烯抑多于促进作用。因此在某些植物种类，乙烯抑制剂可以促进芽的构成。制剂可以促进芽的构成。 AgNO3 、CoCl、AVG其他有机化合物：其他有机化合物： 腺嘌呤衍生物具有促进器官分化作用。腺嘌呤衍生物具有促进器官分化作用。 椰子汁等物质也具有促进分化的功能。椰子汁等物质也具有促进分化的功能。3. 培育条件及其他要素培育条件及其他要素 1光照光照 通常通常10005000 Lx 16 小光阴照。小光阴照。 非洲菊非洲菊1000 lx ，洋葱，洋葱 16小时，马
9、铃薯延续小时，马铃薯延续光照，葡萄要求短日照。光照，葡萄要求短日照。 光质也影响芽的再生，蓝光有利于器官发光质也影响芽的再生，蓝光有利于器官发生，烟草实验，而红光有利于根的发生。生，烟草实验，而红光有利于根的发生。 2温度温度 大部分植物要求大部分植物要求25 oC，少数要求较低，少数要求较低温度温度15 20 oC或较高的温度或较高的温度30 oC 如菖蒲、水仙、洋葱、龟背竹等。如菖蒲、水仙、洋葱、龟背竹等。 变温处置对有些植物器官发生有促进作变温处置对有些植物器官发生有促进作用，如豌豆。用，如豌豆。3湿度：湿度： 培育室相对湿度以培育室相对湿度以7080为适宜，培为适宜，培育容器内要坚持适宜湿度，防止过于枯燥或湿育容器内要坚持适宜湿度，防止过于枯燥或湿度过大。度过大。4气体：气体： 要留意坚持培育容器内良好的通气性。维要留意坚持培育容器内良好的通气性。维持适宜的氧气和二氧化碳浓度，防止有害气体持适宜的氧气和二氧化碳浓度，防止有害气体的积累。的积累。如何进展外植体的起始培育无菌体系的建立？如何进展外植体的起始培育无菌体系的建立？ 1、选择适宜的外植体；、选择适宜的外植体； 2、选择适宜的培育基；、选择适宜的培育基； 3、发明适宜的环境条件、发明适宜的环境条件20050926
